摘 要 基于傅里葉變換紅外光譜原理方法，對(duì)不同產(chǎn)地鴉膽子石油醚提取物成分差異進(jìn)行分析。對(duì)比分析不同產(chǎn)地鴉膽子紅外光譜數(shù)據(jù)，其成分含量變化與9個(gè)特征峰強(qiáng)度的變化相關(guān)，分別是3 471、2 931、2 854、1 743、1 463、1 377、1 238、1 165、723 cm-1。不同產(chǎn)地鴉膽子在特征峰上的含量具有明顯的差異，廣西玉林和廣東湛江產(chǎn)地鴉膽子的油酸和亞油酸含量相對(duì)較高，其次為廣西百色的靖西、右江，廣西田林與廣州，含量最低為廣西柳州。

關(guān)鍵詞 鴉膽子；傅里葉變換紅外光譜；油酸；亞油酸

中圖分類號(hào)：R932 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2024.09.003

鴉膽子為苦木科植物鴉膽子[Brucea javanica （L.） Merr. ]的干燥成熟果實(shí)[1]，是我國(guó)民間傳統(tǒng)常用中藥，別名為老鴨膽、鴉膽、苦榛子等。鴉膽子味苦、性寒，歸大腸經(jīng)、肝經(jīng)。中醫(yī)認(rèn)為其具有清熱解毒、燥濕、止痢、截瘧、腐蝕贅疣的藥效，可治療熱毒血痢、雞眼贅疣等疾病。目前臨床應(yīng)用非常廣泛，尤其在抗癌、抗腫瘤方面有著巨大的開發(fā)價(jià)值。鴉膽子在我國(guó)資源豐富，主要分布在廣西、廣東等華南熱帶亞熱帶地區(qū)。

鴉膽子化學(xué)成分復(fù)雜，主要有效成分為揮發(fā)油等脂溶性成分，易溶于極性小的有機(jī)溶劑。 藥理作用研究表明，鴉膽子油具有一系列的藥效活性，特別在治療惡性腫瘤方面具有顯著作用。鄧湘生等采用小劑量化療藥加鴉膽子油注射液于支氣管動(dòng)脈灌注治療晚期肺癌，對(duì)照單純支氣管動(dòng)脈灌注化療藥，發(fā)現(xiàn)治療組客觀療效優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；治療組在提高生活質(zhì)量、保護(hù)免疫和骨髓功能等方面優(yōu)于對(duì)照組[2]。祝洪福等采用鴉膽子油經(jīng)肝動(dòng)脈栓塞治療 62 例肝癌，治療后 l 年、2 年、3 年生存率分別為 77.4%、41.9% 和25.8%；腫瘤縮小 50% 以上占 64.5%，縮小 30%～50%占 27.4%；腫瘤血管明顯減少 38 例，部分減少 11 例；甲胎蛋白（AFP）下降率為 79%；無骨髓抑制，部分患者治療后肝功能明顯改善[3]。石磊等、田春桃等、田華琴等研究表明鴉膽子制劑具有抗肝癌的功效[4-6]。卜金鐘等研究發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳注射液輔助5-Fu、奧沙利鉑聯(lián)合化療治療晚期大腸癌，可增強(qiáng)化療藥物療效，提高患者的生活質(zhì)量，減輕化療的不良反應(yīng)[7]。倪浩等研究結(jié)果表明，鴉膽子油輔助治療法對(duì)于降低尖銳濕疣復(fù)發(fā)具有一定的療效，彌補(bǔ)了常規(guī)治療方法易復(fù)發(fā)的不足，也拓展了鴉膽子油臨床應(yīng)用的新領(lǐng)域[8]。

紅外光譜能從宏觀上評(píng)價(jià)中藥材的質(zhì)量，其分析方法在中藥材鑒定和質(zhì)量分析方面有著廣泛的應(yīng)用[9-11]。用紅外光譜及其相關(guān)技術(shù)進(jìn)行中藥鑒別與質(zhì)量監(jiān)控在某些方面較現(xiàn)在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用的顯微鑒別、薄層色譜法、高效液相色譜法及當(dāng)前正在研究開發(fā)的DNA分子標(biāo)定鑒別技術(shù)等都有很多特色和優(yōu)勢(shì)，是一種無需提取分離、簡(jiǎn)便、低廉的方法， 具有樣品無損，制樣檢測(cè)快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

當(dāng)前文獻(xiàn)資料顯示，暫無不同產(chǎn)地鴉膽子的紅外圖譜分析的比較研究。本文以不同產(chǎn)地鴉膽子為研究對(duì)象，引入紅外圖譜分析，通過比較分析鴉膽子油組分的含量差異，為后續(xù)規(guī)范化栽培提供參考意見，對(duì)鴉膽子藥用價(jià)值的合理利用和經(jīng)濟(jì)效益具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料

1.1.1" 藥材

鴉膽子藥材產(chǎn)地見表1。

1.1.2" 試劑與儀器

傅里葉變換紅外光譜儀（Nicolet 5700，DTGS/B檢測(cè)器，美國(guó)Thermo公司）， 壓片機(jī)（FW-4A型，天津光學(xué)儀器廠），瑞士梅特勒-托利多超越型分析天平（Mettler Toledo XS105DU）。石油醚（60%～90%，分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠），溴化鉀（光譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.2" 試驗(yàn)方法

1.2.1" 儀器分辨率選擇

根據(jù)文獻(xiàn)資料[12]，分辨率為4時(shí)，圖譜比較理想；分辨率為1時(shí)，信噪比較差，圖譜的背景干擾太大，使得基線毛燥，不夠平滑，影響吸收峰的判定；當(dāng)分辨率為8時(shí)，1 000 cm-1以下的某些樣品在指紋區(qū)的吸收峰不能夠完全被掃描出來，使得某些樣品信息缺失。分辨率為2和4的圖譜相差不大，當(dāng)分辨率為4時(shí)，可以使掃描時(shí)間減少，因此選擇分辨率為4作為分析的分辨率，既可以得到較高的信噪比，基線平滑，也可以使指紋區(qū)的吸收峰完全被掃描出來，還可以使分析時(shí)間相對(duì)減少。

1.2.2" 石油醚提取物紅外圖譜研究方法

根據(jù)鴉膽子油提取工藝優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果，采用索氏提取器進(jìn)行提取，提取溫度為 85 ℃、液料比 8∶1（mL·g-1）、提取時(shí)間 1.5 h、提取 2 次，鴉膽子提取液在蒸發(fā)皿中水浴蒸干，在接近蒸干前加入少量 KBr 拌勻，揮干溶劑后于烘箱中 60 ℃保持 24 h。

采用KBr壓片制樣，測(cè)定紅外光譜圖。將鴉膽子樣品提取的蒸干物置于瑪瑙研缽中，加入適量溴化鉀，研細(xì)后置于模具中，加壓，壓力為20 kPa，約1 min 后取下模具，將壓好的溴化鉀樣品片置于紅外光譜儀中，進(jìn)行紅外光譜掃描。

采用OMNI E.S.P.5.1 智能操作軟件進(jìn)行譜圖數(shù)據(jù)處理。每個(gè)樣品測(cè)定前均對(duì)背景進(jìn)行掃描， 對(duì)得到的紅外光譜進(jìn)行基線校正， 確定峰值和吸光度。Origin 8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并分析。

1.2.3" 不同成熟樣品紅外圖譜研究方法

將玉林、湛江2個(gè)產(chǎn)地的不同成熟鴉膽子按照1.2.2的步驟進(jìn)行提取檢測(cè)，得到相應(yīng)的紅外圖譜并分析。

1.2.4" 不同產(chǎn)地樣品紅外圖譜研究方法

將表1中其余各產(chǎn)地藥材按照1.2.2的步驟進(jìn)行提取檢測(cè)，得到相應(yīng)的紅外圖譜并分析。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 石油醚提取物紅外圖譜研究

石油醚提取物的主要吸收峰集中在3 000 cm-1和1 500 cm-1處。由于石油醚是非極性溶劑，提取物主要是非極性的色素、揮發(fā)油、飽和烷烴類，因此圖譜上反映的也主要是這些物質(zhì)的官能團(tuán)的吸收峰[12]。

石油醚提取物的紅外吸收?qǐng)D譜見圖1。2 931 cm-1為亞甲基C-H反對(duì)稱伸縮振動(dòng)吸收峰，2 854 cm-1為亞甲基C-H對(duì)稱伸縮振動(dòng)吸收峰，1 743 cm-1為羰基C=O伸縮振動(dòng)吸收峰，1 463 cm-1為亞甲基和甲基C-H彎曲振動(dòng)吸收峰，1 165 cm-1為甲基C-H對(duì)稱伸縮振動(dòng)吸收峰，723 cm-1為長(zhǎng)鏈烷烴骨架振動(dòng)吸收峰，以上光譜特征說明鴉膽子石油醚提取物的主體成分為脂肪酸酯類化合物。

2.2" 不同成熟品紅外圖譜研究

分別選取湛江、玉林2個(gè)產(chǎn)地的成熟品與半成熟品進(jìn)行紅外光譜測(cè)定，分析其光譜差異性，為采收藥材提供參考依據(jù)。

圖2顯示，湛江不同成熟品粗油成分含量變化與9個(gè)特征峰強(qiáng)度的變化相關(guān)，其分別是3 471、2 931、2 854、1 743、1 463、1 377、1 238、1 165、723 cm-1。其紅外光譜的峰強(qiáng)無明顯差別，由此我們可以通過做不同光譜特征峰強(qiáng)度的變化趨勢(shì)反映各物質(zhì)含量的變化。文獻(xiàn)資料顯示，油酸在2 575～2 936、2 995～3 644 cm- 1范圍內(nèi)有特征吸收，亞油酸在1 125～1 488 cm- 1范圍內(nèi)有很大特征吸收，棕櫚酸在400～763 cm- 1有特征吸收[13]，所以可作為鴉膽子鑒定時(shí)指認(rèn)油酸、亞油酸、棕櫚酸的重要區(qū)域。

由圖2還可知，2 931、2 854 cm-1在油酸特征吸收范圍內(nèi)，1 463、1 377、1 238、1 165 cm-1在亞油酸特征吸收范圍內(nèi)，723 cm-1屬于棕櫚酸吸收峰，這些特征峰強(qiáng)度的變化趨勢(shì)可反映油酸、亞油酸、棕櫚酸含量的變化趨勢(shì)。

圖3顯示，湛江不同成熟品的9個(gè)特征峰透光率不同，透光率越低，說明濃度越高，含量越高。鴉膽子越成熟，特征峰透光率越低，差異較大在2 931、2 854、1 743、1 165 cm-1處，初步說明成熟度也會(huì)影響油酸、亞油酸的含量，鴉膽子果實(shí)越成熟，油酸和亞油酸含量越高。

圖4顯示，玉林不同成熟品粗油成分含量變化與9個(gè)特征峰強(qiáng)度的變化相關(guān)，其分別是3 471、2 931、2 854、1 743、1 463、1 377、1 238、1 165、723 cm-1。

由圖5還可知，整體上未成熟果實(shí)比成熟果實(shí)的油酸和亞油酸含量低，越青越大個(gè)的果實(shí)含量越低，而黑色果實(shí)不論大小，含量均較高，且差異較小。研究顯示，油酸和亞油酸是鴉膽子作為治療癌癥等藥物的重要有效成分，因此含量差異會(huì)影響其療效[14]。本研究顯示，成熟品中油酸和亞油酸含量相對(duì)較高，為鴉膽子采收及藥材運(yùn)用提供了參考依據(jù)。

2.3" 不同產(chǎn)地樣品紅外圖譜研究

圖6顯示，不同產(chǎn)地的鴉膽子紅外光譜特征峰出現(xiàn)的頻率位置基本一致，僅在峰形和相對(duì)透光率上略有差異。利用紅外OMNIC軟件對(duì)7個(gè)產(chǎn)地鴉膽子藥材提取物的紅外光譜圖進(jìn)行處理，建立圖譜庫(kù)，并進(jìn)行一一匹配，結(jié)果見表2。匹配數(shù)值的大小表示彼此之間的親密程度，當(dāng)數(shù)值越大表示匹配程度越好，數(shù)值為1就表示完全匹配。結(jié)果還顯示，7個(gè)產(chǎn)地藥材的紅外光譜各自的匹配度都在0.978以上，可利用所建立的圖譜庫(kù)對(duì)未知樣品進(jìn)行預(yù)測(cè)，結(jié)果可以準(zhǔn)確地鑒別[15]。

由圖7可知，從整體上看，玉林和湛江產(chǎn)地的含量相對(duì)較高，其次為百色的靖西、右江，田林與廣州，含量最低為柳州。含量高低可能與氣候、土壤等環(huán)境因素相關(guān)。

3" 結(jié)論

3.1" 石油醚提取物紅外圖譜特征穩(wěn)定

石油醚提取物主要是脂肪酸脂類化合物，鴉膽子的重要成分油酸和亞油酸具有明顯的藥理作用，而紅外吸收?qǐng)D譜基本能夠在油酸的吸收范圍2 931、2 854 cm-1顯示，也能在亞油酸的吸收范圍1 463、1 377、1 238、1 165 cm-1顯示，因此，紅外光譜測(cè)定能夠初步進(jìn)行油酸與亞油酸的定性分析。

3.2" 不同成熟品含量差異顯著

通過比較湛江、玉林產(chǎn)地鴉膽子的不同成熟品，結(jié)果顯示成熟品的紅外吸收率較未成熟品高，表明鴉膽子果實(shí)越成熟，油酸和亞油酸含量越高，藥用價(jià)值越大，經(jīng)濟(jì)效益也會(huì)高。在玉林產(chǎn)地中選取個(gè)頭大小進(jìn)行比較，在未成熟的果實(shí)對(duì)比中，小個(gè)的油酸和亞油酸含量較大個(gè)的高，而成熟果實(shí)中個(gè)頭大小含量差異不明顯，因此，在采摘過程中，只要確保鴉膽子果實(shí)成熟即可。

3.3" 不同產(chǎn)地鴉膽子含量有明顯差異

通過比較7個(gè)不同產(chǎn)地鴉膽子成熟果實(shí)紅外吸收?qǐng)D譜，特征峰匹配度較高。在對(duì)比分析變量圖中，廣西玉林和廣東湛江產(chǎn)地鴉膽子的油酸和亞油酸含量相對(duì)較高，其次為廣西百色的靖西、右江，廣西田林與廣州，含量最低為廣西柳州。

鴉膽子在廣西部分地區(qū)已形成規(guī)?；N植，是鴉膽子藥材的主要來源之一。不同地區(qū)的氣候、土壤及種植技術(shù)均影響鴉膽子藥材的質(zhì)量。柳州地理位置在最北邊，往南依次為田林、靖西、廣州、右江、玉林、湛江。本研究結(jié)果顯示的含量變化幾乎呈與之相反的趨勢(shì)，可能因北部氣候相對(duì)寒冷，在油酸和亞油酸的形成中會(huì)產(chǎn)生一定的影響；同時(shí)種植過程中土壤環(huán)境變化對(duì)鴉膽子含油量也會(huì)有影響，還需要進(jìn)一步深入研究。

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（責(zé)任編輯：敬廷桃）