王榕生

【摘要】 目的 探討血漿D-二聚體定量檢測在肺栓塞診斷的應(yīng)用價值。 方法 回顧性分析78例經(jīng)臨床確診為肺栓塞患者D二聚體檢測結(jié)果，其中40例采用CA1500全自動血凝儀免疫比濁法定量檢測，38例采用半定量膠乳凝集法定性檢測，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)報道對其進(jìn)行評價。結(jié)果 采用半定量膠乳凝集法敏感性為57．9%，使用全自動血凝儀檢測敏感性為100%，兩種方法敏感性有顯著性差異。結(jié)論 采用CA1500全自動血凝儀對血漿D-二聚體定量檢測敏感性較高，可作為急性肺栓塞排除診斷的首先篩選試驗，更適合于急診檢測，值得推廣使用。

【關(guān)鍵詞】肺栓塞；D-二聚體； 免疫比濁法； 敏感性

肺栓塞(PE)是內(nèi)源性或外源性栓子堵塞肺動脈引起肺循環(huán)障礙的臨床和病理生理綜合征。其發(fā)病率及誤診率均較高。早期診斷是臨床醫(yī)生極為關(guān)注的問題，血漿D-二聚體是特異性交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物，其水平增高反映凝血酶增多或繼發(fā)性纖溶活性增強，是血管內(nèi)纖溶的最常用血清學(xué)標(biāo)記物，采用測定D-二聚體作為肺動脈血栓栓塞的第一步篩查手段目前已得到國際公認(rèn)。本研究旨在評價不同方法對D-二聚體檢測的敏感性，探討其在肺栓塞診斷的地位和作用，為肺栓塞診斷提供更為方便快捷、準(zhǔn)確可靠的指標(biāo)。

1 資料與方法

1．1 材料

1．1．1 對象 2004年10月至2008年5月揭陽市人民醫(yī)院收治有完整病史資料的肺栓塞患者78例，男48例，女30例；年齡25～85歲，病例均經(jīng)心電圖，動脈血氣分析，X線胸片，增強CT掃描結(jié)合臨床病史、癥狀及體征確診的住院患者。

1．1．2 儀器 日本SysmexCA1500全自動凝血儀。

1．1．3 試劑 儀器法試劑為原裝配套試劑，校正物、質(zhì)控物均為德國DADE公司提供。膠乳凝集法試劑為太陽公司產(chǎn)品。

1．2 方法

1．2．1 原理 D-二聚體定量檢測（儀器法）原理 每個乳膠微粒直徑（0．1±0．02)μm吸附2個D-二聚體特異性抗體,此顆粒的直徑小于檢測光束波長(540 nm),因而當(dāng)光束穿過乳膠顆粒懸液時僅有微量的光波被吸收。溶液中的待測抗原(D-二聚體)與乳膠顆粒吸附抗體結(jié)合形成聚合體,此聚合體的直徑遠(yuǎn)大于入射光波長,因而入射光被吸收的量大大增加,增加的吸光度可反映待測抗原在受檢樣品中的含量。手工半定量法原理:普通乳膠顆粒吸附D-二聚體特異性抗體,與血漿中D-二聚體結(jié)合后形成肉眼可見的凝集塊時判定為陽性結(jié)果(0．5 μg/ml),將標(biāo)本倍比稀釋,結(jié)果為陽性的最大稀釋度乘以0．5即為檢測結(jié)果。

1．2．2 標(biāo)本采集 于應(yīng)用抗凝及溶栓藥物治療前采集患者枸椽酸鈉抗凝靜脈血,2500 r/min離心10 min,采血后2 h內(nèi)完成檢測。

1．2．3 統(tǒng)計學(xué)方法 統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS 10．0統(tǒng)計分析軟件以P<0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

40例肺栓塞患者在全自動血凝儀檢測結(jié)果全部＞500 U/L,敏感性100%,另外38例采用半定量膠乳凝集法檢測結(jié)果有22例為陽性, 敏感性57．9%,兩種方法差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。

3 討論

D-二聚體是凝血酶及因子Ⅻ作用的交聯(lián)纖維蛋白經(jīng)纖溶酶降解作用后的終末產(chǎn)物,血漿中D-二聚體含量增高表明體內(nèi)有血栓形成及溶解發(fā)生,可以作為無創(chuàng)傷性的體內(nèi)血栓形成的指標(biāo)^[1]。臨床上,急性DIC、肺栓死,腦梗死、急性心肌梗死、肝硬化、腫瘤、急性非淋巴細(xì)胞白血病、敗血癥等疾病均可有血漿D-二聚體水平的變化,D-二聚體作為體內(nèi)血栓前狀態(tài)及血栓形成的指標(biāo)之一,在臨床得到廣泛應(yīng)用。

診斷肺栓塞的金標(biāo)準(zhǔn)是肺動脈造影^[2]，由于其檢查有一定危險性，在使用中受到一定限制，增強CT掃描、MR在診斷肺栓塞有很好價值，但需要有大型設(shè)備的醫(yī)療條件,相關(guān)文獻(xiàn)報道D-二聚體對急性肺血栓栓塞的陰性預(yù)測價值接近100%^[3]，也就是D-二聚體不高可以排除急性肺血栓。由于有檢查方便與非創(chuàng)傷性的優(yōu)點，在國內(nèi)外倍受關(guān)注。特別是近年來檢驗方法靈敏度的提高，血漿D-二聚體定量檢測被廣泛應(yīng)用。

檢測D-二聚體的方法建立于1983年,采用免疫學(xué)原理檢測抗原的含量^[3],檢測法有乳膠凝集法、酶聯(lián)免疫法、免疫比濁法等。半定量的乳膠凝集試驗方法敏感性較差,受人為主觀性影響大,本實驗結(jié)果顯示敏感性只有57．9%,已不能滿足臨床發(fā)展需要。酶聯(lián)免疫方法靈敏度較高,在肺栓塞中的診斷價值已得到肯定,國內(nèi)胡云建等報道用全自動免疫分析系統(tǒng)進(jìn)行酶聯(lián)免疫定量檢測D-二聚體(VIDAS-DD法),以494 ng/ml為陽性界值,其對肺栓塞的敏感性和陰性預(yù)測值均為100%^[3];普通ELISA方法由于檢測時間較長,不適合于急診檢驗,應(yīng)用于VIDAS的DD法需特定的進(jìn)口全自動免疫儀器,儀器昂貴難普及。本研究采用CA1500全自動血凝儀免疫比濁法定量檢測D-二聚體，其敏感性為100%,與VIDAS-DD法相同。與半定量的乳膠凝集法敏感性57．9%比較有顯著性差異,敏感性有大幅度提高,而且檢測時間短,尤其適合于急診檢測,值得推廣使用。

參考文獻(xiàn)

［1］ 董懷平,李慶敏.D-二聚體的研究進(jìn)展.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2006,27(12):1134-1135.

［2］ 白明,張斗霞. 肺栓塞的診斷進(jìn)展.臨床內(nèi)科雜志,2004,21(7):433-434.

［3］ 胡云建,陶鳳榮,王厚東,等. D-二聚體測定在肺栓塞診斷中的應(yīng)用價值.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2002,25(2): 95-97.