張　浩　羅來(lái)成　劉若森

摘要隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問(wèn)題和無(wú)公害食品的日益重視,農(nóng)產(chǎn)品快速檢測(cè)技術(shù)的研究已經(jīng)成為當(dāng)前中國(guó)生物技術(shù)研究領(lǐng)域的的一大熱點(diǎn)。介紹了膠體金快速檢測(cè)在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用和技術(shù)特點(diǎn)。

關(guān)鍵詞農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全;膠體金;快速診斷

中圖分類號(hào)TS201.6文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼B文章編號(hào) 1007-5739(2009)19-0338-01

膠體金快速診斷試劑是近年來(lái)的生物產(chǎn)業(yè)化最成功的產(chǎn)品之一,近年來(lái),隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)食品安全問(wèn)題和無(wú)公害食品的日益重視,食品的快速檢測(cè)技術(shù)的研究已經(jīng)成為當(dāng)前中國(guó)生物技術(shù)研究領(lǐng)域的的一大熱點(diǎn)?？焖倌z測(cè)需求廣泛,可以應(yīng)用于臨床醫(yī)用、食品安全、動(dòng)植物疾病和環(huán)境污染等諸多領(lǐng)域。目前,有禽流感、家畜疫病、農(nóng)藥殘留、食品藥物殘留等多個(gè)方向,市場(chǎng)也比較空白,因此發(fā)展前景非常好。

1農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)

目前,“食品安全關(guān)鍵技術(shù)”課題專項(xiàng)已列入我國(guó)“十五”國(guó)家重大科技項(xiàng)目,“農(nóng)藥、獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)”作為其關(guān)鍵課題之一,以提高食品質(zhì)量水平,保障人民身體健康,提高我國(guó)農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力及我國(guó)食品安全科技工作在國(guó)際上的影響力。其中氯霉素等農(nóng)獸藥殘留快速檢測(cè)方法、試劑盒及相關(guān)設(shè)備已作為其重要研究?jī)?nèi)容,受到廣泛關(guān)注。目前免疫膠體金快速檢測(cè)已經(jīng)占據(jù)整個(gè)檢測(cè)市場(chǎng)20%,預(yù)計(jì)在2010年將達(dá)到40%～50%。

快速檢測(cè),顧名思義是在短時(shí)間內(nèi)提供結(jié)果,準(zhǔn)確的說(shuō)是在幾分鐘內(nèi)。這種檢測(cè)法是一種廉價(jià)的、一次性的基于膜的檢測(cè)方法,它能提供分析物存在于液體樣品的視覺(jué)證據(jù),這種檢測(cè)可以是獨(dú)立的試紙條,也可以以裝在塑料盒中的形式進(jìn)行。總的來(lái)說(shuō),做此項(xiàng)檢測(cè)至少需要200μL的液體標(biāo)本,可在5～10min內(nèi)完成。在臨床檢測(cè)中,樣品可能有尿、血液、血清、唾液或其他體液。在非臨床檢測(cè)中,樣本可能是由土壤、粉塵、植物或者食品制備的微量溶液。

2膠體金快速診斷技術(shù)特點(diǎn)

目前,隨著現(xiàn)代單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)和新材料技術(shù)的發(fā)展,新興了一種新型檢測(cè)技術(shù)——膠體金免疫層析法(Colloidal Gold Immunochromatographic Strip Assay,GICA),該方法具有操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)、不需要添加額外設(shè)備、快速(5～10min即可得到檢測(cè)結(jié)果)等特點(diǎn),其反應(yīng)所需要的原料的全部或大部分均已整合到試劑中,當(dāng)待測(cè)樣品(尿液、血清或組織樣處理液)加入到樣品膜上后,由于微孔濾膜的毛細(xì)管作用,使抗原抗體反應(yīng)在固相膜上快速進(jìn)行,反應(yīng)通常只需數(shù)分鐘,測(cè)試結(jié)果以肉眼可見(jiàn)的顯色條帶來(lái)判斷。其顯色反應(yīng)是由于所標(biāo)記的有顏色的顆粒在反應(yīng)區(qū)域聚集而形成的。目前在臨床診斷中得到了廣泛應(yīng)用,如傳染病、早孕、癌癥等檢測(cè)。近年來(lái),膠體金檢測(cè)技術(shù)已開(kāi)始應(yīng)用于小分子物質(zhì)的檢測(cè),如毒素、藥殘留、環(huán)境監(jiān)測(cè)等非臨床檢測(cè)領(lǐng)域,目前國(guó)外已經(jīng)開(kāi)發(fā)出用于鏈霉素、磺胺嘧啶等獸藥殘留檢測(cè)的試劑條。

膠體金快速檢測(cè)試劑采用了免疫膠體金技術(shù),將特異性抗原結(jié)合物和抗體分別固定于硝酸纖維膜上,并與膠體金標(biāo)記的抗單克隆抗體及其他試劑組裝成膠體金快速檢測(cè)試劑板,應(yīng)用層析式免疫競(jìng)爭(zhēng)原理,特異性檢測(cè)牛奶、水產(chǎn)品、動(dòng)物性肌肉組織等樣品中的農(nóng)獸藥殘留。根據(jù)靈敏度的質(zhì)量要求,基層檢測(cè)單位、水產(chǎn)和禽畜養(yǎng)殖企業(yè)及牛奶、蜂制品加工企業(yè)大規(guī)模樣本篩選的實(shí)際情況,將試劑盒的靈敏度定為1～5ng/g(ng/mL),作為樣品定性或半定量檢測(cè)之用。

3膠體金快速檢測(cè)試劑特點(diǎn)

相比目前其他檢測(cè)試劑,包括:ELISA檢測(cè)試劑盒、乳膠凝集法、放免法(RIA)、HPLC、質(zhì)譜法等,膠體金快速檢測(cè)試劑具有以下優(yōu)點(diǎn)。一是價(jià)格低。產(chǎn)品生產(chǎn)流程簡(jiǎn)單,生產(chǎn)成本低。二是質(zhì)量高。膠體金方法制備而成的試劑特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好。三是靈活可靠。大量多樣化的測(cè)試片或試劑盒檢測(cè)的產(chǎn)生,適用的環(huán)境范圍較寬松,其能提供變異系數(shù)在5%或更小范圍的可靠結(jié)果。四是操作簡(jiǎn)便。膠體金方法制備而成的試劑以膠體金作為指示標(biāo)記,定性結(jié)果準(zhǔn)確、快速,操作簡(jiǎn)便,可分批或單個(gè)樣品及時(shí)檢測(cè)。五是易于推廣使用。試劑易保存,操作人員無(wú)需專業(yè)培訓(xùn),不需要配備專門(mén)的儀器設(shè)備,按說(shuō)明書(shū)即可完成操作。

4結(jié)語(yǔ)

總之,由于精良的膠體金試劑有更大的敏感性和特異性的需求,對(duì)膠體金的生產(chǎn)和使用嚴(yán)格的操作才可能取得成功,在大量快速檢測(cè)設(shè)計(jì)中對(duì)更高敏感性、可靠性及重現(xiàn)性要求的增加使得膠體金作為農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥、獸藥殘留量的檢測(cè)首選。

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