張迎君　陳元平　楊　麗　張義剛　張　龑　周心智　張云貴

摘要：我們在江津發(fā)現九葉青花椒根部腐爛后導致果實脫落。為此，開展了該病原的分離鑒定。結果表明，該真菌屬于腐皮鐮刀菌[Fusarium solani(Hart.)Sagel，引起九葉青花椒根腐。

關鍵詞：花椒；病原菌；分離；鑒定

江津九葉青花椒為江津最為重要的經濟作物，2007年全區(qū)種植面積已經達到50萬畝，產量達15萬噸，產值達9.2億元。但是生產普遍存在根部腐爛，引起樹體死亡。為此，本文對引起該現象的病原菌進行了分離與鑒定，以期為其防治提供依據。

1、材料與方法

1．1材料

1．1．1供試花椒根樣由江津區(qū)先鋒鎮(zhèn)陳永江于江津先鋒夾灘社區(qū)3社花椒園采集送樣。

1．1．2供試培養(yǎng)基

馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)；馬鈴薯(去皮)200g，瓊脂20g，葡萄糖20g，加水定容至1000ml。

1．2試驗方法

1．2．1癥狀觀察對采集的花椒樹根樣本進行觀察，記錄病害癥狀。

1．2．2病原菌的分離與純化組織分離：選擇典型發(fā)病病斑切取5mmx5mm的小塊，置于PDA平板上，每皿5片，25℃培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。待病菌長出菌絲產生分生孢子后在顯微鏡下觀察分生孢子的形態(tài)，再通過劃線培養(yǎng)得到單孢菌落。

單孢分離：選擇典型病斑的部位，放人裝有少量無菌水和玻璃顆粒的滅菌三角瓶中，充分搖動，待分生孢子釋放到無菌水中，制成孢懸液，用移液槍將其轉到培養(yǎng)皿中，再倒平板后充分混勻，冷凝后置于25℃培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。待病菌長出菌絲產生分生孢子后在顯微鏡下觀察分生孢子的形態(tài)。

1．2．3病原菌的菌落形態(tài)觀察及鑒定菌落形態(tài)觀察；將單菌蓓的病原菌制片后無需染色直接在顯微鏡下觀察菌絲形態(tài)、孢子形狀，記錄觀察結果并拍照，按照Saccardo的真菌分類系統進行種類鑒定。

2結果與分析

2．1病害癥狀受害植株根部變色腐爛，根皮與木質部易脫離，嚴重的木質部呈黑色，有的根皮上有一些白色絮狀菌落，地上部分葉形變小，葉黃，枝條發(fā)育不全，有的發(fā)黃發(fā)白。

2．2病原菌在PDA上的培養(yǎng)性狀25℃恒溫培養(yǎng)條件下，病菌在PDA上形成的氣生菌絲體茂盛，呈絮狀，無色或淡黃色，培養(yǎng)皿反面無色。

2．3病菌的分生孢子形態(tài)特征及鑒定發(fā)現有大小型分生孢子，小型分生孢子為單胞，少數有112隔，呈卵狀、梨狀、橢圓狀；大型分生孢子為鐮刀形，1-3分隔，參照有關資料，確定為腐皮鐮刀菌[Fyusarium solani(Mart.)Sate]，半知菌亞門鐮刀菌屬，結合癥狀特征，初步確定此病害為花椒根腐病。

3討論

本次實驗通過從枯死花椒根部分離得到的病菌與朱天輝等人的研究結果相吻合，與李智敏等記載的茄形鐮刀菌相一致，只是同物異名，在PDA上的培養(yǎng)性狀與葉鵬盛等描述的形態(tài)基本一致，由此可以初步斷定其為花椒根腐病。同時花椒根腐病又是一種土傳病害，有其自身的復雜性，由于土壤理化性質的影響及微生物區(qū)系的龐大，往往在病原鑒定上存在較大的困難，并且F.sotani是一種腐生菌本次實驗采用的是枯死標本，所以難以準確判斷是因為它的入侵引起了植株的死亡還是植株死亡之后腐生上去的，對于這個問題還有待于進一步的研究。