【摘要】目的:探討對低濃度紅細(xì)胞尿液（10/μl -100/μl）使用不離心法鏡檢計數(shù)紅細(xì)胞的可能性。方法:尿液中加入定量紅細(xì)胞，理論定值為10/μl、25/μl、50 /μl、100/μl。用離心鏡檢法和不離心鏡檢法計數(shù)紅細(xì)胞。結(jié)果:離心鏡檢法與理論定值濃度差異較大，均值為4.52/μl、13.39 /μl、29.91/μl、 56.74/μl，平均偏差-46.15%；不離心鏡檢法結(jié)果與實際濃度比較接近，均值為9.11/μl、23.43/μl、47.42/μl、97.06/μl，平均偏差-5.82%；兩法相比，t=2.52，P<20.05，結(jié)果有顯著性差異。結(jié)論:在尿液紅細(xì)胞濃度較低時，不離心鏡檢計數(shù)比離心鏡檢計數(shù)更能敏感、準(zhǔn)確地放映紅細(xì)胞實際濃度。

【關(guān)鍵詞】離心；尿紅細(xì)胞；細(xì)胞計數(shù)；鏡檢；尿沉渣

【中圖分類號】R122.1+2【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1007-8517(2009)12-0066-01

長期以來，尿液有形成分檢驗是否離心，文獻(xiàn)報道不一[1]~[6]。叢玉隆等認(rèn)為尿液離心檢查法不適合紅細(xì)胞等有形成分定量[5]，馬俊龍等研究發(fā)現(xiàn)離心鏡檢法與不離心鏡檢比較，紅細(xì)胞檢測結(jié)果僅是不離心鏡檢法的一半[7]。但上述研究都是在尿液紅細(xì)胞中高濃度（≥100/μl）以上時得出的。本文使用離心和不離心兩種方法對低濃度紅細(xì)胞（≤100/μl）尿液進(jìn)行紅細(xì)胞鏡檢計數(shù)，結(jié)果報告如下。

1材料與方法

1.1材料①標(biāo)本來源：本院門診病人正常尿液；正常人全血。②儀器器材：Olympus顯微鏡（日本）；LDZ5-2低速自動平衡離心機（北京醫(yī)用離心機廠）；FAST-READ₁₀一次性尿沉渣計數(shù)板（意大利）。

1.2方法

1.2.1不同濃度紅細(xì)胞成分的尿液標(biāo)本的制備選擇EDTA-K₂抗凝的新鮮正常的全血樣本1份，用血細(xì)胞分析儀（使用校準(zhǔn)品校準(zhǔn)）測量紅細(xì)胞數(shù)值，使用正常人混合尿液（收集多人尿液，用高速離心方法去除細(xì)胞等有形成分，留取上清夜）將紅細(xì)胞含量配制成10/μl、25/μl、50 /μl、100/μl四個濃度。配制好的含紅細(xì)胞的尿液標(biāo)本分別由三位熟練檢驗人員用離心鏡檢法和不離心鏡檢法計數(shù)紅細(xì)胞數(shù)量。

1.2.2離心鏡檢法按全國臨床檢驗操作規(guī)程方法[8]進(jìn)行，取混勻的尿液標(biāo)本10ml于一次性尿沉渣專用離心管內(nèi)，以1500r/min，離心5分鐘，吸掉上清夜，留取管底0.2ml沉渣，充分混勻后用一次性塑料吸管滴入FAST-READ₁₀一次性尿沉渣計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi)，稍待片刻，首先用低倍鏡觀察細(xì)胞分布情況，再用高倍鏡計數(shù)全池9個大方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。紅細(xì)胞含量（細(xì)胞數(shù)/μl） =（9個大方格的紅細(xì)胞數(shù)/9）×10÷50。

1.2.3不離心鏡檢法將配制好的紅細(xì)胞尿液充分混勻，用一次性塑料吸管吸取滴入FAST-READ₁₀一次性尿沉渣計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi)，稍待片刻，首先用低倍鏡觀察細(xì)胞分布情況，再用高倍鏡計數(shù)全池9個大方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。紅細(xì)胞含量（細(xì)胞數(shù)/μl） =(9個大方格的紅細(xì)胞數(shù)/9)×10

以上兩種方法，每管都重復(fù)充液計數(shù)6次，取平均值。所有檢測均在樣本配制后2h內(nèi)完成。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法用配對t檢驗。

2結(jié)果

不離心鏡檢計數(shù)與理論定值比較接近，平均偏差-5.82%；但離心法鏡檢計數(shù)結(jié)果是理論定值的一半左右，平均偏差達(dá)-46.15%。見表1。兩法相比，t=2.52，P<20.05，結(jié)果有顯著性差異。

3討論

尿沉渣的顯微鏡檢查是識別尿有形成分的“金標(biāo)準(zhǔn)”，主要有離心鏡檢法和不離心鏡檢法兩種，我國多建議采用離心法[9]。在實際工作中，當(dāng)尿液紅細(xì)胞較多時，離心沉淀反而不利鏡檢計數(shù)，尿沉渣檢驗實際無需離心，這已為檢驗人員所公認(rèn)[4，6，7]。況且，許多研究顯示，在尿紅細(xì)胞中高濃度時，離心法結(jié)果與真實結(jié)果存在明顯的差異，離心法結(jié)果明顯低于不離心法，不離心直接計數(shù)與真實值更加接近[5，7 ，0]。離心的目的是濃縮有形成分，防止漏檢，在尿有形成分濃度較低時，比如在正常參考值的上限9/μl[11]以上，到100/μl這個濃度范圍內(nèi)，將尿液離心，濃縮有形成分后再鏡檢計數(shù)似乎理所當(dāng)然，但本研究顯示即使在低濃度下離心法的計數(shù)結(jié)果仍然明顯低于真實值，而不離心法與真實值較為接近，與叢玉隆等[5]在高濃度下的研究結(jié)果一致。

離心使紅細(xì)胞計數(shù)偏低的原因主要可能有以下幾個方面：①離心后紅細(xì)胞沉淀不完全，上清夜還有紅細(xì)胞；②離心過程中部分紅細(xì)胞受到破壞；③離心管管壁有細(xì)胞的粘附；④計算時除于50這個濃縮倍數(shù)，放大了上述效應(yīng)。本研究方法參考叢玉隆等的研究方法是在沒有干擾物的情況下進(jìn)行的，在實際工作中是否適用，馬俊龍等通過研究已經(jīng)得到了肯定，認(rèn)為采用新鮮尿液直接計數(shù)（擴大計數(shù)范圍）是尿液有形成分計數(shù)的理想方法，而離心鏡檢法不適合有形成分定量分析[7]。綜上所述，可以認(rèn)為，不離心法尿液直接鏡檢計數(shù)紅細(xì)胞（擴大計數(shù)范圍）在決定性水平上（高于參考值上限的低濃度）比離心鏡檢法更為敏感，更為準(zhǔn)確，檢出率更高；且該法操作簡便，結(jié)果快速，無須昂貴儀器，值得基層醫(yī)院推廣。至于數(shù)到多少細(xì)胞的數(shù)量接近泊松分析能夠達(dá)到準(zhǔn)確定量計數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)，尚需探討。

參考文獻(xiàn)

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(收稿日期：2009.01.10)