（2019-11-01發(fā)布2020-01-01實施）

前言

本技術要求按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本技術要求作為人用重組單克隆抗體制品生產的通用技術要求。

本技術要求由上海藥品審評核查中心提出。

本技術要求由上海醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會歸口。

本技術要求起草單位：上海藥品審評核查中心、上海醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會。

本技術要求主要起草人：陳桂良、王沖、張一瓊、成殷、付艷、丁力承、付秋雁、譚建新、劉曉丹、于玲莉、劉芬、夷征掌、吳耀衛(wèi)、朱蓓芬。

本技術要求首批執(zhí)行單位：上海百邁博制藥有限公司、上海復宏漢霖生物制藥有限公司、上海君實生物工程有限公司、上海賽金生物醫(yī)藥有限公司、百濟神州（上海）生物科技有限公司、三生國健藥業(yè)（上海）股份有限公司、勃林格殷格翰生物藥業(yè)（中國）有限公司。

本技術要求為首次發(fā)布。

1范圍

本通用技術要求適用于單抗制品商業(yè)化生產全過程。按照CMP要求制備的臨床試驗藥物可參照執(zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

中華人民共和國衛(wèi)生部藥品生產質量管理規(guī)范

國家藥典委員會中華人民共和國藥典

ICH指導委員會ICHQ5A（R1）來源于人或動物細胞系的生物技術產品的病毒安全性評價

3術語和定義

下列術語和定義適用于本技術要求。

3.1生物反應器

在受控的溫度、通氣、攪拌、pH值和保證無菌等條件下，對細胞進行有控制的培養(yǎng)或特定反應的容器。

3.2細胞培養(yǎng)

是指在體外模擬體內環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使細胞生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。

3.3外源因子

系經(jīng)無意中引入于接種物、細胞基質和（或）生產制品所用的原材料及制品中的、可復制或增殖的污染物，包括細菌、真菌、支原體和病毒等。

3.4中間產物

生產過程中形成的、為下一步工藝所用的物質，不包括原液。

4技術要求

4.1原則

4.1.1本文中所指的人用重組單克隆抗體制品（簡稱“單抗制品”）包括傳統(tǒng)的單克隆抗體（鼠源抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源抗體等）及基于抗體結構的融合蛋白，重點闡述以哺乳動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術制備的IgG型單克隆抗體制品。

4.1.2單抗制品的制造、檢定、保存、運輸及有效期、標簽應當符合《中華人民共和國藥典》中“人用重組單克隆抗體制品總論”的規(guī)定和其他法規(guī)相關規(guī)定。

4.1.3單抗制品高級結構與其功能有高度關聯(lián)性，因此，在單抗制品生產過程中，需保證蛋白正確表達和折疊，并維持結構的穩(wěn)定性。

4.1.3.1穩(wěn)定表達的細胞株在傳代至一定代次后或培養(yǎng)條件發(fā)生變化時，可能會出現(xiàn)表達基因拷貝的丟失或沉默，從而影響產品的表達量。

4.1.3.2細胞培養(yǎng)期間，培養(yǎng)溫度、溶氧、培養(yǎng)基成分、pH值及剪切力等因素可能通過影響細胞狀態(tài)引起蛋白的聚集、降解、二硫鍵錯配、二硫鍵還原，影響蛋白翻譯后的修飾如糖基化、脫氨、N末端焦谷氨酸環(huán)化和氧化。

4.1.3.3在單抗制品純化與制劑過程中，緩沖溶液類型、pH值、鹽離子類型及濃度、表面活性劑、糖類及其它保護劑等可能影響抗體的穩(wěn)定性。

4.1.4單抗制品的病毒污染可能由細胞系、物料或者在生產過程中偶然引入。為確保產品的安全性，需以風險評估及全過程控制的理念控制內源性和外源性的潛在病毒污染。

4.2人員

企業(yè)應當配備具有單抗制品相應專業(yè)知識的生產、質量、管理人員和技術人員，其中生產管理負責人、質量管理負責人及質量受權人應符合《藥品生產質量管理規(guī)范》相關人員資質要求，并具有相關專業(yè)知識和工作經(jīng)驗，能夠在生產、質量管理中履行職責。

4.3廠房與設備

4.3.1單抗制品生產環(huán)境的空氣潔凈度級別應當與產品和生產操作相適應，廠房與設施、設備應最大限度地避免污染和交叉污染，特別是病毒污染，并防止批次間交叉污染。

4.3.1.1應當減少單抗制品生產環(huán)境中的微生物及其它外來微生物。通常原液除菌步驟的環(huán)境控制應當與制劑半成品配制環(huán)境一致。

4.3.1.2單抗制品病毒去除和滅活的前后步驟，應采取必要的預防措施以防止?jié)撛诘牟《疚廴尽?/p>

4.3.1.3應根據(jù)各單擾制品特性和設備情況，采取相應的預防交叉污染措施，如使用專用廠房和設備、階段性生產方式、使用密閉系統(tǒng)等。

4.3.2單抗制品工藝用氣（如壓縮空氣、二氧化碳、氧氣、氮氣等）的質量要求與工藝密切相關，應針對產品進行風險評估，對其質量建立相應的標準和監(jiān)測手段。工藝用氣的供應商應經(jīng)質量管理部門批準。

4.3.3二氧化碳培養(yǎng)箱、生物反應器、純化系統(tǒng)、病毒滅活，去除設備、滅菌設備和除熱原設備等需持續(xù)確認。滅菌設備和除熱原設備的持續(xù)確認應包含裝載方式確認，以保證其滅菌效果和去熱原效果。與產品直接接觸的相關設備需進行清潔驗證，避免污染和交叉污染。

4.3.4深層過濾、連續(xù)流離心機等細胞分離設備，應制定有效操作措施防止這類設備成為污染源。

4.3.5如采用計算機化系統(tǒng)，應建立計算機化系統(tǒng)驗證、計算機化系統(tǒng)管理、數(shù)據(jù)管理等文件，全生命周期管控計算機化系統(tǒng)及其產生的電子數(shù)據(jù)。

4.3.6應對貯藏和運輸用的冷庫及冷鏈運輸設備進行驗證，且保證相關設備、設施能實時監(jiān)控。

4.4物料管理

4.4.1生產用原材料和輔料應符合《中華人民共和國藥典》中“生物制品生產用原材料及輔料質量控制規(guī)程”的要求。應按照風險等級分級控制。盡可能避免使用動物源性的原材料，任何動物源性的成分均應溯源并進行外源因子檢測。

4.4.2培養(yǎng)基、層析填料、病毒過濾膜，濾器、超濾膜包等關鍵物料應與批準的制造及檢定規(guī)程一致。

4.4.3應制定適合產品的培養(yǎng)基內控質量標準。其來源、制備、貯存、檢測過程應當有記錄，貯存條件及效期應符合要求。

4.4.4直接接觸產品的一次性細胞培養(yǎng)袋、一次性儲液袋、除菌過濾器等關鍵一次性材料，企業(yè)應提供適當?shù)尿炞C材料（生物相容性、物理化學相容性、可提取物分析、培養(yǎng)袋完整性和輻照滅菌工藝的有效性等），并使用經(jīng)批準的供應商。

4.4.5質量管理部門應當對生產檢驗用關鍵一次性材料的供應商進行質量評估，如一次性使用系統(tǒng)設計、原材料管理、生產過程監(jiān)控、質量控制與保證和運輸確認等。

4.5生產和質量控制

4.5.1生產和檢定用細胞需建立完善的細胞庫系統(tǒng)。細胞庫系統(tǒng)的建立、檢定、貯存、維護和使用應當符合《中華人民共和國藥典》和批準的制造及檢定規(guī)程的要求。

4.5.2主細胞庫和工作細胞庫的制備應符合《藥品生產質量管理規(guī)范》要求，建立審核、放行程序。

4.5.3應按照《中華人民共和國藥典》對生產終末細胞進行檢定。

4.5.4應驗證細胞庫細胞在凍存及貯存條件下的穩(wěn)定性。

4.5.5液氮貯存設備應當有適當?shù)谋O(jiān)測。任何偏離貯存條件的情況及糾正措施都應記錄并評估。不同細胞庫的貯存應當能夠防止差錯、混淆或交叉污染。

4.5.6在指定人員的監(jiān)督下，經(jīng)批準的人員才能進行細胞庫操作。未經(jīng)批準不得接觸細胞庫。

4.5.7應采用批準的制造及檢定規(guī)程中的工藝組織生產和質量控制。工藝應經(jīng)過驗證并進行持續(xù)工藝確認。

4.5.8從細胞復蘇開始，整個細胞培養(yǎng)過程中應對微生物及其他可能的污染進行控制，包括生物反應器的接種、取樣和收獲的操作必須使用經(jīng)驗證的技術。細胞培養(yǎng)過程中不得有外來微生物的污染，如有污染應對原因進行調查。

4.5.9應記錄細胞株的相關信息，包括細胞株的名稱、代次、批號、編號、凍存日期、數(shù)量。細胞的傳代水平應不超過批準的制造及檢定規(guī)程中的最高限定代次。

4.5.10應對生產用層析填料、深層過濾膜包、一次性關鍵材料、病毒過濾膜，濾器等材料的關鍵信息進行記錄，如名稱、型號，規(guī)格、供應商、批號或其他唯一識別號等。

4.5.11生產過程中應有明確的過程控制參數(shù)，以確保單抗制品安全有效、質量可控：如細胞培養(yǎng)步驟的培養(yǎng)溫度、pH值、攪拌速度、通氣量；層析步驟的上樣載量、上樣流速、柱壓、緩沖液pH值和電導率；低pH孵育步驟的pH值、孵育溫度、時間；制劑半成品配制步驟的配制時長、過濾時長、過濾壓力、灌裝時長等。

4.5.12應對生產過程中關鍵工藝（如細胞培養(yǎng)、純化層析、制劑灌裝/凍干等）的相關參數(shù)進行連續(xù)監(jiān)控，并將連續(xù)監(jiān)控數(shù)據(jù)（如細胞培養(yǎng)控制曲線、層析圖譜、凍干曲線等）納入批記錄。

4.5.13應當采用經(jīng)過驗證的工藝進行病毒去除或滅活處理，操作過程中應當采取有效措施防止已處理的產品被再次污染。

4.5.14含有活細胞等活性物質的廢液、濾器和膜包等，須收集并進行滅活處理。

4.5.15不得將同一層析分離柱用于生產的不同階段。應當明確規(guī)定層析分離柱的合格標準（如柱效、對稱性等）、清潔或滅菌方法及層析填料的使用壽命。層析填料保存、再生及重復使用性的可接受限度應當經(jīng)過研究。

4.5.16未經(jīng)注冊批準，不合格原液及中間產物不得進行返工及重新加工。

4.5.17應當按照《中華人民共和國藥典》和注冊批準要求對原輔料、包裝材料、中間產物、原液、半成品及成品進行檢定。

4.5.18應在研發(fā)階段對產品進行充分的研究，并在此基礎上按特性分析要求對參比品進行全面分析鑒定，參比品的建立和制備可參照“生物制品國家標準物質制備和標定規(guī)程”。應當證明參比品的效價或含量在有效期內保持穩(wěn)定。

4.5.19應對原液和成品進行持續(xù)穩(wěn)定性考察。

4.5.20原液應當參照成品進行留樣，留樣數(shù)量一般至少應當能夠確保按照注冊批準的質量標準完成兩次全檢。

4.5.21純化工藝應保證對產品相關雜質和工藝相關雜質的適當去除。工藝驗證應包括產品相關雜質和工藝相關雜質的去除（如宿主蛋白質和DNA，ProteinA等）。

4.5.22應根據(jù)制品關鍵質量屬性、對產品和工藝理解認識的積累和風險評估的原則，制定相應質量控制策略，確保生產批間一致性和穩(wěn)定性。

4.5.23產品的質量檢定應至少包括以下項目：鑒別、純度和雜質、效價、含量、和其他檢定（如外觀、pH、滲透壓、裝量、無菌、細菌內毒素、可見異物、不溶性微粒檢查）。凍干粉還應考察復溶時間、水分和裝量差異。

4.6質量管理

4.6.1應根據(jù)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)制定中間產物、原液、半成品、成品的貯存條件（包括容器材質）和有效期。中間產物和原液凍融應經(jīng)過驗證。

4.6.2生產工藝變更應符合國家藥品注冊管理等相關要求。應建立有效的風險管理體系，最大限度降低變更導致的風險。需特別注意培養(yǎng)基、生物反應器、細胞分離、層析填料、層析分離柱和病毒過濾等的變更。

4.6.3對一次性使用系統(tǒng)的管理應當基于風險評估的方式，其風險級別通常與一次性使用系統(tǒng)應用中產品所處的生命周期階段和工藝階段有關；還需要考慮一次性使用系統(tǒng)自身的復雜性，以及在特定產品工藝中應用的工藝條件（時間、溫度、溶劑、表面積與體積比率等）等方面。通常應當考慮的要素包含供應商的質量管理及控制策略，檢測項目、方法和標準等。應基于科學和風險對所應用的一次性生產系統(tǒng)及相應產品工藝進行驗證，以確保產品的安全有效。

4.6.4藥品上市許可持有人承擔藥品全生命周期內相關法律和法規(guī)要求的責任，在商業(yè)協(xié)議和質量協(xié)議中與受托生產，檢測企業(yè)明確雙方相應責任。藥品上市許可持有人應當建立藥品上市放行規(guī)程，對藥品生產企業(yè)出廠放行的藥品進行審核，經(jīng)質量受權人簽字后方可放行。不符合國家藥品標準的，不得放行。