王勝君等

摘要：利用真菌培養(yǎng)水稻干尖線蟲的結(jié)果表明：不同的真菌培養(yǎng)線蟲的效果有較大差異。鏈格孢菌、鐮刀菌的效果明顯優(yōu)于常用的灰葡萄孢菌，可選用于培養(yǎng)水稻干尖線蟲。在真菌菌落上，不同的接蟲量以及不同的溫度和培養(yǎng)時間對水稻干尖線蟲的培養(yǎng)均有一定的影響。

關(guān)鍵詞：水稻干尖線蟲；真菌；培養(yǎng)

中圖分類號：S 432，45

水稻干尖線蟲現(xiàn)稱貝西滑刃線蟲，是水稻上的重要寄生線蟲。早在20世紀50～60年代，水稻干尖線蟲病發(fā)生嚴重，并被列為國內(nèi)檢疫對象。近幾年，水稻干尖線蟲病又有反復(fù)趨勢，嚴重威脅水田生產(chǎn)。有關(guān)利用真菌培養(yǎng)線蟲，國內(nèi)外均有報道。Mamiya等首次用灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)菌絲體繁殖松材線蟲。程瑚瑞等利用灰葡萄孢菌在馬鈴薯一葡萄糖一瓊脂(PDA)培養(yǎng)基和玉米粒培養(yǎng)基上均大量繁殖出松材線蟲。在實驗室中，水稻干尖線蟲可以在灰葡萄孢菌等幾種真菌上培養(yǎng)。但很少有人系統(tǒng)研究不同種類的真菌培養(yǎng)該線蟲的效率差異。本研究采用不同條件和用不同種類的真菌培養(yǎng)水稻干尖線蟲，鏈格孢菌和鐮刀菌培養(yǎng)水稻干尖線蟲的效果明顯優(yōu)于常用的灰葡萄孢菌，且鐮刀菌的效果最好，同時得到最適的培養(yǎng)條件，為以后更好地防治水稻干尖線蟲病害提供理論基礎(chǔ)。

1、材料與方法

1.1材料來源

水稻干尖線蟲：貝曼漏斗法分離帶蟲水稻種子而獲得。

真菌：鏈格孢菌和鐮刀菌由作者在水稻種子上分離獲得，灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)由薛春生提供。

1.2供試真菌培養(yǎng)基

馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂(PDA)培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g；葡萄糖20 g；瓊脂20 g；水1 000 mL。

1.3真菌培養(yǎng)水稻干尖線蟲

1.3.1水稻干尖線蟲的接種

將待培養(yǎng)的水稻干尖線蟲先用無菌水沖洗，然后用1％的硫酸鏈霉素浸洗消毒15min，最后用無菌水沖洗干凈，接到長滿菌絲體的供試真菌菌落上，恒溫(25℃)培養(yǎng)，待菌絲體被食凈，貝曼漏斗法分離獲取線蟲。

1.3.2不同種類真菌對水稻干尖線蟲繁殖的影響

在3種供試真菌菌落上分別接入50條水稻干尖線蟲，恒溫(25℃)培養(yǎng)15 d后，檢測蟲量并計算繁殖倍數(shù)。

1.3.3不同接種量對水稻干尖線蟲繁殖的影響

將接種量為10、20、50、100、500條水稻干尖線蟲，分別接到已培養(yǎng)好的上述真菌上培養(yǎng)，恒溫(25℃)培養(yǎng)15 d后，檢測蟲量并計算繁殖倍數(shù)。

1.3.4不同溫度對水稻干尖線蟲繁殖的影響

在培養(yǎng)好的上述真菌上各接入50條水稻干尖線蟲，分別置于15、20、25℃和30℃恒溫培養(yǎng)15 d后，檢測蟲量并計算繁殖倍數(shù)。

1.3.5不同培養(yǎng)時間對水稻干尖線蟲繁殖的影響

在培養(yǎng)好的上述真菌中各接入50條水稻干尖線蟲，恒溫(25℃)分別培養(yǎng)10、15、20、25、30 d后，檢測蟲量并計算繁殖倍數(shù)。

以上試驗均重復(fù)3次。

2、結(jié)果與分析

2.1不同種類真菌對水稻干尖線蟲繁殖的影響

供試的3種真菌均可繁殖水稻干尖線蟲，但線蟲的繁殖倍數(shù)隨真菌種類的不同而有差異。25℃，培養(yǎng)15 d，線蟲在鐮刀菌上的繁殖倍數(shù)最大，達346倍；鏈格孢菌上的次之，為250倍；灰葡萄孢上的最小，為108倍(表1)。

2.2不同接種量對水稻干尖線蟲繁殖的影響

不同接種量對水稻干尖線蟲的繁殖倍數(shù)有一定的影響。在10～50條之間，隨接種蟲量的加大，繁殖倍數(shù)相應(yīng)增大，但增長緩慢；在50～500條之間，亦相應(yīng)增大，且增長快速(表2)。

2.3不同溫度對水稻干尖線蟲繁殖的影響

溫度對水稻干尖線蟲繁殖有較大的影響。15～25℃之間，隨溫度的增高，繁殖倍數(shù)相應(yīng)增大；25℃時，達最大；超過25℃，則逐漸減小(表3)。

3、結(jié)論與討論

研究結(jié)果表明，鏈格孢菌和鐮刀菌培養(yǎng)水稻干尖線蟲的效果明顯優(yōu)于常用的灰葡萄孢菌，且鐮刀菌的效果最好。因此，作者認為前兩者可選用于培養(yǎng)水稻干尖線蟲。

不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間對水稻干尖線蟲的繁殖均有一定的影響，從試驗結(jié)果可以看出，培養(yǎng)水稻干尖線蟲的最適條件為25℃，20 d。此結(jié)論也為研究和防治水稻干尖線蟲病提供一定的理論依據(jù)。

本研究供試的兩種真菌——鏈格孢菌和鐮刀菌，均從水稻種子上分離獲得，并且培養(yǎng)水稻干尖線蟲的效果十分顯著。由此推斷，真菌與水稻干尖線蟲的生長和繁殖有一定的相關(guān)性。真菌在水稻干尖線蟲病發(fā)生發(fā)展過程中的作用不可忽視且有必要作深入的探討。