魏青 葉日蘭

【摘要】 目的：探究彩色多普勒超聲聯(lián)合微小RNA-222（miR-222）、微小RNA-21（miR-21）對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷價(jià)值。方法：選取2022年6月—2023年6月因不適（心悸、發(fā)力、胸痛等）在龍南市第一人民醫(yī)院檢查的患者100例作為研究組，以臨床綜合診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，將其中確診為老年退行性心臟瓣膜病的58例患者作為心臟瓣膜病組，并選取同時(shí)期在本院體檢的健康志愿者90例作為正常組。所有患者行彩色多普勒超聲檢查，并檢測(cè)miR-222、miR-21表達(dá)量。比較心臟瓣膜病組與正常組，以及不同嚴(yán)重程度瓣膜功能障礙患者miR-222、miR-21表達(dá)量，分析彩色多普勒超聲、miR-222、miR-21聯(lián)合診斷老年退行性心臟瓣膜病的價(jià)值。結(jié)果：彩色多普勒超聲對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷準(zhǔn)確度為84.00%（84/100），敏感度為82.76%（48/58），特異度為85.71%（36/42）。與正常組相比，心臟瓣膜病組miR-222、miR-21表達(dá)量均明顯更高（P<0.05）。重度瓣膜功能障礙患者miR-222、miR-21表達(dá)量均明顯高于輕度、中度患者，中度患者miR-222、miR-21表達(dá)量均高于輕度患者（P<0.05）。受試者操作特征（ROC）曲線(xiàn)分析顯示，三項(xiàng)聯(lián)合對(duì)老年退行性心臟瓣膜病診斷的曲線(xiàn)下面積（AUC）高于單項(xiàng)。結(jié)論：miR-222、miR-21在老年退行性心臟瓣膜病中表達(dá)水平較高，且隨著病情嚴(yán)重程度的增加，miR-222、miR-21表達(dá)水平逐漸升高，聯(lián)合檢查彩色多普勒超聲、miR-222、miR-21，具有較高診斷價(jià)值，可用于老年退行性心臟瓣膜病的臨床診斷。

【關(guān)鍵詞】 彩色多普勒超聲 微小RNA-222 微小RNA-21 老年退行性心臟瓣膜病

Diagnostic Value of Color Doppler Ultrasound Combined with miR-222 and miR-21 in Senile Degenerative Heart Valvular Disease/WEI Qing， YE Rilan. //Medical Innovation of China， 2024， 21（14）： 124-128

[Abstract] Objective： To explore the diagnostic value of color Doppler ultrasound combined with microRNA-222 （miR-222） and microRNA-21 （miR-21） in senile degenerative heart valvular disease. Method： A total of 100 patients who were examined in Longnan First People's Hospital from June 2022 to June 2023 due to discomfort （palpitation， force， chest pain， etc.） were selected as the study group， taking comprehensive clinical diagnosis as the gold standard， 58 patients diagnosed with senile degenerative heart valvular disease were selected as the valvular heart disease group. In addition， 90 healthy volunteers who underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the normal group. All patients underwent color Doppler ultrasonography and the expression levels of miR-222 and miR-21 were detected. The expression levels of miR-222

and miR-21 were compared between the valvular heart disease group and the normal group and patients with different severity of valvular dysfunction. The value of combination of color Doppler ultrasound， miR-222 and miR-21

in the diagnosis of senile degenerative heart valvular disease were analyzed. Result： The diagnostic accuracy， sensitivity and specificity of color Doppler ultrasound for senile degenerative heart valvular disease were 84.00% （84/100）， 82.76% （48/58） and 85.71% （36/42） respectively. Compared with the normal group， the expression levels of miR-222 and miR-21 in the heart valvular disease group were significantly higher （P<0.05）. The expression levels of miR-222 and miR-21 in patients with severe valvular dysfunction were significantly higher than those in mild and moderate patients， the expression levels of miR-222 and miR-21 in patients with moderate valvular dysfunction were significantly higher than those in mild and moderate patients （P<0.05）. Receiver operating characteristics （ROC） curve analysis showed that the area under the curve （AUC） of the three combinations for the diagnosis of senile degenerative heart valvular disease was higher than that of the single diagnosis. Conclusion： The expression levels of miR-222 and miR-21 are high in senile degenerative heart valvular disease， and the expression levels of miR-222

and miR-21 gradually increase with the severity of the disease. The combined examination of color Doppler ultrasound， miR-222 and miR-21 have high diagnostic value and can be used in the clinical diagnosis of senile degenerative heart valvular disease.

[Key words] Color Doppler ultrasound microRNA-222 microRNA-21 Senile degenerative heart valvular disease

First-author's address： Department of Ultrasound， Longnan First People's Hospital， Longnan 341700， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.14.030

老年退行性心臟瓣膜病是心臟瓣膜結(jié)締組織退行性變、纖維化和鈣化引起的疾病，這些病理改變導(dǎo)致瓣膜及其支架功能異常[1]。臨床上，此病多表現(xiàn)為鈣化性主動(dòng)脈瓣狹窄、二尖瓣環(huán)鈣化和二尖瓣脫垂癥[2]?；颊呖捎行募隆⒎α托赝吹劝Y狀，在病情晚期癥狀嚴(yán)重而緊急[3]。鑒于早期癥狀可能不甚明顯，且癥狀無(wú)特異性，準(zhǔn)確的臨床診斷對(duì)于改善患者的生存質(zhì)量和預(yù)后至關(guān)重要。彩色多普勒超聲作為非侵入性的診斷工具，能有效展示瓣膜的運(yùn)動(dòng)功能及其結(jié)構(gòu)異常[4]。然而，單一使用彩色多普勒超聲在某些情況下難以對(duì)微小病變進(jìn)行準(zhǔn)確診斷。微小RNA-222（miR-222）、微小RNA-21

（miR-21）的檢測(cè)為診斷提供了分子生物學(xué)層面的支持，這兩種微小RNA的異常表達(dá)與瓣膜纖維化和鈣化過(guò)程密切相關(guān)，可作為早期生物標(biāo)志物來(lái)輔助診斷[5]。然而，目前關(guān)于miR-222和miR-21在老年退行性心臟瓣膜病中具體角色和機(jī)制的研究仍不充分，故本研究旨在探討彩色多普勒超聲結(jié)合miR-222、miR-21在老年退行性心臟瓣膜病診斷中的綜合效能和潛在價(jià)值，以期進(jìn)一步改善患者的管理和預(yù)后。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2022年6月—2023年6月因不適（心悸、發(fā)力、胸痛等）在龍南市第一人民醫(yī)院檢查的患者100例作為研究組，選取同時(shí)期在本院體檢的健康志愿者90例作為正常組。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡>60歲；正常組無(wú)心臟疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：意識(shí)不清、精神異常；合并肝、腎、脾等器質(zhì)性疾??；有先天性心臟瓣膜病、感染性心內(nèi)膜炎、膠原病導(dǎo)致的心臟瓣膜病變。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者和家屬均知情同意本次研究。

1.2 方法

1.2.1 臨床綜合診斷 參考文獻(xiàn)[6]《心血管病診療標(biāo)準(zhǔn)》，患者可有乏力、呼吸困難、胸痛等癥狀，聽(tīng)診有心臟雜音，經(jīng)食道超聲心動(dòng)圖檢查示存在典型的心臟瓣膜及瓣環(huán)鈣化現(xiàn)象，有局限性致密強(qiáng)回聲，瓣膜邊緣規(guī)則、活動(dòng)度降低。

1.2.2 彩色多普勒超聲檢查 采用超聲診斷儀對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行檢查，設(shè)置探頭頻率為2.5～5.0 MHz，對(duì)患者心臟進(jìn)行多個(gè)切面檢查。（1）診斷標(biāo)準(zhǔn)：二尖瓣環(huán)鈣化，回聲增強(qiáng)，瓣環(huán)根部瓣膜、二尖瓣瓣膜增厚3 mm及以上，瓣膜活動(dòng)受到限制；主動(dòng)脈瓣環(huán)鈣化：瓣環(huán)處出現(xiàn)斑塊，且根部產(chǎn)生回聲，反射速度增加；主動(dòng)脈瓣鈣化，瓣膜回聲增加且瓣膜僵硬，厚度為3 mm以上，瓣膜啟閉受到影響；主動(dòng)脈瓣狹窄，主動(dòng)脈瓣前向血流變快，收縮期最大幅度<16 mm。聯(lián)合瓣膜病，累及兩個(gè)及以上瓣膜病變。（2）瓣膜功能障礙嚴(yán)重程度：反流程度=反流束起始處寬度/左心室流出道寬度，輕度，主動(dòng)脈<20%或二尖瓣≤1/3左心房；中度，主動(dòng)脈20%～40%或二尖瓣為1/3～2/3左心房；重度，主動(dòng)脈>40%或二尖瓣>2/3左心房。

1.2.3 miR-222、miR-21表達(dá)量檢測(cè) 抽取患者靜脈血4 mL，離心處理（3 000 r/min，10 min），留取上層清液，-60 ℃保存，待檢。采用ELISA法檢測(cè)血清中miR-222、miR-21水平：將miR-222、miR-21標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)谷隕P管，混勻，后將其倒入空白孔中，室溫下孵育90 min，在孔中加入洗滌緩沖液，重復(fù)清洗，后加入50 ?L miR-222、miR-21抗體，室溫下孵育60 min，加入洗滌緩沖液，重復(fù)清洗，加入100 ?L 鏈霉親和素蛋白結(jié)合液，封孔，室溫下孵育45 min，加入洗滌緩沖液，重復(fù)清洗，后加入100 ?L四甲基聯(lián)苯胺顯色液，450 mm、570 mm下測(cè)定OD值，測(cè)出miR-222、miR-21水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料用（x±s）進(jìn)行描述，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率（%）進(jìn)行描述，組間比較采用字2檢驗(yàn)；采用受試者操作特征（ROC）曲線(xiàn)評(píng)價(jià)彩色多普勒超聲、miR-222、miR-21對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷價(jià)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線(xiàn)資料比較

研究組男53例，女47例；平均年齡（67.92±7.73）歲。正常組男56例，女34例，平均年齡（67.45±7.38）歲。兩組基線(xiàn)資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 影像學(xué)特征

彩色多普勒超聲檢查顯示：圖1A，左室長(zhǎng)軸切面示二尖瓣后瓣環(huán)及主動(dòng)脈瓣鈣化；圖1B，心尖五腔切面示主動(dòng)脈瓣鈣化；圖1C，大動(dòng)脈短軸切面示主動(dòng)脈瓣鈣化；圖1D，心尖五腔切面示主動(dòng)脈瓣及二尖瓣鈣化。

2.3 彩色多普勒超聲對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷結(jié)果

以臨床綜合診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，彩色多普勒超聲對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷準(zhǔn)確度為84.00%（84/100），敏感度為82.76%（48/58），特異度為85.71%（36/42）。見(jiàn)表1。

2.4 心臟瓣膜病組與正常組miR-222、miR-21表達(dá)量比較

將研究組中診斷為老年退行性心臟瓣膜病的58例患者作為心臟瓣膜病組。與正常組相比，心臟瓣膜病組miR-222、miR-21表達(dá)量均明顯更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.5 不同嚴(yán)重程度瓣膜功能障礙患者miR-222、miR-21表達(dá)量比較

重度瓣膜功能障礙患者miR-222、miR-21表達(dá)量均明顯高于輕度、中度患者，中度患者的miR-222、miR-21表達(dá)量均高于輕度患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

2.6 彩色多普勒超聲、miR-222、miR-21對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷價(jià)值分析

ROC曲線(xiàn)分析顯示，三項(xiàng)聯(lián)合對(duì)老年退行性心臟瓣膜病診斷的AUC為0.982，高于單項(xiàng)檢測(cè)，見(jiàn)表4、圖2。

3 討論

老年退行性心臟瓣膜病可能引發(fā)諸如心悸、乏力和疲勞等臨床癥狀，在病情進(jìn)展至較嚴(yán)重階段時(shí)，患者可能會(huì)出現(xiàn)暈厥、呼吸困難、心絞痛，甚至心力衰竭和猝死[7]。在臨床檢查中，通過(guò)評(píng)估心臟雜音的響度，可將病情分為輕度、中度和重度[8]。老年退行性心臟瓣膜病治療不及時(shí)，可導(dǎo)致病情惡化，影響患者預(yù)后，故臨床需早期進(jìn)行診斷，制訂有效的防治措施[9-10]。本文通過(guò)評(píng)估彩色多普勒超聲聯(lián)合miR-222、miR-21對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷價(jià)值，希望為臨床提供更多參考依據(jù)。

采用彩色多普勒超聲檢查，可清楚顯示出老年退行性心臟瓣膜病患者血流情況，并可觀察到患者瓣膜鈣化程度、部位，在臨床診斷、治療中發(fā)揮較大作用[11-12]。本研究結(jié)果顯示，彩色多普勒超聲對(duì)老年退行性心臟瓣膜病的診斷準(zhǔn)確度為84.00%（84/100），敏感度為82.76%（48/58），特異度為85.71%（36/42），具有較高的準(zhǔn)確度，因?yàn)榇思夹g(shù)可以詳細(xì)顯示心臟瓣膜及其周?chē)Y(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)改變，如鈣化。研究指出，鈣化是老年退行性心臟瓣膜病的典型特征，由瓣膜細(xì)胞的功能異常、慢性炎癥反應(yīng)和鈣鹽沉積引起，導(dǎo)致瓣膜剛性增加、運(yùn)動(dòng)受限等情況[13]。此外，彩色多普勒超聲能夠通過(guò)檢測(cè)這些結(jié)構(gòu)變化來(lái)診斷瓣膜病，如在左室長(zhǎng)軸切面、心尖五腔切面和大動(dòng)脈短軸切面顯示的二尖瓣和主動(dòng)脈瓣鈣化[14-15]。

也有研究表明，老年退行性心臟瓣膜病的發(fā)生與發(fā)展可能與miR-222有關(guān)，miR-222在心臟瓣膜組織中的表達(dá)變化可能影響炎癥途徑，從而促進(jìn)心臟瓣膜的退行性改變[16]。此外，miR-21能通過(guò)調(diào)節(jié)Bcl-2蛋白表達(dá)，促進(jìn)心臟纖維化進(jìn)程，進(jìn)一步促進(jìn)纖維化和瓣膜結(jié)構(gòu)的病理性改變。研究發(fā)現(xiàn)，在心臟瓣膜病引起的心力衰竭患者中，miR-21的表達(dá)呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，這可能與miR-21抑制程序性細(xì)胞死亡蛋白4的表達(dá)有關(guān)[17]。本研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，心臟瓣膜病組miR-21的表達(dá)量明顯升高，這一結(jié)果提示血清miR-21可能對(duì)心臟瓣膜病患者中的心力衰竭存在診斷價(jià)值。也有研究顯示，在風(fēng)濕性心臟瓣膜病合并持久性房顫的患者中，心房組織內(nèi)miR-21的表達(dá)量呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)。可能是miR-21通過(guò)調(diào)節(jié)心臟組織中的膠原合成與降解，引發(fā)了心臟瓣膜病和心房顫動(dòng)相關(guān)病理過(guò)程[18-19]。本研究中，重度瓣膜功能障礙患者的miR-222、miR-21水平均高于輕度和中度患者，進(jìn)一步說(shuō)明miR-222和miR-21參與調(diào)節(jié)心臟細(xì)胞的增殖、纖維化及炎癥反應(yīng)的過(guò)程，在心臟瓣膜的結(jié)構(gòu)重構(gòu)和瓣膜鈣化中扮演了重要角色。在重度患者中，心臟瓣膜的病理變化更為顯著，這可能導(dǎo)致miR-222和miR-21的表達(dá)更為活躍，以應(yīng)對(duì)病變帶來(lái)的細(xì)胞環(huán)境變化。因此，這些微小RNA的水平變化不僅能反映疾病的嚴(yán)重程度，還可能成為評(píng)估病情進(jìn)展和治療反應(yīng)的潛在生物標(biāo)志物。ROC曲線(xiàn)分析顯示，彩色多普勒超聲、miR-222、miR-21三項(xiàng)聯(lián)合對(duì)老年退行性心臟瓣膜病診斷的AUC高于單項(xiàng)，說(shuō)明聯(lián)合這些檢測(cè)手段可以更有效地識(shí)別和評(píng)估患者的病情。彩色多普勒超聲提供關(guān)于心臟結(jié)構(gòu)和功能的直接視覺(jué)信息，而miR-222和miR-21作為生物分子標(biāo)志物，反映了疾病的分子和細(xì)胞層面變化。這種多模態(tài)診斷策略通過(guò)結(jié)合形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)信息，可以增強(qiáng)對(duì)疾病狀態(tài)的理解，提高診斷的敏感度和特異度。因此，采用這種綜合診斷方法不僅可以在早期更準(zhǔn)確地診斷出疾病，還有助于監(jiān)測(cè)病情進(jìn)展和評(píng)估治療效果，從而為患者制訂個(gè)性化的治療方案，優(yōu)化治療結(jié)果。

綜上所述，老年退行性心臟瓣膜病采用彩色多普勒超聲、miR-222、miR-21診斷，具有較高的價(jià)值，有著較好的效果，值得在臨床中推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1] AJMONE MARSAN N， DELGADO V，SHAH D J，et al.Valvular heart disease： shifting the focus to the myocardium[J].Eur Heart J，2023，44（1）：28-40.

[2] DESJARDIN J T， CHIKWE J， HAHN R T， et al.Sex differences and similarities in valvular heart disease[J].Circ Res，2022，130（4）：455-473.

[3] PETEK B J， BAGGISH A L.Valvular heart disease in athletes[J].Curr Treat Options Cardiovasc Med，2021，23（11）：69-70.

[4]謝禎暉，陳長(zhǎng)源.老年退行性心臟瓣膜病的流行病學(xué)現(xiàn)狀及診療進(jìn)展[J].國(guó)際心血管病雜志，2023，50（2）：65-68.

[5] WALDUM H， WAHBA A.Serotonin-a driver of progressive heart valve disease[J].Front Cardiovasc Med，2022，9（5）：77-75.

[6]貝政平，沈衛(wèi)峰，湯如勇.心血管病診療標(biāo)準(zhǔn)[M].上海：上?？茖W(xué)普及出版社，2013：132-135.

[7]譚政，尚鴻娣，龔亞馳，等.血清Cys-C、Hcy水平與老年退行性心臟瓣膜病患者瓣膜鈣化的相關(guān)性[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2021，41（2）：225-228.

[8]史超，陳可斌，尋增艷，等.血清PTX3、TNF-α、IL-1β、Hcy水平與退行性心臟瓣膜病合并心房顫動(dòng)病人心功能的相關(guān)性[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2021，19（21）：3768-3771.

[9]宋志鵬，李家睿，高蕊，等.沉默信息調(diào)節(jié)因子1基因啟動(dòng)子區(qū)域單核苷酸多態(tài)性與老年退行性心臟瓣膜病的相關(guān)性分析[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2020，100（13）：991-996.

[10]王萬(wàn)里，魏靜，閆鳳琴.頸動(dòng)脈粥樣硬化指標(biāo)與老年退行性心臟瓣膜病瓣膜鈣化程度的相關(guān)性[J].中華高血壓雜志，2021，29（12）：1289-1292.

[11]周筆峰，符妹垂，鄒婧，等.彩色多普勒超聲診斷老年高血壓性心臟病的價(jià)值[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2020，40（9）：1805-1807.

[12]劉海峰，劉燕.多層螺旋CT及彩色多普勒超聲檢查在兒童先天性心臟病中的應(yīng)用價(jià)值探討[J].中國(guó)CT和MRI雜志，2020，18（7）：60-62.

[13]石鵬，張蕾，楊淑麗，等.經(jīng)胸彩色多普勒超聲心動(dòng)圖對(duì)心臟瓣膜病診斷與評(píng)估的價(jià)值[J].中國(guó)臨床保健雜志，2021，24（4）：551-553.

[14]趙琳仁.彩色多普勒超聲心動(dòng)圖在不同年齡段老年鈣化性心臟瓣膜病臨床診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)藥物與臨床，2020，20（1）：43-45.

[15]蘇錦文，張小剛，錢(qián)巧慧，等.超聲心動(dòng)圖對(duì)老年鈣化性心臟瓣膜病診斷價(jià)值[J].中國(guó)臨床醫(yī)生雜志，2020，48（5）：564-566.

[16] ZHOU H，LIN S，LI X，et al.Serum miR-222 is independently associated with atrial fibrillation in patients with degenerative valvular heart disease[J].BMC Cardiovasc Disord，2021，21（1）：98.

[17]李玉梅，盛紅彬，徐恒仕.血清miR-21和miR-423-5p對(duì)心臟瓣膜病伴有心力衰竭患者的診斷價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2018，15（33）：151-154，162.

[18]范燕賓，陳豐毅，李雪博，等.miR-29、miR-21和miR-133在持續(xù)心房顫動(dòng)合并射血分?jǐn)?shù)減低患者中的表達(dá)及臨床意義[J].廣東醫(yī)學(xué)，2023，44（8）：1003-1007.

[19]尹波，李翠翠，朱應(yīng)超，等.心臟瓣膜病中線(xiàn)粒體凋亡調(diào)控因子與microRNA的相互作用[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2019，38（9）：4314-4318.

（收稿日期：2023-12-02） （本文編輯：陳韻）