杜 玫 邢龍飛 胡庭堯 朱文婷 馬薇薇 郭長青

(北京中醫(yī)藥大學(xué),北京,100029)

膝骨關(guān)節(jié)炎(Knee Osteoarthritis,KOA)是以膝關(guān)節(jié)疼痛、活動(dòng)受限、腫脹、僵硬等為主要臨床癥狀的骨關(guān)節(jié)疾病[1]。關(guān)節(jié)軟骨是維持膝關(guān)節(jié)功能的重要因素,其正常的力學(xué)環(huán)境對維持關(guān)節(jié)的穩(wěn)定性具有重要意義[2]。KOA發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,生物力學(xué)因素是誘發(fā)KOA及其形成過程中的關(guān)鍵因素,膝關(guān)節(jié)力學(xué)的失衡導(dǎo)致局部關(guān)節(jié)軟骨承受的應(yīng)力異常,加劇軟骨的磨損、疼痛,導(dǎo)致軟骨退變誘發(fā)KOA[3]。在此過程中,軟骨的化學(xué)成分、結(jié)構(gòu)以及其他力學(xué)特征都發(fā)生顯著變化,使得其液體承載能力和纖維的抗拉伸能力受到嚴(yán)重削弱,從而引起軟骨變形、細(xì)胞凋亡以及纖維衰減[4-5]。由于關(guān)節(jié)軟骨出現(xiàn)破壞,滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)作用于神經(jīng)元,引發(fā)疼痛[6]。研究表明,白細(xì)胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎疾病的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用,作為炎癥介質(zhì)二者協(xié)同激活炎癥信號通路后迅速傳遞信號,導(dǎo)致大量相關(guān)基因表達(dá),增加炎癥介質(zhì)、趨化因子、黏附因子以及酶分泌,加重關(guān)節(jié)炎癥和疼痛,導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨破壞程度加劇,加速KOA進(jìn)程,最終對關(guān)節(jié)的功能產(chǎn)生不利影響[7]。因此,恢復(fù)膝關(guān)節(jié)軟骨正常應(yīng)力、抑制炎癥介質(zhì)釋放是延緩軟骨退變從而治療KOA的有效方法。

前期研究已證實(shí),針刀“調(diào)筋”可有效調(diào)節(jié)肌肉-肌腱力學(xué)特性進(jìn)而恢復(fù)關(guān)節(jié)良性應(yīng)力環(huán)境,改善軟骨組織合成和分解以緩解軟骨退變,發(fā)揮針刀“治骨”的作用[8]。但針刀對膝關(guān)節(jié)軟骨力學(xué)方面以及滑膜液炎癥介質(zhì)的直接影響尚不清楚。本研究意在通過觀察針刀干預(yù)后膝關(guān)節(jié)、關(guān)節(jié)軟骨應(yīng)力變化、軟骨形態(tài)學(xué)變化及炎癥介質(zhì)表達(dá)的變化,分析針刀干預(yù)對軟骨受力、退變的影響,進(jìn)一步探討針刀治療KOA的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 健康24周齡的清潔級新西蘭雄性兔28只,體質(zhì)量2.0～2.5 kg,分籠飼養(yǎng),室溫保持(20±2)℃,濕度為40%～60%,自然光線充足照射,標(biāo)準(zhǔn)飲食供給,自由攝食飲水,實(shí)驗(yàn)室定期進(jìn)行紫外線消毒。實(shí)驗(yàn)場地由北京富龍騰飛實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究院有限公司提供,合格證號：SYXK(京)2018-0041。本研究通過實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)審批(倫理審批號：BUCM-4-2022010101-1097)。

1.1.2 試劑與儀器 3%戊巴比妥鈉溶液(Sigma,德國,貨號：P1110);乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic Acid,EDTA)脫鈣液(塞維爾公司,貨號：G1105);蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin,HE)染液套裝(塞維爾公司,貨號：G1003);磷酸鹽緩沖液(Phosphate Buffered Saline,PBS)(塞維爾公司,貨號：G0002);酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)試劑盒(南京建成生物工程研究有限公司,貨號：CB10058-Rb、CB10011-Hs);一次性無菌針灸(蘇州針灸用品有限公司,規(guī)格：0.2 mm×13 mm);韓氏穴位神經(jīng)刺激儀(北京華衛(wèi),型號：LH202);一次性針刀(北京卓越華友醫(yī)療器械有限公司,規(guī)格：0.3 mm×30 mm);臺式高速冷凍離心機(jī)[大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器(北京)股份公司,型號：D3024];酶標(biāo)檢測儀(BioTeK,美國,型號：Epoch);磁共振成像系統(tǒng)(飛利浦,日本,型號：Achieva3.0T)。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 選取健康清潔級24周齡雄性新西蘭兔28只,適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為空白組、模型組、針刀組、電針組4組,每組7只?？瞻捉M正常飼養(yǎng),對模型組、電針組、針刀組進(jìn)行兔左下肢制動(dòng)。造模前對兔禁食,持續(xù)10～16 h,禁食結(jié)束后對耳緣靜脈進(jìn)行消毒,以30 mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)確定劑量后進(jìn)行麻醉。麻醉后,將兔仰臥位固定,將其左后肢牽拉至伸直位,保證膝關(guān)節(jié)處于180°伸直位、踝關(guān)節(jié)則保持背屈60°。將高分子繃帶軟化后,從腹股溝纏繞至足踝部進(jìn)行固定；留出兔足趾部分以便觀察其供血情況。為防止兔啃咬破壞模型，使用透明膠紙?jiān)谕獠窟M(jìn)行纏繞，保護(hù)高分子繃帶[9]。定期觀察模型損壞、松動(dòng)情況以及兔左下肢供血情況，有效制動(dòng)持續(xù)6周。

1.2.2 干預(yù)方法 拆除各組固定后開始進(jìn)行干預(yù)。1)空白組：正常飼養(yǎng),不作任何處理,每天正常抓取。2)模型組：造模后每天正常抓取。3)電針組：造模成功后,根據(jù)《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》動(dòng)物穴位定位,取以下四穴進(jìn)行干預(yù)：梁丘、血海、內(nèi)膝眼、外膝眼。采用0.2 mm×13 mm一次性無菌針灸對上述腧穴進(jìn)行治療,選用波形疏密波行電針治療,強(qiáng)度3 mA,頻率2/100 Hz,20 min/次,隔天治療1次,治療3周。4)針刀組：造模成功后,選取兔膝關(guān)節(jié)股內(nèi)外側(cè)肌肌腱止點(diǎn)、股直肌肌腱止點(diǎn)、股二頭肌肌腱止點(diǎn)及鵝足滑囊處為治療點(diǎn)。常規(guī)備皮、消毒后,選用規(guī)格0.3 mm×30 mm一次性針刀刺入,針刀刀刃平行于肌腱,刀體與皮膚切面垂直,刺入后沿肌腱與骨連接方向進(jìn)行松解,出針刀后進(jìn)行按壓止血。治療頻率為1次/周,治療3周。

1.2.3 檢測指標(biāo)與方法

1.2.3.1 取材 各組動(dòng)物于KOA模型制備前、造模后、治療結(jié)束后分別以3%戊巴比妥麻醉,采用3.0T MRI對兔患側(cè)膝關(guān)節(jié)進(jìn)行活體掃描,獲取相關(guān)MRI圖像數(shù)據(jù)。治療結(jié)束后將各組動(dòng)物以3%戊巴比妥麻醉過量致死后提取家兔左后肢關(guān)節(jié)液。切開、分離皮下組織后,暴露髕骨韌帶。膝關(guān)節(jié)彎曲45°,選取髕骨韌帶中部和股骨下緣進(jìn)入針頭,在膝關(guān)節(jié)充分彎曲和拉伸后將關(guān)節(jié)液收集到凍干管中,在4 ℃下以1 000 r/min,離心半徑15 cm,離心15 min,去除細(xì)胞和關(guān)節(jié)碎片,于-80 ℃下保存。打開關(guān)節(jié)腔,在無菌環(huán)境中使用直徑4 mm的環(huán)鉆對關(guān)節(jié)軟骨面進(jìn)行操作。從兔膝關(guān)節(jié)脛骨和股骨軟骨面的中心負(fù)重區(qū)垂直切割出圓柱狀的軟骨-軟骨下骨結(jié)合體組織塊,鉆取深度為3 mm。

1.2.3.2 光鏡HE染色觀察軟骨組織 對組織塊進(jìn)行沖洗,使用生理鹽水清潔其附著的血液、黏液及污物等,浸入4%多聚甲醛溶液中固定72 h。將軟骨標(biāo)本進(jìn)行脫鈣、脫水、透明、透蠟后進(jìn)行石蠟包埋,切片4 μm,進(jìn)行HE染色,在光鏡下觀察兔膝關(guān)節(jié)軟骨,并參照Mankin評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評估。

1.2.3.3 ELISA檢測 采用ELISA法測定滑膜液中IL-1β和TNF-α的含量。取出冷凍的滑膜液,恢復(fù)至室溫后離心取上清液。樣品按照ELISA試劑盒程序進(jìn)行檢測,用酶標(biāo)記儀器在450 nm處測量吸光度值。通過與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較,計(jì)算IL-1β和TNF-α的含量。

1.2.3.4 關(guān)節(jié)軟骨接觸面間壓力分布測試 導(dǎo)入核磁掃描文件Dicom,可以得到3種方位視圖,一是軸向視圖,第二、三為矢狀面、冠狀面,由切層數(shù)據(jù)獲得。調(diào)節(jié)閾值范圍使得模型各斷層面達(dá)到最高清晰度后生成3D模型,點(diǎn)擊Smooth調(diào)整模型表面光滑度、完整度,實(shí)現(xiàn)各部分整體表面盡可能符合實(shí)體,如此便可獲得較為逼真的兔膝關(guān)節(jié)3D模型。見圖1。將處理好的3D模型保存為Stl文件,導(dǎo)入到Ansa軟件中進(jìn)行有限元前處理。進(jìn)入軟件點(diǎn)擊表面化處理(To surface)功能生成幾何模型,根據(jù)不同部位進(jìn)行拆分、定義,生成殼網(wǎng)格。網(wǎng)格單元多位四邊形、少數(shù)三角形,即定義其為混合單元。將殼模型定義為實(shí)體模型,并將其劃分為四面體網(wǎng)格模型。對各部分賦予相應(yīng)的材料彈性模量及泊松比[9](表1)。建立接觸面集合(Set),根據(jù)實(shí)際情況將緊密連接的面設(shè)定為綁定(Tie)關(guān)系。

表1 兔膝關(guān)節(jié)有限元模型中各組成部分材料參數(shù)

圖1 兔膝關(guān)節(jié)3D模型

2 結(jié)果

2.1 各組兔軟骨HE光鏡觀察結(jié)果比較 在空白組兔的膝關(guān)節(jié)軟骨中,可以清晰觀察到表淺層、移行層、輻射層以及鈣化層。這4部分從淺至深的結(jié)構(gòu)完整且明確,潮線清晰可見;細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)均清晰可見,分別呈藍(lán)紫色、紫紅色;未觀察到軟骨細(xì)胞聚集及血管通過。鈣化層軟骨可觀察到少量血管。模型組兔膝關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)混亂,4層結(jié)構(gòu)模糊不清,表層和移形層軟骨出現(xiàn)分層剝落,部分區(qū)域剝離到輻射層;潮線扭曲且不規(guī)則,可觀察到有血管延伸至非鈣化層軟骨。電針組兔膝關(guān)節(jié)軟骨組織結(jié)構(gòu)尚清晰,軟骨表面可見不規(guī)則及部分剝脫,部分細(xì)胞出現(xiàn)凋亡,潮線模糊不清,未觀察到血管翳的產(chǎn)生。針刀組兔膝關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)明顯,但是軟骨表面并不完全平滑。同時(shí),軟骨細(xì)胞的層次分布也比較均勻,潮線呈現(xiàn)出規(guī)則且清晰的特點(diǎn),偶有重復(fù)的潮線出現(xiàn)。此外,有少數(shù)血管穿過至非鈣化層軟骨,但是未觀察到血管翳形成。見圖3。

圖3 各組兔膝關(guān)節(jié)軟骨組織病理觀察(HE染色,×200)

2.2 各組兔軟骨Mankin評分 造模后,與空白組比較,模型組兔軟骨Mankin評分升高(P<0.05)。進(jìn)行干預(yù)后,電針組、針刀組兔軟骨Mankin評分較模型組降低(P<0.05);針刀組較電針組兔軟骨Mankin評分降低更為明顯(P<0.05)。見表2。

表2 各組兔關(guān)節(jié)軟骨Mankin評分比較

2.3 各組兔膝關(guān)節(jié)滑液中炎癥介質(zhì)水平比較 與空白組比較,模型組TNF-α、IL-1β水平均顯著升高(P<0.01);與模型組比較,電針組、針刀組TNF-α、IL-1β水平均顯著降低(P<0.01),且針刀組明顯低于電針組(P<0.01)。見表3。

表3 各組兔膝關(guān)節(jié)滑液中TNF-α、IL-1β水平比較

2.4 各組兔有限元結(jié)果分析 與空白組比較,模型組膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力顯著降低(P<0.01)、關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,電針組和針刀組膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力、關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);針刀組與電針組比較,膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力和關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力均增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組兔膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力及關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力數(shù)據(jù)見表4。與空白組比較,模型組膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力、關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力均顯著降低(P<0.01),對比空白組與模型組應(yīng)力云圖可以觀察到,關(guān)節(jié)軟骨表面存在明顯的應(yīng)力集中區(qū)域,主要出現(xiàn)在膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè),且模型組應(yīng)力集中趨勢較空白組更加明顯,應(yīng)力分布出現(xiàn)明顯的不均勻分布;與模型組比較,電針組和針刀組膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力、關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);針刀組與電針組比較,膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力和關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力均增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);觀察電針組、針刀組應(yīng)力云圖可發(fā)現(xiàn),針刀組較電針組應(yīng)力分布更加均勻、應(yīng)力集中區(qū)域減少。各組兔關(guān)節(jié)軟骨應(yīng)力云圖見圖4。

表4 各組兔膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力及關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力比較

圖4 KOA兔膝關(guān)節(jié)屈曲60°關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力

3 討論

KOA屬于中醫(yī)學(xué)“骨痹”“痹病”“膝痹”等范疇[10]。正常膝關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)依賴于骨骼和韌帶提供的靜態(tài)穩(wěn)定性以及由肌肉產(chǎn)生的動(dòng)態(tài)穩(wěn)定性來確保膝蓋部位良性壓力分布,以維持其健康狀態(tài)下軟骨合成與分解過程的平衡,并保護(hù)其功能正常[11]。若膝部周圍的軟組織出現(xiàn)力學(xué)異?；蛘呦リP(guān)節(jié)的動(dòng)靜態(tài)失衡,《素問·痿論篇》曰“宗筋主束骨而利機(jī)關(guān)”的生理功能受到嚴(yán)重?fù)p害,關(guān)節(jié)軟骨會(huì)出現(xiàn)退變、磨損,削弱軟骨的抗拉伸能力,進(jìn)而導(dǎo)致關(guān)節(jié)對位匹配不良、關(guān)節(jié)穩(wěn)定性下降,使應(yīng)力集中更加明顯逐漸引發(fā)疼痛[12]。關(guān)節(jié)失穩(wěn)后異常應(yīng)力環(huán)境加速軟骨退變,最終導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)的骨骼受損,從而引發(fā)筋骨共病,惡性循環(huán)發(fā)展為KOA[13-14]。本團(tuán)隊(duì)前期研究表明,針刀根據(jù)“以痛為輸”原則對軟組織損傷點(diǎn)即壓痛點(diǎn)進(jìn)行松解,并在現(xiàn)代膝關(guān)節(jié)“力學(xué)平衡理論”指導(dǎo)下對膝周韌帶、肌肉-肌腱等高應(yīng)力點(diǎn)進(jìn)行松解,“調(diào)筋”可以有效地改善韌帶和肌腱的生物力學(xué)特性,同時(shí)能夠調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞的合成代謝過程,從而使得針刀發(fā)揮“治骨”作用[15-17]。

在正常的關(guān)節(jié)軟骨中,其基質(zhì)內(nèi)液會(huì)通過物理壓力的作用而與滑液互相轉(zhuǎn)換,從而為軟骨細(xì)胞提供必要的養(yǎng)分以保持其健康的形態(tài)、功能以及新陳代謝[18]。關(guān)節(jié)及軟骨受到的應(yīng)力大小能夠在一定程度上調(diào)控細(xì)胞合成、分泌基質(zhì)等正常生理活動(dòng)。當(dāng)軟骨受壓過大或關(guān)節(jié)負(fù)荷失衡,那么軟骨細(xì)胞和基質(zhì)的構(gòu)造就會(huì)遭受損害并導(dǎo)致軟骨的退化[19]。本團(tuán)隊(duì)在前期研究中發(fā)現(xiàn),針刀能夠通過松解膝周高應(yīng)力點(diǎn)改善軟骨彈性模量,但對整體膝關(guān)節(jié)及軟骨的應(yīng)力變化研究還未涉及。因此,本實(shí)驗(yàn)選擇有限元模擬進(jìn)行膝關(guān)節(jié)整體及軟骨的應(yīng)力分析。有限元分析法是一種理論型的模擬生物力學(xué)變化的研究方法,利用現(xiàn)代仿真技術(shù)建立逼真的兔膝關(guān)節(jié)模型,通過變化參數(shù)來模擬模型的力學(xué)變化情況,解決了傳統(tǒng)生物力學(xué)檢測中無法兼顧的全關(guān)節(jié)動(dòng)態(tài)力學(xué)變化[20]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與空白組比較,模型組膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力及關(guān)節(jié)軟骨最大應(yīng)力均明顯下降,同時(shí)HE染色觀察到,關(guān)節(jié)軟骨組織層次紊亂、出現(xiàn)分層剝脫、潮線扭曲并有血管通過,且到達(dá)非鈣化層軟骨,Mankin評分降低。當(dāng)軟骨處于較低的應(yīng)力環(huán)境時(shí),由于缺乏充足的、生理性的應(yīng)力刺激,使得軟骨細(xì)胞的功能受到抑制、軟骨基質(zhì)的生成量減少。與此同時(shí),軟骨細(xì)胞的病變也會(huì)促使其異常產(chǎn)生能夠引發(fā)基質(zhì)金屬蛋白酶產(chǎn)生的細(xì)胞因子,該蛋白酶的增加會(huì)引起軟骨基質(zhì)降解,這進(jìn)一步增加了軟骨基質(zhì)的損傷程度,同時(shí)也削弱了其形成能力。二者相互影響,最終導(dǎo)致軟骨損傷逐漸加重[21]。在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn),有限元模擬檢測表明電針組、針刀組兔膝關(guān)節(jié)整體應(yīng)力及軟骨最大應(yīng)力均有提升;HE染色觀察到軟骨組織結(jié)構(gòu)均有所改善,Mankin評分均有所升高,且針刀組較電針組更為顯著。因此可以推測針刀干預(yù)能夠恢復(fù)膝關(guān)節(jié)及軟骨應(yīng)力,進(jìn)而改善膝關(guān)節(jié)軟骨損傷程度。

IL-1β和TNF-α是參與骨關(guān)節(jié)炎的常見炎癥介質(zhì)[22]。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以觀察到,與空白組比較,模型組IL-1β和TNF-α表達(dá)明顯增高,這可能是由于模型組膝關(guān)節(jié)受力能力降低、加劇軟骨磨損引發(fā)炎癥反應(yīng)而發(fā)生的變化。研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)關(guān)節(jié)軟骨組織遭受非正常的機(jī)械應(yīng)力時(shí),會(huì)生成一種一氧化氮(Nitric Oxide,NO)分子。這種小分子在軟骨內(nèi)迅速擴(kuò)散后會(huì)在其內(nèi)部快速傳播,并且刺激軟骨細(xì)胞產(chǎn)生大量的IL-1β,基質(zhì)金屬蛋白酶出現(xiàn)持續(xù)高水平表達(dá)。這些細(xì)胞因子的過量產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)中的大分子物質(zhì)遭到破壞而引發(fā)軟骨病變的發(fā)生[23]。IL-1β等物質(zhì)會(huì)由于軟骨變性后基質(zhì)纖維片段及其他分子產(chǎn)物的產(chǎn)生而持續(xù)高水平表達(dá),使基質(zhì)金屬蛋白酶的釋放和活性持續(xù)處于高水平狀態(tài)。其中,IL-1β、TNF-α的過量表達(dá)與骨關(guān)節(jié)炎病理變化密切相關(guān)。IL-1β是一種重要的炎癥介質(zhì),是引起KOA產(chǎn)生并逐漸加重的關(guān)鍵因素,它可以獨(dú)立誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)和軟骨分解,也能夠與其他介質(zhì)一同作用,其表達(dá)水平可以有效體現(xiàn)骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)展過程中軟骨基質(zhì)降解、滑膜破壞的程度。IL-1β水平與骨關(guān)節(jié)受損程度成正相關(guān),它能夠影響滑膜細(xì)胞的生長、分化,使滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞協(xié)同合成并釋放前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)和膠原酶,抑制蛋白多糖的合成及軟骨細(xì)胞的增殖,從而加快了軟骨基質(zhì)的降解[24]。TNF-α是由軟骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的肽類激素,通過炎癥反應(yīng)抑制蛋白聚糖的合成以及骨膠原的產(chǎn)生,進(jìn)而干擾軟骨的合成加速關(guān)節(jié)軟骨破壞。有研究表明,TNF-α能夠通過誘導(dǎo)骨母細(xì)胞產(chǎn)生一種能夠促使骨吸收的破骨因子,并可與IL-1β、單核粒細(xì)胞刺激因子細(xì)胞等共同構(gòu)成炎癥介質(zhì)參與軟骨的吸收,介導(dǎo)骨關(guān)節(jié)組織的炎癥反應(yīng)和破壞[25]。本研究結(jié)果表明,在經(jīng)過電針、針刀的干預(yù)后,2組兔IL-1β和TNF-α表達(dá)水平均有所下降,且針刀組優(yōu)于電針組。由此可以認(rèn)為,針刀能夠通過干預(yù)肌肉-肌腱生物力學(xué)特性以恢復(fù)關(guān)節(jié)異常應(yīng)力環(huán)境,降低KOA關(guān)節(jié)軟骨中炎癥介質(zhì)的含量,改善軟骨細(xì)胞的生長和代謝。

因此,通過以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以認(rèn)為,針刀干預(yù)能夠恢復(fù)關(guān)節(jié)及軟骨良性應(yīng)力環(huán)境,有效抑制KOA軟骨破壞,促進(jìn)炎癥的吸收和消散,延緩軟骨退變,從而發(fā)揮“治骨”的重要作用。本實(shí)驗(yàn)中僅選取單一角度對兔膝關(guān)節(jié)及軟骨力學(xué)環(huán)境進(jìn)行分析,對針刀干預(yù)膝關(guān)節(jié)實(shí)時(shí)力學(xué)的動(dòng)態(tài)變化還有待進(jìn)一步研究。

利益沖突聲明：所有作者聲明無利益沖突。