［摘 要］ 目的：通過(guò)生物信息學(xué)方法探討重癥支氣管哮喘 ［簡(jiǎn)稱(chēng)重癥哮喘 （SA）］ 的差異表達(dá)基因，分析其作用機(jī)制，并篩選潛在具有治療作用的中藥及活性成分。方法：在高通量基因表達(dá)（GEO） 數(shù)據(jù)庫(kù)中選取GSE136587 和GSE158752 數(shù)據(jù)集，利用R 軟件對(duì)數(shù)據(jù)集進(jìn)行差異分析獲得差異表達(dá)基因，并進(jìn)行蛋白-蛋白相互作用（PPI） 網(wǎng)絡(luò)分析，篩選核心基因，尋找關(guān)鍵通路和樞紐基因。最后將核心基因提交至Coremine 數(shù)據(jù)庫(kù)篩選具有潛在治療作用的中藥，并通過(guò)《中華醫(yī)典》檢索相關(guān)中藥方劑。結(jié)果：共篩選出466個(gè)差異表達(dá)基因。通過(guò)STRING平臺(tái)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)共篩選包括25 kDa突觸關(guān)聯(lián)蛋白（SNAP25）、谷氨酸離子型受體2 （GRIA2）、軸突蛋白1 （NRXN1）、鉀電壓門(mén)控通道亞家族A 成員1 （KCNA1）、突觸囊泡蛋白 1 （SYT1） 和嗜鉻蛋白A （CHGA） 等核心靶點(diǎn)25 個(gè)。基因本體（GO） 功能富集顯示SA 的生物學(xué)過(guò)程與細(xì)胞趨化性和白細(xì)胞遷移等有重要關(guān)系，京都基因與基因組百科全書(shū)（KEGG） 富集的通路主要涉及骨髓白細(xì)胞遷移、白細(xì)胞趨化性、細(xì)胞趨化性、白細(xì)胞遷移、對(duì)外部刺激反應(yīng)的正向調(diào)節(jié)和骨髓白細(xì)胞活化等信號(hào)通路。采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法基于核心靶點(diǎn)篩選得到具有潛在治療SA 作用的中藥367 種，其中人參、水牛角、全蝎和黃芪等中藥涉及多個(gè)核心靶點(diǎn)，與SA 具有高度相關(guān)性，在《中華醫(yī)典》中檢索具有高度相關(guān)性的中藥，共得到17 個(gè)潛在具有治療效果的中藥方劑。結(jié)論：通過(guò)生物信息學(xué)篩選SA的潛在標(biāo)志物和具有治療作用的中藥，為SA早期診斷和發(fā)病機(jī)制研究提供新的靶點(diǎn)，為其治療的中藥方劑研發(fā)提供思路。

［關(guān)鍵詞］ 重癥哮喘； 差異表達(dá)基因； 生物信息學(xué)； 中藥篩選

［中圖分類(lèi)號(hào)］ R256. 12 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

目前全球有超過(guò)3 億人患有支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱(chēng)哮喘），在我國(guó)有超過(guò)3 000 萬(wàn)人患有哮喘［1-2］。盡管多數(shù)哮喘患者已經(jīng)使用多年的藥物治療（吸入性皮質(zhì)類(lèi)固醇或支氣管擴(kuò)張劑） 實(shí)現(xiàn)了良好的癥狀控制，但仍有 5%～10% 的患者按照全球哮喘防治創(chuàng)議（Global Initiative for Asthma， GINA） 推薦的第4-5 級(jí)治療才能夠維持控制或即使在上述治療下仍未控制，癥狀發(fā)生持續(xù)惡化，此類(lèi)哮喘即為難治性支氣管哮喘（severe therapy resistant asthma，STRA） 或重癥支氣管哮喘［簡(jiǎn)稱(chēng)重癥哮喘（severeasthma，SA）］［3］。SA 患者急性加重次數(shù)頻繁，致殘、致死率高，近年來(lái)隨著空氣污染加重等原因，SA 患者發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。但目前SA 通常是由處方用藥劑量和癥狀的控制狀態(tài)來(lái)定義的，發(fā)病機(jī)制尚未明確，治療方案主要是遠(yuǎn)離誘發(fā)因素、抗炎、降低氣道高反應(yīng)和舒張平滑肌，且不同類(lèi)型SA 患者的臨床表現(xiàn)及對(duì)藥物的反應(yīng)存在較大的差異［4-5］。因此加強(qiáng)對(duì)SA 的早期預(yù)測(cè)評(píng)估，更準(zhǔn)確地了解其發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，探討發(fā)病過(guò)程中起到重要作用的關(guān)鍵基因，有助于開(kāi)發(fā)新的治療靶點(diǎn)和預(yù)防策略，及時(shí)阻斷病情發(fā)展， 改善患者預(yù)后。SA 屬于中醫(yī)“ 哮證” 或“喘證”范疇，目前有研究者結(jié)合臨床實(shí)踐與文獻(xiàn)梳理對(duì)治療SA 的辨治經(jīng)驗(yàn)和組方規(guī)律進(jìn)行了初步探索。國(guó)醫(yī)大師晁恩祥教授根據(jù)多年的臨床癥狀學(xué)觀(guān)察及反復(fù)驗(yàn)證，創(chuàng)制了具有祛風(fēng)解痙、宣肺化痰平喘的黃龍疏喘湯， 主要藥物有麻黃、杏仁、地龍、白果、紫蘇子、白芍、石菖蒲和五味子等，對(duì)治療SA 具有良好的效果［6］；馬歡歡［7］ 探討了八味沉香散治療SA 患者的療效，在常規(guī)使用八味沉香散的基礎(chǔ)上，對(duì)患者采取集束化護(hù)理，可有效改善肺功能， 降低并發(fā)癥的發(fā)生率， 提升患者生活質(zhì)量； 秦欣欣等［8］ 基于“ 腎陽(yáng)虛、肺絡(luò)熱” 的診治思路采用二仙湯和青蒿鱉甲湯合生脈飲等中藥治療SA 患者，使患者避免糖皮質(zhì)激素依賴(lài)，提高了治療效果。上述研究總結(jié)了一些中醫(yī)辨證治療SA 的經(jīng)驗(yàn)，但這些研究受個(gè)人知識(shí)體系及臨床經(jīng)驗(yàn)的影響，歸納的內(nèi)容和適用的范圍都不盡相同，使得治療經(jīng)驗(yàn)較難單獨(dú)理解和應(yīng)用，限制了中醫(yī)診療優(yōu)勢(shì)作用的發(fā)揮。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)依托大數(shù)據(jù)技術(shù)集合了藥理學(xué)、分子生物學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)與各類(lèi)網(wǎng)絡(luò)計(jì)算平臺(tái)，由多靶點(diǎn)、多分子和多通路分子機(jī)制，結(jié)合中醫(yī)遺傳表型疾病的多層次信息，篩選并構(gòu)建多層網(wǎng)絡(luò)，直觀(guān)地剖析中藥方劑與疾病的關(guān)聯(lián)性可用于揭示基于復(fù)雜生物系統(tǒng)的中藥方劑作用機(jī)制和科學(xué)依據(jù)［9］。本研究通過(guò)生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)研究SA 關(guān)鍵基因， 結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探索針對(duì)靶點(diǎn)的中藥及方劑， 為后續(xù)更深層次的研究及臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1. 1 數(shù)據(jù)的獲得及處理

基于高通量基因表達(dá)（Gene Expression Omnibus， GEO） 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www. ncbi. nim. nih. gov/geo/） 以“asthma”為關(guān)鍵詞， 檢索哮喘相關(guān)數(shù)據(jù)集， 以樣本量大于20，同時(shí)包含正常人群樣本和SA 樣本作為篩選條件，并對(duì)數(shù)據(jù)集進(jìn)行質(zhì)量控制，保證得到的數(shù)據(jù)集可用于差異分析。使用R 軟件（4. 3. 1 版本） 對(duì)篩選得到的數(shù)據(jù)集進(jìn)行歸一化處理及差異分析，以差異倍數(shù)（fold change，F(xiàn)C） 對(duì)數(shù)的絕對(duì)值|log2FC|≥1，統(tǒng)計(jì)差異顯著性水平Plt;0. 05 為篩選標(biāo)準(zhǔn)得到差異表達(dá)基因，正數(shù)代表上調(diào)，負(fù)數(shù)代表下調(diào)，獲取上調(diào)和下調(diào)基因繪制熱圖，同時(shí)繪制火山圖。

1. 2 核心基因篩選

SA 相 關(guān) 基 因 導(dǎo) 入STRING 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//cn. string-db. org/），設(shè)置對(duì)比物種為“homosapines”，選擇置信度為0. 4，其余參數(shù)選擇默認(rèn)值， 繪制蛋白-蛋白相互作用（protein- protein interaction， PPI） 網(wǎng)絡(luò)， 并下載tsv 格式文件， 將該文件通過(guò)Cytoscape 軟件中的hubba 插件，基于Degree 算法篩選出差異表達(dá)基因PPI 中的核心基因。

1. 3 基因集合富集分析

用 R 軟 件clusterProfiler 和org. Hs. eg. db 包 ， 通過(guò)基因本體（Gene Ontology， GO） 數(shù)據(jù)庫(kù)和京都基因與基因組百科全書(shū)（Kyoto Encyclopedia of Genes andGenomes，KEGG） 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因集合富集分析（Gene Set Enrichment Analysis， GSEA）， 以Plt;0. 05 且基于P 分布的偽發(fā)現(xiàn)率（False DiscoveryRate， FDR） 校正值qlt;0. 02 為篩選條件， 聚焦SA 相關(guān)的生物過(guò)程 （biological process，BP）、細(xì)胞組分（cellular component， CC） 和分子功能（molecular function， MF）， 并通過(guò)R 軟件進(jìn)行相關(guān)圖形繪制。

1. 4 對(duì) SA 具有治療作用的中藥篩選

通過(guò)醫(yī)學(xué)本體信息檢索數(shù)據(jù)庫(kù)（Coremine Medical，https：//coremine. com/medical/#search） 搜集核心基因?qū)?yīng)的中藥。將核心基因輸入CoremineMedical 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索框， 以Plt;0. 05 篩選出具有潛在治療作用的中藥，并統(tǒng)計(jì)頻數(shù)。

1. 5 中藥方劑篩選

將“1. 4”中篩選的對(duì)SA具有潛在治療作用的中藥通過(guò)《中華醫(yī)典》（第5 版）［10］予以檢索，再以“哮”和“喘”為關(guān)鍵詞，選擇在結(jié)果中檢索，尋找中醫(yī)古籍中的記載，探索其組方配伍。

2 結(jié) 果

2. 1 SA的差異基因獲取

在 GEO數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選得到GSE136587 和GSE158752 數(shù)據(jù)集，僅保留SA患者和正常對(duì)照組人群的支氣管上皮細(xì)胞樣本以進(jìn)一步分析。各基因芯片數(shù)據(jù)集包含樣本例數(shù)和芯片平臺(tái)等信息。見(jiàn)表1。

采用R 語(yǔ)言對(duì)GSE136587 和GSE158752 基因芯片數(shù)據(jù)集進(jìn)行歸一化處理，去除各樣本間批次效應(yīng)，使得芯片內(nèi)的樣本數(shù)據(jù)處于同一尺度（圖1），減小奇異樣本數(shù)據(jù)導(dǎo)致的不良影響。結(jié)果顯示：GSE136587 和GSE158752 數(shù)據(jù)集芯片間具有良好的一致性，可用于差異表達(dá)基因的分析。

將2 個(gè)數(shù)據(jù)集合并， 并對(duì)健康組（H 組） 與SA 組（S 組） 進(jìn)行差異分析，共獲得466 個(gè)差異基因，其中98 個(gè)上調(diào)基因，368 個(gè)下調(diào)基因，并繪制火山圖和熱圖（圖2）。

2. 2 SA的PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心靶點(diǎn)分析

將差異表達(dá)基因?qū)隨TRING 平臺(tái)構(gòu)建PPI 網(wǎng)絡(luò)， 通過(guò)Cytoscape 軟件中的hubba 插件“MCC” 算法確定核心基因（圖3），共篩選包括25 kDa 突觸關(guān)聯(lián)蛋白（synaptosomal associated protein 25 kDa，SNAP25）、谷 氨 酸 離 子 型 受 體 2 （glutamateionotropic receptor AMPA type subunit 2，GRIA2）、軸突蛋白1 （neurexin 1，NRXN1）、鉀電壓門(mén)控通道亞家族A 成員1 （potassium voltage-gated channelsubfamily a member 1，KCNA1）、突觸囊泡蛋白 1（synaptotagmin 1， SYT1） 和嗜鉻蛋白A（chromogranin A， CHGA） 等核心靶點(diǎn)25 個(gè)。其中SNAP25 的分值最高（表2）。

2. 3 GO 功能和 KEGG 信號(hào)通路富集分析

通過(guò)DAVID 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行關(guān)鍵靶點(diǎn)的GO 功能富集分析和KEGG 信號(hào)通路富集分析。GO 功能富集分析結(jié)果顯示：與生物過(guò)程相關(guān)的條目主要富集在髓細(xì)胞白細(xì)胞遷移、白細(xì)胞趨化反應(yīng)、細(xì)胞趨化性、白細(xì)胞遷移和對(duì)外部刺激反應(yīng)的正向調(diào)節(jié)；與細(xì)胞組分相關(guān)的條目主要富集在三級(jí)顆粒、分泌顆粒膜、三級(jí)顆粒膜、分泌顆粒腔和細(xì)胞質(zhì)囊泡腔；與分子功能相關(guān)的條目主要富集在模式識(shí)別受體活性、門(mén)控通道活動(dòng)、被動(dòng)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性和網(wǎng)絡(luò)離子通道活性（圖4）。KEGG 信號(hào)通路富集分析結(jié)果顯示：核心基因高表達(dá)顯著富集的通路有骨髓白細(xì)胞遷移、白細(xì)胞趨化性、細(xì)胞趨化性、白細(xì)胞遷移、對(duì)外部刺激反應(yīng)的正向調(diào)節(jié)、骨髓白細(xì)胞活化、對(duì)脂多糖的反應(yīng)、對(duì)細(xì)菌來(lái)源分子的反應(yīng)、粒細(xì)胞遷移、細(xì)胞因子產(chǎn)生的正調(diào)控、粒細(xì)胞趨化性、中性粒細(xì)胞遷移、趨化因子介導(dǎo)的信號(hào)通路、中性粒細(xì)胞趨化性、對(duì)細(xì)菌的防御反應(yīng)、單核細(xì)胞遷移、防御反應(yīng)的正向調(diào)節(jié)、對(duì)趨化因子的反應(yīng)、細(xì)胞對(duì)趨化因子的反應(yīng)和腫瘤壞死因子的產(chǎn)生等相關(guān)通路（圖5 和6）。

2. 4 具有治療作用的中藥篩選

將核心基因靶點(diǎn)導(dǎo)入Coremine Medical 數(shù)據(jù)庫(kù)， 查找相對(duì)應(yīng)中藥，以Plt;0. 05 作為篩選條件， 規(guī)范中藥名后進(jìn)行整理， 共得到367 味中藥， 其中茶樹(shù)根、人參、黃芪、水牛角、魚(yú)腦石、魚(yú)鰾膠、全蝎、蜂毒和黃連等涉及4 個(gè)及4 個(gè)以上基因靶點(diǎn)， 具有高度相關(guān)性（表3）。

2. 5 中藥方劑篩選

通過(guò)第5版《中華醫(yī)典》，分別將篩選出的具有潛在治療作用的中藥作為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，在檢索結(jié)果中再以“哮”和“喘”為檢索關(guān)鍵詞進(jìn)一步篩選，發(fā)現(xiàn)中醫(yī)古籍中與這些中藥相關(guān)且對(duì)哮喘有治療作用的方劑共17 種。其中，人參相關(guān)記載較多，《傷寒指掌》《傷寒捷訣》《重訂通俗傷寒論》《傷寒論辯證廣注》《傷寒大白》《傷寒總病論》中分別記載了參附湯、人參敗毒散、人參瀉肺湯、人參竹葉湯和人參白虎湯等8 種含有人參的方劑；《傷寒指掌》《重訂通俗傷寒論》分別記載了含有黃芪的方劑黃芪建中湯和可保立蘇湯；《傷寒解毒療法》《壽世保元》《古今醫(yī)統(tǒng)大全》分別記載了含有全蝎的方劑溫補(bǔ)定驚丸、吐風(fēng)散、千金散、尊重丸和再生丹；《傷寒指掌》中記載了含有黃連的方劑葛根黃芩黃連湯；《外科心法要訣》中記載了含有魚(yú)腦石的方劑萬(wàn)氏潤(rùn)燥膏；茶樹(shù)根、水牛角、魚(yú)鰾膠和蜂毒未見(jiàn)相關(guān)記載。見(jiàn)表4。

3 討 論

SA 患者發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，癥狀嚴(yán)重，肺功能明顯降低，且預(yù)后極差，病死率較高。其治療原則為早期識(shí)別、及時(shí)干預(yù)和改善預(yù)后［11］。因此， 加強(qiáng)對(duì)SA 的早期預(yù)測(cè)評(píng)估和及時(shí)發(fā)現(xiàn)并強(qiáng)化控制炎癥反應(yīng)能及時(shí)阻斷病情發(fā)展，改善患者預(yù)后［12］。臨床上通常采用檢測(cè)血清白細(xì)胞介素6 （interleukin-6，IL-6） 水平和肺功能指標(biāo)來(lái)評(píng)估哮喘患者病情，但將其作為判斷SA 患者氣道炎癥控制標(biāo)準(zhǔn)以及評(píng)估病情嚴(yán)重程度指標(biāo)的靈敏度和特異度較差，臨床應(yīng)用價(jià)值較低。本研究通過(guò)將SA 患者與健康人支氣管上皮細(xì)胞中的表達(dá)基因進(jìn)行差異分析， 篩選出SA 患者與健康人的466 個(gè)差異表達(dá)基因， 其中98 個(gè)上調(diào)基因，368 個(gè)下調(diào)基因；并通過(guò)PPI 分析篩選出了關(guān)鍵候選基因。PPI 網(wǎng)絡(luò)顯示上述SA 關(guān)鍵基因包含2 個(gè)蛋離子型谷氨酸受體2 白質(zhì)相互作用群。其中1 個(gè)PPI 群包含SNAP25、GRIA2、NRXN1 和CHGA 等。CHGA 被視為機(jī)體遭受致命打擊后產(chǎn)生的重要的急性期蛋白，與機(jī)體應(yīng)激狀態(tài)下的多種防御和自適應(yīng)調(diào)節(jié)有關(guān)，其能夠影響血管和心肌緊張度、炎癥免疫狀態(tài)及內(nèi)皮細(xì)胞通透性等重要機(jī)體生理功能以及反應(yīng)交感神經(jīng)系統(tǒng)緊張度水平［13-14］。CHGA 濃度與多種危重病評(píng)分呈正相關(guān)關(guān)系，死亡患者CHGA 濃度較生存患者的明顯增高。在重癥患者中， CHGA 表達(dá)水平升高與非全身炎癥反應(yīng)引起的機(jī)體嚴(yán)重應(yīng)激有關(guān)，急性應(yīng)激引起糖皮質(zhì)激素的釋放能在基因?qū)用嫔险{(diào)CHGA 的合成［15］。這表明CHGA 可能參與非全身炎癥反應(yīng)狀態(tài)下的多臟器衰竭發(fā)生的病理過(guò)程［16］， CHGA 可作為重癥患者早期評(píng)估的生物標(biāo)志物［17］ 。SNAP25、GRIA2 和NRXN1 等靶點(diǎn)與哮喘相關(guān)性未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，但其部分是神經(jīng)傳遞作用相關(guān)蛋白或興奮性神經(jīng)遞質(zhì)受體［18-20］，提示可能與神經(jīng)源性氣道炎癥有關(guān)。另一核心PPI 網(wǎng)絡(luò)包含白細(xì)胞介素10 （interleukin-10， IL-10）、白細(xì)胞介素33（interleukin-33， IL-33）、CC 趨化因子配體3（chemokine ligand 3， CCL3）、CXC 趨化因子 9（CXC chemokine ligand 9， CXCL9） 和干擾素γ（interferon-γ，IFN-γ） 等，這些靶點(diǎn)與哮喘密切相關(guān)［21-22］。白細(xì)胞分化抗原（cluster of differentiation163，CD163） 是一種人體血紅蛋白-觸珠蛋白復(fù)合物的親和力受體，與肺間質(zhì)密切相關(guān)，其可溶性形式sCD163 是活化的M2 巨噬細(xì)胞（alternativelyactivated macrophages， M2） 的標(biāo)志物［23］。CD163可以作為血紅蛋白受體參與血紅素亞基降解和清除， 發(fā)揮清道夫受體的功能， 避免了疾病的產(chǎn)生［24］， 也可以作為病原體的受體， 與病毒的吸附有關(guān)［25］。CD163 相關(guān)信號(hào)能夠誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞激活并產(chǎn)生血清IL-6 和CXC 趨化因子2 （CXCchemokine ligand 2，CXCL2） 等促腫瘤細(xì)胞因子，其陽(yáng)性表達(dá)可導(dǎo)致支氣管鱗狀細(xì)胞的病變惡化［26］。IL-33 主要由氣道上皮細(xì)胞等產(chǎn)生的關(guān)鍵細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)各種細(xì)胞因子的產(chǎn)生， 包括白細(xì)胞介素4（interleukin-4，IL-4） 和白細(xì)胞介素5 （interleukin-5，IL-5）和白細(xì)胞介素13（interleukin-13，IL-13）［27］。IL-33 通過(guò)增加Th2 細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和抑制抗病毒免疫力從而導(dǎo)致哮喘惡化［28］。綜上，CHGA、CD163 和IL-33 及其受體可作為SA 藥物干預(yù)的潛在生物標(biāo)志物或靶點(diǎn)。

SA 是以中性粒細(xì)胞為主的肺部炎癥和廣泛的氣道重塑，GO 功能和 KEGG 信號(hào)通路富集分析結(jié)果顯示：SA 的生物學(xué)過(guò)程與細(xì)胞趨化性和白細(xì)胞遷移有重要關(guān)系。通路富集分析結(jié)果顯示這些基因主要富集于趨化因子介導(dǎo)的信號(hào)通路。趨化因子是誘發(fā)哮喘的主要介質(zhì)，其高水平表達(dá)與臨床哮喘嚴(yán)重程度和進(jìn)展呈正相關(guān)關(guān)系，其在許多肺部炎癥和纖維化疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用［29］。在SA患者中， CXC 趨化因子表達(dá)水平升高能夠促進(jìn)肺組織和支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage，BAL） 中中性粒細(xì)胞數(shù)量增加， 從而誘導(dǎo)產(chǎn)生肺損傷以及引發(fā)肺組織炎癥和膠原沉積［30］。而頻繁的肺部感染引起的過(guò)敏原暴露增加了趨化因子的釋放，并削弱氣道上皮細(xì)胞的防御功能，導(dǎo)致上皮病毒負(fù)荷增加、Th2 型炎癥和氣道重塑，影響氣道上皮功能和細(xì)胞修復(fù)， 是SA 發(fā)病機(jī)制的核心環(huán)節(jié)［31］。因此，阻斷氣道上皮損傷可為SA 治療提供新的切入點(diǎn)。

本研究通過(guò)Coremine Medical 數(shù)據(jù)庫(kù)分析得到SA 治療的潛在中藥， 其中茶樹(shù)根、人參、黃芪、魚(yú)腦石、魚(yú)鰾膠、水牛角、全蝎和黃連等中藥對(duì)應(yīng)多個(gè)SA 的核心標(biāo)志物?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明：人參制劑中的主要活性成分人參皂苷Rh1 通過(guò)抑制IL-4 和IL-5 從而抑制Th2 細(xì)胞在一定程度上逆轉(zhuǎn)Th1/Th2 功能失衡， 達(dá)到抗炎并緩解哮喘的作用［32］， 人參皂苷Rh2 能顯著降低哮喘小鼠IL-4、IL-5、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothlialgrowth factor， VEGF） 和基質(zhì)金屬蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9， MMP-9） mRNA 及蛋白表達(dá)水平， 從而抑制氣道重塑的發(fā)生［33］。全蝎可以阻止氣道口徑縮小，緩解呼吸道痙攣，促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬功能，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為淋巴母細(xì)胞等作用，從而緩解并改善支氣管哮喘的癥狀［34］；黃芪多糖（astragalus polysaccharides， APS） 是中藥黃芪的主要活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和抗腫瘤等多種生物活性，其不僅能夠減少哮喘患者嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)、減輕氣道管壁增厚及降低上皮細(xì)胞膠原沉積來(lái)減輕氣道高反應(yīng)性，還能顯著減輕氣道黏液分泌改善氣道重塑［35-36］。應(yīng)用這些中藥治療支氣管哮喘在中醫(yī)古籍中具有相關(guān)記載，特別是近年來(lái)應(yīng)用人參五味子湯治療支氣管哮喘具有較多相關(guān)研究［37-39］， 但未見(jiàn)與SA 相關(guān)研究。

綜上所述，這些藥物及方劑為治療SA 的新藥研發(fā)及中藥方劑研發(fā)提供思路以及理論依據(jù)， 為SA 的臨床治療和后續(xù)試驗(yàn)研究提供新方向。本研究基于理論層面篩選SA 可能治療靶點(diǎn)、中藥及方劑，具有一定局限性，后期將開(kāi)展進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究對(duì)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：陳麗平參與研究設(shè)計(jì)、論文構(gòu)思和論文撰寫(xiě)，龐立業(yè)參與數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)分析，韓立參與論文審閱，卞華參與研究項(xiàng)目的監(jiān)督和指導(dǎo)。

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[基金項(xiàng)目] 國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目（81704200）；第五批全國(guó)中醫(yī)臨床優(yōu)秀人才研修項(xiàng)目（國(guó)中醫(yī)藥人教函〔2022〕239 號(hào)）； 河南省科技廳科技攻關(guān)項(xiàng)目（222102310551）； 河南省科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目（232300421192）