Evaluation of the Relationship Between Changes in Vascular Endothelial Inflammatory Phenotype and Endothelial Function in Hypertension Based on Aortic Histopathology and Circulating Biomarkers

ZHANG Jianning1，XIAN Wanyong2，ZHANG Xiaoyu1，TAO Jun1，XIA Wenhao1 （1.DeparmentofHypertesionandVascularDiseaseheirstAfliated HospitalofSunYat-sen UniersityGuangzhou000， Guangdong，China；2.The Fourth People's Hospital of Foshan Nanhai District，F(xiàn)oshan ，Guangdong，China）

【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheasociationsofmacrophageinflammatorymarkersandendothelialfunctioninhypertensive patients.MetosUsingoticsufromhertesivepatintsdertesieouseoelsmufuorescetogsudto detectheexpresiofacopgesdiflamatorctodslarngeperintseredctedtvaatedolistolic function.96patitsdagosdwithhpertesatTeFstAfliatedHospitalofSunYatsnUniversityfroctoerOtDber 2022wereeolldnerlalracteristsecodpresivelsof8torctosiame usingliquid-phasesuspensionchiptechnology，andtheendothelialfuctionofthebrachialarterywasevaluatedusingflo-diated vasodiltio（FTorlaiotnifmaoyakrsdasexplodoSpeaancorelaonoeffcitels ComparedwiththeealthontrolgoupertensivepatintssowdarichmentofD68acrophgesinorticisuedaese in the expression levels of tumor necrosis factor-a（TNF-a）and interleukin-8（IL-8）（ Plt;0.01） .The aortic endothelial relaxation function of hypertensive mice wasimpaired，thenumberof macrophagesincreased，andtheexpressionof TNF-awasupregulated（ Plt;0 . 001）. The bivariatepeancoeottniftoactosiepalblodohypersieptssgedatteas significant correlation between inflammatory factors （ Plt;0. 01 ）.In the uncorrected model，F(xiàn)MD was significantly negatively correlated with TNF- ∝（r=-0.252，P=0.013） and IL-8 （ r=-0.330，Plt;0.01） . After adjusting for age，sex，systolic blood pressure，diabetes and smoking， FMD still had a significant negative correlation with IL-8 r=-0.301，P=0.018） .ConclusionElevated levels of IL-8 expression in plasma and enriched macrophages in the aorta of hypertensive patients are associated with endothelial dysfunction.

在全球范圍內(nèi)，高血壓的流行趨勢(shì)愈發(fā)嚴(yán)峻，給各國(guó)公共衛(wèi)生帶來沉重負(fù)擔(dān)和巨大挑戰(zhàn)[1-2]。高血壓在中國(guó)的患病率持續(xù)上升[3]，作為動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的主要危險(xiǎn)因素，對(duì)居民健康造成嚴(yán)重威脅，已成為中國(guó)動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病相關(guān)死亡的重要原因。血管內(nèi)皮損傷是高血壓發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)和關(guān)鍵環(huán)節(jié)[4-5]，通過血管內(nèi)皮功能的臨床檢測(cè)，有助于早期評(píng)估高血壓患者的血管風(fēng)險(xiǎn)和長(zhǎng)期預(yù)后[。目前臨床上，肱動(dòng)脈血流介導(dǎo)的血管內(nèi)皮舒張功能（flow-mediateddilation，F(xiàn)MD）檢查常應(yīng)用于無創(chuàng)監(jiān)測(cè)血管內(nèi)皮功能[7]。由慢性炎癥反應(yīng)引起的血管穩(wěn)態(tài)失衡是高血壓血管損傷的病理機(jī)制之一[8-10]。研究[]報(bào)道，主動(dòng)脈組織巨噬細(xì)胞與平滑肌細(xì)胞相互作用，參與調(diào)控血管通透性，維持主動(dòng)脈的完整性。臨床研究[12-I5]發(fā)現(xiàn)，循環(huán)炎癥標(biāo)志物與血管內(nèi)皮功能障礙存在較弱關(guān)聯(lián)，且在不同種族中存在分布差異。然而，目前尚無統(tǒng)一的研究結(jié)論，需進(jìn)一步探討高血壓患者中炎癥因子分布及其與血管內(nèi)皮功能的關(guān)系。本研究旨在通過檢測(cè)高血壓炎癥標(biāo)志物分布，觀察其與血管內(nèi)皮功能的關(guān)聯(lián)，以期發(fā)現(xiàn)高血壓相關(guān)血管病的潛在機(jī)制，在臨床實(shí)踐中提供改善患者預(yù)后的診治靶標(biāo)。

1資料與方法

1.1 主動(dòng)脈組織的獲取

高血壓組主動(dòng)脈組織樣品自高血壓腦出血供體獲取[收縮壓 gt;180mmHg（1mmHg=0.133kPa）] ，對(duì)照組主動(dòng)脈組織樣品自遭受交通事故和頭部創(chuàng)傷的心臟/腎臟/肝臟供體獲取。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）主動(dòng)脈夾層；（2）遺傳性主動(dòng)脈疾病，如馬方綜合征；（3）糖尿病、腫瘤等疾病。根據(jù)中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)的人類研究方案（倫審［2021]160號(hào)）進(jìn)行樣品采集，并獲取器官捐獻(xiàn)者法定代理人的書面知情同意書。本研究選用從移植手術(shù)中獲取的人降主動(dòng)脈組織，分別使用高血壓組樣品3例和對(duì)照組正常血壓樣品3例。兩組供體性別和年齡（ ±5 歲）匹配。每個(gè)樣品分離一片 1～2cm² 主動(dòng)脈組織后，液氮保存用于后續(xù)炎癥標(biāo)志物的測(cè)定。

1.2高血壓小鼠模型的構(gòu)建

選取 C57BL/6J 雄性小鼠（8～10周齡），隨機(jī)分入生理鹽水組和高血壓組。小鼠麻醉后，利用背部皮膚植入注射生理鹽水或血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngII）（Sigma-Aldrich，每天 0.8mg/kg ）滲透泵（AlzetMINI-OSMOTICPUMP），持續(xù)4周，構(gòu)建高血壓小鼠模型。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫審動(dòng)[2023]098號(hào)）。

1.3研究人群和臨床資料

研究設(shè)計(jì)為橫斷面研究，納入2020年10月—2022年12月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的高血壓患者96例。本研究遵循《赫爾辛基宣言》制定的相關(guān)原則，經(jīng)中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)通過（倫審[2019]345號(hào)），受試者均對(duì)試驗(yàn)知情并簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡 ?18 歲，性別不限；（2）符合《中國(guó)高血壓防治指南（2018年修訂版）》[6診斷標(biāo)準(zhǔn)；（3）接受FMD檢查；（4）血漿樣品分裝保存于-80^°C 冰箱。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并嚴(yán)重感染或風(fēng)濕免疫疾?。唬?）合并其他嚴(yán)重心腦血管疾病，如急性心肌梗死、心力衰竭、腦卒中等；（3）繼發(fā)性高血壓，包括腎實(shí)質(zhì)性高血壓、腎血管性高血壓、原發(fā)性醛固酮增多癥、庫(kù)欣綜合征等；（4）正在使用非甾體抗炎藥、類固醇或血管活性藥物；（5）孕婦或預(yù)期懷孕或哺乳期婦女。

記錄入組受試者的臨床資料，包括患者性別、年齡、體重指數(shù)、收縮壓、舒張壓、糖尿病病史、吸煙史。

1.4 指標(biāo)檢測(cè)

1.4.1主動(dòng)脈組織炎癥因子表達(dá)檢測(cè)

收集人或小鼠主動(dòng)脈組織，制備成冰凍切片，將切片在 4% 多聚甲醛中固定 30min ，用磷酸鹽緩沖液沖洗，然后在經(jīng)緩沖處理的正常山羊血清中室溫孵育1h，以防抗體非特異性結(jié)合。切片分別與抗CD68（稀釋比例 1：100 ，Abcam，英國(guó)）、抗腫瘤壞死因子a（tumornecrosisfactor-a，TNF-a）（稀釋比例 1：5 000 ，Abcam，英國(guó)）抗白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-8（稀釋比例 1：100 ，Abcam，英國(guó)）一抗孵育過夜，隨后分別與山羊抗兔IgGHamp;L（AlexaFluor@568）（稀釋比例1：1000，Abcam，英國(guó)）、山羊抗兔 IgG Hamp;L（Alexa Fluor？647）（稀釋比例 1：1 000 ，Abcam，英國(guó)）、山羊抗兔IgGHamp;L（Alexa Fluor@488）（稀釋比例 1：1 000 ，Abcam，英國(guó)）標(biāo)記的二抗孵育，并用4’，6二胱基-2-苯基吲哚（4’，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）（Invitrogen，美國(guó)）復(fù)染細(xì)胞核。完成染色后，使用激光共聚焦顯微鏡（CarlZeiss，德國(guó)）成像，由ImageJ軟件進(jìn)行后續(xù)分析。

1.4.2 小鼠尾動(dòng)脈血壓監(jiān)測(cè)

應(yīng)用無創(chuàng)尾袖體積描記儀（SoftronBP-2010A血壓監(jiān)測(cè)系統(tǒng)）監(jiān)測(cè)小鼠尾動(dòng)脈血壓，具體操作步驟為：維持環(huán)境溫度適宜且恒定，固定小鼠，用乙醇擦拭裸露鼠尾后，將加壓尾套放置鼠尾根部，于安靜狀態(tài)下，監(jiān)測(cè)對(duì)照組和高血壓組小鼠尾動(dòng)脈血壓數(shù)值，每只小鼠取3次測(cè)量的平均值并記錄。

1.4.3 小鼠血管環(huán)實(shí)驗(yàn)

利用Wire Myograph System 620M（DMT620M）進(jìn)行血管環(huán)實(shí)驗(yàn)。完成力校準(zhǔn)后，將小鼠用過量麻醉劑深度麻醉，迅速打開胸腔，小心分離出胸主動(dòng)脈段，切成長(zhǎng)度約為 2mm 的血管環(huán)。小心、迅速地將主動(dòng)脈環(huán)懸掛于兩根不銹鋼掛鉤上，一根掛鉤固定在浴槽底部，另一根掛鉤連接力傳感器，置入 37^°C 恒溫Krebs液的浴槽中。平衡 40min 后，分別加入 1μmol/L 的去氧腎上腺素和 30μmol/L 的乙酰膽堿，觀察并記錄血管環(huán)張力的變化。洗滌并重新平衡 40min 后，通過增加乙酰膽堿劑量，獲得濃度依賴性血管環(huán)張力變化曲線。數(shù)據(jù)分析由PanLab系統(tǒng)進(jìn)行。

1.4.4高血壓患者血漿炎癥標(biāo)志物檢測(cè)

采用液相懸浮芯片技術(shù)（LuminexX-200，美國(guó)），通過選擇構(gòu)建TNF- σ?a （可檢測(cè)范圍 0.53～9648pg/ mL）、IL-6（可檢測(cè)范圍 0.30～4669pg/mL ）、IL-8（可檢測(cè)范圍 ）、CXC趨化因子配體10[chemokine（C-X-C motif）ligand10，CXCL10]（可檢測(cè)范圍 0. 13～1 790pg/mL ） ?γ 干擾素（interferon- ?γ ，IFN-γ （可檢測(cè)范圍 2.88～85101pg/mL 、IL-17（可檢測(cè)范圍 ）、細(xì)胞間黏附分子（intercellularadhesionmolecule-1，ICAM-1）（可檢測(cè)范圍 594.50～5792607pg/mL ）、CXC趨化因子配體11[chemokine（C-X-C motif）ligand11，CXCL11]（可檢測(cè)范圍 4.00～11826pg/mL ）抗體分子編碼微球試劑盒（Ramp;D公司，美國(guó)），檢測(cè)96例高血壓患者血漿樣品中各炎癥因子的表達(dá)情況。嚴(yán)格按照試劑盒說明書提供的操作步驟進(jìn)行檢測(cè)，每批實(shí)驗(yàn)設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)孔位，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品重復(fù)檢測(cè)孔位。通過計(jì)算重復(fù)樣本檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)來評(píng)估實(shí)驗(yàn)的精密度，保證變異系數(shù) lt;10% 。

1.4.5 高血壓患者血管內(nèi)皮功能檢測(cè)

采用FMD評(píng)價(jià)高血壓患者血管內(nèi)皮舒張功能。

根據(jù)美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)測(cè)量指南[17]，F(xiàn)MD通過高分辨率血管超聲成像設(shè)備（UNEXEF18G）檢測(cè)，參考既往研究的測(cè)量方法[18]，設(shè)備利用高分辨率的傳感器對(duì)肘窩上 5～10cm 處的肱動(dòng)脈進(jìn)行縱向可視化觀察，通過關(guān)聯(lián)的智能分析軟件對(duì)血管內(nèi)徑自動(dòng)成像。在獲取基礎(chǔ)圖像 30s 后，利用合適的上臂袖帶，通過袖帶充氣施加大于收縮壓 50mmHg 的壓力 5min ，以實(shí)現(xiàn)肱動(dòng)脈的局部血流阻斷。此間，肱動(dòng)脈的內(nèi)徑和二維圖像被持續(xù)性記錄，直到阻斷壓力釋放后 1min 。FMD百分比被用于血管功能分析，其具體計(jì)算公式為：FMD（%）= （反應(yīng)性充血后肱動(dòng)脈峰內(nèi)徑-基礎(chǔ)內(nèi)徑）/基礎(chǔ)內(nèi)徑。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

平均值和標(biāo)準(zhǔn)差、中位數(shù)和四分位間距分別用于正態(tài)/非正態(tài)分布的連續(xù)性變量的統(tǒng)計(jì)描述；百分?jǐn)?shù)用以計(jì)算和描述分類資料。根據(jù)資料類型，采用 χ_t 檢驗(yàn)、Wilcoxon秩和檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)方法分別推斷組間差異。由于FMD和炎癥因子分布呈偏態(tài)分布，采用Spearman相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)各炎癥因子和FMD的相關(guān)關(guān)系，同時(shí)評(píng)估校正年齡、性別、收縮壓、糖尿病、目前是否吸煙的Spearman偏相關(guān)系數(shù)。雙側(cè) Plt;0.05 定義為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有的統(tǒng)計(jì)分析由SPSS25.0軟件執(zhí)行，圖表制作由GraphpadPrism9.0軟件執(zhí)行。

2結(jié)果

2.1健康對(duì)照組和高血壓患者組主動(dòng)脈組織炎癥因子表達(dá)

在高血壓患者組和健康對(duì)照組的主動(dòng)脈中，使用巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)志物CD68進(jìn)行了免疫熒光檢測(cè)，數(shù)據(jù)表明，與健康對(duì)照組相比，高血壓狀態(tài)下 CD68⁺ 的巨噬細(xì)胞數(shù)量更為豐富（ t=9.875，Plt;0.001 。同時(shí)，與健康對(duì)照組相比，高血壓患者主動(dòng)脈組織TNF-a（ t= 10.35， Plt;0.001 ）、IL-8（ t=7.352 Plt;0.01 ）表達(dá)水平升高。見圖1。

圖1健康對(duì)照組和高血壓患者主動(dòng)脈組織炎癥標(biāo)志物的比較

注：免疫熒光檢測(cè)TNF- ??a 、IL-8和CD68表達(dá)水平。比例尺為 200μm 1 ^** 表示與對(duì)照組相比， Plt;0. 01，n=3 ?=??? 表示與對(duì)照組相比， Plt;0.001，n=3

2.2高血壓小鼠血壓、血管內(nèi)皮功能和炎癥因子表達(dá)

如圖2A、2B所示，高血壓小鼠血壓顯著高于生理鹽水對(duì)照組 （n=10，t_?garge=41.56，t_?garge=29.33，Plt; 0.001）。血管環(huán)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高血壓小鼠內(nèi)皮舒張功能明顯低于對(duì)照組 （n=10，Plt;0.001） ），見圖2C。免疫熒光檢測(cè)發(fā)現(xiàn)高血壓小鼠主動(dòng)脈 CD68⁺ 巨噬細(xì)胞富集 Ω_{n=4，t=13.68，Plt;0.001} 及TNF- σ?a 表達(dá)水平升高 ，見圖 2D 。

注：A和B為各組收縮壓、舒張壓水平；C為血管環(huán)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的各組內(nèi)皮舒張功能結(jié)果;D為免疫熒光檢測(cè)的TNF- σ_?a 和CD68表達(dá)水平。Saline為生理鹽水組， Ang Ⅱ?yàn)楦哐獕盒∈蠼M。比例尺為 50μm_? 。***表示與生理鹽水組相比， Plt;0.001 。

圖2AngI誘導(dǎo)的高血壓小鼠血壓、血管內(nèi)皮功能和炎癥因子表達(dá)

2.3高血壓患者臨床資料、血漿炎癥因子水平和血管內(nèi)皮功能

本研究共納入接受FMD 測(cè)量的96例高血壓患者，年齡為（ 48.60±13.19. 歲， 42.71% 為女性。女性的FMD中位數(shù)（四分位間距）為 4.7%（2.8%） ，男性為 4.9%（2.7%） 。血漿炎癥因子和血管內(nèi)皮功能的統(tǒng)計(jì)資料見表1。對(duì)FMD和受試者臨床特征行雙變量間Spearman相關(guān)分析，未發(fā)現(xiàn)FMD與年齡、體重指數(shù)、收縮壓間具有顯著相關(guān)關(guān)系（ Pgt;0.05 ）。8項(xiàng)炎癥因子間雙變量Spearman相關(guān)系數(shù)結(jié)果顯示，變量間普遍存在顯著相關(guān)（ Plt;0.01 ），其中TNF-a 與IL-6、IL-8、IFN- γ，IL-17 ICAM-1、CXCL11均呈正相關(guān)（相關(guān)系數(shù)r 分別為0.355、0.304、0.655、0.420、0.683、0.282）。

表1血漿炎癥因子和血管內(nèi)皮功能特征

2.4高血壓患者炎癥因子與血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性分析

上述炎癥因子分別與FMD 行雙變量間Spearman相關(guān)分析（表2），發(fā)現(xiàn)FMD與TNF- a（r=-0.252，P= 0.013）IL-8（ r=-0. 330 ， Plt;0. 01 ）、CXCL10（ r= -0.219，P=0. 0 32）呈顯著負(fù)相關(guān);而FMD與IL-6、IFN- ?γ IL-17、ICAM-1、CXCL11間相關(guān)系數(shù)無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Pgt;0.05 ）。同時(shí)，在校正年齡、性別的多因素分析中，F(xiàn)MD與TNF a（r=-0.242，P=0.019 ）、IL-8中 r=-0.326，Plt;0.01 ）、CXCL10 ）（r=-0.217，P=0.036 ）存在顯著負(fù)相關(guān)。當(dāng)校正年齡、性別、收縮壓、糖尿病、目前是否吸煙后，F(xiàn)MD與IL-8（ r=-0. 301 ， P= 0.018）的負(fù)相關(guān)關(guān)系，仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2血漿炎癥因子與血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性分析

注：多因素模型1校正了年齡、性別;多因素模型2校正了年齡、性別、收縮壓、糖尿病、目前是否吸煙。

3討論

高血壓是發(fā)病機(jī)制復(fù)雜的常見疾病，由多種因素造成血壓升高并累及靶器官功能，其中血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能的完整性喪失是高血壓及其相關(guān)心血管疾病發(fā)生發(fā)展的共同通路和關(guān)鍵環(huán)節(jié)[19-20]。免疫炎癥反應(yīng)參與調(diào)控高血壓血管損傷[2I-22]，由慢性炎癥導(dǎo)致促炎/抗炎穩(wěn)態(tài)失衡是高血壓血管損傷的主要病理生理機(jī)制之一。

巨噬細(xì)胞由造血干細(xì)胞衍生的單核細(xì)胞在血液循環(huán)中遷移及分化而來，是一種重要的固有免疫系統(tǒng)效應(yīng)細(xì)胞，并對(duì)適應(yīng)性免疫起著重要的調(diào)節(jié)作用。巨噬細(xì)胞在特定的組織中定居并長(zhǎng)期存在，具有組織特異性，通常處于相對(duì)靜止但持續(xù)監(jiān)視的狀態(tài)，對(duì)維持組織穩(wěn)態(tài)發(fā)揮關(guān)鍵作用[23]。在炎癥干擾下，單核細(xì)胞分化會(huì)趨于促炎、促修復(fù)表型，稱為炎癥相關(guān)的巨噬細(xì)胞。本研究觀察到高血壓腦出血患者主動(dòng)脈組織中炎癥相關(guān)的巨噬細(xì)胞富集，且TNF-a和IL-8炎癥因子表達(dá)增加；高血壓小鼠內(nèi)皮舒張功能減低，炎癥相關(guān)的巨噬細(xì)胞數(shù)量增多。這些結(jié)果提示巨噬細(xì)胞在參與高血壓血管損傷過程中發(fā)揮重要作用。既往研究[24-25]發(fā)現(xiàn)，促炎細(xì)胞因子TNF- ??a_λIL-8 趨化和募集巨噬細(xì)胞，并激活巨噬細(xì)胞吞噬、分泌功能，促進(jìn)巨噬細(xì)胞向具有促炎作用的M1型極化。同時(shí)，巨噬細(xì)胞釋放炎癥因子（如TNF-a、IL-8），可能通過顯著調(diào)控PI3K/Akt和核因子 κB 信號(hào)通路的激活，調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性和黏附分子、趨化因子表達(dá)，促進(jìn)炎癥細(xì)胞聚集和活化，進(jìn)一步放大炎癥信號(hào)，加重血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷[26-27]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[28]證實(shí)，抑制巨噬細(xì)胞M1型極化可改善小鼠下肢缺血模型血管新生現(xiàn)象。

通過檢測(cè)高血壓患者外周血循環(huán)中炎癥標(biāo)志物，本研究觀察到血漿中IL-8炎癥因子水平與肽動(dòng)脈FMD呈顯著負(fù)相關(guān)，表明IL-8在高血壓血管內(nèi)皮損傷中具有重要作用。同時(shí)，血漿中TNF- ?a，CXCL10 炎癥因子水平也與FMD存在較弱關(guān)聯(lián)。然而，在本研究人群中，其他炎癥標(biāo)志物，包括IL-6、 IFN-γ 、IL-17、ICAM-1、CXCL11，均未發(fā)現(xiàn)其與FMD的關(guān)聯(lián)。外周血循環(huán)中炎癥因子與FMD間的較弱或不顯著的關(guān)聯(lián)，與既往相關(guān)研究結(jié)果一致[12-13]。最近的研究[29]表明，高血壓血管內(nèi)皮功能正常者與血管內(nèi)皮功能障礙者相比較，其組間血漿炎癥因子 TNF-a，IL-6，IFN-γ 表達(dá)水平存在差異。因此，如何統(tǒng)一炎癥因子的標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法，并應(yīng)用于疾病臨床實(shí)踐，有待進(jìn)一步探討。既往研究報(bào)道與FMD水平相關(guān)的臨床特征，可能包括低密度脂蛋白膽固醇、腰圍、降壓藥物治療等，但需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量以排除這些混雜因素對(duì)研究結(jié)果的影響。

在臨床實(shí)踐中，靶向或影響炎癥因子表達(dá)的治療方法，可能使高血壓血管內(nèi)皮功能障礙者獲益。有文獻(xiàn)[29]報(bào)道，經(jīng)阿托伐他汀藥物治療后，炎癥因子IL-6水平下降，而血管內(nèi)皮舒張功能得以改善，歸因于他汀類藥物除降低血脂外的多效性作用。另有研究[30]報(bào)道，經(jīng)過8周和12周喹那普利治療的心肌梗死后合并左心室收縮功能障礙患者，其血漿TNF- ??a，C 反應(yīng)蛋白水平顯著下降，F(xiàn)MD 水平顯著升高。近期研究[31]發(fā)現(xiàn)，服用富含多酚類物質(zhì)的食物刺檗8周后，高血壓患者的血漿ICAM-1水平下降，F(xiàn)MD改善。CANTOS研究[32]提示，既往患有心肌梗死且高敏C反應(yīng)蛋白≥2mg/L 的受試者，使用IL- 1β 單克隆抗體卡那單抗治療，經(jīng)過中位隨訪時(shí)間（3.7年）后，患者高敏C反應(yīng)蛋白水平下降，并顯著減少心血管事件的發(fā)生。

本研究的主要局限性：（1）患者主動(dòng)脈組織取自高血壓腦出血患者，盡管這些患者與常規(guī)高血壓患者在血管病理特征上可能存在一定差異，但二者均以高血壓為基礎(chǔ)病理過程，本研究結(jié)果在一定程度上反映了高血壓疾病進(jìn)展的演變規(guī)律。未來將進(jìn)一步分析不同階段高血壓患者的血管病理變化與炎癥標(biāo)志物的關(guān)系，以便更全面地揭示高血壓及其并發(fā)癥的病理機(jī)制。（2）尚未深入探討高血壓患者血管壁巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥因子釋放的下游分子機(jī)制。該研究為橫斷面研究，無法推斷炎癥標(biāo)志物與血管內(nèi)皮功能間的因果聯(lián)系。（3）炎癥對(duì)高血壓血管內(nèi)皮損傷的預(yù)后影響仍需通過長(zhǎng)期大樣本人群觀察驗(yàn)證，進(jìn)一步多中心隊(duì)列驗(yàn)證研究是必要的。

綜上所述，巨噬細(xì)胞富集與高血壓血管損傷相關(guān)，炎癥因子IL-8與高血壓血管內(nèi)皮舒張功能損傷相關(guān)，可能通過巨噬細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞相互作用在高血壓疾病進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。本研究在分層研究和隨訪監(jiān)測(cè)心腦血管事件“硬終點(diǎn)”方面存在不足，有待進(jìn)一步擴(kuò)大研究，針對(duì)高血壓患者的患病時(shí)程、血壓達(dá)標(biāo)情況、抗高血壓藥使用等進(jìn)行分層、分類精準(zhǔn)評(píng)估，并闡明其分子機(jī)制，以期改進(jìn)高血壓相關(guān)血管病臨床診治策略。

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