[摘要]"目的"探討異型淋巴細(xì)胞比例對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥（infectious"mononucleosis，IM）患兒免疫系統(tǒng)的影響。方法"選取2023年5月至2024年5月金華市婦幼保健院收治的153例IM患兒作為IM組，選取同期153名健康兒童作為健康組，分析異型淋巴細(xì)胞比例與IM患兒EB病毒載量的關(guān)系。檢測(cè)并比較兩組納入者的免疫系統(tǒng)指標(biāo)[補(bǔ)體C3、C4、CD19+細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM]表達(dá)水平，分析異型淋巴細(xì)胞比例與免疫系統(tǒng)指標(biāo)的關(guān)系。根據(jù)免疫情況將IM患兒分為嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組、非嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組，分析嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂IM患兒的臨床特征并比較異型淋巴細(xì)胞比例差異。結(jié)果"與健康組比較，IM組患兒的異型淋巴細(xì)胞比例升高（Plt;0.001）。Pearson檢驗(yàn)顯示異型淋巴細(xì)胞比例與IM患兒EB病毒載量呈正相關(guān)（Plt;0.05）。與健康組比較，IM組患兒補(bǔ)體C3、C4、CD8+T細(xì)胞、IgA、IgG、IgM水平升高，CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+、CD19+細(xì)胞降低（Plt;0.001）。在IM兒童中，異型淋巴細(xì)胞比例與CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+、CD19+細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞、IgA、IgG、IgM呈正相關(guān)（Plt;0.05）。異型淋巴細(xì)胞比例升高是IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度的危險(xiǎn)因素（Plt;0.001）。異型淋巴細(xì)胞比例診斷IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂的曲線下面積為0.918。結(jié)論"IM患兒存在不同程度的免疫系統(tǒng)紊亂現(xiàn)象，以特異性免疫紊亂為主，其紊亂程度與異型淋巴細(xì)胞比例升高有關(guān)。異型淋巴細(xì)胞比例可作為早期診斷IM患兒免疫紊亂程度的參考指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞]"傳染性單核細(xì)胞增多癥；異型淋巴細(xì)胞比例；細(xì)胞免疫；體液免疫；免疫系統(tǒng)紊亂

[中圖分類號(hào)]"R512.7""""""[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]"A""""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.36.011

The"effect"of"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"on"the"immune"system"of"children"with"infectious"mononucleosis

LIU"Chuchu，"ZHONG"Xiaoying

Department"of"Pediatrics，"Jinhua"Maternal"and"Child"Health"Care"Hospital，"Jinhua"321000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"study"the"effect"of"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"on"the"immune"system"of"children"with"infectious"mononucleosis"（IM）."Methods"153"children"with"IM"admitted"Jinhua"Maternal"and"Child"Health"Care"Hospital"from"May"2023"to"May"2024"were"selected"as"IM"group，"and"153"healthy"children"were"selected"as"healthy"group."The"relationship"between"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"and"EB"virus"load"in"IM"patients"was"analyzed."The"expression"levels"of"immune"system"indicators"[complement"C3，"C4，"CD19+cells，"T"lymphocyte"subsets，"immunoglobulin"（Ig）"A，"IgG，"IgM]"between"two"groups"were"detected"and"compared，"the"relationship"between"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"and"immune"system"indicators"was"analyzed."The"children"with"IM"were"divided"into"severe"immune"system"disorder"group"and"non-severe"immune"system"disorder"group"according"to"the"immune"status，"the"clinical"characteristics"of"children"with"severe"immune"disorder"analyzed"and"compared"the"differences"in"the"proportion"of"atypical"lymphocytes."Results"Compared"with"healthy"group，"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"in"IM"group"increased"（Plt;0.001）."Pearson"correlation"test"showed"a"positive"correlation"between"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"and"EBnbsp;virus"load"in"children"with"IM"（Plt;0.05）."Compared"with"healthy"group，"levels"of"complement"C3，"C4，"CD8+T"cells，"IgA，"IgG"and"IgM"were"increased"in"IM"group，"while"CD4+T"cells，"CD4+/CD8+"ratio，"and"CD19+"cells"were"decreased"（Plt;0.001）."In"children"with"IM，"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"was"negatively"correlated"with"CD4+T"cells，"CD4+/CD8+"ratio，"and"CD19+"cells，"and"positively"correlated"with"CD8+T"cells，"IgA，"IgG"and"IgM"（Plt;0.05）."The"increased"proportion"of"atypical"lymphocytes"was"a"risk"factor"for"the"degree"of"immune"system"disorder"in"children"with"IM"（Plt;0.001）."Area"under"the"curve"for"diagnosing"immune"system"disorders"in"children"with"IM"using"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"was"0.918."Conclusion"Children"with"IM"exhibit"varying"degrees"of"immune"system"disorders，"with"specific"immune"disorders"being"the"main"cause."The"degree"of"disorder"is"related"to"an"increase"in"the"proportion"of"atypical"lymphocytes，"which"can"serve"as"a"reference"indicator"for"early"diagnosis"of"immune"disorders"in"children"with"IM.

[Key"words]"Infectious"mononucleosis;"Proportion"of"atypical"lymphocytes;"Cellular"immunity;"Humoral"immunity;"Immune"system"disorders

傳染性單核細(xì)胞增多癥（infectious"mononucleosis，IM）屬常見(jiàn)的急性自限性疾病，約90%是由EB病毒引起。IM常見(jiàn)于5歲以下兒童，多表現(xiàn)為發(fā)熱、咽峽炎、頸部淋巴結(jié)腫大，并可累及多器官系統(tǒng)，嚴(yán)重影響患兒預(yù)后[1-3]。研究表明IM患兒通常存在不同程度的免疫系統(tǒng)紊亂，可能因?yàn)镋B病毒侵入機(jī)體后免疫系統(tǒng)被激活，觸發(fā)非特異性和特異性免疫反應(yīng)，清除有害物質(zhì)并維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)[4]。研究發(fā)現(xiàn)健康人體B淋巴細(xì)胞表面存在EB病毒受體[5]。EB病毒侵襲機(jī)體后產(chǎn)生的特異性抗體可與B淋巴細(xì)胞表面的EB病毒受體結(jié)合，繼而激活T淋巴細(xì)胞并使其轉(zhuǎn)換為異型淋巴細(xì)胞。針對(duì)EB病毒感染后異型淋巴細(xì)胞特點(diǎn)，臨床通常將異型淋巴細(xì)胞比例作為兒童IM的輔助診斷指標(biāo)，且已證實(shí)異型淋巴細(xì)胞比例可用于IM的診斷。然而，關(guān)于異型淋巴細(xì)胞比例是否會(huì)對(duì)宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響的研究較少。本研究通過(guò)分析異型淋巴細(xì)胞比例對(duì)IM患兒免疫系統(tǒng)的影響，明確其相關(guān)性，以期為IM的早期診療提供參考。

1""資料與方法

1.1""資料來(lái)源

選取2023年5月至2024年5月金華市婦幼保健院收治的153例IM患兒作為IM組，男78例，女75例，年齡2～10歲，平均（5.45±1.98）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合兒童IM的診斷[6]；②初次診斷；③家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①EB病毒合并其他病原體感染；②患有先天免疫性疾病者；③肝腎原發(fā)損傷者；④先天畸形、染色體疾病者。另選取同期于金華市婦幼保健院體檢的153名健康兒童作為健康組，男72名，女81名，年齡2～10歲，平均（5.26±1.76）歲。兩組納入者的一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。本研究經(jīng)金華市婦幼保健院倫理委員會(huì)審批通過(guò)（倫理審批號(hào)：2024年倫審QT第087號(hào)）。

1.2""研究方法

1.2.1""異型淋巴細(xì)胞比例檢測(cè)""抽取納入者2ml空腹靜脈血，使用EDTA-K2抗凝，血涂片后行瑞氏-姬薩姆染液染色，經(jīng)油鏡計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算異型淋巴細(xì)胞比例。

1.2.2""EB病毒載量檢測(cè)""抽取納入者3ml空腹靜脈血，3000轉(zhuǎn)/min離心10min獲得血清，使用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)EB病毒載量。熒光探針序列：5?-CACCCAGGCACAGTACACCTGAT-3?。

1.2.3""免疫系統(tǒng)指標(biāo)檢測(cè)""抽取納入者3ml空腹靜脈血，使用Multiskan"FC全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)補(bǔ)體C3、C4、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM水平，使用BD"FACSAriaⅡ流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD19+細(xì)胞（B細(xì)胞）、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞比例，并計(jì)算CD4+/CD8+。

1.2.4""IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度評(píng)價(jià)""根據(jù)IM患兒T淋巴細(xì)胞亞群與正常兒童的差異值評(píng)價(jià)免疫系統(tǒng)紊亂程度，將CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+低于同齡正常兒童均值±2標(biāo)準(zhǔn)差、CD8+T細(xì)胞高于同齡正常兒童均值±2標(biāo)準(zhǔn)差定義為嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂，最終篩選得到嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組112例，非嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組41例。采集兩組患者的性別、年齡、臨床表現(xiàn)、EB病毒抗體陽(yáng)性、異型淋巴細(xì)胞比例及免疫系統(tǒng)指標(biāo)。

1.3""統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS"21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（"）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，組間比較采用c2檢驗(yàn)；Pearson檢驗(yàn)分析指標(biāo)的相關(guān)性；經(jīng)Logistic回歸分析異型淋巴細(xì)胞比例是否為影響IM患兒免疫系統(tǒng)狀態(tài)的危險(xiǎn)因素；采用受試者操作特征曲線（receiver"operating"characteristic"curve，ROC曲線）分析異型淋巴細(xì)胞比例診斷IM患兒免疫系統(tǒng)狀態(tài)的效能。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2""結(jié)果

2.1""兩組納入者的異型淋巴細(xì)胞比例比較

與健康組納入者[（1.97±0.23）%]比較，IM組患兒的異型淋巴細(xì)胞比例[（16.56±1.34）%]升高（t=132.700，Plt;0.001）。

2.2""異型淋巴細(xì)胞比例與IM患兒EB病毒載量的關(guān)系分析

IM患兒EB病毒載量為（7.56±2.15）×103copy/ml，Pearson分析顯示異型淋巴細(xì)胞比例與IM患兒的EB病毒載量呈正相關(guān)（r=0.504，Plt;0.05），見(jiàn)圖1。

2.3""兩組納入者的免疫系統(tǒng)指標(biāo)比較

與健康組納入者比較，IM組患兒的補(bǔ)體C3、C4、CD8+T細(xì)胞、IgA、IgG、IgM升高，CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+、CD19+細(xì)胞降低（Plt;0.001），見(jiàn)表1。

2.4""異型淋巴細(xì)胞比例與IM患兒免疫系統(tǒng)指標(biāo)的相關(guān)性分析

IM患兒中異型淋巴細(xì)胞比例與補(bǔ)體C3、C4無(wú)關(guān)（Pgt;0.05），與CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+、CD19+細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞、IgA、IgG、IgM呈正相關(guān)（Plt;0.05），見(jiàn)表2。

2.5""不同免疫系統(tǒng)紊亂程度IM患兒的臨床特征分析

與非嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組患兒比較，嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組患兒的熱程更長(zhǎng)，更易出現(xiàn)發(fā)熱、咽峽炎表現(xiàn)，EB病毒載量更高（Plt;0.05），見(jiàn)表3。

2.6""不同免疫系統(tǒng)紊亂程度IM患兒異型淋巴細(xì)胞比例及免疫指標(biāo)的比較

與非嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組患兒比較，嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂組患兒的異型淋巴細(xì)胞比例更高，免疫細(xì)胞指標(biāo)異常更顯著（Plt;0.001），見(jiàn)表4。

2.7""影響IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度的因素分析

Logistic回歸分析顯示，異型淋巴細(xì)胞比例升高是IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度的危險(xiǎn)因素（Plt;0.001），見(jiàn)表5。

2.8""異型淋巴細(xì)胞比例診斷IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度的效能分析

繪制ROC曲線分析異型淋巴細(xì)胞比例診斷IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度的效能發(fā)現(xiàn)，異型淋巴細(xì)胞比例診斷的曲線下面積為0.918，95%CI：0.876～0.961，當(dāng)截?cái)嘀禐?6.00%時(shí)診斷效能最佳，敏感度為89.97%，特異性為85.64%。

3""討論

異型淋巴細(xì)胞多見(jiàn)于EB病毒感染后，可嚴(yán)重影響患兒的生長(zhǎng)發(fā)育[7]。研究發(fā)現(xiàn)EB病毒通過(guò)口腔進(jìn)入機(jī)體后，可感染具有相關(guān)受體的咽上皮細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞異常增殖，最終形成異型淋巴細(xì)胞[8]。本研究發(fā)現(xiàn)與健康組比較，IM組患兒的異型淋巴細(xì)胞比例顯著升高，且與EB病毒載量呈正相關(guān)，提示異型淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生與EB病毒有關(guān)，這可能與EB病毒持續(xù)刺激下正常的B、T淋巴細(xì)胞發(fā)生形變進(jìn)而生成大量異型淋巴細(xì)胞有關(guān)。該結(jié)果與鐘田花等[9]研究認(rèn)為異型淋巴細(xì)胞比例升高與EBV-DNA載量呈正相關(guān)的結(jié)果一致，但與石秋萍等[10]研究認(rèn)為異型淋巴細(xì)胞比例與IM患者EB病毒載量無(wú)關(guān)的結(jié)果相悖，歸因于納入人群年齡或樣本量不同。

近年來(lái)隨著免疫學(xué)研究的深入，IM免疫系統(tǒng)紊亂機(jī)制越來(lái)越受到臨床關(guān)注。研究表明EB病毒感染后，一方面細(xì)胞吞噬系統(tǒng)、補(bǔ)體系統(tǒng)迅速啟動(dòng)非特異性免疫反應(yīng)，另一方面激活細(xì)胞與體液免疫產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，導(dǎo)致免疫細(xì)胞、分子活性異常，免疫系統(tǒng)紊亂[11]。補(bǔ)體C3、C4作為非特異性免疫的重要標(biāo)志物，具有維持機(jī)體免疫平衡、避免免疫復(fù)合物沉積的功能，可通過(guò)抵御外界病原微生物入侵阻礙疾病的進(jìn)展[12-13]。本研究發(fā)現(xiàn)IM患兒補(bǔ)體C3、C4水平高于健康兒童，但異型淋巴細(xì)胞比例與兩者并無(wú)明顯關(guān)聯(lián)，提示異型淋巴細(xì)胞比例增加可能對(duì)機(jī)體非特異性免疫反應(yīng)產(chǎn)生的影響較小。

研究表明IM發(fā)生后存在不同程度的EB病毒寡克隆或多克隆增殖現(xiàn)象，此過(guò)程中B、T淋巴細(xì)胞共同誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，即CD19+細(xì)胞分泌減少，CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞數(shù)量異常[14-16]；另有研究顯示，當(dāng)EB病毒攻擊T淋巴細(xì)胞時(shí)，免疫反應(yīng)增強(qiáng)，CD8+T細(xì)胞大量增殖，殺傷感染EB病毒的CD19+細(xì)胞，促使其凋亡[17-19]。B淋巴細(xì)胞在適應(yīng)性免疫反應(yīng)中具有關(guān)鍵作用，可生成高親和力抗體和充當(dāng)抗原呈遞細(xì)胞并分泌細(xì)胞因子，并生成IgA、IgG、IgM等抗體[20-21]。本研究發(fā)現(xiàn)IM患兒較健康兒童存在明顯的免疫系統(tǒng)紊亂現(xiàn)象，其中特異性免疫反應(yīng)指標(biāo)改善更顯著，提示EB病毒感染可引起IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂且以特異性免疫反應(yīng)異常為主。經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，在兒童IM中異型淋巴細(xì)胞比例與CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+、CD19+細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞、IgA、IgG、IgM呈正相關(guān)，提示異型淋巴細(xì)胞比例升高可影響IM后特異性免疫反應(yīng)。分析原因可能為EB病毒攻擊B、T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生異型淋巴細(xì)胞后反向引起B(yǎng)、T淋巴細(xì)胞功能改變，介導(dǎo)特異性免疫反應(yīng)，最終導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂。

為進(jìn)一步分析IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂特征，本研究與健康兒童比較，分析得出IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度。結(jié)果顯示所納入的IM患兒大多存在嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂表現(xiàn)，且此類患兒熱程更長(zhǎng)，更易出現(xiàn)咽峽炎表現(xiàn)，EB病毒載量更高。由此可見(jiàn)，嚴(yán)重免疫系統(tǒng)紊亂的IM患兒臨床特征更突出。

綜上所述，IM患兒異型淋巴細(xì)胞比例升高，與免疫系統(tǒng)紊亂程度有關(guān)。異型淋巴細(xì)胞比例升高是IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂的危險(xiǎn)因素，可作為早期診斷IM患兒免疫系統(tǒng)紊亂程度的參考指標(biāo)。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 梁志芳，"韓璽."兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥外周血細(xì)胞比值變化與肝損傷的關(guān)系[J]."中國(guó)婦幼保健，"2024，"39（12）："2174–2177.

[2] LEUNG"A"K"C，"LAM"J"M，"BARANKIN"B."Infectious"mononucleosis："An"updated"review[J]."Curr"Pediatr"Rev，"2024，"20（3）："305–322.

[3] SYLVESTER"J"E，"BUCHANAN"B"K，"SILVA"T"W."Infectious"mononucleosis："Rapid"evidence"review[J]."Am"Fam"Physician，"2023，"107（1）："71–78.

[4] ZHANG"Y，"HUANG"C，"ZHANG"H，"et"al."Characteristics"of"immunological"events"in"Epstein-Barr"virus"infection"in"children"with"infectious"mononucleosis[J]."Front"Pediatr，"2023，"11（1）："1060053.

[5] 陳新敏，"梁華，"郭燕，"等."異型淋巴細(xì)胞比例聯(lián)合EB病毒抗體及核酸檢測(cè)在兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥輔助診斷中的應(yīng)用[J]."國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，"2021，"42（4）："501–503.