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        羊炭疽病實驗室診斷和治療方法及全面有效防控綜合探討

        2024-12-31 00:00:00李飛云王寶軍
        農(nóng)民致富之友 2024年26期

        羊炭疽病作為一種由炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis)引起的急性、高度致命的傳染性疾病,對全球范圍內(nèi)的畜牧業(yè)產(chǎn)生了重大影響。其不僅嚴重威脅動物健康和生命安全,還具有潛在的人畜共患風險,對公共衛(wèi)生安全構(gòu)成了威脅。鑒于炭疽桿菌具有強大的環(huán)境抗逆性,能在土壤中以孢子形式存活數(shù)十年,一旦動物攝入或接觸這些芽孢,就可能迅速患病并在短時間內(nèi)死亡。因此,對羊炭疽病的診斷、防控與治療,尤其是對其發(fā)生機制、流行特點及影響因素的深入理解,對于有效控制和預防此病的傳播至關(guān)重要。本文旨在綜合探討羊炭疽病的診斷方法、綜合防控措施以及有效的治療方法,以期為畜牧養(yǎng)殖業(yè)提供科學的指導策略,減少羊炭疽病的發(fā)生率,保障畜牧業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展及人類社會的公共衛(wèi)生安全。

        一、羊炭疽病的發(fā)生與流行

        1、病原特點

        羊炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種急性、發(fā)熱性傳染病,該病原體具有較高的致病性和抵抗環(huán)境因素的能力。炭疽桿菌在自然條件下可以形成耐高溫、耐干燥的芽孢,這種形態(tài)的芽孢可以在土壤中存活數(shù)十年之久,當適合的宿主如羊攝入這些芽孢后,芽孢在宿主體內(nèi)萌發(fā),迅速繁殖并產(chǎn)生毒素,導致病情發(fā)展。炭疽桿菌產(chǎn)生的主要致病因子包括保護性抗原(PA)、致死因子(LF)和水腫因子(EF),這三種因子共同作用形成炭疽毒素,是引起疾病嚴重程度和死亡的直接原因。病原的這些特性使得羊炭疽病的控制和預防面臨極大的挑戰(zhàn)。

        2、流行特點

        羊炭疽病的流行具有明顯的地域性和季節(jié)性特點。地域性體現(xiàn)在該病多發(fā)生在羊群較為集中,且土壤pH值偏堿性、富含有機物和鈣鹽的地區(qū)。這些條件有利于炭疽芽孢的存活和傳播。季節(jié)性特點則表現(xiàn)為在高溫多濕的季節(jié),尤其是夏季和秋季,羊炭疽病的發(fā)生率顯著增高。這一現(xiàn)象與炭疽芽孢桿菌在適宜的環(huán)境條件下更易于萌發(fā)有關(guān)。此外,不當?shù)娘曫B(yǎng)管理、過度放牧、飼料和水源的污染也會增加羊群感染炭疽病的風險。羊只一旦感染炭疽,病情進展迅速,往往在數(shù)小時內(nèi)即可死亡,病死羊的尸體若不妥善處理,會污染環(huán)境,形成傳播源,增加其他動物感染的風險,從而導致炭疽病在羊群中的流行和擴散。因此,了解羊炭疽病的流行規(guī)律,對于制定有效的防控措施具有重要意義。

        二、羊炭疽病的臨床癥狀

        羊炭疽病是由炭疽芽孢桿菌引起的一種急性、發(fā)熱性、傳染性疾病。該病不僅影響羊,也能影響其他哺乳動物,包括人類。根據(jù)疾病的發(fā)展速度和癥狀的嚴重程度,羊炭疽病可分為最急性型、急性型和亞急性型三種。

        1、最急性型感染

        最急性型炭疽感染是疾病中最為致命的形式,其發(fā)病迅速且往往在臨床癥狀顯現(xiàn)前導致死亡。在這種情況下,感染的羊只可能突然倒下,出現(xiàn)高熱、抽搐,隨后迅速死亡。死后解剖常見的特點包括未凝固的血液以及脾臟的顯著腫大。由于最急性型感染往往在癥狀出現(xiàn)后不久導致死亡,因此預防和早期診斷顯得尤為重要。

        2、急性型感染

        急性型炭疽感染的癥狀比最急性型感染稍微緩慢,但仍然非常嚴重。感染的羊只可能表現(xiàn)出高熱、呼吸困難、心跳加快、肌肉顫抖以及不同程度的昏迷。此外,可能出現(xiàn)局部腫脹,尤其是在頸部、胸部、肩部、腹部等區(qū)域。這種腫脹通常是由于炭疽桿菌引起的皮下出血和組織壞死。如果不及時治療,急性型炭疽感染通常會在幾天內(nèi)導致羊只死亡。

        3、亞急性型感染

        亞急性型炭疽感染的發(fā)展比最急性型和急性型感染更為緩慢,癥狀也相對較輕。感染的羊只可能出現(xiàn)輕微的發(fā)熱、體弱、食欲不振和體重下降。部分動物可能會出現(xiàn)腫脹,但與急性型感染相比,腫脹程度較輕。亞急性型炭疽感染的治愈率相對較高,但仍然需要及時地診斷和治療。未經(jīng)治療的動物可能會發(fā)展為更嚴重的疾病狀態(tài),或者成為慢性帶菌者,增加疫病的傳播風險。

        三、羊炭疽病的影響因素

        羊炭疽病是一種由炭疽芽孢桿菌引起的急性、烈性傳染病,該病不僅嚴重威脅著畜牧業(yè)的發(fā)展,也對公共衛(wèi)生安全構(gòu)成了潛在的威脅。研究羊炭疽病的影響因素對于疫病的預防和控制具有重要意義。下文將從環(huán)境條件、動物自身因素和管理措施三個方面,詳細探討羊炭疽病的影響因素。

        1、環(huán)境條件是影響羊炭疽病發(fā)生的重要外部因素

        炭疽芽孢桿菌在自然條件下可以形成抗逆性極強的芽孢,能在土壤中存活數(shù)十年之久。當環(huán)境條件(如溫度、濕度)適宜時,芽孢可激活、繁殖,增加了羊只通過食用受污染的草料或水源而感染炭疽的風險。特別是在高溫多濕的季節(jié),炭疽芽孢的活性增強,疫病的暴發(fā)概率相應增大。此外,洪水等自然災害可能將芽孢從土壤中沖入水體,或者將芽孢廣泛散布至未受污染的區(qū)域,進一步擴大疫病的范圍。因此,環(huán)境監(jiān)測和管理,尤其是對牧場周邊環(huán)境的監(jiān)測,對預防羊炭疽病的發(fā)生至關(guān)重要。

        2、在羊炭疽病的發(fā)展中動物自身因素也至關(guān)重要

        例如,羊只的年齡、免疫狀態(tài)、遺傳易感性等均可影響其對炭疽芽孢桿菌的抵抗力。一般而言,年幼的羊只因免疫系統(tǒng)未完全發(fā)育,對炭疽的抵抗力較弱。此外,營養(yǎng)不良、長期處于壓力狀態(tài)下的羊只,其免疫功能亦會受到抑制,易于感染炭疽。而遺傳因素也可能決定羊只對炭疽的易感性,某些品種的羊可能天生對炭疽芽孢桿菌更為敏感。因此,加強羊只的健康管理,提高其整體抵抗力,對于防控炭疽病具有重要意義。

        3、管理措施的有效性直接影響著羊炭疽病的防控效果

        包括疫苗接種、飼養(yǎng)密度控制、飼料和水源的安全管理等方面。定期對羊只進行炭疽疫苗接種,是預防炭疽病發(fā)生的有效手段。同時,合理控制飼養(yǎng)密度,避免過度擁擠,可以降低病原傳播的風險。確保飼料和水源的安全,防止炭疽芽孢通過這些途徑感染羊只。此外,加強對牧場工作人員的培訓,提高他們對炭疽病的認識和防控能力,也是防止炭疽疫病擴散的重要措施。

        總的來說,羊炭疽病的發(fā)生與環(huán)境條件、動物自身因素及管理措施三方面密切相關(guān)。只有全面了解和掌握這些影響因素,采取針對性的預防控制措施,才能有效遏制羊炭疽病的發(fā)生和傳播,保障畜牧業(yè)的健康發(fā)展及公共衛(wèi)生安全。

        四、羊炭疽病的實驗室診斷方法

        1、微觀觀察與鏡檢分析

        在進行炭疽病原體診斷的過程中,首先在嚴格無菌的實驗條件下,從死亡羊只的脾臟組織中制備細胞抹片,隨后應用吉姆薩染色技術(shù)對抹片進行染色處理。在10×100倍的顯微鏡觀察下,可以明顯觀察到一致分布、形態(tài)各異的炭疽桿菌。這些病原體的兩端呈現(xiàn)直線狀,類似于切割后鋒利的鐵絲,其中較長的個體略顯彎曲,而較短的個體彎曲程度較輕或幾乎不彎曲。經(jīng)過染色,這些繁殖體顯現(xiàn)為藍黑色。此外,在感染炭疽的羊只脾臟血液中,也能觀察到大量的病原桿菌,通常在每個顯微視野下能觀察到超過60個病原體。這些血液中大量的繁殖菌體導致血液顏色變?yōu)榘岛稚?,呈現(xiàn)出類似煤焦油樣的血液,且失去了凝固能力。

        2、病原體分離與培養(yǎng)技術(shù)

        針對新鮮的病理樣本,可以直接在標準肉湯培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基中接種進行培養(yǎng)。對于存儲時間較長或可能被污染的樣本,則需先將其制備成懸浮液,并在70℃條件下加熱30分鐘,以此殺死非芽孢形成的細菌,隨后才可進行接種培養(yǎng)。分離得到的疑似炭疽病原菌株,需進一步通過噬菌體裂解實驗、莢膜形成測試和串珠試驗進行驗證。在無菌環(huán)境下,將疑似病原體的瓊脂培養(yǎng)物接種至每毫升含有0.5萬單位青霉素的瓊脂培養(yǎng)基中,并在37℃條件下培養(yǎng)24小時。這一過程通常會產(chǎn)生生長緩慢、稀疏的菌落。進一步從這些菌落中挑取單個菌落,進行革蘭氏染色后的顯微鏡檢查,可見到膨大的革蘭氏陽性桿菌,呈串珠狀排列,菌體中央可見芽孢。

        3、動物接種試驗

        為進一步驗證病原體的致病性,從患病羊只的淋巴結(jié)、脾臟和肝臟中取出2~3g組織,這些組織被剪成小塊后,加入少量滅菌的生理鹽水進行細致研磨。隨后,將此混合物加入5~10倍體積的滅菌生理鹽水稀釋,并進行過濾以獲取上清液。將此上清液以每只0.2 ml的劑量,腹腔內(nèi)接種至3只健康且未曾患病的實驗小白鼠中。在18~20小時后,接種小白鼠均發(fā)生死亡。將其腹腔滲出液制備成涂片,并經(jīng)過染色及顯微鏡檢查,可觀察到與原病死羊體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的桿菌完全一致的細菌,進一步證實了病原體的致病性。

        五、羊炭疽病的預防方法及治療方法

        1、預防方法

        ①加強環(huán)境管理

        環(huán)境管理的核心在于控制和減少炭疽桿菌在環(huán)境中的存在和傳播。具體而言,應定期對養(yǎng)殖場的土壤進行檢測,尤其是在有炭疽病歷史的區(qū)域,因為炭疽桿菌能夠以孢子形態(tài)在土壤中存活長達數(shù)十年。一旦發(fā)現(xiàn)炭疽孢子,必須立即采取相應措施,例如對土壤進行深翻和滅菌處理,以防止羊只與受污染的土壤接觸。此外,飼料和水源的管理同樣至關(guān)重要。飼料應儲存在干燥且清潔的環(huán)境中,避免野生動物的接觸與污染,因為其可能是炭疽桿菌的潛在傳播者。水源亦需定期檢查,確保其未受污染,從而防止炭疽孢子通過水源傳播給羊只。作為預防措施的一部分,環(huán)境消毒同樣不可忽視。應定期使用高效的消毒劑對養(yǎng)殖設施、工具以及養(yǎng)殖場周邊環(huán)境進行全面消毒,特別是在處理疑似或確診炭疽病致死的羊只時。

        ②規(guī)范人員管理

        人員管理在預防羊炭疽病中同樣占有重要位置。所有接觸羊只的工作人員和管理者都應接受有關(guān)炭疽病的教育和培訓,以確保他們了解炭疽病的傳播方式、癥狀以及防控措施。這不僅有助于早期識別疫病,還能防止人為的交叉污染。工作人員在進入養(yǎng)殖區(qū)前應更換工作服和鞋子,并進行手部消毒,減少病原體帶入養(yǎng)殖環(huán)境的風險。同樣,在離開養(yǎng)殖區(qū)后,應采取相應的衛(wèi)生措施,以防止將病原體帶出養(yǎng)殖場。對于處理疑似或確診炭疽病死亡的羊只,必須由專業(yè)人員按照生物安全措施進行,并確保穿戴適當?shù)膫€人防護裝備,防止病原體通過空氣或直接接觸傳播給人或其他動物。所有處理后的遺體和廢棄物都應安全處置,以避免環(huán)境再次被污染。

        ③科學處理病羊

        針對病羊的處理需遵循規(guī)范化流程,以防止其長期留存或被誤食。在處理病羊時,應優(yōu)先考慮采用焚燒或深埋的方式,并對受到病羊尸體污染的土壤實施相同的處理方法,包括上覆石灰進行消毒處理。在處理過程中,特別注意避免羊只的血液和排泄物對土地的污染,并在污染發(fā)生后徹底進行清潔和消毒。對于曾發(fā)生病羊的羊舍,建議使用2%的熱堿水或20%的漂白粉溶液進行消毒處理,具體方法為先進行1小時消毒,間隔1小時后再次進行1小時的消毒,此方法可有效殺滅尚未形成芽孢的細菌。此外,對于病羊所使用的墊草、接觸過的飲水設施以及病羊糞便的處理,推薦采用焚燒的方式進行徹底處理。完成以上所有處理步驟后,應進行全面的炭疽病發(fā)病源頭調(diào)查,確保羊群遠離潛在的危險區(qū)域。在地方性疾病大面積爆發(fā)時,應盡量避免羊群接觸公共牧區(qū)。若疾病通過飼料傳播,必須及時更換為干凈的飼料,以避免進一步傳播。

        ④科學注射疫苗

        疫苗接種是提高防疫效能的關(guān)鍵措施。為減少綿羊炭疽病的發(fā)生率,建議對綿羊進行皮下注射無毒芽孢疫苗,劑量為0.5ml/次。然而,該疫苗對山羊并不適用。對于既適用于綿羊又適用于山羊的二號疫苗,其接種方式亦為皮下注射,推薦劑量為1ml/次。需要注意的是,上述疫苗均不適宜于1歲以下的羊只。為主動防控炭疽病,應確保羊只每年按時接種疫苗。在被動免疫方面,一旦羊群中出現(xiàn)炭疽病例,除了隔離病患羊只外,還應為其他羊只注射抗血清,并根據(jù)藥物說明書調(diào)整劑量。在此,抗血清提供的免疫保護期限大約為1個月,因此無法提供長期免疫保護,僅適用于短期、緊急的預防措施,屬于輔助性防疫手段。

        2、治療方法

        羊只出現(xiàn)癥狀時,可通過注射青霉素、金霉素、鏈霉素等抗生素進行積極的藥物治療。具體到青霉素的應用,建議通過靜脈注射的方式進行,并根據(jù)病情需要采用較高劑量,每日2次。在用藥期間,應持續(xù)監(jiān)測羊只的體溫,并在體溫恢復至正常范圍后繼續(xù)用藥2~3天以鞏固療效;青霉素亦可通過肌內(nèi)注射方式給藥,首次劑量為640萬單位,之后的治療期間以每日4~6次的頻率注射,每次320萬單位。對于磺胺類藥物的使用,可以選擇注射或口服的給藥方式,劑量控制在0.1~0.2g/kg體重。肌內(nèi)注射的頻率為每日2次,而口服給藥時,則采取灌服方式,每日3~4次。在使用抗血清進行治療時,可以通過靜脈注射或皮下注射的方法給藥,每次給藥量為50~120ml。用藥后應繼續(xù)監(jiān)控體溫變化,若12小時內(nèi)體溫仍異常,則需再次給藥。

        炭疽桿菌能夠通過呼吸道、消化道、皮膚等多種途徑侵入羊只體內(nèi),在局部產(chǎn)生毒素,導致組織和器官的出血性浸潤、壞死和水腫,從而觸發(fā)炭疽病。這種病原體通過淋巴系統(tǒng)和血液循環(huán)實現(xiàn)全身擴散,可能誘發(fā)敗血癥和繼發(fā)性腦膜炎等嚴重疾病。羊炭疽病的有效管理和控制要求從診斷、預防、治療多個層面進行綜合策略的實施。準確的實驗室診斷方法是及時發(fā)現(xiàn)和控制疫病的前提,而科學合理的預防措施則是減少病發(fā)率和控制疫病蔓延的關(guān)鍵。此外,一旦動物出現(xiàn)癥狀,及時有效的治療措施能夠顯著降低死亡率,減輕疫病的影響。在此基礎上,環(huán)境管理、人員管理、科學處理病羊以及科學注射疫苗等措施,共同構(gòu)成了一個全面的羊炭疽病防控體系。隨著科技進步和研究的深入,未來對于炭疽病的診斷技術(shù)將更加精確,防控措施更加科學有效,治療方法也將更加多樣化和個性化。通過跨學科合作,整合微生物學、獸醫(yī)學、流行病學和生態(tài)學等領域的研究成果,可以為羊炭疽病的控制提供更加堅實的科學基礎。同時,提高公眾對于炭疽病的認識和理解,加強疫病監(jiān)測和風險評估,也是維護公共衛(wèi)生安全的重要環(huán)節(jié)。

        (作者單位:719499陜西省榆林市府谷縣動物疫病預防控制中心)

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