[摘要]目的:探討脂質(zhì)體介導血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCS)應用于基因治療的可行性、安全性。方法:體外分離、培養(yǎng)、鑒定MSCs,PcDNA3.1(-)/VEGF165質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MSCs,轉(zhuǎn)染后用免疫熒光和ELISA檢測MSCs表達VEGF蛋白的情況,MTT檢測Mscs對VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的敏感性。 結(jié)果:骨髓中分離得到MSCs,流式細胞檢測顯示MSCs不表達CD34和CD45,但表達CD90。透射電鏡觀察可見細胞漿中含大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和分泌顆粒。VEGF基因轉(zhuǎn)染MSCs后第5天抗VEGF免疫熒光染色約90%的MSCs呈陽性,ELISA檢測結(jié)果顯示PcDNA3.1(-)/VEGFl65質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組細胞培養(yǎng)上清液中VEGF含量明顯高于對照組,并于轉(zhuǎn)染后第5天達到峰值。MTT檢測結(jié)果顯示VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對Mscs增殖無影響。 結(jié)論:MSC可作為VEGF基因轉(zhuǎn)染的靶細胞用于基因治療。
[關(guān)鍵詞]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞;血管內(nèi)皮細胞生長因子;基因治療
[中圖分類號]Q813.1 [文獻標識碼]A [文章編號]1008—6455(2006)09—998—03