摘要：：為了了解評(píng)估寧夏地區(qū)2019—2022年羊口蹄疫O型免疫抗體檢測(cè)效果情況，從22個(gè)縣、市（區(qū)）分別隨機(jī)抽取1個(gè)規(guī)模羊場(chǎng)、5個(gè)散養(yǎng)戶，共264個(gè)規(guī)模羊場(chǎng)、880個(gè)散養(yǎng)戶，采集5330份羊血清樣品，通過液相阻斷ELISA方法進(jìn)行O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)。結(jié)果：2019—2022年羊血清樣品口蹄疫O型免疫抗體合格率分別為97.58%、87.95%、95.61%和93.14%，均達(dá)到國家規(guī)定≥70%的標(biāo)準(zhǔn)要求。結(jié)論：寧夏地區(qū)22個(gè)縣、市（區(qū)）羊O型口蹄疫免疫抗體效果整體較好，強(qiáng)制免疫工作達(dá)到預(yù)期效果，但部分地區(qū)免疫水平偏低，仍需要加強(qiáng)基層動(dòng)物防疫體系建設(shè)，強(qiáng)化養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物防疫主體責(zé)任，加大強(qiáng)制免疫宣傳力度，及時(shí)進(jìn)行排查補(bǔ)免，提高羊群免疫抗體水平，從而達(dá)到保護(hù)效果。

關(guān)鍵詞：羊O型口蹄疫；抗體檢測(cè)；分析

口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV）是細(xì)小核糖核酸病毒科（picornaviridae）口瘡毒屬（aphthovirus）的成員[1]。FMDV有七個(gè)不同的血清型：A、O、C、SAT1（南非1型）、SAT2（南非2型） 、SAT3（南非3型）和Asia1（亞洲1型）。各型之間不產(chǎn)生交叉免疫。易于出錯(cuò)的RNA復(fù)制過程發(fā)生的突變、重組以及宿主選擇（host selection）不斷產(chǎn)生新的FMDV變異株[2]。FMD潛伏期2～14 d?！禣IE陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》描述的潛伏期14 d。臨床癥狀的嚴(yán)重程度因毒株、感染劑量、年齡、動(dòng)物品質(zhì)、宿主物種和免疫水平而異。癥狀表現(xiàn)從輕微或不明顯到嚴(yán)重。發(fā)病率可能接近100%。成年動(dòng)物通常死亡率低（1%～5%），但幼犢、羔羊和仔豬較高（20%或更高）。在不發(fā)生繼發(fā)或混合感染情況下，通常2周左右康復(fù)。為掌握寧夏地區(qū)羊O型口蹄疫強(qiáng)制免疫效果，寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心每年對(duì)全區(qū)22個(gè)縣（市、區(qū)）羊口蹄疫免疫血清開展隨機(jī)抽查監(jiān)測(cè)，為科學(xué)防控羊口蹄疫提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

分別于2019—2022年春秋集中免疫結(jié)束后，從22個(gè)縣、市（區(qū)）分別隨機(jī)抽取1個(gè)規(guī)模羊場(chǎng)、5個(gè)散養(yǎng)戶，采集免疫注射20 d以上的羊全血樣品并及時(shí)按要求分離血清備用。

1.2 儀器和設(shè)備

單道微量移液器和多道微量移液器，購自Eppendorf公司；洗板機(jī)，購自北京普朗新技術(shù)有限公司；酶標(biāo)儀，購自美國Bio-Rad公司；37 ℃恒溫箱，購自法國Jouan Innovens。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑

實(shí)驗(yàn)試劑采用中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，所有試劑均按照產(chǎn)品說明書要求保存并使用。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

采用口蹄疫液相阻斷ELISA試驗(yàn)方法對(duì)羊血清進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)，檢測(cè)方法按檢測(cè)試劑盒使用說明書進(jìn)行?？贵w液相阻斷ELISA的抗體效價(jià)≥26判定為合格，存欄家畜免疫抗體合格率≥70%即判定為免疫抗體水平合格。

1.5樣品來源及處理

中心實(shí)驗(yàn)室于2019—2022年采集寧夏地區(qū)羊血液樣本共5 330份，每年采集樣品情況（見表1）。樣品采集后將采血管傾斜45 ℃放置，室溫靜置2～4 h，待血液完全凝固后血清自然析出，3 000 r/min離心5 min，將上清轉(zhuǎn)移至無菌離心管中，做好標(biāo)記，置-20 ℃保存、備用。

2 結(jié)果與分析

1）2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫春秋季集中免疫抗體檢測(cè)結(jié)果（見表2）。由表2可知，2019—2022年，全年平均羊口蹄疫O型抗體檢測(cè)合格率分別為97.58%、87.95%、95.61%、93.14%，均高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部≥70%的要求。

2）2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫春季規(guī)模場(chǎng)、散養(yǎng)戶集中免疫抗體檢測(cè)合格率分別為96.21%、81.52%、94.09%、96.9%，均達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求（見表3）。

3）2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫秋季規(guī)模場(chǎng)、散養(yǎng)戶集中免疫抗體檢測(cè)合格率分別為98.64%、94.39%、96.21%、89.09%，均達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求（見表4）。

3 討論

2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫春季集中免疫抗體檢測(cè)結(jié)果顯示，全區(qū)羊O型口蹄疫整體抗體合格率均超過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定≥70%要求，其中2019年秋季更是高達(dá)98.94%，能夠起到較好的免疫保護(hù)水平，表明寧夏地區(qū)動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫工作落實(shí)到位。

1）動(dòng)物疫病保持較高免疫水平。2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫免疫抗體合格率均超過70%以上，分別為97.58%、87.95%、95.61%、93.14%。

2）繼續(xù)高度重視動(dòng)物疫病防控工作。雖然2019—2022年未發(fā)生口蹄疫等疫情，但疫情的風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)主要在免疫薄弱環(huán)節(jié)，如活畜調(diào)運(yùn)環(huán)節(jié)和免疫不確實(shí)的養(yǎng)殖場(chǎng)點(diǎn)。

3）加強(qiáng)活畜移動(dòng)監(jiān)管?；钚蟮漠惖匾苿?dòng)與動(dòng)物疫病的發(fā)生密切相關(guān)。建議完善活畜調(diào)運(yùn)的檢疫監(jiān)管、運(yùn)前免疫、追溯調(diào)查等措施，減少運(yùn)輸環(huán)節(jié)的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

4 建議

動(dòng)物免疫接種是防止傳染病發(fā)生最直接有效的方法，國家對(duì)動(dòng)物疫病實(shí)行預(yù)防為主、防治結(jié)合、分類管理、依靠科學(xué)、依靠群眾的方針，加強(qiáng)基礎(chǔ)免疫，有效防控重大動(dòng)物疫病。繼續(xù)做好口蹄疫、高致病性禽流感等6種動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫工作，在春、秋兩季集中免疫工作中，寧夏地區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳畜牧獸醫(yī)主管部門組織開展大規(guī)模疫苗接種活動(dòng)，力求應(yīng)免全免，總體達(dá)到群體免疫的基礎(chǔ)水平。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，2019—2022年寧夏地區(qū)羊口蹄疫免疫效果總體較好，基本達(dá)到了預(yù)期的目標(biāo)。

1）切實(shí)落實(shí)生產(chǎn)經(jīng)營者的防疫主體責(zé)任。寧夏地區(qū)制定“先打后補(bǔ)”標(biāo)準(zhǔn)，推進(jìn)各縣“先打后補(bǔ)”工作，進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)強(qiáng)制免疫養(yǎng)殖場(chǎng)戶主采購、財(cái)政直補(bǔ)的政策。大力培育和鼓勵(lì)獸醫(yī)社會(huì)化服務(wù)組織發(fā)展，拓展獸醫(yī)社會(huì)化服務(wù)組織服務(wù)內(nèi)容。進(jìn)一步提高各個(gè)環(huán)節(jié)生產(chǎn)經(jīng)營者的防疫意識(shí)，改造防疫設(shè)施，健全防疫制度，提高生物安全水平，壓實(shí)防疫主體責(zé)任[3]。要加強(qiáng)對(duì)生產(chǎn)經(jīng)營者與群眾開展相關(guān)動(dòng)物疫病防控知識(shí)的宣傳與指導(dǎo)，增強(qiáng)養(yǎng)殖戶疫病防治意識(shí)與疫情報(bào)告意識(shí)，鼓勵(lì)廣大群眾互相監(jiān)督，積極主動(dòng)上報(bào)動(dòng)物疫情，盡可能地實(shí)現(xiàn)疫情早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早診斷、早處置。

2）切實(shí)強(qiáng)化疫病防控關(guān)鍵措施的落實(shí)。堅(jiān)持半年和全年動(dòng)物疫情監(jiān)測(cè)分析培訓(xùn)工作；創(chuàng)新人才培養(yǎng)方式，繼續(xù)開展全區(qū)獸醫(yī)技術(shù)骨干人才輪訓(xùn)；選送一批有想法、肯干事、有能力的鄉(xiāng)鎮(zhèn)和獸醫(yī)社會(huì)化服務(wù)組織的技術(shù)骨干在高校開展封閉式培訓(xùn)，并將培訓(xùn)知識(shí)應(yīng)用于實(shí)際工作中。掌握真實(shí)的養(yǎng)殖情況，及時(shí)整頓各類養(yǎng)殖戶，清退落后養(yǎng)殖散戶；要詳細(xì)梳理販運(yùn)人員和販運(yùn)車輛相關(guān)信息，規(guī)范其經(jīng)營行為；要真正做到“到村、到場(chǎng)、到戶”的疫情排查；要做到科學(xué)抽樣、準(zhǔn)確采樣、真實(shí)檢測(cè)的疫病監(jiān)測(cè)。只有疫病防控的各個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)都正常運(yùn)轉(zhuǎn)起來，整個(gè)動(dòng)物防疫體系才能有效運(yùn)行[4]。

3）全力做好突發(fā)疫情的應(yīng)急處置。按照自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳獸醫(yī)局動(dòng)物疫病凈化總體要求，結(jié)合寧夏科技廳、農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳主推技術(shù)和動(dòng)物疫病凈化項(xiàng)目建設(shè)，進(jìn)一步做好動(dòng)物疫病防控督查，對(duì)督查中存在問題的相關(guān)養(yǎng)殖場(chǎng)及縣、鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)進(jìn)行通報(bào)，督促及時(shí)整改。各級(jí)部門應(yīng)加強(qiáng)人員隊(duì)伍、技術(shù)力量及防控物資等的應(yīng)急儲(chǔ)備，當(dāng)突發(fā)動(dòng)物疫情時(shí)，要堅(jiān)持“早、快、嚴(yán)、小”原則，力爭(zhēng)在最短時(shí)間內(nèi)徹底拔點(diǎn)滅源，防止疫情擴(kuò)散蔓延。

4）強(qiáng)化聯(lián)防聯(lián)控，提高風(fēng)險(xiǎn)管理能力。進(jìn)一步加強(qiáng)科研院所等部門的人畜共患病聯(lián)防聯(lián)控和技術(shù)研發(fā)與應(yīng)用工作。獸醫(yī)部門單打獨(dú)斗是不可能做好動(dòng)物疫病防控工作，從養(yǎng)殖到屠宰的全產(chǎn)業(yè)鏈條上，有許多動(dòng)物疫情發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)。只有強(qiáng)化多部門的聯(lián)防聯(lián)控，才能切實(shí)提高全鏈條的風(fēng)險(xiǎn)管控能力，規(guī)范各類場(chǎng)所和車輛的清洗消毒程序，加強(qiáng)落實(shí)屠宰環(huán)節(jié)生物安全管理、樣品監(jiān)測(cè)、清洗消毒和無害化處理等措施?！?/p>

參考文獻(xiàn)：

[1] 朱紅剛，寧華杰，張韜，等.2018-2020年長沙市牛羊O型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)分析[J].河南農(nóng)業(yè)，2021（24）：59-60.

[2] 索南卓瑪.牛羊O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2011，27（6）：44.

[3] 張玉巧.2017-2021年順昌縣牛羊O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)與分析[J].福建畜牧獸醫(yī)，2022，44（5）：17-19+22.

[4] 黃宇，何文娜，陳忠偉，等.2017-2019年廣西玉林市牛羊口蹄疫和小反芻獸疫血清抗體檢測(cè)[J].中國動(dòng)物檢疫，2021，38（02）：13-19.

收稿日期：2023-10-07

基金項(xiàng)目：自治區(qū)重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目《規(guī)模羊場(chǎng)地方高發(fā)疫病快速診斷技術(shù)研究與示范》（2021BEF02026）；自治區(qū)青年拔尖人才“自治區(qū)學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人”后備人選人才項(xiàng)目；自治區(qū)動(dòng)物疫病凈化科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（2020CXTDLX05）。

作者簡(jiǎn)介：李莉（1987—" ），女，寧夏鹽池人，本科，獸醫(yī)師，研究方向：畜禽疾病診斷；李知新（1981- ），寧夏隆德人，博士，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事畜禽疾病診斷工作。

*通信作者：馬龍（1983.09— ），寧夏固原人，本科，獸醫(yī)師，研究方向：畜禽疾病診斷。