【摘要】目的：研究亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯的抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳腫脹和醋酸所致小鼠毛細(xì)管通透性增高模型觀察其抗炎作用，采用大腸桿菌誘發(fā)家兔發(fā)熱模型觀察其解熱作用，采用熱板法及扭體法觀察其鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：與對照組比較，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1可明顯抑制二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳腫脹；亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1可明顯抑制醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性的增高。結(jié)論：亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯具有一定抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用。

【關(guān)鍵詞】亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯;抗炎;解熱;鎮(zhèn)痛

【中圖分類號】R282.6【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1007-8517(2009)12-0005-02

穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide)系自爵床科植物穿心蓮中提取得到的二萜內(nèi)酯類化合物，是中藥穿心蓮的主要成分之一，具有解熱、抗炎、抗菌、抗病毒等功效。臨床多用于上呼吸道感染、急性菌痢、胃腸炎、感冒發(fā)熱及高血壓等心血管疾病的治療[1]。以天然產(chǎn)物中的有效成分為先導(dǎo)化合物，進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造，是發(fā)現(xiàn)新藥的重要途徑。為了研究亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯的主要藥效，我們對其進(jìn)行了鎮(zhèn)痛、抗炎、解熱等實(shí)驗(yàn)研究，旨在為臨床應(yīng)用進(jìn)一步提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料

1.1實(shí)驗(yàn)動物昆明種小鼠，體重18～22g；家兔2.0～2.5kg，購自安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，合格證號：皖醫(yī)實(shí)動準(zhǔn)01號；實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)溫度：22±2℃。

1.2藥品與試劑亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯，安徽先鋒制藥提供，批號20031208；蓮必治注射液，無錫山禾藥業(yè)，批號20031126；二甲苯，徐州試劑二廠，批號980507；冰醋酸，徐州試劑總廠，批號990702；大腸桿菌ATCC35218，安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科提供。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器756MC紫外分光光度計(jì)；TGL-16H高速離心機(jī)；FA1004天平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS軟件11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)量反應(yīng)資料均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)，給藥前后比較采用配對t檢驗(yàn)的方法。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1抗炎作用

2.1.1二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳腫脹模型[2]取昆明種小鼠50只，♀♂各半，體重20±2g，隨機(jī)分為5組，每組10只，即對照組、亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯大、中、小三個(gè)劑量組（160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1）、陽性藥組（蓮必治注射液80mg#8226;kg-1）。肌內(nèi)注射給藥，每天1次，連續(xù)3d。于末次給藥后1h，在小鼠右耳兩面涂100%二甲苯0.03ml，左耳為對照，3h后將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm打孔器分別在同一部位打下圓耳片，用電子天平稱重，以兩耳重量之差作為腫脹度。

2.1.3醋酸所致小鼠毛細(xì)管通透性增高模型[3]取小鼠50只，♀♂各半，共分5組，每組10只，即對照組、亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯大、中、小三個(gè)劑量組（160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1）、陽性藥組（蓮必治注射液80mg#8226;kg-1）。肌內(nèi)注射給藥，每天1次，連續(xù)3d，于末次給藥后1h，每鼠尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)生理鹽水0.1ml#8226;10g-1，隨即ip0.7%冰醋酸0.1ml#8226;10g-1。20min后脫臼處死小鼠，切開腹部皮膚肌肉，用6ml生理鹽水分?jǐn)?shù)次洗滌腹腔，吸管吸出洗滌液，3000rpm離心15分鐘，取清液于590nm處比色測定吸光度。

2.2解熱作用

2.2.1大腸桿菌誘發(fā)家兔發(fā)熱模型[3]實(shí)驗(yàn)前家兔停食2h，將肛表插入肛門內(nèi)放置4分鐘，以測定家兔的基礎(chǔ)體溫，間隔45分鐘，重復(fù)測定一次，棄除2次溫差大于0.2℃的家兔，耳緣靜脈注射大腸桿菌液（1×106個(gè)），5小時(shí)后剔除體溫升高不到1℃的家兔。將篩選合格的40只家兔，♀♂各半，隨機(jī)分為5組，每組8只，即對照組、亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯大、中、小三個(gè)劑量組（80.0、40.0和20.0mg.kg-1）、陽性藥組（蓮必治注射液40mg.kg-1）。除對照組外，各組耳緣靜脈注射相應(yīng)藥物，并于給藥后45、90、150分鐘分別測定家兔體溫1次，計(jì)算家兔各個(gè)時(shí)間的溫度與其初始體溫的差值，即為體溫的變化值，若為負(fù)值，計(jì)為0℃，計(jì)算各組體溫變化值的平均值及標(biāo)準(zhǔn)差，進(jìn)行t檢驗(yàn)對及校正t檢驗(yàn)以觀察藥物的降溫作用。

2.3鎮(zhèn)痛作用

2.3.1小鼠熱板舔足反應(yīng)模型[3]實(shí)驗(yàn)前將♀小鼠置于55℃恒溫水浴金屬板上，以小鼠舔右后足為疼痛反應(yīng)指標(biāo)，記錄小鼠舔足反應(yīng)潛伏期為基礎(chǔ)痛閾（剔除基礎(chǔ)痛閾小于5S，大于30S的小鼠），將篩選的50只♀小鼠隨機(jī)分為對照組，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯大、中、小劑量組（160.0、80.0和40.0mg.kg-1）及陽性藥組（蓮必治注射液80.0mg.kg-1），每組10只，各組小鼠肌內(nèi)注射給藥，共3天，各組小鼠于最后一次給藥1h后，按同法測定小鼠舔足反應(yīng)潛伏期。

2.3.2小鼠扭體反應(yīng)模型[3]取小鼠50只，♀♂各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，即對照組、亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯大、中、小三個(gè)劑量組（160.0、80.0和40.0 mg.kg-1）、陽性藥組（蓮必治注射液80 mg.kg-1）。各小鼠肌內(nèi)注射給藥，共3天，于最后一次給藥后1h，實(shí)驗(yàn)小鼠ip0.7％冰醋酸0.1ml.10g-1，記錄15min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1抗炎作用

3.1.1亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯對二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組比較，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1可明顯抑制二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳腫脹，結(jié)果見表1。

3.1.2亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯對小鼠毛細(xì)血管通透性的影響試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組比較，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1可明顯抑制醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性的增高，結(jié)果見表2。

3.2 解熱作用

3.2.1亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯對大腸桿菌誘發(fā)家兔發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組比較，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯80.0和40.0mg#8226;kg-1可顯著降低大腸桿菌誘發(fā)的家兔發(fā)熱，結(jié)果見表3。

3.3鎮(zhèn)痛作用

3.3.1亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯對小鼠熱板反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與給藥前及對照組比較，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯160.0和80.0mg.kg-1組可顯著延長小鼠舔足反應(yīng)潛伏期。

3.3.2 亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯對小鼠扭體反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組比較，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯大劑量組160.0 mg.kg-1可減少冰醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)。

4討論

亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯160.0、80.0和40.0mg#8226;kg-1可顯著抑制二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹程度和醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性增高，提示亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯具有明顯的抗炎作用，其抗炎機(jī)制可能為抑制急性炎癥早期的毛細(xì)血管通透性增加而減少滲出及抑制中性粒細(xì)胞[4]。中性粒細(xì)胞在炎癥特別是急性炎癥早期有重要作用。中性粒細(xì)胞在吞噬過程中產(chǎn)生大量氧自由基及由此轉(zhuǎn)化成的H₂O₂，#8226;OH等活性氧，活性氧在機(jī)體抗御感染、炎癥反應(yīng)和介導(dǎo)組織損傷等過程中起到重要作用。

另外，亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯80.0和40.0mg#8226;kg-1可顯著降低大腸桿菌引起的家兔體溫升高，具有較好的解熱作用；160.0和80.0mg#8226;kg-1亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯可顯著延長小鼠熱板舔足反應(yīng)潛伏期，減少冰醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)，這提示亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯具有一定鎮(zhèn)痛作用。

參考文獻(xiàn)

[1]王琳，楊靜偉，宋鳳平.穿心蓮的藥理作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2003，20(6):2

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1992：259-273

[3]徐叔云、卞如濂、陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：905-934

(收稿日期：2009.03.10)