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        氣生培養(yǎng)誘導(dǎo)刺五加微體生根技術(shù)研究

        2025-08-18 00:00:00田新華邱新宇王福德
        林業(yè)科技 2025年4期
        關(guān)鍵詞:試管生根苗木

        圖分類號(hào):S567.19 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-9499(2025)04-0020-02

        Study on Microsomal Rooting in Gas Method of Plantlet Cultured of Acanthopanax senticosus

        TIAN Xinhua QIU XinyuWANG Fude** (Heilongjiang Forestry Institute,HeilongjiangHarbin150081)

        AbstractThe sugarcane of excellent single plants of Acanthopanax senticosus were used as materials to induce rooting of sugarcane by a combination of the method rooting in gas and hormone treatment. Experimental results:Seedlings induced by 1/2MS+NAA 0.5mg/L+IBA 1.0mg/L+ boricacid 20mg/L medium had thick root system,large root volume and high rooting rate.

        Key wordsAcanthopanax senticosus;culture in gas;rooting

        刺五加(Acanthopanaxsenticosus)為五加科,多年生落葉灌木,主要分布在小興安嶺、吉林長(zhǎng)白山區(qū)、華北、河南及陜西北部,朝鮮、日本及俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)[1]。性耐陰,喜濕潤(rùn)和較肥沃的土壤。刺五加的根皮可入藥,具有調(diào)節(jié)神經(jīng)、補(bǔ)腎安神、益氣健脾、抗腫瘤、改善血壓及心腦血管疾病等功效[2-3]。刺五加體內(nèi)含有皂苷、黃酮、揮發(fā)油等特殊成分,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值非常高[4-6]。種子可榨油;嫩芽可作蔬菜、茶葉。

        近年來,人們對(duì)于刺五加及其產(chǎn)品的需求與日俱增。2023年,刺五加根皮干品價(jià)格已達(dá)到7000元 μ 苗木供求矛盾日益突出。然而,刺五加種子存在后熟現(xiàn)象[7-9],經(jīng)處理后萌發(fā)率仍低于 30%[10-11] ,扦插生根率也不高,組織培養(yǎng)過程中存在植株生長(zhǎng)速度慢、生根困難等問題,組織培養(yǎng)體系尚不成熟,嚴(yán)重制約了刺五加良種產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程[12]。因此,本試驗(yàn)針對(duì)刺五加優(yōu)良單株的無(wú)性系展開研究,采用氣生培養(yǎng)與植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑相結(jié)合的方法,誘導(dǎo)刺五加試管苗生根,篩選適宜的生根培養(yǎng)基配方,旨在解決微體生根瓶頸問題,建立完善的組織培養(yǎng)體系,從而推動(dòng)良種產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。

        1試驗(yàn)材料與方法

        以伊春市金山屯林場(chǎng)的刺五加優(yōu)良單株無(wú)菌

        試管苗為試材。

        1.1刺五加健壯基礎(chǔ)苗培養(yǎng)

        在無(wú)菌環(huán)境的超凈工作臺(tái)上,將分化苗分割為單株,接種于 MS+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA 0.5mg/L+30g/L 蔗糖 + 瓊脂粉 6g/L+ 椰子水 50g/L 培養(yǎng)基, pH 調(diào)至 5.8~6.0 。

        1.2氣生培養(yǎng)誘導(dǎo)試管苗生根

        在生根培養(yǎng)基配制滅菌1d后,在超凈工作臺(tái)上修剪試管壯苗的基部,將植株及部分葉片以30° 角斜嵌于培養(yǎng)基表層,苗木基部部分暴露于空氣中。由于苗木上部營(yíng)養(yǎng)器官具有向上生長(zhǎng)特性,根系具有向下生長(zhǎng)特性,所以一旦誘導(dǎo)出氣生根,它就向下生長(zhǎng)扎入培養(yǎng)基中吸收營(yíng)養(yǎng),供應(yīng)苗木上部器官生長(zhǎng),糾正試管苗傾斜狀態(tài),恢復(fù)苗木正常生長(zhǎng)狀態(tài)。

        1.3誘導(dǎo)刺五加生根培養(yǎng)基的篩選

        將培養(yǎng)的試管壯苗利用氣生培養(yǎng)方法接種于基本培養(yǎng)基為1/2MS,添加不同激素及濃度的培養(yǎng)基中培養(yǎng)(表1),培養(yǎng)基中添加蔗糖 15g/L ,日產(chǎn)瓊脂粉 6g/L ,硼酸 20mg/L,pH 調(diào)至 5.8~6.0 。按照單因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行試管苗生根培養(yǎng)基的篩選。每個(gè)處理接種8瓶,重復(fù)2次。培養(yǎng) 30d 后,再同號(hào)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接一次,培養(yǎng) 60d 調(diào)查苗木的生根狀況。

        表1誘導(dǎo)刺五加試管苗生根培養(yǎng)基

        1.4培養(yǎng)條件

        壯苗培養(yǎng):光照培養(yǎng)箱中全光培養(yǎng),光照強(qiáng)度3000Lux ,溫度控制在 (23±2)°C ,光照時(shí)長(zhǎng) 12h/d

        生根培養(yǎng):先將培養(yǎng)瓶置于暗培箱中 1W ,然后轉(zhuǎn)入正常光培養(yǎng),溫度控制在 (25±1)°C ,光照強(qiáng)度 2000Lux ,光照時(shí)長(zhǎng) 12h/d 。

        1. 5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)

        采用MicrosoftExcel2013的統(tǒng)計(jì)工具進(jìn)行計(jì)算,DPS19.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和差異顯著性測(cè)驗(yàn)(Tukey法)[13]。

        2 結(jié)果與分析

        首先將接種后的瓶苗放置于暗培養(yǎng)室中進(jìn)行暗處理1W,然后轉(zhuǎn)移到光下培養(yǎng)。培養(yǎng)15d左右在切口處有白色愈傷組織球產(chǎn)生,培養(yǎng)22d左右有白色根芽產(chǎn)生,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)不同培養(yǎng)基生根狀況不同。生根培養(yǎng)30d,相同培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接一次,將培養(yǎng)60d后生根狀況進(jìn)行方差分析(表2)表明,各性狀的處理間差異顯著。經(jīng)Tukey法多重比較(表3)顯示,經(jīng)處理Ⅲ培養(yǎng)的試管苗生根數(shù)量較多,生根率最高,并且與其他處理差異顯著。結(jié)合表型觀察,處理Ⅱ和處理V培養(yǎng)的試管苗生根細(xì)長(zhǎng)、柔軟,分支少或無(wú)分支,顏色青綠,生根率不高。處理Ⅲ培養(yǎng)的試管苗生根數(shù)量多、根系粗壯、色白、多分支、生根率較高。由此可見,誘導(dǎo)刺五加試管苗生根的激素有NAA與IBA,但NAA的誘導(dǎo)效果更好。但從處理V的生根情況來看,培養(yǎng)基中的NAA含量不易過高,否則易形成愈傷組織塊影響根系質(zhì)量。結(jié)合上述試驗(yàn)結(jié)果,選擇 1/2MS+NAA 0.5mg/L+IBA1.0mg/L+ 硼酸 20mg/L 為刺五加試管苗的生根培養(yǎng)基。

        表2試管苗根系生長(zhǎng)狀況方差分析
        注 :plt;0.05 水平為差異顯著, ,plt;0.01 水平為差異極顯著

        平均生根數(shù) Σ=Σ 生根總數(shù)/已生根苗數(shù);平均生根率 Σ=Σ 已生根苗數(shù)/苗木總數(shù)

        表3不同處理試管苗生根狀況多重比較

        3結(jié)論與討論

        3.1植物組織培養(yǎng)可以不受季節(jié)限制,全年不間斷的培養(yǎng)遺傳基礎(chǔ)完全一致的優(yōu)質(zhì)苗木。然而刺五加試管苗生根問題一直是阻礙新品種推廣應(yīng)用的瓶頸,本研究通過氣生培養(yǎng)和激素處理相結(jié)合的方法,有效地誘導(dǎo)試管苗生根,不同處理間差異顯著,其中 1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA1.0mg/L+ 酸 20mg/L 培養(yǎng)基誘導(dǎo)的苗木生根粗壯、色白、皮層生根、生根率較高。

        3.2刺五加試管苗生根需要較長(zhǎng)時(shí)間的前期積累,因此,需要將分化苗進(jìn)行一個(gè)周期的壯苗培養(yǎng),然后轉(zhuǎn)人生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根,才有利于根芽萌發(fā)。

        3.3相對(duì)正常生根培養(yǎng)而言,氣生誘導(dǎo)發(fā)根速度更快,根量大。氣生根形成后便扎入培養(yǎng)基中吸取營(yíng)養(yǎng)形成真正的根系,可以及時(shí)糾正植株的生長(zhǎng)狀態(tài),促進(jìn)植株上部組織生長(zhǎng)。

        參考文獻(xiàn)

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