摘要：為探索長期連作狀態(tài)下煙草根系分泌物內(nèi)含有的化感物質(zhì)組成成分，設(shè)置石英砂栽培和連作土壤栽培2種煙草培養(yǎng)處理，對2種煙草不同生長時期的根系分泌物進行提取，利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（ultra-highperformance liquid chromatography tandem mass spectrometry， UHPLC-MS/MS）對提取的根系分泌物進行分析，通過數(shù)據(jù)庫比對、差異分析和時間聚類分析等方法篩選連作煙草根系分泌物中潛在的化感物質(zhì)。結(jié)果表明，共篩選出11類潛在化感物質(zhì)，分別為生物堿、萜類、胺類、有機酸、苯酸及其衍生物、脂肪酸、酚類、氨基酸和多肽、香豆素、肉桂酸及其衍生物和其他。生物堿、萜類、胺類和有機酸4類化合物相對含量占所有化合物的73.3%。L-煙堿、熊果酸、β-氨基丙腈、5-羥基吲哚乙酸、早熟素Ⅱ、單乙基己基鄰苯二甲酸、己內(nèi)酰胺、姜酚、L-乳酸、鄰苯二甲酸二乙酯和2，3-二氫-3，5-二羥基-2-氧代-3-吲哚乙酸甲酯是連作煙草根系分泌物中相對含量較高的潛在化感物質(zhì)。研究結(jié)果為煙草根系化感物質(zhì)的化感作用研究及緩解煙草連作障礙方法研究提供理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：煙草；根系分泌物；化感物質(zhì)；化感作用；連作障礙；UHPLC-MS/MS

doi：10.13304/j.nykjdb.2023.0034

中圖分類號：S181；S572 文獻標志碼：A 文章編號：1008?0864（2024）07?0136?11

在煙草的生長過程中，其根系會不斷向根際周圍釋放大量的化合物，這些化合物被稱為根系分泌物[1?2]。根系分泌物是植物與土壤環(huán)境進行物質(zhì)和能量交換及信息傳遞的重要載體，例如植物根系之間的相互作用、根系與微生物的相互作用等[3?4]。植物根系分泌物是化感物質(zhì)的重要來源，產(chǎn)生的化感物質(zhì)會抑制植物種子萌發(fā)，擾亂植物的生長過程，在農(nóng)田系統(tǒng)中化感物質(zhì)會直接或間接影響相鄰的同種作物或下茬作物的生長發(fā)育[5?6]?；凶饔帽徽J為是供體植物釋放的具有生物活性的化學物質(zhì)與受體植物之間產(chǎn)生相互化學作用的過程[7]。有研究表明，煙草根系分泌物中的鄰苯二甲酸酯，在含量大于0.5 mmol·L-1時對煙草種子萌發(fā)和幼苗生長表現(xiàn)出抑制作用[8]。

過度耕種所引發(fā)的連作障礙會造成煙田不同程度的土壤養(yǎng)分耗竭、生物多樣性下降、土壤酸化或鹽堿化、煙草生長發(fā)育減緩等問題[8-10]。研究表明，長期單一作物種植會降低土壤中氮、磷和鉀等養(yǎng)分含量，導(dǎo)致植物吸收養(yǎng)分不平衡[11]以及化感自毒物質(zhì)在土壤中不斷累積，加劇了連作下土傳病害的發(fā)生[12?13]。長期連續(xù)種植棉花，其根系分泌物在土壤中大量累積，改變根際微生態(tài)環(huán)境，增加病蟲害[14]的發(fā)生。王勁松等[15]研究發(fā)現(xiàn)，長期連作的高粱根系分泌物組成單一，會導(dǎo)致根際微生物的代謝活性、群落功能和多樣性下降。

已有研究表明，根系分泌物作為化感物質(zhì)的重要輸出源之一，是探索作物補植問題的重要因素[2，16]。連作障礙的發(fā)生會對植物的生理活動造成影響，因此，本研究在理想生長環(huán)境以及長期連作土壤2種生長條件下，對長期連作條件下煙草根系分泌物中的潛在化感物質(zhì)成分進行篩選分析，以期為長期連作煙草根系分泌物中化感物質(zhì)的研究和生態(tài)應(yīng)用提供研究依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本研究選用的煙草品種為‘云煙87’，從連作5 年以上煙田隨機采集土壤，土壤類型為壤土。土壤樣品經(jīng)自然風干、混合和過篩，去除多余植物根莖、石子等，進行后續(xù)盆栽試驗。試驗使用的塑料花盆上口直徑34 cm、內(nèi)口直徑31 cm、高25 cm。試驗所用Hoagland營養(yǎng)液組分如下：KNO3 0.506 g·L-1，Ca（NO3）2 1.181 g·L-1，MgSO4·7H2O 0.493 g·L-1，KH2PO4 0.14 g·L-1，H3BO3 0.028 g·L-1，MnCl2·4H2O0.020 g·L-1，ZnSO4·7H2O 0.023 g·L-1，CuSO4·5H2O0.08 g·L-1，Na2MoO4·2H2O 0.010 g·L-1， EDTA-Fe6.51 g·L-1。

1.2 試驗設(shè)計

1.2.1 煙草培養(yǎng)

試驗設(shè)置砂培和土培2種煙草盆栽試驗。煙草種子經(jīng)消毒、浸種后，使用煙草漂浮育苗方法進行育苗，待幼苗長至5葉1心時，選取長勢一致的煙草幼苗進行移栽，煙草移栽后共培養(yǎng)60 d。煙草砂培所用石英砂用10%（體積分數(shù)）鹽酸進行浸泡消毒，使用蒸餾水沖洗至pH穩(wěn)定后，每個塑料花盆裝入12.5 kg石英砂；煙草土培使用連作5年以上煙田土壤，每個塑料花盆裝入12.5 kg土壤。每種培養(yǎng)方式分別移栽30 株煙草幼苗，共60株；在移栽后30、45、60 d每種培養(yǎng)方式隨機選取6株煙草，收集煙草根系分泌物，共收集36個根系分泌物樣品（砂培：S30、S45、S60；土培：T30、T45、T60）。每隔1 d澆Hoagland營養(yǎng)液200 mL。

1.2.2 煙草根系分泌物的收集

煙草根系分泌物選擇土壤-水培法進行收集[17-19]。將長勢良好的煙草植株從土壤和石英砂中取出，盡量避免對根部的損傷，保持根的完整。用去離子水緩緩洗去根部附著的土壤和石英砂顆粒，將沖洗干凈的煙株置于去離子水中浸泡10 min，然后將煙株置于1 L去離子水中（淹沒完整的根部），在25 ℃恒溫恒濕的人工氣候箱中培養(yǎng)24 h。將煙株取出后，根系分泌物提取液用0.22 μm水系濾膜過濾，將過濾后的溶液進行真空冷凍干燥。稱取5 mg樣品粉末，加入500 μL甲醇提取液（含同位素標記內(nèi)標混合物），35 Hz 研磨4 min，超聲冰水浴5 min，-40 ℃靜置1 h，在4 ℃、12 000 r·min-1條件下離心15 min，取上清液進行超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（ultra-high performance liquid chromatographytandem mass spectrometry，UHPLC-MS/MS）上機檢測。

1.2.3 UHPLC-MS/MS 上機檢測條件

煙草根系分泌物使用Vanquish（Thermo Fisher Scientific）超高效液相色譜儀上機檢測，通過Wasters ACQUITY UPLCHSS T3（2.1 mm×100.0 mm，18 μm）液相色譜柱進行色譜分離。液相色譜A 相為水相，含5 mmol·L-1 乙酸銨和5 mmol·L-1 乙酸，B相為乙腈。樣品盤溫度4 ℃ ，進樣體積2 μL。Orbitrap Exploris 120質(zhì)譜儀在Xcalibur軟件控制下進行一級、二級質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集，參數(shù)如下：Sheath gas flow rate： 50 Arb， Aux gas flow rate： 15Arb， Capillary temperature： 320 ℃， Full ms resolution：60 000， MS/MS resolution： 15 000， Collision energy：10/30/60 in NCE mode， Spray Voltage： 3.8 kV（positive）或-3.4 kV （negative）。

1.3 數(shù)據(jù)分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Proteo Wizard軟件轉(zhuǎn)成mzXML格式后，使用R語言進行峰識別、峰提取、峰對齊等處理，然后進行數(shù)據(jù)預(yù)處理，保留樣品中大于80%的化合物，對缺失值進行模擬填補（最小值1/2），利用內(nèi)標進行歸一化。得到的原始數(shù)據(jù)矩陣使用Biotree DB（Version 2.1）自建二級質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫匹配進行物質(zhì)注釋。化合物數(shù)據(jù)使用SIMCA軟件進行主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法（orthogonal partial least squaresdiscrminantanalysis，OPLS-DA）建模。使用R 語言（Version 4.2.1）中table函數(shù)統(tǒng)計各分類的化合物數(shù)量，并使用Origin 2022b軟件繪制分泌物分類餅圖。使用R語言ggplot2函數(shù)繪制差異根系分泌物火山圖，使用mfuzz函數(shù)對不同時期連作煙草根系分泌物進行時間序列聚類分析。鑒定出的化合物豐度均使用內(nèi)標歸一化為0到1之間的范圍。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙草根系分泌物成分鑒定

從正、負2 種離子模式質(zhì)控樣本（qualitycontrol，QC）的總離子流可以看出，在本研究的檢測條件下，峰形及分布良好，表明超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UHPLC-MS/MS）檢測所獲得的數(shù)據(jù)可靠（圖1）。保留每組樣品中非零值，且匹配度80%以上的代謝物，陽離子模式下共獲得890種代謝物，負離子模式下共鑒定出344種代謝物。

對根系分泌物在Super Class 層級上進行分類，正離子模式鑒定的根系分泌物在Super Class層級上被分為14類，其中，脂質(zhì)和類脂質(zhì)分子中包含的化合物種類最多，所占比重為34.04%，其次是有機雜環(huán)化合物、有機酸及其衍生物和有機氧化合物，所占比重分別為19.76%、12.46% 和10.94%（圖2A）。負離子模式鑒定的根系分泌物在Super Class層級上被分為10類，其中，脂質(zhì)和類脂質(zhì)分子中包含的化合物種類最多，所占比重為31.78%，其次是苯類化合物、有機酸及其衍生物、苯丙烷和聚酮類化合物，所占比重分別為16.82%、14.49%和13.08%（圖2B）。

2.2 不同培養(yǎng)方式煙草根系分泌物的差異分析

為篩選出2種培養(yǎng)方式煙草根系主要的差異分泌物，對不同時期根系分泌物樣本數(shù)據(jù)進行正交偏最小二乘法判別分析（OPLS-DA），可以實現(xiàn)2種培養(yǎng)方式的煙草根系分泌物樣品的有效區(qū)分（圖3），本次分析中的R2gt;0.5，模型預(yù)測指數(shù)Q2gt;0.5，模型擬合結(jié)果良好[18]。之后對構(gòu)建的OPLS-DA模型進行置換檢驗（n=200），如圖4所示，各模型Q2回歸線與Y 軸交點小于零，表明構(gòu)建模型沒有過擬合，認為模型結(jié)果準確有效，可以用于不同時期2種培養(yǎng)方式的煙草根系分泌物鑒別分析。

經(jīng)過對數(shù)據(jù)進行差異分析，發(fā)現(xiàn)2種培養(yǎng)方式的煙草在不同時期根系中表現(xiàn)出了差異代謝，根據(jù)OPLS-DA模型計算各代謝物的VIP值，篩選出各時期VIPgt;1，Qlt;0.05且|log2FC|gt;2的差異代謝物（圖5）。砂培組與土培組相比，在煙草移栽后30 d時，篩選出32種上調(diào)代謝物和27種下調(diào)代謝物；在煙草移栽后45 d時，篩選出121種上調(diào)代謝物和18種下調(diào)代謝物；在煙草移栽后60 d時，篩選出148種上調(diào)代謝物和13種下調(diào)代謝物。根據(jù)不同時間煙草根系差異代謝物，篩選出與砂培煙草相比土培煙草根系代謝物上調(diào)的代謝物（表1）。

2.3 土培煙草根系分泌物時間序列分析

為了研究差異代謝物在煙草生長不同時期中的相對含量變化趨勢，并篩選生長過程中重要的根系分泌物，將所有分組比較中按照篩選標準鑒定得到的全部差異代謝物的相對含量進行Z 分（z-score）標準化，之后應(yīng)用模糊C-均值法對3個時期的煙草根系分泌物進行聚類分析。結(jié)果顯示，共觀察到8個不同的時間模式簇（Cluster），代表不同變化趨勢的根系分泌物（圖6），在煙草生長期的第30～60天時，簇1、4和6表示先下調(diào)后上調(diào)的代謝物，簇2表示先上調(diào)后下調(diào)的代謝物，簇3、5和7表示持續(xù)下調(diào)的代謝物，簇8表示持續(xù)上調(diào)的代謝物。根據(jù)聚類結(jié)果，篩選同類簇中membershipgt;0.5 的重要代謝物，共106 種代謝物。

2.4 輪作煙草根系分泌物潛在化感物質(zhì)篩選

依據(jù)已有對植物化感物質(zhì)的分類[19-22]，對篩選出的根系分泌物進行分類，并選擇相對含量大于0.005的化合物。由圖7可知，篩選出的潛在化感物質(zhì)共分屬11大類，分別是生物堿、萜類、胺類、有機酸、苯酸及其衍生物、脂肪酸、酚類、氨基酸和多肽、香豆素、肉桂酸及其衍生物和其他。其中，生物堿、萜類、胺類和有機酸4類化感物質(zhì)占所有潛在化感物質(zhì)的73.3%。由表2可知，在44種潛在化感物質(zhì)種相對含量大于0.03的物質(zhì)分屬于苯酸及其衍生物、萜類、有機酸、生物堿、胺類、酚類和其他7 種，分別是L-煙堿、熊果酸、β-氨基丙腈、5-羥基吲哚乙酸、早熟素Ⅱ、單乙基己基鄰苯二甲酸、己內(nèi)酰胺、姜酚、L-乳酸、鄰苯二甲酸二乙酯和2，3-二氫-3，5-二羥基-2-氧代-3-吲哚乙酸甲酯。

3 討論

煙草化感物質(zhì)對煙株的自毒作用是一種特殊的種內(nèi)競爭，它會造成競爭個體之間的生存適應(yīng)能力下降，導(dǎo)致連作障礙的發(fā)生[23]。有研究表明，長期連作會影響土壤中化感物質(zhì)的組成和含量，連作年限越長差異越大[15，24?25]。于會泳等[26]研究發(fā)現(xiàn)，煙草根系分泌物中包含的有機酸、酰胺類、酯類、甘油和煙堿是可能導(dǎo)致煙草連作障礙的化感物質(zhì)。對叔丁基苯甲酸、對羥基苯甲酸等化感物質(zhì)通過抑制氮循環(huán)，降低土壤中的營養(yǎng)物質(zhì)含量，對作物的生長產(chǎn)生影響。種子的萌發(fā)和植物幼苗的生長可以用來評估化感物質(zhì)對植物自毒作用的情況[27?28]。Deng 等[29]研究發(fā)現(xiàn)，煙草根系分泌物中鄰苯二甲酸酯對煙草種子和幼苗生長有顯著的自毒作用。根系分泌物中熊果酸對糖膠樹以及綠蘭種子和幼苗生長有抑制作用[30?31]。

根系分泌物中的化感物質(zhì)與根際微生物群落之間存在著相互作用，化感物質(zhì)對根際群落的組成和結(jié)構(gòu)有顯著影響[32]。如玉米根系分泌物中的抗生素二萜類化合物有助于根際微生物的組裝[33]，酚酸類物質(zhì)會導(dǎo)致土壤根際真菌群落結(jié)構(gòu)改變，增加群落中病原菌負荷，導(dǎo)致土傳病害增加[34?35]。白羽祥等[36]研究發(fā)現(xiàn)，根系分泌物中的酚酸類物質(zhì)在低水平時對煙草黑莖病菌有促進作用。劉艷霞等[37]研究表明，煙草根系分泌物提取物能促進根際微生物中的病原菌生長，抑制拮抗菌生長，病原菌對分泌物中的苯甲酸和3-苯丙酸利用率高于拮抗菌，這是造成連作煙草青枯病頻發(fā)的重要原因之一。

本研究通過對非連作和連作2種煙草的根系分泌物進行比較分析，共篩選出44種潛在化感物質(zhì)，分屬生物堿、萜類、胺類、有機酸、苯酸及其衍生物、脂肪酸、酚類、氨基酸和多肽、香豆素、肉桂酸及衍生物和其他11大類。潛在化感物質(zhì)組分中含量較高（gt;0.03）的11種化合物分別是L-煙堿、熊果酸、β-氨基丙腈、5-羥基吲哚乙酸、早熟素Ⅱ、單乙基己基鄰苯二甲酸、己內(nèi)酰胺、姜酚、L-乳酸、鄰苯二甲酸二乙酯和2，3-二氫-3，5-二羥基-2-氧代-3-吲哚乙酸甲酯。對連作煙草根系分泌物中的化感物質(zhì)研究可以為化感作用以及緩解煙草連作障礙方法研究提供理論基礎(chǔ)，所篩選化感物質(zhì)的化感效應(yīng)還需進一步研究。

參 考 文 獻

［1］ BAIS H P， WEIR T L， PERRY L G， et al .. The role of rootexudates in rhizosphere interactions with plants and otherorganisms [J]. Annu. Rev. Plant Biol.， 2006， 57（1）： 233-266.

［2］ 劉帥，黃坤，陳樂，等.煙草根系分泌物及其化感作用研究進展[J].亞熱帶農(nóng)業(yè)研究，2018，14（1）：61-65.

LIU S， HUANG K ， CHEN L ， et al .. Research progress ontobacco root exudates and their allelopathy [J]. Subtrop. Agric.Res.， 2018，14（1）：61-65.

［3］ VIVES-PERIS V， DE OLLAS C， GOMEZ-CADENAS A， et al ..Root exudates： from plant to rhizosphere and beyond [J]. PlantCell Rep.， 2020， 39（1）： 3-17

［4］ 蔡瑩，于曉菲.植物根系分泌物的生態(tài)效應(yīng)研究[J].環(huán)境生態(tài)學，2022，4（9）：9-16.

CAI Y， YU X F. Study on the ecological effects of plant rootexudates [J]. Environ. Ecol.， 2022，4（9）：9-16.

［5］ MILLER D A. Allelopathy in forage crop systems [J]. Agron. J.，1996， 88（6）： 854-859.

［6］ XING Y， ZHANG L H， SHI C P， et al .. The extraction，isolation and identification of exudates from the roots ofFlaveria bidentis [J]. J. Integr. Agric.， 2014， 13（1）： 105-114.

［7］ KATO-NOGUCHI H. Allelopathy and allelochemicals ofimperata cylindrica as an invasive plant species [J/OL]. Plants，2022， 11（19）： 2551 [2022-12-20]. https： doi.org/10.3390/plants11192551.

［8］ DENG J J， ZHANG S X， HU J W， et al .. Toxic effects ofphthalate esters in tobacco root exudates on seed germinationand seedling growth [J]. Pedosphere， 2017， 27（6）： 1073-1082.

［9］ 時鵬，張繼光，王正旭，等.煙草連作障礙的癥狀機理及防治措施[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2011，39（1）：120-122，124.

SHI P， ZHANG J G， WANG Z X， et al .. Symptoms， mechanismand controlling measures of tobacco continuous croppingobstacles [J]. J. Anhui Agric. Sci.， 2011，39（1）：120-122，124.

［10］ APARICIO V， COSTA J L. Soil quality indicators undercontinuous cropping systems in the Argentinean Pampas [J].Soil Tillage Res.， 2007， 96（1-2）： 155-165.

［11］ 晉艷，楊宇虹，段玉琪，等.烤煙輪作、連作對煙葉產(chǎn)量質(zhì)量的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學報， 2004，17（增刊1）：267-271.

JIN Y， YANG Y H， DUAN Y Q， et al .. Effect of rotationalcropping and continuous cropping on yield and quality of fluecuredtobacco [J]. Southwest China J. Agric. Sci.， 2004， 17（S1）：267-271.

［12］ WANG J， TIAN T， WANG H， et al .. Chitosan-coatedcompound fertilizer application and crop rotation alleviatecontinuous cotton cropping obstacles by modulating rootexudates [J/OL]. Rhizosphere， 2022， 23：100581 [2022-12-20].https：//doi.org/10.1016/j.rhisph.2022.100581.

［13］ TAN Y， CUI Y， LI H， et al .. Rhizospheric soil and rootendogenous fungal diversity and composition in response tocontinuous Panax notoginseng cropping practices [J]. Microbiol.Res.， 2017， 194： 10-19.

［14］ LI W， KNOPS J J M H， ZUO X， et al .. Carbon and nitrogencycling are resistant to fire in nutrient-poor grassland [J]. Soil Sci. Soc. Am. J.， 2014， 78（3）： 825-831.

［15］ 王勁松，樊芳芳，郭珺，等.不同作物輪作對連作高粱生長及其根際土壤環(huán)境的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學報，2016，27（7）：2283-2291.

WANG J S， FAN F F， GUO J， et al .. Effect of different croprotations on growth of continuous cropping sorghum and itsrhizosphere soil micro-environment [J]. Chin. J. Appl. Ecol.，2016， 27（7）： 2283-2291.

［16］ ASADUZZAMAN M， ASAO T. Autotoxicity in beans and theirallelochemicals [J]. Sci. Hortic.， 2012， 134： 26-31.

［17］ CANARINI A， MERCHANT A， DIJKSTRA F A. Droughteffects on Helianthus annuus and glycine max metabolites：from phloem to root exudates [J]. Rhizosphere， 2016， 2： 85-97.

［18］ YUN J， CUI C， ZHANG S， et al .. Use of headspace GC/MScombined with chemometric analysis to identify the geographicorigins of black tea [J/OL]. Food Chem.， 2021， 360（11）： 130033[2022-12-20]. https：//doi.org/10.1016/j.foodchem.2021.130033.

［19］ 孫穎，李江，雷小林，等.胡頹子根系分泌物中潛在化感物質(zhì)分析[J].中南林業(yè)科技大學學報，2020，40（3）：8-12， 52.

SUN Y， LI J， LEI X L， et al .. Analysis of potentialallelochemicals in root exudation of Elaeagnus pungens [J]. J.Cent. South Univ. For. Technol.， 2020，40（3）：8-12， 52.

［20］ KONG C H， XUAN T D， KHANH T D， et al.. Allelochemicals andsignaling chemicals in plants [J/OL]. Molecules， 2019， 24（15）： 2737[2022-12-20]. https：//doi.org/10.3390/molecules24152737.

［21］ YANG R Y， MEI L X， TANG J J， et al .. Allelopathic effects ofinvasive Solidago canadensis L. on germination and growth ofnative Chinese plant species [J]. Allelopathy J.， 2007， 19（1）：241-248.

［22］ 師小平，陳銀萍，閆志強，等.植物化感作用研究進展[J].生物技術(shù)通報，2020，36（6）：215-222.

SHI X P， CHEN Y P， YAN Z Q， et al .. Research progress onplant allelopathy [J]. Biotechnol. Bull.， 2020，36（6）：215-222.

［23］ JIAJUN D， ZHANG Y L， JIWEI H U， et al .. Autotoxicity ofphthalate esters in tobacco root exudates： effects on seedgermination and seedling growth [J]. Pedosphere， 2017， 27（6）：1073-1082.

［24］ 孫敬國，王昌軍，孫光偉，等.連作年限對植煙根際土壤化感物質(zhì)積累的影響——以湖北黃棕壤煙田為例[J].土壤，2021，53（1）：148-153.

SUN J G， WANG C J， SUN G W， et al .. Effect of tobaccocontinuous cropping on allelochemicals accumulation inrhizosphere soil—a case study of yellow brown soil of Hubei[J]. Soil， 2021， 53（1）： 148-153.

［25］ 劉蘋，趙海軍，唐朝輝，等.連作對不同抗性花生品種根系分泌物和土壤中化感物質(zhì)含量的影響[J].中國油料作物學報，2015，37（4）：467-474.

LIU P， ZHAO H J， TANG C H， et al .. Effects of continuouscropping on root exudates of different resistance peanut （Arachishypogaea L.） varieties and allelochemicals content in soil [J]. Chin.J. Oil Crop Sci.， 2015， 37（4）： 467-474.

［26］ 于會泳，申國明，高欣欣.煙草根系分泌物的GC-MS檢測[J].中國煙草學報，2013，19（4）：64-72.

YU H Y， SHEN G M， GAO X X. Determination of tobacco rootexudates by GC-MS [J]. Acta Tab. Sin.， 2013， 19（4）： 64-72.

［27］ LARA-Nú?EZ A， SáNCHEZ-NIETO S， LUISA ANAYA A， et al..Phytotoxic effects of Sicyos deppei （Cucurbitaceae） in germinatingtomato seeds [J]. Physiol. Plant.， 2009， 136（2）： 180-192.

［28］ ASAO T， HASEGAWA K， SUEDA Y， et al.. Autotoxicity of rootexudates from taro [J]. Sci. Hortic.， 2003， 97（3-4）： 389-396.

［29］ DENG J J， ZHANG Y L， HU J W， et al .. Autotoxicity ofphthalate esters in tobacco root exudates： effects on seedgermination and seedling growth [J]. Pedosphere， 2017， 27（6）：1073-1082.

［30］ WANG C M， CHEN H T， LI T C， et al .. The role of pentacyclictriterpenoids in the allelopathic effects of Alstonia scholaris [J].J. Chem. Ecol.， 2014， 40（1）： 90-98.

［31］ SELVI B， KADAMBAN D. Allelopathic effect of ursolic acidon growth and physiology of green gram cultivar KM-2 [J]. Int.J. Plant Sci. （Muzaffarnagar）， 2009， 4（2）： 578-581.

［32］ SCHANDRY N， BECKER C. Allelopathic plants： models forstudying plant-interkingdom interactions [J]. Trends Plant Sci.，2020， 25（2）： 176-185.

［33］ MURPHY K M， EDWARDS J， LOUIE K B， et al .. Bioactivediterpenoids impact the composition of the root-associatedmicrobiome in maize （Zea mays） [J]. Sci. Rep.， 2021， 11（1）：1-13.

［34］ LI Z， FU J， ZHOU R， et al .. Effects of phenolic acids fromginseng rhizosphere on soil fungi structure， richness anddiversity in consecutive monoculturing of ginseng [J]. Saudi J.Biol. Sci.， 2018， 25（8）： 1788-1794.

［35］ 李慶凱，劉蘋，趙海軍，等.玉米根系分泌物對連作花生土壤酚酸類物質(zhì)化感作用的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報，2020，22（3）：119-130 .

LI Q K， LIU P， ZHAO H J， et al .. Effects of maize rootexudates on allelopathy of phenolic acids in soil of continuouscropping peanut [J]. J. Agric. Sci. Technol.， 2020， 22（3）：119-130.

［36］ 白羽祥，朱媛，楊煥文，等.煙草酚酸和有機酸對黑脛病菌生長的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學報，2017，30（6）：1364-1368.

BAI Y X， ZHU Y， YANG H W， et al .. Effect of phenolic andorganic acid on growth of Phytophora parasitica var. nicotiana [J].Southwest China J. Agric. Sci.， 2017， 30（6）： 1364-1368.

［37］ 劉艷霞，李想，蔡劉體，等.煙草根系分泌物酚酸類物質(zhì)的鑒定及其對根際微生物的影響[J].植物營養(yǎng)與肥料學報，2016，22（2）：418-428.

LIU Y X， LI X， CAI L T， et al .. Identification of phenolic acidsin tobacco root exudates and their role in the growth ofrhizosphere microorganisms [J]. J. Plant Nutr. Fert.， 2016， 22（2）：418-428.

基金項目：湖南省煙草公司長沙市公司項目20-22A07）；湖南省教育廳資助科研項目（20A230）；湖南省高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新引領(lǐng)計劃項目（2020NK2005）。