沈 波 曹 瑩 江海濤
【摘要】本文主要利用正交設計試驗優(yōu)化櫻花多糖的提取工藝,為櫻花多糖的提取研究提供相關的實驗數(shù)據(jù)。
【關鍵詞】櫻花多糖 正交設計 提取工藝
櫻花(學名Cerasua serrulata)為薔薇科(Rosaceae)櫻屬(Cerasus)植物,在世界各地都有栽培,具有很高的觀賞價值。目前,對櫻花的研究主要集中在櫻花的栽培上[1-3],對于櫻花成分及功能的研究鮮有報道。本文主要通過正交試驗優(yōu)化櫻花多糖的提取工藝,為櫻花多糖的提取研究提供相關的實驗數(shù)據(jù)。
1.實驗材料和方法
1.1材料
櫻花采自南京曉莊學院北圩校區(qū)
1.2儀器
電子精密天平、數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-4)、紫外可見分光光度計,離心機等。
1.3方法
1.3.1櫻花多糖的提取工藝
材料準備→前處理→浸提(蒸餾水提?。4-6] →離心取上清液(重復提取3 次,合并上清液濃縮→3倍乙醇沉淀→離心分離→干燥→提取物的初步鑒定。
1.3.2正交設計因素水平表
采用正交設計[7-8]考察提取時間、提取溫度以及料液比三個因素對櫻花多糖提取程度的影響。精確稱取干燥的櫻花花瓣3g,分別以不同的提取時間,提取溫度,料液比為因素做3因素3水平正交試驗,每個處理重復3次。試驗設計(見表1):
1.3.3 標準曲線制備
精密稱取105℃干燥到恒重的標準葡萄糖10mg,在100mL容量瓶中加純凈水溶解并稀釋至刻度,配成100ug.mL-1的標準品溶液;分別精密吸取該溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL,依次加蒸餾水稀釋至1mL。另取1mL水為空白,置冰水浴中5min;取出后,分別精密吸取4ml蒽酮試劑,沸水浴10min,取出,用自來水冷卻,室溫放置10min,用722型分光光度計于620nm處測定吸光度,以進樣濃度C(ug.mL-1)對吸光度值A進行線性回歸。
2.結果
2.1葡萄糖標準曲線繪制
經(jīng)回歸處理,得回歸方程為:
y=134.35x-20.424R2=0.975線性范圍:10-70ug.mL-1
y為葡萄糖濃度(ug.mL-1) x為葡萄糖
2.2不同因素對櫻花多糖提取的影響
利用正交設計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析,結果見表2和表3。
3.討論
多糖的提取受到多種因素的影響。本實驗結果表明提取溫度、提取時間以及料液比三個因素對櫻花多糖的提取都有一定的影響。表2及表3分析可以看出,三個因素對還原糖提取的影響次為:提取溫度>提取時間>料液比。統(tǒng)計結果顯示,溫度對櫻花多糖的提取有顯著影響(P〈0.05),而提取時間和料液比的影響較小,無統(tǒng)計學差異。通過正交結果分析,櫻花多糖提取的最佳條件為A3B3C2 ,即3g干燥的櫻花花瓣置于燒杯中,加蒸餾水240ml,在90℃的水浴鍋中提取3h,過濾,濃縮,加3倍乙醇沉淀。有關提取工藝的研究將進一步深入。
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作者簡介:沈波,(1987-),男,漢族,南京曉莊學院生命科學系大四學生。