黃 琴 彭曉明 梅麗萍 韓豎霞△

1. 湖北省中醫(yī)院檢驗科 (湖北 武漢, 430061) 2.湖北省中醫(yī)藥研究院 3.中醫(yī)肝腎研究及應(yīng)用湖北省重點實驗室

原發(fā)性肝癌(PHC)是我國常見的惡性腫瘤之一,PHC起病隱匿,早期的臨床癥狀特異性不強,且發(fā)展迅速,因此PHC的早期發(fā)現(xiàn)具有重要意義[1]。在我國,PHC的主要病因是乙型肝炎病毒(HBV)感染[2]。HBV感染誘導的肝細胞損傷及炎癥壞死是進展為乙型肝炎相關(guān)性肝硬化(HBV-LC)乃至原發(fā)性肝癌(HBC-HCC)的重要因素[3]。目前,在早期肝癌篩查中,維生素K缺乏或拮抗劑-Ⅱ誘導蛋白(PIVKA-Ⅱ)是診斷肝癌的重要指標,具有較高的特異性[4];γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)水平的高低可以反映肝細胞損傷的程度。作為血常規(guī)中的兩個常規(guī)參數(shù),血小板計數(shù)(PLT)與腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系,淋巴細胞計數(shù)(LY)在腫瘤特異性免疫應(yīng)答中起著重要的作用[5]。研究報道GGT與PLT比值(GGT/PLT,GPR)是肝癌的一個獨立預測因子[6]。GGT與LY比值(GGT/LY,GLR)在肝癌患者中可以預測微血管侵犯的發(fā)生及預后[7]。高PLT與LY比值(PLR)是預測肝癌患者預后較差的獨立危險因素[5]。本研究旨在探討PIVKA-Ⅱ、GGT、GPR、GLR、PLR在 HBV 感染后所致不同肝臟疾病患者中的變化情況以及單獨和聯(lián)合檢測對HBV-HCC的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集2020年1月至2022年12月收治的241例HBV相關(guān)性肝病患者的臨床資料,其中慢性乙型肝炎(CHB)患者83例, HBV-LC患者82例, HBV-HCC患者76例。另將同期在本院體檢中心體檢的81例健康人員作為正常對照組(NC組)。CHB組83例中男 62例,女21例,平均年齡(54.46±7.80)歲;HBV-LC組82例中男61例,女21 例,平均年齡(55.43±10.34)歲;HBV-HCC組76例中男58例,女18例,平均年齡(55.83±8.70)歲;NC組81例中男60例,女21例,平均年齡(54.04±6.26)歲。4 組研究對象的性別、年齡均差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05) 。

1.2 診斷標準 CHB、HBV-LC診斷符合2019 年《CHB防治指南》中的相關(guān)標準[3]。HBV-HCC診斷參照2022年《HCC診療指南》中的相關(guān)標準[8]。

1.3 納入及排除標準 納入標準:①均為HBV感染的相關(guān)肝病患者;②年齡18～78歲。排除標準:①合并其他嗜肝病毒及HIV感染者;②伴有心、腎、肺、血液、代謝及胃腸道嚴重疾病者;③孕婦或哺乳期婦女;④過敏體質(zhì)或?qū)Χ喾N藥物過敏者[2]。

1.4 研究方法 采用G2100分析儀(日本富士瑞必歐株式會社)及其配套試劑對血清PIVKA-Ⅱ進行測定;采用AU5800全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)測定血清GGT;采用Unicel DXH800全自動細胞分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)進行血液分析的各項指標測定。PIVKA-Ⅱ的生物參考區(qū)間為0～40 mAU/ml,GGT的生物參考區(qū)間10～60 U/L(男)、7～45 U/L(女)。陽性標準均為檢測結(jié)果高于正常參考區(qū)間上限值。收集各組人員的PLT、LY,計算GPR、PLR、GLR[9]。

1.5 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用GraphPad Prism 9軟件對數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗,不服從正態(tài)分布,采用中位數(shù)(四分位數(shù))[M(P25,P75)]表示,組間比較采用非參數(shù)Kruskal-WallisH及Mann-WhitneyU檢驗;相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)系數(shù)分析;利用二元Logistic回歸分析構(gòu)建PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR聯(lián)合診斷HBV-HCC的模型。采用MedCalc軟件繪制受試者工作特征(ROC)曲線,計算曲線下面積(AUC)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清PIVKA-Ⅱ、GGT以及GLR、GPR、PLR水平比較CHB組、HBV-LC組、HBV-HCC組的PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR水平依次增加,其中兩兩組比較,GGT、GLR、GPR水平差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),HBV-HCC組的PIVKA-Ⅱ水平高于CHB組、HBV-LC組(P<0.05)。CHB組、HBV-LC組的PIVKA-Ⅱ、PLR水平均低于NC組(P<0.05)。見表1。

表1 4組血清PIVKA-Ⅱ、GGT以及GLR、GPR、PLR水平比較 [M(P25,P75)]

2.2 各組血清PIVKA-Ⅱ、GGT陽性情況比較 HBV-HCC組血清PIVKA-Ⅱ、GGT陽性率都大于50%。見表2。

表2 4組血清PIVKA-Ⅱ、GGT陽性情況比較 [例(%)]

2.3 HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT指標的相關(guān)性分析 HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT呈正相關(guān)性;其中,GLR與GGT的相關(guān)系數(shù)最高(r=0.913),PLR與PIVKA-Ⅱ的相關(guān)系數(shù)最低(r=0.122)。見表3。

表3 HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT的相關(guān)性分析

2.4 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR單獨與聯(lián)合檢測對HBV-HCC的診斷價值 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR聯(lián)合檢測的診斷敏感度、AUC以及Youden指數(shù)均高于PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR單獨檢測,GGT、GLR、GPR三者聯(lián)合檢測的特異度達到95.06%。見表4。

表4 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR單獨與聯(lián)合檢測對HBV-HCC的診斷價值

3 討論

目前,我國一般人群乙型肝炎表面抗原(HBsAg)流行率為5%～6%,慢性HBV感染者約7 000萬例,HBV感染原發(fā)性肝癌病死率為38%,臨床對于HBV-HCC的早發(fā)現(xiàn)、早治療對于肝癌患者生存時間的延長和生活質(zhì)量的提高具有重要意義[10]。當前,病理學、影像學和實驗室檢查為臨床診斷HBV-HCC的主要方法。病理檢查雖然為金標準,但它是一種有創(chuàng)性檢查。影像學檢查常有一定的滯后性和主觀性,易發(fā)生偏倚,其對于早期肝癌的診斷敏感度低,結(jié)節(jié)性肝硬化診斷易出現(xiàn)假陽性,不適用于大量的早期篩查。臨床實驗室檢查采用最小創(chuàng)傷性的方式對患者的血液做一些相關(guān)指標的檢查和分析。甲胎蛋白(AFP)是應(yīng)用最廣泛的肝癌血清標志物,但診斷敏感度僅為55%～65 %,診斷效果仍不理想[11]。PIVKA-Ⅱ是一種無凝血活性的異常的凝血酶原。凝血酶原前體轉(zhuǎn)變?yōu)槟冈蕾嚲S生素K,肝癌患者因肝細胞病變合成異常凝血酶原[12]。近年來許多研究表明PIVKA-Ⅱ診斷肝癌具有很高的特異性,肝癌診療指南中也指出將其作為肝癌早期診斷標志物,特別是針對血清AFP陰性人群[8,13-15]。本研究結(jié)果顯示,HBV-HCC組的PIVKA-Ⅱ水平高于CHB組、HBV-LC組(P<0.05),HBV-HCC組陽性率大于50%,診斷特異性為97.53%。GGT也主要來源于肝臟,用于肝功能的監(jiān)測和評估。肝硬化、肝癌患者肝臟功能受損,代謝能力減弱,導致GGT水平增高。研究表明GGT可以聯(lián)合PIVKA-Ⅱ提高肝癌的檢出率[16]。PLT和LY是血常規(guī)中的常規(guī)監(jiān)測指標,其在HBV-HCC的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮巨大作用。PLT可釋放5-羥色胺誘導血管的生成及肝細胞的再生,加速肝硬化進程,從而誘發(fā)HBV-HCC[17]。腫瘤免疫中的淋巴細胞以T細胞為主,通過識別腫瘤細胞分泌的可溶性抗原,激活免疫細胞,或者通過直接的細胞毒性作用,發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)[18,19]。據(jù)報道,GLR、GPR、PLR這三個指標作為新的炎癥因子,是肝癌的預測、發(fā)展和預后監(jiān)測中的重要指標[5-7]。本研究表明CHB組、HBV-LC組、HBV-HCC組的GLR、GPR水平依次增加,其中組間兩兩比較,GLR、GPR水平差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),CHB組、HBV-LC組的PLR水平均低于NC組(P<0.05)。通過相關(guān)性分析,HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT呈正相關(guān)性,GLR與GGT的相關(guān)性系數(shù)最高為0.913,PLR與PIVKA-Ⅱ的相關(guān)性系數(shù)最低為0.122。GLR、GPR、PLR三者對于HBV-HCC的診斷特異度均大于85%,靈敏度分別為68.42%、76.32%、36.84%,其中PLR的Youden指數(shù)為0.233,雖然PLR對HBV-HCC的診斷具有一定的特異度,但是綜合評估其診斷價值偏低。

為了提高HBV-HCC的診斷準確度,本研究采用 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR聯(lián)合檢測診斷HBV-HCC。結(jié)果顯示,GGT、GLR、GPR三者聯(lián)合診斷HBV-HCC的AUC為0.909,特異度為95.06%;PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR四者聯(lián)合診斷HBV-HCC的AUC為0.934,靈敏度提高至89.47%。表明聯(lián)合檢測為提高HBV-HCC診斷的有效方法。同時,由于GGT,PLT和LY是常規(guī)的檢測參數(shù),相比于PIVKA-Ⅱ檢測費用較低,操作簡單,可以廣泛用于HBV感染后肝臟疾病發(fā)展的基層醫(yī)院監(jiān)測。綜上所述,PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR的聯(lián)合檢測有助于HBV-HCC的早期診斷。