摘""要：絲狀真菌中，菌絲需要將生長(zhǎng)相關(guān)的物質(zhì)不斷向菌絲的頂端分泌以完成極性生長(zhǎng)，已有研究表明胞泌復(fù)合體（exocyst"complex）在真菌分泌、極性生長(zhǎng)過程中發(fā)揮重要作用，但目前對(duì)于專性寄生真菌的菌絲生長(zhǎng)及致病機(jī)制的研究較少。巴西橡膠樹（Hevea"brasiliensis）是天然橡膠的主要來源，白粉病是為害巴西橡膠樹最嚴(yán)重的病害之一，其病原菌橡膠樹白粉菌（Erysiphe"quercicola）屬于專性寄生真菌。本研究在橡膠樹白粉菌中鑒定到了胞泌復(fù)合體亞基EqExo70，通過電擊轉(zhuǎn)化的方法在橡膠樹白粉菌中表達(dá)GFP標(biāo)記的EqExo70，表現(xiàn)出熒光在菌絲頂端聚集的現(xiàn)象，表明EqExo70可能與菌絲頂端極性生長(zhǎng)有關(guān)。通過將EqExo70的反向互補(bǔ)序列電擊轉(zhuǎn)化到橡膠樹白粉菌中進(jìn)行基因沉默，發(fā)現(xiàn)白粉菌的致病能力下降且菌絲生長(zhǎng)減慢，說明EqExo70影響橡膠樹白粉菌的致病力。接種沉默EqExo70基因的橡膠樹白粉菌的橡膠樹葉片，表現(xiàn)出胼胝質(zhì)沉積和活性氧爆發(fā)增強(qiáng)的現(xiàn)象，這表明EqExo70能夠抑制寄主的防衛(wèi)反應(yīng)。上述結(jié)果表明EqExo70是影響橡膠樹白粉菌致病的關(guān)鍵因子，并可能參與了橡膠樹白粉菌與橡膠樹的互作及菌絲的極性生長(zhǎng)。

關(guān)鍵詞：橡膠樹；白粉菌；胞泌復(fù)合體；Exo70蛋白亞基中圖分類號(hào)：S763.7""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

EqExo70"Subunit"of"Exocyst"Complex"Regulating"the"Growth"and"Pathogenicity"of"Erysiphe"quercicola

CHEN"Yalong1，"YIN"Jinyao1，2，"ZHU"Xuehuan1，2，"LYU"Yanyang1，2，"LIU"Wenbo1，2，"MIAO"Weiguo1，2*，"LI"Xiao1，2*

1."School"of"Tropical"Agriculture"and"Forestry，"Hainan"University"/"Key"Laboratory"of"Green"Prevention"and"Control"of"Tropical"Plant"Diseases"and"Pests，"Ministry"of"Education，"Haikou，"Hainan"570228，"China;"2."Danzhou"Invasive"Species"Observation"and"Research"Station"of"Hainan"Province，"Danzhou，"Hainan"571737，"China

Abstract："Hyphal"polarized"growth"in"filamentous"fungi"requires"tip-directed"secretion"of"growth-related"substances，"and"previous"studies"have"shown"that"exocyst"complex"plays"an"important"role"in"the"processes"of"fungal"secretion"and"polar"growth."However，"there"are"few"researches"on"the"hyphal"polarized"growth"and"pathogenic"mechanism"of"obligate"biotrophic"fungi"at"present."Rubber"tree"（Hevea"brasiliensis）"is"the"most"important"source"of"natural"rubber."Powdery"mildew"is"one"of"the"most"serious"diseases"of"H."brasiliensis，"and"its"pathogen"Erysiphe"quercicolanbsp;belongs"to"obligate"parasitic"fungi."In"this"study，"EqExo70，"a"subunit"of"the"exocyst"complex，"was"identified"in"E."quercicola."The"GFP"labeled"EqExo70"was"expressed"in"the"E."quercicola"by"electrotransformation"method，"and"it"was"found"that"the"protein"showed"fluorescence"aggregation"at"the"hyphal"tip，"suggesting"that"EqExo70"may"be"related"to"hyphal"polarized"growth."In"addition，"we"silenced"the"EqExo70"by"electroporating"the"reverse"complementary"sequence"of"EqExo70"into"the"E."quercicola，"it"was"found"that"the"pathogenic"ability"of"E."quercicola"decreased"and"the"growth"of"hypha"slowed"down，"suggesting"that"EqExo70"affects"the"pathogenicity"of"E."quercicola."The"level"of"callose"deposition"and"reactive"oxygen"species"burst"in"H."brasiliensis"significantly"increased"upon"infection"with"the"EqExo70-silenced"strain，"indicating"that"EqExo70"contributes"to"suppressing"host"immune"response."The"results"indicated"that"EqExo70"is"a"key"factor"affecting"pathogenicity"of"E."quercicola，"and"may"be"involved"in"the"interaction"with"H."brasiliensis，"as"well"as"the"hyphal"polarized"growth.

Keywords："rubber"tree;"powdery"mildew"fungus"（Erysiphe"quercicola）;"exocyst"complex;"Exo70"subunit"of"the"exocyst"complex

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2025.05.019

真核生物的胞泌復(fù)合體（exocyst"complex）控制蛋白的外泌（exocytosis）和細(xì)胞極性生長(zhǎng)（polarized"growth）。胞泌復(fù)合體主要由Exo70、Sec5和Sec6等8個(gè)蛋白亞基組成。在酵母中，胞泌復(fù)合體定位于出芽部位、子細(xì)胞的極性頂端及子細(xì)胞與母細(xì)胞連接處[1]。在絲狀真菌，如粗糙脈孢霉（Neurospora"crassa）、棉病囊菌（Ashbya"gossypii）、白色念珠菌（Candida"albicans）和米曲霉（Aspergillus"oryzae）中，胞泌復(fù)合體定位于菌絲尖端[2-6]，調(diào)節(jié)菌絲的頂端生長(zhǎng)。此外，胞泌復(fù)合體也與絲狀真菌的致病性有關(guān)。稻瘟病菌（Magnaporthe"Oryzae）中Sec5和Exo70基因的突變抑制了侵染結(jié)構(gòu)附著胞的形成并導(dǎo)致毒性蛋白/效應(yīng)蛋白（effectors）分泌缺陷，導(dǎo)致致病性下降[7]?；移咸焰呔˙otrytis"cinerea）中Exo70的缺失顯著影響了真菌的生長(zhǎng)、分生孢子和菌核的產(chǎn)生以及致病性，并且Sec5、Sec4基因突變菌株的生長(zhǎng)速率減慢，對(duì)番茄、蘋果和葡萄的侵染下降[8-9]。煙曲霉（Aspergillus"fumigatus）中的Sec4同源基因敲除后其致病能力降低[10]。但目前對(duì)于該復(fù)合體在專性寄生真菌的侵染以及克服寄主防衛(wèi)反應(yīng)的過程中發(fā)揮的作用知之甚少。

白粉菌是一類專性寄生真菌，侵染多種作物，如大麥、葡萄、橡膠樹等。橡膠樹白粉菌（Erysiphe"quercicola）侵染巴西橡膠樹（Hevea"brasiliensis）后會(huì)導(dǎo)致天然橡膠產(chǎn)量嚴(yán)重下降[11-12]。該白粉菌常侵染植物幼嫩組織，包括葉片和芽，并在受侵染的組織表面產(chǎn)生由菌絲和分生孢子組成的白粉菌菌落[13]。專性寄生真菌目前無法離體培養(yǎng)，因此，傳統(tǒng)的模式真菌基因操作方法無法適用[14-15]。目前已有研究報(bào)道，在瓜類白粉菌（Podosphaera"xanthii）和橡膠樹白粉菌（E."quercicola）中使用電擊轉(zhuǎn)化的方法[16-17]分別表達(dá)了綠色熒光蛋白GFP和效應(yīng)蛋白EqIsc1，并且這種電擊轉(zhuǎn)化方法可以實(shí)現(xiàn)靶基因的沉默。

本課題組前期已完成對(duì)橡膠樹白粉菌基因組的測(cè)序[18-19]，多基因組比對(duì)分析結(jié)果表明該菌碳水化合物代謝相關(guān)基因、植物細(xì)胞壁降解酶和效應(yīng)蛋白基因較少，推測(cè)該菌可能可以較好地克服寄主抗性[17]。因此，本研究擬利用電擊轉(zhuǎn)化的方法初步分析和探討橡膠樹白粉菌中EqExo70蛋白亞基在菌絲極性生長(zhǎng)和致病力等方面的生物功能，以期增加對(duì)白粉菌致病機(jī)制的了解，為控制白粉病找到更多的潛力靶點(diǎn)。

1""材料與方法

1.1""材料

1.1.1""植物材料及實(shí)驗(yàn)菌株""橡膠樹（Hevea"brasiliensis）品種：熱研7-33-97（嫁接苗）購(gòu)自中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院；橡膠樹白粉菌（Erisiphe"quercicola）（菌株HO-73）保存于海南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院分子植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室，采自海南省儋州市橡膠林，接種在橡膠樹熱研7-33-97（嫁接苗）上，培養(yǎng)溫度為22"℃，16"h光照/8"h黑暗周期，相對(duì)濕度為70%。大腸桿菌（DH5α）購(gòu)自天根生化科技有限公司。

1.1.2""載體以及培養(yǎng)基""pJNARG載體由熱帶農(nóng)林生物災(zāi)害綠色防控教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保存。LB培養(yǎng)基按常規(guī)方法配制[20-21]。

1.1.3""實(shí)驗(yàn)試劑""Taq"Pro"Universal"SYBR"qPCR"Master"Mix、RNA"isolater"Total"RNA"Extraction"Reagent、DNA純化試劑盒、2×ClonExpress"Mix、2×Phanta"Max"Master"Mix購(gòu)自南京諾唯贊生物科技股份有限公司；質(zhì)粒提取試劑盒購(gòu)自O(shè)mage公司；苯胺藍(lán)、3，3￠-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）購(gòu)自生工生物工程（上海）股份有限公司；其他試劑購(gòu)自TaKaRa公司及北京索萊寶科技有限公司。

1.2""方法

1.2.1""EqExo70的生物信息學(xué)分析""使用Bioedit軟件對(duì)橡膠樹基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，獲得酵母菌Exo70的同源基因EqExo70；使用MEGA軟件對(duì)11個(gè)同源蛋白進(jìn)行Clustal"W多序列比對(duì)并繪制進(jìn)化樹；使用MEME（https：//memesuite.org/meme/"tools/meme）在線軟件對(duì)11個(gè)蛋白進(jìn)行結(jié)構(gòu)域分析；使用NCBI的Conserved"Domain"Search"Service（CD"Search）（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/"Structure/cdd/wrpsb.cgi）分析EqExo70的保守結(jié)構(gòu)域。使用TB-tools軟件制圖[22]。

1.2.2""目的基因的克隆與載體構(gòu)建""通過Premier"5.0軟件設(shè)計(jì)基因擴(kuò)增引物EqExo70-F/R（表1），

擴(kuò)增EqExo70基因的完整序列。收集新鮮的橡膠樹白粉菌孢子，使用RNA提取試劑盒提取橡膠樹白粉菌的RNA，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。以橡膠樹白粉菌cDNA為模板，進(jìn)行目的片段的擴(kuò)增。在獲得目的片段之后，通過T4連接酶將片段構(gòu)建到pMD-18T載體中以便后續(xù)進(jìn)行基因擴(kuò)增。

1.2.3""EqExo70蛋白亞基在白粉菌絲中的定位""使用EcoRⅠ限制性內(nèi)切酶將pJNARG載體進(jìn)行單酶切，使用Cycle"Pure"Kit純化試劑盒（諾唯贊，DC301-1）進(jìn)行酶切載體的純化回收。擴(kuò)增EqExo70片段，通過同源重組構(gòu)建pJNARG-"EqExo70-GFP載體。提取含有pJNARG-EqExo70-"GFP載體的質(zhì)粒，使用Xcm"I限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切、回收。從白粉菌基因組中擴(kuò)增RP60啟動(dòng)子及Tub2抗性基因（攜帶多菌靈抗性），進(jìn)行融合PCR后回收，通過T4連接酶與回收的pJNARG-EqExo70-GFP載體16"℃過夜連接，獲得pJNARG-EqExo70-GFP-Tub2重組表達(dá)載體。收集白粉菌孢子懸浮液（濃度為1×106個(gè)/mL），將含有pJNARG-EqExo70-GFP-Tub2的質(zhì)粒通過電擊轉(zhuǎn)化的方法（1.70"kV，間隔5"s，電擊3次）轉(zhuǎn)入白粉菌孢子[17]，在橡膠樹古銅期葉片上接種白粉菌孢子懸浮液，24"℃環(huán)境下培養(yǎng)7"d，在接種的第2～7天內(nèi)，每天施用多菌靈（100"μg/mL）篩選轉(zhuǎn)化菌株，7"d后用顯微鏡觀察轉(zhuǎn)化子熒光分布情況。

1.2.4""EqExo70基因沉默對(duì)白粉菌致病力的影響測(cè)定""構(gòu)建pJNARG-EqExo70RNAi-GFP-Tub2重組表達(dá)載體，通過電擊轉(zhuǎn)化的方法轉(zhuǎn)入白粉菌孢子[17]（方法同1.2.3），接種在橡膠樹的古銅期葉片，進(jìn)行多菌靈藥劑篩選，接種7"d后觀察發(fā)病情況并使用ImageJ軟件對(duì)葉片上的病斑面積進(jìn)行計(jì)算，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行3次生物學(xué)重復(fù)。用RNA"isolater"Total"RNA"Extraction"Reagent試劑盒提取白粉菌的總RNA。以EqEF1a為內(nèi)參基因，采用SYBR"GreenⅠ熒光染料法進(jìn)行熒光定量PCR（quantitative"real-time"PCR，qRT-PCR）檢測(cè)。每個(gè)樣本進(jìn)行3次獨(dú)立重復(fù)。反應(yīng)完成后，使用2-ΔΔCt法分析EqExo70基因的相對(duì)表達(dá)水平。

1.2.5""苯胺藍(lán)染色""在橡膠樹古銅期葉片表面接種EqExo70沉默菌株（方法同1.2.4），同時(shí)施用多菌靈藥劑篩選，接種7"d后用乙醇乙酸脫色液（乙醇∶乙酸=3∶1）脫色，用0.1%的苯胺藍(lán)染色，30"min后使用顯微鏡觀察菌絲發(fā)育狀況以及吸器數(shù)量（統(tǒng)計(jì)每0.3"mm2的吸器數(shù)量）。

1.2.6""活性氧爆發(fā)和胼胝質(zhì)沉積測(cè)定""為探究EqExo70沉默后是否影響橡膠樹的防衛(wèi)反應(yīng)，將沉默EqExo70的白粉菌轉(zhuǎn)化子接種至橡膠樹古銅期葉片上，使用多菌靈（100"μg/mL）溶液進(jìn)行噴灑處理，7"d后使用3，3?-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）染色以及0.01%苯胺藍(lán)染色后檢測(cè)橡膠樹葉片活性氧爆發(fā)和胼胝質(zhì)沉積情況。

（1）活性氧爆發(fā)測(cè)定。將帶有白粉菌病斑的橡膠葉片剪下，置于培養(yǎng)皿中，加入20"mL"0.1%"3，3?-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）溶液中，用錫箔紙包裹并在搖床上過夜染色（振蕩混勻）。配制脫色液并將葉片放在燒杯中水浴脫色，顯微鏡觀察葉片活性氧爆發(fā)情況。

（2）胼胝質(zhì)沉積測(cè)定。接種橡膠樹白粉菌的橡膠葉片放入脫色液中室溫脫色3～4"h，隨后加入緩沖液（5%"K2HPO4），在室溫靜置0.5"h。使用0.01%苯胺藍(lán)溶液（0.01"g苯胺藍(lán)溶于100"mL"0.067"mol/L"K2HPO4）進(jìn)行避光染色4"h，使用熒光顯微鏡檢測(cè)胼胝質(zhì)沉積情況（統(tǒng)計(jì)每0.3"mm2的胼胝質(zhì)數(shù)量）。

2""結(jié)果與分析

2.1""Exo70生物信息學(xué)分析

使用Mega軟件進(jìn)行Clustal"W比對(duì)并繪制進(jìn)化樹發(fā)現(xiàn)，EqExo70與布氏白粉菌、葡萄白粉菌及甜瓜白粉菌的親緣關(guān)系較近，可能在遺傳上具有穩(wěn)定性和保守性。同時(shí)利用MEME在線軟件分析發(fā)現(xiàn)，EqExo70與除酵母菌Exo70外的10個(gè)Exo70蛋白均具有位置、大小相近的10個(gè)motif，可能在功能上具有相似性。同時(shí)使用NCBI的CD-Search工具分析發(fā)現(xiàn)，所有Exo70蛋白均具有典型的Exo70結(jié)構(gòu)域（圖1）。

2.2""EqExo70蛋白亞基定位在白粉菌菌絲尖端

為了觀察EqExo70蛋白亞基在白粉菌菌絲中的定位，構(gòu)建了pJNARG-EqExo70-GFP-Tub2熒光表達(dá)載體，通過電擊轉(zhuǎn)化的方法轉(zhuǎn)入白粉菌孢子，7"d后用熒光顯微鏡觀察其定位情況。結(jié)果顯示，EqExo70-GFP融合蛋白菌株熒光聚集在菌絲尖端，呈現(xiàn)頂端定位，而GFP菌株（對(duì)照）則均勻分布在白粉菌菌絲中，未表現(xiàn)頂端定位（圖2）。在絲狀真菌中，頂端極性的維持對(duì)菌絲的極性生長(zhǎng)至關(guān)重要，這表明EqExo70蛋白亞基可能在白粉菌菌絲的極性生長(zhǎng)中發(fā)揮作用。

2.3""電擊轉(zhuǎn)化沉默EqExo70導(dǎo)致橡膠樹白粉菌致病力下降

為了探究EqExo70是否影響橡膠樹白粉菌的致病能力，通過電擊轉(zhuǎn)化將EqExo70反向互補(bǔ)序列轉(zhuǎn)入橡膠樹白粉菌中，誘導(dǎo)靶基因沉默并測(cè)定菌株致病性。與對(duì)照（WT、GFP：表達(dá)GFP基因的轉(zhuǎn)化子）相比，-EqExo70（沉默EqExo70基因的轉(zhuǎn)化子）菌株的病斑面積降低了64%（圖3A，圖3B），提取白粉菌中的RNA，通過qRT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，EqExo70沉默后的白粉菌中EqExo70基因表達(dá)量下調(diào)47%（圖3C）。結(jié)果表明EqExo70基因沉默會(huì)導(dǎo)致白粉菌致病力顯著下降，因此該蛋白亞基在白粉菌侵染過程中發(fā)揮重要作用。

2.4""EqExo70基因沉默影響白粉菌菌絲發(fā)育

為了探究EqExo70對(duì)白粉菌菌絲發(fā)育的影響，將EqExo70進(jìn)行沉默，觀察菌絲生長(zhǎng)發(fā)育狀況。結(jié)果顯示與對(duì)照（WT、GFP菌株）相比，EqExo70沉默菌株的菌絲發(fā)育受到明顯抑制（圖4A），經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析，吸器數(shù)量與對(duì)照相比減少94%（圖4B）。這表明EqExo70蛋白在白粉菌的生長(zhǎng)發(fā)育過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，EqExo70的基因沉默嚴(yán)重抑制白粉菌菌絲的生長(zhǎng)以及吸器的形成。

2.5""EqExo70影響橡膠樹的防衛(wèi)免疫反應(yīng)

植物可以通過表面受體（pattern"recognition"receptors，"PRRs）特異性識(shí)別胞外信號(hào)，并引起相應(yīng)免疫應(yīng)答反應(yīng)，如氣孔關(guān)閉、活性氧和胼胝質(zhì)積累等來抑制病原菌侵染實(shí)現(xiàn)廣譜抗性[23-24]。本研究中EqExo70沉默轉(zhuǎn)化子接種的橡膠樹葉片與對(duì)照相比，活性氧爆發(fā)及胼胝質(zhì)沉積顯著增加（圖5A）。沉默EqExo70后每克葉片的活性氧強(qiáng)度顯著提高，胼胝質(zhì)沉積面積增加（圖5B，圖5C）。因此，EqExo70基因沉默可增加橡膠樹葉片活性氧的爆發(fā)和胼胝質(zhì)的沉積，EqExo70可能參與白粉菌與橡膠樹的互作過程。

3""討論

本研究對(duì)橡膠樹白粉菌EqExo70蛋白亞基功能進(jìn)行了分析，通過電擊轉(zhuǎn)化的方法將pJNARG-"Tub2-EqExo70-GFP載體轉(zhuǎn)入白粉菌中，觀察到EqExo70-GFP融合蛋白熒光聚集在白粉菌絲尖端，呈現(xiàn)極性定位。菌絲的極性生長(zhǎng)依賴菌絲尖端的定向延伸，此前已有研究報(bào)道，灰葡萄孢菌（B."cinerea）中的Exo70聚集在菌絲尖端，影響菌絲的極性生長(zhǎng)[8]。在非絲狀真菌中，Exo70蛋白亞基也具有相似的功能，如在裂變酵母（S."romyces）中Exo70可沿著肌動(dòng)蛋白進(jìn)行運(yùn)輸，并定位到細(xì)胞極點(diǎn)[25]；在出芽酵母（S."cerevisiae）中，芽體的極性生長(zhǎng)也離不開Exo70蛋白與GTPase的相互作用[26]。這也表明EqExo70蛋白可能在菌絲極性生長(zhǎng)以及物質(zhì)的極性運(yùn)輸中發(fā)揮著重要作用，具體作用模式將在后續(xù)研究中進(jìn)行進(jìn)一步探索。

電擊轉(zhuǎn)化介導(dǎo)的基因沉默是通過電穿孔的方法將相關(guān)靶基因的反向互補(bǔ)序列轉(zhuǎn)入，進(jìn)行抗性篩選獲得沉默轉(zhuǎn)化子的一項(xiàng)技術(shù)[16]。橡膠樹白粉菌相關(guān)研究已經(jīng)報(bào)道通過該技術(shù)對(duì)保守的MAPK激酶EqFus3、EqSlt2以及actin相關(guān)基因EqSac6進(jìn)行沉默，并發(fā)現(xiàn)與EqSlt2和EqSac6沉默相比，EqFus3沉默導(dǎo)致的致病性下降更為明顯[17]。本研究中，通過電擊轉(zhuǎn)化技術(shù)對(duì)EqExo70進(jìn)行沉默，發(fā)現(xiàn)白粉菌的致病力降低并且沉默菌株吸器數(shù)量減少，表明EqExo70對(duì)橡膠樹白粉菌菌絲發(fā)育以及致病力至關(guān)重要。據(jù)報(bào)道香蕉枯萎病菌（Fusarium"odoratissimum）中Exo70基因的缺失導(dǎo)致了病原菌的生長(zhǎng)、分化和致病性的缺陷，Exo70的缺失還導(dǎo)致內(nèi)源性葡萄糖苷酶和淀粉酶活性的下降[27]。內(nèi)毒素類似物ES2-14處理稻瘟病菌（M."oryzae）可抑制附著胞的形成，減小稻瘟病菌引起的病變[28]。這為EqExo70在未來能夠應(yīng)用于橡膠樹白粉菌的防治提供了更多的參考和可能性，同時(shí)，本研究也對(duì)病原菌的靶標(biāo)防治提供了新的研究方向。

Exo70蛋白亞基在真菌——植物相互作用方面，也發(fā)揮著重要作用。如植物中的Exo70亞基在PTI中扮演著重要角色，能協(xié)助對(duì)真菌病原體的分離和包裹[29-31]。活性氧爆發(fā)和胼胝質(zhì)沉積被認(rèn)為是植物應(yīng)對(duì)病原物侵染的基礎(chǔ)防衛(wèi)反應(yīng)[32]。此前的研究表明，擬南芥（Arabidopsis"thaliana）中Exo70和MLO蛋白可以相互作用調(diào)節(jié)胼胝質(zhì)的合成，增強(qiáng)其對(duì)白粉菌的抗病能力[33]。本研究中發(fā)現(xiàn)，EqExo70沉默后，活性氧爆發(fā)及胼胝質(zhì)沉積顯著增加，表明植物防衛(wèi)反應(yīng)增強(qiáng)，這預(yù)示著EqExo70可能參與了白粉菌與橡膠樹的互作過程，幫助白粉菌的侵染。

橡膠樹白粉菌的胞泌復(fù)合體亞基EqExo70能夠表現(xiàn)出在菌絲尖端的極性定位，沉默EqExo70時(shí)能夠影響白粉菌的生長(zhǎng)和致病力，并且能夠引起寄主防衛(wèi)反應(yīng)的增強(qiáng)，這表明EqExo70蛋白亞基在真菌——植物相互作用以及病原菌的靶標(biāo)防治方面具有很大的研究?jī)r(jià)值和研究潛力。本課題組將進(jìn)一步研究橡膠樹白粉菌EqExo70蛋白亞基在極性生長(zhǎng)和極性運(yùn)輸?shù)淖饔?，以期明確EqExo70在白粉菌侵染過程中發(fā)揮的作用。

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