[摘要] 目的 結(jié)合計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)提供宮頸分泌物中沙眼衣原體(CT)、人乳頭狀瘤病毒(HPV)檢測(cè)服務(wù)，了解農(nóng)村婦女生殖道CT、HPV感染的情況。方法 采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)226例已婚農(nóng)村婦女宮頸分泌物中CT、HPV DNA。結(jié)果226例檢測(cè)對(duì)象中CT陽(yáng)性檢出率為21.2%，HPV陽(yáng)性檢出率為14.2%，CT及HPV均陽(yáng)性檢出率為4.0%。80%以上的CT、HPV感染者陰道、宮頸無(wú)臨床癥狀表現(xiàn)。結(jié)論對(duì)有性生活，特別是生活在農(nóng)村的婦女提供常規(guī)的宮頸涂片檢查、CT和HPV檢測(cè)服務(wù)，有助于提高農(nóng)村婦女的生殖健康水平。

[關(guān)鍵詞] 衣原體;人乳頭狀病毒;聚合酶鏈反應(yīng);生殖健康

[中圖分類(lèi)號(hào)] R797.2[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2009)34-113-02

生殖道感染(reproductive track infection，RTI)在婦科疾病中位居首位。引起女性生殖道感染的常見(jiàn)病原體有淋球菌(neisseria gonorrhoeae，NG)、沙眼衣原體(chlamydia trachomatis，CT)、解脲脲原體(M. urealyticum，UU)、人乳頭狀瘤病毒(human papillo- mavirus，HPV)和人巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus，CMV)，其中CT、HPV的感染和女性子宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。有研究[1]顯示，96.6%的子宮頸癌患者的標(biāo)本中檢出HPV，CT可與HPV協(xié)同誘發(fā)宮頸瘤變[2，3]。RTI感染綜合防治是目前計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)開(kāi)展的一項(xiàng)生殖保健服務(wù)項(xiàng)目，利用現(xiàn)有的計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)網(wǎng)絡(luò)，結(jié)合計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)，指導(dǎo)和開(kāi)展婦女生殖道感染相關(guān)病原體檢測(cè)服務(wù)，對(duì)提高婦女的生殖健康水平、維護(hù)婦女的健康權(quán)益尤為重要。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象

2007年9月～2007年10月在提供計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)的過(guò)程中，對(duì)年齡相近、文化程度、經(jīng)濟(jì)水平相似，居住同一地區(qū)的已婚婦女226人的宮頸分泌物進(jìn)行CT及HPV DNA檢測(cè)。

1.2研究方法

1.2.1標(biāo)本處理宮頸分泌物棉拭子于1.5mL生理鹽水中洗滌片刻，15000rpm離心10min，棄上清，沉淀中加入40μL裂解液和2μL 10mg/mL蛋白酶K，攪勻后45℃水浴作用1h，稍后離心再100℃沸水浴5min，最后10000rpm離心2min，上清液作為模板DNA待檢。

1.2.2CT PCR檢測(cè)方法在0.5mL無(wú)菌離心管中加入PCR反應(yīng)混合物25μL，反應(yīng)體系的終濃度為10mmol/L Tris-HCl (pH 8.3)，50mmol/L KCl，0.01%明膠，0.1% TritonX-100，1.5mmol/L MgCl2，各200μmol/L的dNTPs，各2μmol/L引物T1、T2，再加入Taq DNA聚合酶1U，模板DNA 5μL，混勻后離心數(shù)秒，加無(wú)菌液體石蠟30μL，按下列程序擴(kuò)增:94℃×3min預(yù)變性，94℃×60s-50℃×60s-72℃×60s，72℃×2min延伸，共35次循環(huán)。反應(yīng)液中加入1μL溴酚藍(lán)終止反應(yīng)。

1.2.3CT測(cè)定向擴(kuò)增產(chǎn)物中加入5μL上樣液，混勻后取15μL加樣于2%瓊脂糖凝膠板上，60V恒壓電泳30min后，在紫外光下可觀(guān)察到一條517bp的清晰的DNA片段，即為陽(yáng)性。

1.2.4HPV PCR檢測(cè)方法在0.5mL無(wú)菌離心管中加入PCR反應(yīng)混合物20μL，再加入Taq DNA聚合酶1U，模板DNA 4μL，混勻后離心數(shù)秒，加無(wú)菌液體石蠟40μL，按下列程序擴(kuò)增:94℃×2min預(yù)變性，94℃×30s-55℃×30s-72℃×60s延伸，共35次循環(huán)。反應(yīng)液中加入1μL溴酚藍(lán)終止反應(yīng)。

1.2.5HPV測(cè)定取15μL反應(yīng)液，加樣于2%瓊脂糖凝膠板上，5V/cm，恒壓電泳30min后，在紫外光下觀(guān)察結(jié)果，如407~412bp處出現(xiàn)橙黃色條帶，則HPV為陽(yáng)性。HPV-6，11，33型陽(yáng)性產(chǎn)物為407bp;HPV-16，18型陽(yáng)性產(chǎn)物為412bp。

2結(jié)果

2.1研究對(duì)象基本情況

226例婦女平均年齡為(44.56±3.13)歲，初潮年齡為(16.70 ±1.83)歲，妊娠數(shù)為(1.77±0.80)次，活產(chǎn)數(shù)為(1.10±0.33)例，人流數(shù)為(0.63±0.76)次。

2.2CT及HPV檢出率

受檢者中CT陽(yáng)性檢出率為21.2%，HPV陽(yáng)性檢出率為14.2%，CT及HPV均陽(yáng)性檢出率為4.0%。

2.3CT、HPV陽(yáng)性對(duì)象生殖健康狀況

CT陽(yáng)性對(duì)象中陰道異常的比例為8.3%，宮頸異常為12.5%;HPV陽(yáng)性對(duì)象中陰道異常的比例為9.4%，宮頸異常的比例為18.8%。CT及HPV均陽(yáng)性對(duì)象中陰道及宮頸異常的比例均為11.1%。見(jiàn)表1。

3討論

泌尿生殖道CT感染是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的性傳播疾病之一，近年來(lái)CT感染率不斷上升，在許多國(guó)家CT引發(fā)的STDs位居STD的首位，已超過(guò)了淋病和梅毒。在女性生殖道，CT感染多首發(fā)于宮頸，進(jìn)而沿柱狀上皮上行導(dǎo)致子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、盆腔炎[4]，反復(fù)持續(xù)感染造成盆腔粘連、輸卵管積水、梗阻導(dǎo)致不孕。Bell報(bào)道[5]，經(jīng)陰道分娩及剖宮產(chǎn)，新生兒感染CT的陽(yáng)性率為52.8%和25%，出現(xiàn)胎膜早破后，即使剖宮分娩，新生兒也有感染CT的風(fēng)險(xiǎn)。孕婦感染后，可導(dǎo)致絨毛膜羊膜炎、流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和胎膜早破等不良妊娠結(jié)局[6，7]。CT生殖道感染潛伏期長(zhǎng)，泌尿生殖系感染后l～3周才出現(xiàn)臨床癥狀，而且約有50%的被感染男性和約70%的被感染女性不出現(xiàn)任何的臨床表現(xiàn)。國(guó)內(nèi)外報(bào)道一般女性生殖道CT的感染率在3.7%～23.19%，以16～20歲組最高，無(wú)癥狀者占6.06%～50.60%?？讞澚醄8]的研究表明受檢者的CT感染率為18.65%，無(wú)癥狀占68.85%。

在自然人群中，HPV感染率從低于1%到高達(dá)50%，在性活躍人群中20%～80%以上的人有HPV感染史。HPV感染可發(fā)生于各種年齡，從初生的嬰兒到80歲以上年齡者均有HPV感染的報(bào)道[9]。郭廣洲等[10]對(duì)深圳某銀行系統(tǒng)1276名女性員工共檢出HPV陽(yáng)性者94例，陽(yáng)性率為7.37%，在被測(cè)的23個(gè)HPV亞型中，18個(gè)與宮頸癌密切相關(guān)的高危亞型HPV陽(yáng)性率為6.35%，5個(gè)低危型HPV陽(yáng)性率為1.02%。趙超等[11]對(duì)北京市795名20～54歲有性生活婦女進(jìn)行篩查，高危型HPV感染陽(yáng)性112例，占14.1%;陰性683例，占85.9%。子宮頸癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，也是發(fā)展中國(guó)家最常見(jiàn)的癌癥。最近的全球資料顯示，在全世界婦女中，每年的新發(fā)病例數(shù)近50萬(wàn)，其中80%病例發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。我國(guó)每年新發(fā)病例13.15萬(wàn)，約占世界宮頸癌新發(fā)病例的30%左右，近年來(lái)，宮頸癌的發(fā)病正呈現(xiàn)一種年輕化趨勢(shì)。以往關(guān)于宮頸癌的研究提示發(fā)病與多種因素有關(guān)，如人乳頭瘤病毒(HPV)感染、多產(chǎn)、初產(chǎn)年齡、性行為、經(jīng)濟(jì)狀況、吸煙、長(zhǎng)期使用口服避孕藥等。另外的研究也證實(shí)CT能協(xié)同HPV誘發(fā)宮頸癌的發(fā)生[1]。

本資料是在提供計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)的過(guò)程中，結(jié)合生殖道感染防治服務(wù)，對(duì)部分農(nóng)村女性的宮頸分泌物進(jìn)行CT及HPV的檢測(cè)，研究對(duì)象中CT及高危HPV的檢出率與其他報(bào)道相似，分別為21.2%及14.2%，說(shuō)明江蘇農(nóng)村婦女生殖道CT與HPV的感染與其他地區(qū)的婦女感染相似。研究中也發(fā)現(xiàn)CT及HPV感染者中陰道及宮頸異常的比例較低，感染無(wú)癥狀者在陰道發(fā)現(xiàn)為異常的大于90%，宮頸未見(jiàn)異常的大于81%。由于CT、HPV感染危害性的存在，需要加強(qiáng)對(duì)CT、HPV陽(yáng)性人群的實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)與隨訪(fǎng)，及早預(yù)防和減少因CT、HPV感染而致的疾病發(fā)生。因此，在計(jì)劃生育日常隨訪(fǎng)服務(wù)中，衛(wèi)生技術(shù)人員應(yīng)該對(duì)有性生活婦女提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室檢查和臨床觀(guān)察，提高婦女的生殖健康水平，維護(hù)婦女的健康權(quán)益。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Munoz N，Bosch FX，De Sanjose S，et a1.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J]. New Eng J Med，2003，348:518-527.

[2] Madeleine MM，Anttila T，Schwartz SM，et al.Risk of cervical cancer associated with Chlamydia trachomatis antibodies by histology.HPV type and HPV cofactors[J].Int J Cancer，2007，120(3):650-655.

[3] Bosch FX，de Sanjosé S. The epidemiology of human papillomavirus infection and cervical cancer[J]. Dis Markers，2007，23(4):213-217.

[4] 隗伏冰，濮德敏，盧運(yùn)萍.生殖道沙眼衣原體感染與發(fā)生輸卵管妊娠的關(guān)系[J]. 中華婦產(chǎn)科雜志，2000，35(2):113-114.

[5] Bell TA，Stature WE，Kuo CC，et al. Risk of perinatal transmission of chlamyida trachomatis by mode of delivery[J]. Jinfeet， 1994，29(5):165-169.

[6] Pint P，Islam MQ. Sexually transmitted diseases in the 1990s global epidemiology and challenges for control[J]. Sex Transm Dis，1994，2(1):7-13.

[7] 彭慧蘭，曹來(lái)英，魏敏. 兩種方法檢測(cè)分娩期孕婦解脲支原體、沙眼衣原體宮內(nèi)感染的分析[J]. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2005，13(3):56-58.

[8] 孔棟玲，任晨春. 天津地區(qū)育齡婦女生殖道沙眼衣原體感染狀況探討[J]. 天津醫(yī)藥，2007，35(11):862-863.

[9] 曹喜琴，杜海軍，周玲. 人乳頭瘤病毒感染的影響因素[J]. 國(guó)際病毒學(xué)雜志. 2006，13(4):104-107.

[10] 郭廣洲，姜萍，張冰凌，等. 深圳白領(lǐng)女性HPV感染調(diào)查及其亞型分布[J]. 中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2007，7(10):1775-1776.

[11] 趙超，李靜，屠錚，等. 北京社區(qū)婦女生殖道人乳頭瘤病毒感染及子宮頸上皮內(nèi)瘤變流行病學(xué)調(diào)查[J]. 中華流行病學(xué)雜志，2007，28(10):947-950.

(收稿日期:2009-10-12)