，，，

(1.南京婦幼保健院，江蘇 南京 210029；2.南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210029)

婦炎凈方是我院的臨床驗方，主要由三棱、莪術、蒲黃等多味中藥組成，該方主要用于慢性盆腔炎、盆腔包塊的治療。經多年的臨床觀察，其具有獨特療效，能使患者的炎癥愈合、疼痛緩解、包塊消失。為更好地發(fā)揚該方的優(yōu)良療效，更方便地服務患者，擬研制婦炎凈顆粒，考慮其以合劑長期應用于臨床，本制劑提取工藝設計為部分藥味提取揮發(fā)油后，再與余下部分合并水提。本文對水提部分的工藝進行正交法優(yōu)選，由于水提部分藥材中多味含有黃酮類成分，且黃酮類成分不僅對心血管、消化系統(tǒng)有作用，還具有抗炎、抗病毒等多種作用[1],因此以總黃酮的量作為工藝考察的指標，文獻多以甲醇為溶劑在紫外或可見光區(qū)測定其含量[2-3]，本文采用UV法，方法簡便實用，重復性好，可操作性強。

1 儀器與試藥

紫外可見分光光度計Spectrum 754型(上海分析儀器總廠);蘆丁(20080315):中國藥品生物制品檢定所；藥材：均購自南京市藥材公司，經鑒定符合《中國藥典》2005版規(guī)定；試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 正交試驗設計[4-5]根據有關浸提理論及預試驗結果，提取工藝與藥材煎煮時間、煎煮次數、加水量等因素有較密切的關系，為選擇最佳水提工藝條件，選用L9(34)正交表，各因素、水平見表1。

根據專業(yè)知識和實際經驗，各試驗的提取次數與提取時間及加水量的關系，如表2。

根據表2，若實驗因素水平為A2B2C2即表示該號實驗提取總時間為3.0 h，分2次提取，第1次加10倍量水，沸后煎煮1.5 h，第2次加8倍量水，沸后煎煮1.5 h,依次類推，量取體積。依照原處方，各次實驗藥材量為276 g。精密取濾液1.0 mL,置于25 mL容量瓶中，余按標線項下操作，測其總黃酮的量。

表1 工藝因素水平

表2 各號試驗時間和加水量的分配關系

表3 正交試驗數據及其計算分析結果

2.2 標準曲線的繪制 精密稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對照品10.12 mg,于50 mL容量瓶中，加適量甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得對照品貯備液，精密吸取1.0，2.0，3.0,4.0,5.0，6.0 mL,分別置于25 mL容量瓶中，加5%NaNO21 mL,放置6 min,續(xù)加入10%Al(NO3)31 mL，放置6 min,再加入5%NaOH試液10 mL，并加水置刻度，搖勻，放置15 min，以相應的試劑作空白對照，以UV-754在500 nm處測定各樣品的吸收度,Y=10.592X+0.011 9(r=0.999 7),蘆丁濃度在0.008 09～0.097 075 mg/mL之間呈良好的線性關系。

2.3 結果 根據正交表，共進行9次試驗，有關實驗數據及其計算分析結果，見表3。利用方差分析對表3中各因素的數據進行分析,結果見表4。

表4 方差分析

由表4的方差分析表可以看出，因素A加水量的影響具有顯著性；因素B煎煮時間和因素C煎煮次數的影響均不顯著。從表3極差直觀分析，我們確定最佳水提取工藝A1B2C2，即:第1次加水9倍量，煎煮1.5 h，第2次加6倍量水，煎煮1.5 h，濾過，合并煎液。

2.4 工藝驗證 根據正交試驗結果，按此最佳工藝條件放大試驗,投料3批進行工藝驗證，結果表明該工藝提取較好。

3 討論

3.1 從實驗結果看，所選擇的3個因素中加水量的影響具有顯著性，因此在實際操作中應嚴格控制這個因素。

3.2 根據本方中藥材的性質，采用水提工藝，可有效地提出其中大部分有效成分，水煎工藝優(yōu)選曾進行浸泡試驗考察，結果表明煎前浸泡0.5、1 h，總黃酮的量相差甚小,為節(jié)省工時，均選擇浸泡0.5 h。

[1]王憲楷.天然藥物化學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1990:276.

[2]侯世祥,鄧定剛,蔣學華,等.復方中藥制劑中總黃酮含量測定方法探討[J].華西藥學雜志,1993,8(3):131.

[3]叢維濤,崔 健,陳 新,等.不同產地槐角的質量分析[J].吉林中醫(yī)藥,2005,25(6):51.

[4]何 凌.淫羊藿總黃酮提取物的制備工藝研究[J].吉林中醫(yī)藥,2007,27(11):57-58.

[5]孟祥穎,郭 良,李玉新,等.蘆丁的來源、用途及提取純化方法[J].長春中醫(yī)學院學報,2003,19(2):63-66.