【摘要】目的：測(cè)定胞磷膽堿鈉注射劑三種劑型的有關(guān)物質(zhì)，對(duì)有關(guān)物質(zhì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較劑型優(yōu)劣。方法：采用現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定24家企業(yè)400批胞磷膽堿鈉注射液、8家企業(yè)49批注射用胞磷膽堿鈉及7家企業(yè)30批胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液的有關(guān)物質(zhì)，并對(duì)胞磷膽堿鈉注射液、注射用胞磷膽堿鈉和胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液的5’-胞苷酸和其他雜質(zhì)總量（各雜質(zhì)總量）進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果：三種劑型之間的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果有顯著性差異，注射用胞磷膽堿鈉優(yōu)于胞磷膽堿鈉注射液，胞磷膽堿鈉注射液優(yōu)于胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液。結(jié)論：建議相關(guān)生產(chǎn)企業(yè)根據(jù)劑型特點(diǎn)，提高工藝水平，降低有關(guān)物質(zhì)含量，以提高產(chǎn)品質(zhì)量。本研究為醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床用藥提供參考。

【關(guān)鍵詞】胞磷膽堿鈉；注射劑；有關(guān)物質(zhì)

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.05.010

Comparison of Related Substances in Three Dosage Forms of Citicoline Sodium Injection

AI Juntao1， ZHOU Wei1， YANG Dingyong2， HE Xiaoyan1*

（1.Hunan DrugAudit and Inspection Center， Changsha 410001， China； 2.Hunan Drug Evaluation andAdverse Reaction Monitoring Center， Changsha 410013， China）

Abstract： Objective： to determine the related substances in three dosage forms of citicoline sodium injection， to analyze the results of related substances， and to compare the advantages and disadvantages of dosage forms. Methods： the related substances of 400 batches of citicoline sodium injection in 24 enterprises， 49 batches of citicoline sodium for injection in 8 enterprises and 30 batches of citicoline sodium and sodium chloride injection in 7 enterprises were determined by current legal standards. The total amount of 5 ’- cytidine acid and other impurities （total amount of each impurity） in citicoline sodium injection， citicoline sodium for injection and citicoline sodium chloride injection were compared and analyzed. Results： There were significant differences in the determination results of related substances among the three dosage forms. Citicoline sodium for injection was superior to citicoline sodium injection， and citicoline sodium injection was superior to citicoline sodium chloride injection. Conclusion： according to the characteristics of dosage forms， it is suggested to improve the technology level and reduce the content of related substances. Improve product quality. This study provides a reference for clinical medication in medical institutions.

Keywords： citicoline sodium； injection type； related substances

0引言

胞磷膽堿鈉（Citicoline Sodium），化學(xué)名為膽堿胞嘧啶核苷二磷酸酯的單鈉鹽，別名胞二磷膽堿等，主要用于急性顱腦外傷和腦手術(shù)后意識(shí)障礙的治療，其能夠通過(guò)改善腦血液循環(huán)、緩解纖容功能亢進(jìn)等機(jī)制改善凝血功能，穩(wěn)定出血灶。在腦外傷、腦卒中、血管性癡呆、急性腦炎、肝性腦病、新生兒缺血缺氧性腦病和面神經(jīng)炎、突發(fā)性耳聾、妊娠劇吐、低齡弱視等疾病的治療中顯示出肯定療效。胞磷膽堿注射劑有注射用胞磷膽堿鈉、胞磷膽堿鈉注射液、胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液及胞磷膽堿鈉葡萄糖注射液四種劑型。這些制劑中的有關(guān)物質(zhì)可能導(dǎo)致臨床使用安全風(fēng)險(xiǎn)。本文采用HPLC法對(duì)不同廠家的注射用胞磷膽堿鈉、胞磷膽堿鈉注射液、胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液三種劑型的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行比較，為臨床用藥提供參考。

1儀器與試藥

1.1儀器

METTER電子分析天平；Agilent1260高效液相色譜儀，XtimateTM C18（25 cm×4.6 mm，5μm）VWD檢測(cè)器。

1.2試劑

水為超純水；甲醇、乙腈均為色譜純，其他均為分析純。

1.3樣品

注射用胞磷膽堿鈉（8家企業(yè)，規(guī)格：①0.5 g，12批；②0.25 g，37批）。

胞磷膽堿鈉注射液（24家企業(yè)，規(guī)格：①12 mL∶0.2 g，2批；②2 mL∶0.25 g，398批）。

胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液（1家企業(yè)，規(guī)格：50 mL∶胞磷膽堿鈉0.5 g與氯化鈉0.45 g，4批；1家企業(yè)，規(guī)格：100 mL∶胞磷膽堿鈉0.25 g與氯化鈉0.9 g，3批；5家企業(yè)，規(guī)格：100 mL∶胞磷膽堿鈉0.5 g與氯化鈉0.9 g，23批）。

1.4對(duì)照品

胞苷對(duì)照品（Sigma公司，批號(hào)：101056876），胞嘧啶對(duì)照品（Sigma公司，批號(hào)：101186902），尿苷對(duì)照品（Sigma公司，批號(hào)：1001329434），胞磷膽堿鈉對(duì)照品（中檢院，批號(hào)：140675-201904，99.6%）。

2方法

按現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版二部，對(duì)胞磷膽堿鈉注射劑三個(gè)劑型的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢查，根據(jù)結(jié)果比較劑型優(yōu)劣。

2.1色譜條件

色譜柱：XtimateTM C18（25 cm×4.6 mm，5μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)：276 nm，柱溫：25℃，流速：1.0 mL/min，進(jìn)樣量：20μL；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液[0.1 mol/L的磷酸二氫鉀溶液和四丁基銨溶液（取0.01 mol/L四丁基氫氧化銨溶液用磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.5）等量混合]-甲醇（95∶5）。

2.2溶液的配制

供試品溶液的配制：精密取樣，用水制成1 mL中含胞磷膽堿鈉2.5 mg的溶液。

對(duì)照溶液的配制：精密量取1 mL，置于200 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

對(duì)照品溶液的配制：精密稱取5’-胞苷酸對(duì)照品15.02 mg，置于20 mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，然后精密量取1 mL，置于100 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

3有關(guān)物質(zhì)結(jié)果

3.1注射用胞磷膽堿鈉

49批注射用胞磷膽堿鈉按現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，5’-胞苷酸的結(jié)果分布在0.004%～0.06%范圍內(nèi)（限度≤0.3%），其他各雜質(zhì)總量的結(jié)果分布在0.008%～0.32%范圍內(nèi)（限度≤0.7%），均符合規(guī)定。有關(guān)物質(zhì)結(jié)果分布見(jiàn)圖1。

3.1.15’-胞苷酸

在8家生產(chǎn)企業(yè)中5’-胞苷酸的均值最高的是0.046%，均值最低是0.013%。離散程度見(jiàn)圖2。

3.1.2其他各雜質(zhì)總量

在8家生產(chǎn)企業(yè)中，其他各雜質(zhì)總量的均值最高是0.133%，均值最低是0.009%。離散程度見(jiàn)圖3。

3.2胞磷膽堿鈉注射液

在400批胞磷膽堿鈉注射液中，399批抽樣按《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版二部要求進(jìn)行檢驗(yàn)，5’-胞苷酸結(jié)果分布在0.003%～0.14%范圍內(nèi)（限度≤0.3%），其他各雜質(zhì)總量的結(jié)果分布在0.08%～0.49%范圍內(nèi)（限度≤0.7%），均符合規(guī)定；其余1批樣品的5’-胞苷酸為0.04%，各雜質(zhì)總量為0.99%，不符合規(guī)定，該批樣品為濟(jì)南某企業(yè)生產(chǎn)。有關(guān)物質(zhì)結(jié)果分布見(jiàn)圖4。

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3.2.15’-胞苷酸

在24家生產(chǎn)企業(yè)中，5’-胞苷酸均值最高的是0.039%，均值最低的是0.013%。離散程度見(jiàn)圖5。

3.2.2其他各雜質(zhì)總量在24家生產(chǎn)企業(yè)中，其他各雜質(zhì)總量均值最高的是

0.446%，均值最低的是0.112%。離散程度見(jiàn)圖6。

3.3胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液

30批胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液按現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，5’-胞苷酸的結(jié)果分布在0.006%～0.19%范圍內(nèi)（限度≤0.3%），其他各雜質(zhì)總量的結(jié)果分布在0.28%～0.54%范圍內(nèi)（限度≤0.7%），均符合規(guī)定。有關(guān)物質(zhì)結(jié)果分布見(jiàn)圖7。

3.3.15’-胞苷酸

在7家生產(chǎn)企業(yè)中，5’-胞苷酸均值最高的是0.088%，均值最低的是0.007%。離散程度見(jiàn)圖8。

3.3.2其他各雜質(zhì)總量

在7家生產(chǎn)企業(yè)中，其他各雜質(zhì)總量均值最高的是0.457%，均值最低的是0.366%。離散程度見(jiàn)圖9。

3.4三種劑型之間的有關(guān)物質(zhì)結(jié)果比較

將胞磷膽堿鈉注射液、注射用胞磷膽堿鈉與胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液這三種劑型的5’-胞苷酸與其他雜質(zhì)總量分別進(jìn)行比較，結(jié)果如下。

3.4.15’-胞苷酸

胞磷膽堿鈉注射液、注射用胞磷膽堿鈉和胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液的5’-胞苷酸均值分別為0.025%、0.021%和0.049%，三者的離散程度分別為0.023%～0.026%、0.017%～ 0.025%和0.034%～0.063%，結(jié)果見(jiàn)圖10。

方差分析結(jié)果表明，F(xiàn)=30.094，P=0.000<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可以認(rèn)為不同劑型之間的5’-胞苷酸的測(cè)定結(jié)果有顯著性差異，結(jié)果見(jiàn)表1。兩項(xiàng)分析結(jié)果表明，對(duì)5’-胞苷酸而言，注射用胞磷膽堿鈉優(yōu)于胞磷膽堿鈉注射液，胞磷膽堿鈉注射液優(yōu)于胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液。

3.4.2其他雜質(zhì)總量（各雜質(zhì)總量）

胞磷膽堿鈉注射液、注射用胞磷膽堿鈉和胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液其他雜質(zhì)總量的均值分別為0.227%、0.090%和0.408%，三者的離散程度分別為0.216%～0.238%、0.069%～ 0.111%和0.381%～0.456%，結(jié)果見(jiàn)圖11。

方差分析結(jié)果表明，F(xiàn)=823b264507b6239c50fcd49a179ddf29f6b22eb45bdb117409daf60233d2e28fd4.883，P=0.000<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可以認(rèn)為不同劑型之間胞苷酸的測(cè)定結(jié)果有顯著性差異，結(jié)果見(jiàn)表2。兩項(xiàng)分析結(jié)果表明，就其他雜質(zhì)總量（各雜質(zhì)總量）而言，注射用胞磷膽堿鈉優(yōu)于胞磷膽堿鈉注射液，胞磷膽堿鈉注射液優(yōu)于胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液。

4.討論

對(duì)胞磷膽堿鈉注射液、注射用胞磷膽堿鈉和胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液的5’-胞苷酸和其他雜質(zhì)總量進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果表明：不同劑型之間的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果有顯著性差異，注射用胞磷膽堿鈉優(yōu)于胞磷膽堿鈉注射液，胞磷膽堿鈉注射液優(yōu)于胞磷膽堿鈉氯化鈉注射液。從有關(guān)物質(zhì)離散程度分布圖也可以看出，企業(yè)間離散程度大小不一。這說(shuō)明某些企業(yè)的工藝有待改進(jìn)和提升。

從原料到成品的生產(chǎn)過(guò)程中，有關(guān)物質(zhì)等雜質(zhì)產(chǎn)生的環(huán)節(jié)無(wú)處不在，很多有潛在危害性的雜質(zhì)可能超出了現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢測(cè)范圍，它們帶來(lái)的危害可能危及用藥患者的身體健康。要提高樣品質(zhì)量，減少雜質(zhì)等不穩(wěn)定因素的產(chǎn)生，僅靠對(duì)成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的控制是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，只有通過(guò)對(duì)每一步生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格的控制，并結(jié)合嚴(yán)格的質(zhì)量控制才能真正提升藥品質(zhì)量。依據(jù)本研究結(jié)果，建議各生產(chǎn)企業(yè)對(duì)該品種有關(guān)物質(zhì)的來(lái)源進(jìn)行考察，根據(jù)劑型特點(diǎn)，提高工藝水平，降低有關(guān)物質(zhì)含量，在保證產(chǎn)品質(zhì)量的前提下，進(jìn)一步提高產(chǎn)品的安全性。

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【作者簡(jiǎn)介】

艾俊濤，男，1987年出生，主管藥師，碩士，研究方向?yàn)樗幤?、醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)。

通信作者：何曉艷，女，1978年出生，副主任藥師，碩士，研究方向?yàn)樗幤?、醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)，810494306@qq.com。

（編輯：侯睿琪）