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張 巍 張 昆 邵明亮
灰樹花是擔子菌綱、多孔菌科的一種食用菌。本研究用荷瘤鼠模型觀察灰樹花對移植性腫瘤的抑制作用,并對抗腫瘤作用的免疫機制進行初步探討。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 動物 昆明小鼠體質(zhì)量為18~22 g,3~ 4周齡,雌性90只購自佳木斯大學(xué)實驗動物中心。
1.1.2 試劑 灰樹花多糖針劑,含量>50% ,由南京百盛生物工程有限公司提供。注射用環(huán)磷酰胺(CTX),由江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)。抗T細胞單克隆抗體L3T4、Lyt-2以及FITC兔抗鼠IgG,購自北京醫(yī)科大學(xué);小鼠肝腹水瘤細胞系(H22 ),由佳木斯大學(xué)病理教研室保存。
1.2 方法
1.2.1 建立模型 本研究設(shè)實驗組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ劑量組)和荷瘤模型對照組、陽性對照組(CTX),以及正常組,每組15只。灌胃3周后接種,制成模型。
1.2.2 對小鼠H22 的抑制作用 實驗組按分別按照100、200、400 mg/kg灌胃給藥1次/d,陽性對照組給環(huán)磷酰胺100 mg/kg,荷瘤模型對照組給生理鹽水0.4 ml。計算抑瘤率。
1.2.3 脾臟T細胞亞群的檢測 分離脾細胞,然后調(diào)整細胞濃度為1×106個/ml,按照操作說明完成后滴片,求出熒光細胞百分率。
2 結(jié)果
2.1 對小鼠H22 的抑制 由表1可見,灰樹花多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組荷瘤動物的瘤重與荷瘤模型組相比均有明顯的抑制作用,陽性對照組亦有明顯的抑制作用 (P<0.05) 。
2.2 T細胞亞群的檢測荷瘤鼠的輔助性T細胞L3T4水平明顯下降,抑制性T細胞Lyt-2水平亦顯著下降, L3T4/Lyt-2比值極顯著下降。而灰樹花多糖Ⅱ、Ⅲ組恢復(fù)到正常小鼠水平。
3 討論
本研究通過灰樹花多糖對荷瘤鼠瘤重等影響的分析,從瘤體比的統(tǒng)計分析結(jié)果更能清楚地說明灰樹花糖組的作用效果明顯優(yōu)于陽性對照組。本研究發(fā)現(xiàn)荷瘤鼠的L3T4和Lyt-2百分率均明顯下降,因此,L3T4/Lyt-2比值亦明顯下降。給予灰樹花多糖后L3T4和Lyt-2百分率均有明顯升高。L3T4百分率恢復(fù)到正常小鼠水平,L3T4/Lyt-2比值明顯升高?;覙?/p>
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作者單位:154002佳木斯大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院(張巍);佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(張昆);佳木斯大學(xué)第五臨床醫(yī)院(邵明亮)
花多糖Ⅱ、Ⅲ組的L3T4/Lyt-2比值恢復(fù)到正常小鼠水平,表明灰樹花多糖具有改善荷瘤鼠免疫功能的作用。因此,給予灰樹花多糖升高的Lyt-2或許是TCS表型,佐證L3T4在腫瘤免疫中是最為關(guān)鍵的效應(yīng)細胞。
參 考 文 獻
[1] 鄭建仙.β(1-3)葡聚糖的構(gòu)效關(guān)系.天津中醫(yī)藥,2004,21(1):53-57.
[2] 劉春輝,陳體強,林躍鑫.藥用真菌桑黃的研究進展.菌物研究,2004,2(2):53-59.