[摘" "要]" "目的：探索牛膝多肽k（Achyranthes bidentata polypeptides，ABPPk）處理下施萬(wàn)細(xì)胞（Schwann cells， SCs）發(fā)育過程中動(dòng)態(tài)功能RNA的變化以及時(shí)間依賴性特征。方法：將SCs設(shè)為DMEM組、含有ABPPk（0.5 μg/mL）的ABPPk+DMEM組、含有神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor，NGF）（0.1 μg/mL）的NGF+DMEM組。ABPPk和NGF作用于SCs 0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h時(shí)分別收取SCs共75個(gè)樣本，進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組RNA測(cè)序，通過質(zhì)量控制評(píng)估和表達(dá)驗(yàn)證，展示完整、深度測(cè)序且高度一致的時(shí)間序列數(shù)據(jù)集。結(jié)果：RNA測(cè)序結(jié)果顯示所有樣品均具有較高的RNA完整性數(shù)值（RNA integrity number，RIN），表明總RNA完整。UMAP分析顯示兩個(gè)主要的簇具有輕微的時(shí)間依賴性。差異表達(dá)分析顯示，差異表達(dá)基因的數(shù)量在12 h和24 h變化較大。功能聚類分析顯示，在12 h這個(gè)時(shí)間點(diǎn)，ABPPk處理所特有的上調(diào)基因主要參與調(diào)控蛋白質(zhì)磷酸化、細(xì)胞凋亡、粘附連接等過程，而NGF處理所特有的上調(diào)基因主要參與調(diào)控內(nèi)吞、GTP酶活性、氧化磷酸化等過程。在24 h這個(gè)時(shí)間點(diǎn)，ABPPk處理后上調(diào)的基因主要參與調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白骨架、DNA修復(fù)、軸突導(dǎo)向等過程，而NGF處理后上調(diào)的基因主要參與基因表達(dá)的正向調(diào)控及鞘脂信號(hào)通路的激活。實(shí)時(shí)PCR結(jié)果顯示，參與SCs發(fā)育的基因Ccnd1、Foxo3、Pmp22、Lgals3、Usp1及Rps6ka1在RNA-seq和實(shí)時(shí)PCR之間的mRNA表達(dá)高度相關(guān)，表明數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。結(jié)論：本研究獲得的數(shù)據(jù)集能助力探索動(dòng)態(tài)功能RNA在施萬(wàn)細(xì)胞發(fā)育中的作用，以及在不同神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子處理下的分子差異，有利于發(fā)現(xiàn)周圍神經(jīng)再生的新治療靶點(diǎn)。

[關(guān)鍵詞]" "牛膝多肽；施萬(wàn)細(xì)胞；RNA測(cè)序；神經(jīng)生長(zhǎng)因子

[中圖分類號(hào)]" "Q813 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]" "A [DOI]" "10.19767/j.cnki.32-1412.2025.01.001

Analysis of time-dependent characteristics of Schwann Cells in rats treated with ABPPk by full transcriptome sequencing

LIU Xingyu1， DING Zhaoyi1， LI Xinyi1， WANG Dong2， SHEN Yuntian2

（1Medical School of Nantong University， Jiangsu 226001; 2Jiangsu Key Laboratory of Neuroregeneration， Nantong University）

[Abstract]" "Objective： To investigate the dynamic functional RNA changes and time-dependent characteristics during the development of Schwann cells （SCs） treated by Achyranthes bidentata polypeptides （ABPPk）. Methods： SCs were divided into DMEM group， ABPPk+DMEM group containing ABPPk （0.5 μg/mL）， and NGF+DMEM group containing nerve growth factor （NGF） （0.1 μg/mL）. A total of 75 SCs samples treated by ABPPk and NGF at 0.25 h， 0.5 h， 1 h， 2 h， 3 h， 6 h， 12 h and 24 h were collected， respectively， and then full transcriptome RNA sequencing was performed to demonstrate a complete， deeply sequenced and highly consistent time series dataset through quality control assessment and expression verification. Results：RNA sequencing results showed that all samples had high RNA integrity number （RIN）， indicating that total RNA was integral. UMAP analysis showed that the two main clusters had a slight time dependence. Differential expression analysis showed that the number of differentially expressed genes changed significantly at 12 h and 24 h. Functional cluster analysis showed that at 12 h， the up-regulated genes specific to ABPPk treatment were mainly involved in the regulation of protein phosphorylation， cell apoptosis and adhesion， while the up-regulated genes specific to NGF treatment were mainly involved in the regulation of entosis， GTPase activity and oxidative phosphorylation. At 24 h， the up-regulated genes after ABPPk treatment were mainly involved in the actin skeleton regulation， DNA repair， and axon orientation， while the up-regulated genes after NGF treatment were mainly involved in the positive regulation of gene expression and the activation of sphingolipid signaling pathway. Real-time PCR results showed that the mRNA expressions of Ccnd1， Foxo3， Pmp22， Lgals3， Usp1 and Rps6ka1 genes involved in SCs development were highly correlated between RNA-seq and real-time PCR， indicating that the data were accurate. Conclusion： These datasets can help explore the role of dynamic functional RNA in SCs development and molecular differences in the treatment of different neurotrophic factors， which will facilitate the discovery of" novel therapeutic targets for peripheral nerve regeneration.

[Key words]" "Achyranthes bidentata polypeptides; Schwann cells; RNA sequencing; nerve growth factor

周圍神經(jīng)損傷在臨床上很常見，通常導(dǎo)致嚴(yán)重的感覺和運(yùn)動(dòng)功能障礙，甚至永久性殘疾[1-2]。與中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷不同，受損軸突在周圍神經(jīng)損傷后可以再生并恢復(fù)感覺和運(yùn)動(dòng)功能。施萬(wàn)細(xì)胞（Schwann cells，SCs）是支持外周軸突的髓鞘細(xì)胞，在損傷后神經(jīng)修復(fù)和再生中起重要作用[3]。在SCs中非髓鞘形成和髓鞘形成之間的表型轉(zhuǎn)變對(duì)于促進(jìn)軸突再生至關(guān)重要，包括神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的釋放和巨噬細(xì)胞的募集來(lái)清除細(xì)胞碎片[3-4]。SCs增殖是神經(jīng)損傷和再生中SCs反應(yīng)的一個(gè)關(guān)鍵特性[4]，有助于增強(qiáng)軸突生長(zhǎng)并促進(jìn)髓鞘的形成。放大SCs的有效性可以顯著提高周圍神經(jīng)損傷的治療效果，推進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療發(fā)展。因此，提高SCs效能已成為周圍神經(jīng)再生和修復(fù)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

牛膝多肽k（Achyranthes bidentata polypeptides，ABPPk）是從中藥牛膝草中分離，經(jīng)高效液相色譜（high-performance liquid chromatography，HPLC）純化而得到，該技術(shù)已申報(bào)中國(guó)發(fā)明專利（專利申請(qǐng)?zhí)枺?01310108655.6）。前期研究表明，ABPPk在帕金森病或損傷動(dòng)物模型中發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)元免受凋亡的作用[5-7]，ABPPk可以通過抑制血清剝奪引起的凋亡來(lái)保護(hù)受損的SCs[8]。SCs在周圍神經(jīng)疾病發(fā)病機(jī)制中的作用已被廣泛研究，但多聚焦于單一時(shí)間點(diǎn)的基因表達(dá)變化，并且有關(guān)傳統(tǒng)中藥促進(jìn)SCs表型和功能變化的研究很少，缺乏對(duì)SCs在傳統(tǒng)中藥處理下全轉(zhuǎn)錄組動(dòng)態(tài)演變的系統(tǒng)性解析。

本研究通過全轉(zhuǎn)錄組時(shí)間序列分析，探索植物源性ABPPk和動(dòng)物源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor，NGF）治療下SCs發(fā)育中的動(dòng)態(tài)功能RNA和分子差異，首次繪制ABPPk誘導(dǎo)SCs再生的多組學(xué)動(dòng)態(tài)圖譜，為臨床轉(zhuǎn)化提供關(guān)鍵理論依據(jù)。

1" "材料與方法

1.1" "施萬(wàn)細(xì)胞培養(yǎng)" "取新生Sprague-Dawley大鼠（購(gòu)自南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）雙側(cè)坐骨神經(jīng)，膠原酶/胰酶混合消化完全后離心棄上清液，加入含10%胎牛血清的DMEM完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，過篩網(wǎng)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。均勻種于培養(yǎng)皿中，于細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。避光下?lián)Q成含有阿糖胞苷（10 μmol/L）的完全培養(yǎng)基。繼續(xù)培養(yǎng)2天，換成含有Forskolin（2 μmol/mL）和HRG（10 ng/mL）的完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)皿底部后，加入適量含有Thy 1.1（1∶1 000）的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，冰上孵育2小時(shí)。離心棄上清，加入含有補(bǔ)體的DMEM于37 ℃孵育30分鐘。離心后加入完全培養(yǎng)基均勻種于培養(yǎng)皿中，置于37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。第二天換成含有Forskolin（2 μmol/mL）和HRG（10 ng/mL）的完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

1.2" "施萬(wàn)細(xì)胞處理" "SCs細(xì)胞按照5×105/mL密度種于6孔板，分別更換為DMEM組、含有ABPPk（0.5 μg/mL）的ABPPk+DMEM組、含有神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor，NGF）（0.1 μg/mL）的NGF+DMEM組繼續(xù)培養(yǎng)，分別于不同時(shí)間點(diǎn)（0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h）收取SCs細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步分析。

1.3" "RNA-seq文庫(kù)的構(gòu)建和測(cè)序" "收集3組的3個(gè)重復(fù)樣本，使用mirVana miRNA分離試劑盒（Ambion）提取SCs總RNA。RNA完整性使用Agilent 2100生物分析儀（Agilent Technologies，Santa Clara，CA，USA）進(jìn)行評(píng)估，RNA完整性編號(hào)用于后續(xù)文庫(kù)構(gòu)建。采用Illumina HiSeq 2500以150 bp配對(duì)端讀取，對(duì)合格的庫(kù)進(jìn)行排序。RNA分離、庫(kù)構(gòu)建和測(cè)序由OEbiotech公司（上海）進(jìn)行。

1.4" "RNA-seq數(shù)據(jù)分析" "采用FastQC（v 0.11）評(píng)估測(cè)序reads的質(zhì)量，包括Phred評(píng)分和GC含量分布。對(duì)質(zhì)量較低的原始reads按以下順序進(jìn)行裁剪和過濾：丟棄Phred評(píng)分小于20（Q20）且長(zhǎng)度小于35 bp的reads；修剪reads 3’端低質(zhì)量（Q20）堿基及不明確的堿基（Ns）；保留剩余堿基數(shù)大于35 bp的reads。從Ensemble數(shù)據(jù)庫(kù)（release 84，Rnor 6.0）檢索大鼠基因組和基因組注釋。使用TopHat2（v 2.1）[9]默認(rèn)參數(shù)將clean reads映射到基因組。為了量化基因/轉(zhuǎn)錄物的表達(dá)水平，使用Bowtie2（v 2.3）[10]和eXpress（v 1.5）[11]將它們歸一化為FPKM（Fragments Per kb Per Million Reads）。當(dāng)存在一個(gè)基因的多個(gè)轉(zhuǎn)錄物時(shí)，對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行求和。接下來(lái)使用RSeqQC[12]（v 2.6）評(píng)估測(cè)序飽和度和覆蓋均勻性，使用R的Umap包進(jìn)行降維，并使用ggplot2 package進(jìn)行可視化。為了檢測(cè)差異表達(dá)的基因/轉(zhuǎn)錄物，使用DESeq2 package[13]將調(diào)整后P值 log2FC≥1.5 的基因/轉(zhuǎn)錄本定義為DEGs。在R程序中實(shí)現(xiàn)cor.test檢驗(yàn)功能。利用在線工具DAVID基因功能分類（DAVID Gene Functional Classification），對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能富集分析（https：//david.ncifcrf.gov/summary.jsp）。

1.5" "實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）" "使用TRIzol試劑提取各組SCs總RNA，然后使用PrimeSCriptTM RT試劑盒（Perfect Real Time，TaKaRa，Japan）轉(zhuǎn)化為cDNA，TB Green^（Ｒ）Primix Ex TaqTM （Tli RNAseH Plus，TaKaRa，Japan）進(jìn)行qPCR。6個(gè)基因（Ccnd1、Foxo3、Pmp22、Lgals3、Usp1和Rps6ka1）引物序列見表1。基因的相對(duì)表達(dá)水平被歸一化為GAPDH表達(dá)。

1.6" "統(tǒng)計(jì)學(xué)處理" "計(jì)量資料以x±s表示，組間差異性比較采用方差分析（ANOVA），Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2" "結(jié)" " " 果

2.1" "總RNA的完整性" "為了研究ABPPk在SCs發(fā)育時(shí)潛在的分子變化，在8個(gè)時(shí)間點(diǎn)（0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h）進(jìn)行RNA測(cè)序。使用Agilent生物分析儀2100評(píng)估每個(gè)樣品中總RNA的完整性。結(jié)果表明，所有樣品均具有較高的RNA完整性數(shù)值（RNA integrity number，RIN）（RINgt;7），可用于進(jìn)一步文庫(kù)建設(shè)（圖1）。

2.2" "總RNA和RNA- seq數(shù)據(jù)的質(zhì)量評(píng)估" "為了檢查測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量，首先使用FastQC評(píng)估每個(gè)堿基的質(zhì)量分?jǐn)?shù)和reads的GC內(nèi)容。結(jié)果顯示，gt;90% reads具有高質(zhì)量評(píng)分（Q30），GC含量呈正態(tài)分布（樣品質(zhì)量控制如圖2所示）。為了進(jìn)一步評(píng)估測(cè)序數(shù)據(jù)在檢測(cè)基因和覆蓋率方面的質(zhì)量，將修剪后的reads映射到大鼠基因組量化表達(dá)水平，然后評(píng)估基因覆蓋率和測(cè)序飽和度。結(jié)果顯示高基因組映射比（平均88.97%）具有高基因覆蓋率（圖2C、2D），達(dá)到飽和，這可以很好地檢測(cè)出低表達(dá)的基因。

2.3" "差異表達(dá)基因（differentially expressed gene，DEG）的分子模式分析" "UMAP分析顯示，兩個(gè)主要的簇具有輕微的時(shí)間依賴性（圖3）。差異表達(dá)分析顯示，DEG的數(shù)量在12 h和24 h變化較大（圖4）。與原代SCs（pSCs）相比，DMEM組24 h的DEG數(shù)（gt;150）相對(duì)較高， 24 h前的DEG數(shù)較?。╨t;50），表明SCs在24 h快速生長(zhǎng)（圖4A和4C）。有趣的是，與DMEM組比較，ABPPk+DMEM組12 h DEG數(shù)（包含上調(diào)和下調(diào)的DEG）達(dá)到峰值，NGF+DMEM組的DEG數(shù)略大于ABPPk組（圖4B）。ABPPk+DMEM組與NGF+DMEM組之間共享的DEG較少，表明兩組存在差異調(diào)控分子，需要進(jìn)一步深入研究。

2.4" "差異表達(dá)基因的功能富集分析" "我們對(duì)ABPPk和NGF處理特有的上調(diào)基因進(jìn)行功能聚類分析。在12 h這個(gè)時(shí)間點(diǎn)，ABPPk所特有的上調(diào)基因主要參與調(diào)控蛋白質(zhì)磷酸化、細(xì)胞凋亡、粘附連接等過程，而NGF處理所特有的上調(diào)基因主要參與調(diào)控內(nèi)吞、GTP酶活性、氧化磷酸化和突觸囊泡周期等過程（圖5A）。在24 h這個(gè)時(shí)間點(diǎn)，ABPPk+DMEM組上調(diào)基因主要參與調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白骨架、DNA修復(fù)、軸突導(dǎo)向等過程，而NGF+DMEM組上調(diào)基因主要參與基因表達(dá)的正向調(diào)控及鞘脂信號(hào)通路的激活（圖5B）。ABPPk和NGF處理所特有的上調(diào)基因之間的功能差異非常明顯，再次表明ABPPk和NGF可能作用于不同的下游靶點(diǎn)。

2.5" "實(shí)時(shí)PCR驗(yàn)證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性" "為了進(jìn)一步確認(rèn)測(cè)序數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，采用實(shí)時(shí)PCR驗(yàn)證6個(gè)參與SCs發(fā)育的基因（Ccnd1、Foxo3、Pmp22、Lgals3、Usp1和Rps6ka1）表達(dá)。6個(gè)基因在RNA-seq和實(shí)時(shí)PCR之間的mRNA表達(dá)高度相關(guān)（圖6），表明數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。

3" "討" " " 論

神經(jīng)損傷的轉(zhuǎn)錄機(jī)制是一個(gè)重要的研究領(lǐng)域，當(dāng)神經(jīng)無(wú)法再生時(shí)，患者可能會(huì)經(jīng)歷慢性疼痛或失去所有感覺。本課題組致力于研究ABPPk對(duì)SCs的作用，多項(xiàng)研究表明ABPPk對(duì)SCs損傷和凋亡具有一定的保護(hù)作用。由于早期營(yíng)養(yǎng)因子的保護(hù)作用最強(qiáng)，為了探索ABPPk在神經(jīng)損傷早期階段的保護(hù)和修復(fù)潛力，我們選擇ABPPk作用于SCs 0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h這8個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行RNA轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，并將其與NGF處理的相同條件進(jìn)行比較，以確定ABPPk對(duì)SCs的作用分子和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，以及ABPPk和NGF對(duì)SCs的分子變化是否具有相似的表型效應(yīng)。本研究共測(cè)序了75個(gè)樣本，每個(gè)樣本產(chǎn)生約1億個(gè)reads，使研究功能RNA的概況成為可能，包括蛋白質(zhì)編碼、長(zhǎng)非編碼和環(huán)狀RNA。生物信息學(xué)分析表明，本研究的測(cè)序數(shù)據(jù)在堿基質(zhì)量、測(cè)序飽和度和基因覆蓋率方面都是高質(zhì)量的。我們還進(jìn)行了實(shí)時(shí)PCR驗(yàn)證，在表達(dá)水平上顯示了很高的準(zhǔn)確性。差異表達(dá)分析顯示，與pSC相比，ABPPk+DMEM組、NGF+DMEM組及DEME組SCs差異表達(dá)的基因數(shù)量較少，在24 h達(dá)到峰值。

與DMEM組比較，ABPPk處理SCs 12 h后，15個(gè)獨(dú)特的上調(diào)DEG主要參與調(diào)控蛋白磷酸化、細(xì)胞凋亡、粘附連接、細(xì)胞周期、膠質(zhì)細(xì)胞分化和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架形成等過程。SCs中含有多種蛋白激酶，可催化蛋白質(zhì)磷酸化，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能。蛋白磷酸化在SCs細(xì)胞形態(tài)、遷移、分化、髓鞘形成和修復(fù)中發(fā)揮重要作用[14]。粘附連接可以通過激活信號(hào)通路影響SCs的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而調(diào)節(jié)SCs增殖、存活和分化。與DMEM組比較，NGF處理SCs 12 h后，76個(gè)獨(dú)特的上調(diào)DEG主要參與內(nèi)吞作用、GTPase活性正調(diào)控、氧化還原、序列特異性DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子活性正調(diào)控和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架組織的調(diào)節(jié)。內(nèi)吞作用是修復(fù)性SCs的主要特征之一，修復(fù)性SCs的形成受NGF、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）等多種細(xì)胞因子的影響，這些細(xì)胞因子通過激活不同的信號(hào)通路，調(diào)控SCs的轉(zhuǎn)錄因子和表觀遺傳修飾，從而影響SCs細(xì)胞分化和去分化[15-16]。SCs去分化為修復(fù)性SCs，并通過內(nèi)吞作用促進(jìn)神經(jīng)再生。與pSCs比較，ABPPk處理SCs 24 h后，45個(gè)獨(dú)特上調(diào)的DEGs主要參與調(diào)節(jié)基因表達(dá)、肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架、軸突引導(dǎo)、營(yíng)養(yǎng)水平反應(yīng)、磷酸化和蛋白質(zhì)多泛素化。有趣的是，這些上調(diào)基因的功能與神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育有更多相似之處，如神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移、器官生長(zhǎng)、信號(hào)素叢蛋白信號(hào)通路和共同伴侶SMAD蛋白磷酸化[17]，表明ABPPk處理的SCs可能在一定程度上類似于它們的自然發(fā)育過程。與pSCs相比，NGF處理SCs 24 h后，25種獨(dú)特上調(diào)的DEGs參與基因表達(dá)和鞘脂信號(hào)通路的正調(diào)控。髓磷脂中含有豐富的鞘磷脂和鞘脂，它們由前體神經(jīng)酰胺合成。神經(jīng)酰胺是神經(jīng)鞘脂信號(hào)通路中的關(guān)鍵分子，對(duì)SCs的髓鞘形成有重要影響。此外，鞘脂信號(hào)通路可以保護(hù)SCs免受應(yīng)激損傷。我們先前研究發(fā)現(xiàn)ABPPk有促進(jìn)SCs增殖的作用，其作用與NGF相當(dāng)。作為一種經(jīng)典的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，NGF促進(jìn)SCs增殖和髓鞘形成，已被廣泛應(yīng)用于臨床。本研究結(jié)果顯示，ABPPk+DMEM組的SCs更接近其固有發(fā)育的特征，而NGF+DMEM組SCs則主要表現(xiàn)出修復(fù)作用。這些數(shù)據(jù)表明ABPPk和NGF可能作用于SCs中不同的下游信號(hào)通路。

通過質(zhì)量控制評(píng)估和表達(dá)驗(yàn)證，本研究展示了完整的、深度測(cè)序的且高度一致的時(shí)間序列數(shù)據(jù)集，這些數(shù)據(jù)集能助力探索動(dòng)態(tài)功能RNA在SCs發(fā)育中的作用，以及在植物源性和動(dòng)物源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子處理下的分子差異。本研究有助于全面準(zhǔn)確地了解ABPPk和NGF對(duì)SCs的影響，并將成為神經(jīng)再生治療藥物開發(fā)的重要資源。

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[收稿日期] 2025-01-11

（本文編輯" "趙喜）

* [基金項(xiàng)目] 國(guó)家自然科學(xué)基金（32200799；81901933）；南通大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（202310304120Y）。

** [作者簡(jiǎn)介] 劉星雨，女，漢族，江蘇南通人，生于2000年11月，本科。研究方向：周圍神經(jīng)損傷與修復(fù)。" " " 通信作者：沈筠恬，E-mail：Syt517@ntu.edu.cn