陳國(guó)慶 張惠文

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院 上海市兒科醫(yī)學(xué)研究所兒科內(nèi)分泌遺傳代謝病研究室（上海 200082）

1 黏多糖貯積癥Ⅱ型概述

黏多糖貯積癥Ⅱ型（mucopolysaccharidosis type Ⅱ，MPS Ⅱ）是MPS 中唯一一種X 連鎖隱性遺傳病。MPS Ⅱ發(fā)病率約為1.07/10 萬(wàn)，是我國(guó)和其他東亞地區(qū)最常見(jiàn)的MPS類型，約占所有MPS的一半。該病于1917年由Hunter醫(yī)生首次描述，故又稱為Hunter 病[1]。MPS Ⅱ是由編碼艾杜糖‐2‐硫酸酯酶（iduronate 2‐sulfatase,IDS）的IDS基因變異所導(dǎo)致，該酶催化硫酸皮膚素（dermatansulphate，DS）和硫酸乙酰肝素（heparansulphate，HS）的2‐硫酸基團(tuán)水解。艾杜糖‐2‐硫酸酯酶缺陷導(dǎo)致這兩種糖胺聚糖（glycosaminoglycans，GAGs）無(wú)法正常水解，在組織中形成病理性堆積，累及多器官并影響生理功能，此為MPSⅡ發(fā)病的主要病理生理機(jī)制。

根據(jù)患者有無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，MPS Ⅱ型主要分為兩種類型，即有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的嚴(yán)重型和無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的輕型。共同臨床癥狀和體征包括面容粗糙、骨骼畸形和關(guān)節(jié)僵硬、生長(zhǎng)遲緩所致矮身材、呼吸道感染和呼吸困難、爪形手和心臟損傷等。聽(tīng)力減退是該病的特征性表現(xiàn)之一[2]。至少三分之二患者有腹股溝疝和臍疝、肝脾腫大[3‐5]。嚴(yán)重型患者發(fā)病早，有認(rèn)知障礙和重度行為障礙，智力落后較為嚴(yán)重。癥狀進(jìn)展較快，通常在生命第二個(gè)或第三個(gè)十年早期死于該疾病。輕型患者主要以皮膚，骨骼改變?yōu)橹?，一般不累及中樞神?jīng)系統(tǒng)，可活到40～50歲或更久。常見(jiàn)死亡原因是呼吸衰竭或心力衰竭[6]。

2 黏多糖貯積癥Ⅱ型診斷與基因診斷

MPSⅡ的確診需要結(jié)合臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查，酶活性測(cè)定和基因檢測(cè)進(jìn)行綜合診斷。出現(xiàn)MPSⅡ典型癥狀、新生兒篩查陽(yáng)性或有家族史的疑似患兒需要進(jìn)一步檢測(cè)IDS活性和尿GAGs。IDS活性低于正常水平具有確診意義。大多數(shù)患兒酶活性完全缺乏，部分輕型患兒酶活性為正常水平的0.2%～2.4%。對(duì)于尿GAGs 水平升高伴IDS 活性缺乏且其他溶酶體硫酸酯酶活性正常的患者，應(yīng)進(jìn)行基因檢測(cè)以進(jìn)一步診斷。

IDS基因位于染色體Xq 28，包含9 個(gè)外顯子和8 個(gè)內(nèi)含子，編碼550 個(gè)氨基酸。IDS基因是MPS Ⅱ的唯一致病基因，但是IDS基因變異的異質(zhì)性與MPSⅡ患者臨床表現(xiàn)的異質(zhì)性高度相關(guān)。截至2023年11月，已報(bào)告了1 223種不同的IDS基因變異，其中大片段或整個(gè)基因缺失、基因重排約占MPSⅡ型的19%～25%，小變異或微小病變（包括插入、缺失、重復(fù)等）約占MPS Ⅱ型的75%～80%。外顯子9 的p.R468W/Q是我國(guó)熱點(diǎn)變異，常導(dǎo)致重型MPSⅡ，而p.R443X和p.G374G突變常與MPSⅡ輕型相關(guān)[7]。

在距離IDS基因著絲粒遠(yuǎn)端約20kb的位置，存在一個(gè)假基因IDSP1，其外顯子2、3和內(nèi)含子2、3、7的堿基組成和IDS基因高度同源，可產(chǎn)生IDS-IDSP1重排。IDS-IDSP1重排不單是MPSⅡ的重要遺傳學(xué)病因，也給IDS基因變異的診斷帶來(lái)挑戰(zhàn)。Sanger測(cè)序和多重連接依賴的探針擴(kuò)增（MLPA）無(wú)法鑒別序列變異位于IDS基因或IDSP 1基因，必須采用等位基因特異性檢測(cè)方法對(duì)基因組或者RNA 序列進(jìn)行分析，才能得到可靠的診斷[8]。

MPS Ⅱ?yàn)閄 連鎖隱性遺傳病，主要累及男性患者。但依然有罕見(jiàn)的女性病例被報(bào)道。女性MPS Ⅱ通常由非隨機(jī)X染色體失活或X染色體異常重排所致[9‐12]，是引起女性MPSⅡ發(fā)生的主要原因[13]。

3 黏多糖貯積癥Ⅱ型常規(guī)治療

目前臨床上針對(duì)MPS Ⅱ的主要治療方法包括對(duì)癥治療、酶替代治療（ERT）和造血干細(xì)胞移植（HSCT）。對(duì)癥治療主要包括：①神經(jīng)系統(tǒng)，交通性腦積水和脊髓壓迫可采用減壓手術(shù)治療。出現(xiàn)癲癇發(fā)作時(shí)用抗驚厥藥物治療。腕管綜合征可行外科減壓手術(shù)。腦積水可植入心室分流器。②骨骼系統(tǒng)，物理治療和康復(fù)鍛煉可以一定程度改善關(guān)節(jié)僵硬。關(guān)節(jié)嚴(yán)重畸形時(shí)可行關(guān)節(jié)置換術(shù)以改善功能。③呼吸系統(tǒng)，發(fā)生睡眠呼吸暫?？捎煤?jiǎn)易呼吸器持續(xù)終末正壓治療，氣道狹窄可行氣管切開(kāi)。④心血管系統(tǒng)，定期心電圖、心臟超聲檢查。心臟瓣膜病引起相應(yīng)反流或狹窄可行瓣膜置換術(shù)。⑤其他，定期檢查眼底，及早發(fā)現(xiàn)視神經(jīng)病變。反復(fù)中耳炎可行咽鼓管置換術(shù)[14‐15]。

ERT是輕型MPSⅡ的標(biāo)準(zhǔn)治療方法。該療法可顯著降低患者肝臟和脾臟內(nèi)GAGs 的貯積，臨床可觀察到肝脾體積明顯減少，尿液中GAGs排泄減少。但靜脈輸注的酶在體內(nèi)半衰期很短，需要兩周一次定期靜脈輸注，反復(fù)輸注酶有較低增加免疫反應(yīng)產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)，影響療效[16]。由于血腦屏障的存在，現(xiàn)有ERT 技術(shù)無(wú)法將替代酶輸入大腦，不能改善關(guān)鍵的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。盡管通過(guò)工程酶穿過(guò)血腦屏障[17‐18]和替代給藥途徑（鞘內(nèi)或側(cè)腦室內(nèi)）[19]來(lái)改善組織靶向性的方法正在開(kāi)發(fā)研究，現(xiàn)階段尚無(wú)法在臨床應(yīng)用。此外，ERT價(jià)格昂貴。從可及性和治療的便利性角度，ERT目前均有難以克服的困難。

與需要反復(fù)輸注的ERT 不同，HSCT 可為患者持續(xù)提供酶,與ERT相比，移植的細(xì)胞可通過(guò)血腦屏障，早期行HSCT 可有效預(yù)防中樞和外周癥狀的出現(xiàn)，但由于臨床診斷時(shí)間一般相對(duì)較晚，從發(fā)病到診斷的平均年限達(dá)3.5年，嚴(yán)重影響了HSCT的治療效果[20‐21]。供體適配性也是一大難題，大部分移植后患者存在移植物抗宿主?。℅VHD），需免疫抑制劑控制[22]。

4 基因治療

基因治療是指將正常外源基因通過(guò)一定方式導(dǎo)入靶細(xì)胞以糾正或補(bǔ)償異常基因以達(dá)到治療目的的手段。基因治療可通過(guò)體內(nèi)和體外途徑實(shí)現(xiàn)。體內(nèi)基因治療需要將攜帶治療基因的病毒載體引入患者體內(nèi)，使用的病毒載體包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒（AAV）載體，采用的基因組編輯技術(shù)主要為鋅指核酸酶（ZFN）技術(shù)、轉(zhuǎn)錄激活效應(yīng)因子核酸酶技術(shù)和CRISPR/Cas9技術(shù)三大類[23]。目前，只有ZFN和CRISPR/Cas9用于MPS的臨床前研究，其中CRISPR/Cas9更多用于MPSⅡ的動(dòng)物模型構(gòu)建[24]。體外基因治療包括在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)患者細(xì)胞，將攜帶目的基因的病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞并回輸入患者體內(nèi)[25]。體外基因治療主要使用逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒載體[26]。在大多數(shù)MPS中，將酶水平恢復(fù)到正常值的大約10%就足以抑制GAGs在器官中的堆積[27]。基因治療主要優(yōu)點(diǎn)是可提供長(zhǎng)期、持續(xù)的療效而無(wú)需連續(xù)給藥。為了改善MPS 的神經(jīng)癥狀，基因療法也可以直接遞送載體至中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）[28]。

4.1 采用腺相關(guān)病毒（AAV）載體的基因治療

4.1.1 臨床前研究 目前，AAV 是基因治療中應(yīng)用最廣泛的病毒載體之一。AAV是一種無(wú)包膜病毒，直徑約25nm，屬于細(xì)小病毒科。AAV包含一個(gè)相對(duì)較小的單鏈DNA基因組，約為4.7kb[29]。AAV載體可轉(zhuǎn)導(dǎo)入全身各處細(xì)胞，在不分裂細(xì)胞中能提供長(zhǎng)期的基因表達(dá)。AAV載體主要缺點(diǎn)為轉(zhuǎn)導(dǎo)后病毒載體產(chǎn)生的免疫原性和載體包裝容量小[30]。向小鼠、大鼠靜脈注射AAV 9 后可穿過(guò)血腦屏障，靶向神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞；顱內(nèi)或鞘內(nèi)注射時(shí)，AAV9能在多個(gè)腦區(qū)穩(wěn)定表達(dá)。盡管AAV 9 穿透血腦屏障的特性尚未在靈長(zhǎng)類動(dòng)物上得到證實(shí)[31‐32]，但其仍被認(rèn)為是最有可能改善CNS癥狀的AAV類型。

2006 年，Cardone 等[33]通過(guò)控制肝臟特異性啟動(dòng)子TBG，向2 月齡MPS Ⅱ小鼠尾靜脈注射AAV2/8TBG‐IDS病毒載體。TBG啟動(dòng)子是由人甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）啟動(dòng)子和微球蛋白增強(qiáng)子組成的啟動(dòng)子，用于肝臟特異性外源基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。3～4月齡模型鼠與同齡野生型小鼠相比出現(xiàn)明顯外觀差異，包括顱骨短，脫發(fā)和腳趾增粗；在大腦不同區(qū)域（海馬、丘腦、小腦和腦干）檢測(cè)到細(xì)胞空泡化。在長(zhǎng)達(dá)7 個(gè)月的時(shí)間里，治療組小鼠的血漿和組織IDS活性均恢復(fù)到正常水平，大腦中IDS酶活性雖然比野生型小鼠低，但較模型鼠高約800倍。酶活性升高促使肝、脾、肺、腎、肌肉和大腦中堆積的GAGs被降解，尿液中GAGs水平正常化。2009年，該小組在出生第二天的IDS‐KO 新生小鼠中通過(guò)顳靜脈注射攜帶人IDS cDNA的AAV 2/5 型載體，該載體通過(guò)巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子（AAV2/5CMV hIDS）轉(zhuǎn)錄翻譯，并可在骨骼肌和肺等多種組織有效轉(zhuǎn)導(dǎo)。該研究發(fā)現(xiàn)治療后神經(jīng)退行性變、星形膠質(zhì)細(xì)胞增生和神經(jīng)炎癥得到了明顯改善或完全糾正。在治療組小鼠大腦中未檢測(cè)AAV載體基因拷貝數(shù)，而在小鼠肝臟中檢測(cè)到，表明中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的改善是由于IDS酶穿過(guò)血腦屏障發(fā)揮作用[34]。

2016 年，Motas 等[35]研究小組向2 月齡小鼠腦池內(nèi)注射了帶有CAG啟動(dòng)子和IDS基因的AAV9載體。CAG啟動(dòng)子由巨細(xì)胞病毒增強(qiáng)子、雞β‐肌動(dòng)蛋白啟動(dòng)子和雞β‐肌動(dòng)蛋白內(nèi)含子組成，用于驅(qū)動(dòng)IDS基因在載體中的高效表達(dá)。在注射4個(gè)月后，治療組小鼠大腦的IDS 酶活性顯著增加，達(dá)到野生型小鼠大腦IDS酶活性的40%。大腦各區(qū)域（分為5個(gè)區(qū)域?qū)?yīng)嗅球、尾殼核、丘腦后復(fù)合體、中腦、小腦）GAGs 下降至正常范圍，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中的透明空泡明顯減少，神經(jīng)炎癥消失。此外，載體還轉(zhuǎn)導(dǎo)至肝臟，肺和心臟等器官，表現(xiàn)出與大腦類似的IDS酶活性和GAGs變化。治療組小鼠行為缺陷被糾正，存活期顯著延長(zhǎng)。

2017 年Laoharawee 等[36]通過(guò)鞘內(nèi)注射、尾靜脈注射和腦室內(nèi)注射將AAV 9 hIDS 注射入2 月齡MPS Ⅱ小鼠體內(nèi)。對(duì)于腦室內(nèi)注射治療組，注射后28 周內(nèi)血漿中保持超生理水平IDS 酶活性（比野生型高160倍）；在注射后10個(gè)月，小鼠心、肺、肝、脾、腎中仍保持較高的IDS 酶活性（肝臟中IDS 酶活性最高，約為野生型166倍）。相反，在大腦各功能區(qū)（海馬、皮質(zhì)、腦干、紋狀體、嗅球、小腦）和脊髓中只有低水平的IDS 酶活性（野生型的7%～40%）。此外，IDS酶在CNS的持續(xù)表達(dá)對(duì)預(yù)防2月齡的MPSⅡ小鼠的神經(jīng)認(rèn)知缺陷有突出作用，然而鞘內(nèi)注射、尾靜脈注射處理的小鼠CNS中的IDS活性未出現(xiàn)明顯升高。而后該小組在小鼠神經(jīng)功能缺損出現(xiàn)后，側(cè)腦室注射編碼人IDUA 或IDS 的AAV 9 載體到5～6 月齡MPS I和MPSⅡ小鼠中。除了升高IDS酶活性和降低GAGs，小鼠認(rèn)知功能得到部分恢復(fù)，表明基因轉(zhuǎn)導(dǎo)可糾正已發(fā)生的神經(jīng)功能障礙[37]。

4.1.2 臨床研究 在上述臨床前研究的基礎(chǔ)上，REGENXBIO 公司在2018 年啟動(dòng)了通過(guò)腦室注射RGX‐121 治療MPS Ⅱ神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的臨床試驗(yàn)（NCT03566043）。RGX‐121是一種帶有hIDS基因的重組AAV血清9型病毒載體。這是一項(xiàng)Ⅰ/Ⅱ期劑量遞增研究，對(duì)象為4個(gè)月到5歲的兒童。截至2023年2月，已有15名受試者參加了3個(gè)不同劑量組（分別為1.3×1010、6.5×1010和2.0×1011基因組拷貝數(shù)/腦質(zhì)量）[38]。受試者對(duì)RGX‐121耐受良好，無(wú)藥物相關(guān)嚴(yán)重不良事件發(fā)生。在給藥后約8周～兩年時(shí)間內(nèi)，受試者腦脊液中GAGs顯示出一致的降低，下降幅度呈劑量依賴性，所有劑量組均在給藥48周時(shí)接近正常范圍；神經(jīng)發(fā)育測(cè)試較入組時(shí)有明顯提高[39]。試驗(yàn)后續(xù)會(huì)對(duì)試驗(yàn)者進(jìn)行為期5年的隨訪和長(zhǎng)期觀察記錄（NCT04597385）。另外還有對(duì)嚴(yán)重型MPSⅡ兒童（5～18 歲）的單劑量隊(duì)列研究，受試者將接受單劑量（6.5×1010基因組拷貝數(shù)/腦重量）的RGX‐121，通過(guò)腦室內(nèi)注射給藥。在最初24周（研究初期）主要關(guān)注是否產(chǎn)生不良反應(yīng)。在初期研究結(jié)束后，受試者將繼續(xù)接受RGX‐121治療后共計(jì)104周的安全性和療效評(píng)估（NCT04571970）。

另一項(xiàng)臨床試驗(yàn)旨在通過(guò)一種靜脈輸注攜帶hIDS的新型AAV‐HSC16載體（HMI‐203）評(píng)估安全性和療效并和接受標(biāo)準(zhǔn)ERT治療的患者療效作比較（NCT 05238324）。AAV‐HSC 16 載體是從人CD 34+細(xì)胞中分離出的造血干細(xì)胞AAV變種。與其他血清型相比，這種載體在異體移植受體中能更穩(wěn)定地表達(dá)[40]?；加蠱PS Ⅱ的成年男性將接受單劑量HMI‐203的靜脈注射。計(jì)劃分為3個(gè)不同劑量組，每組由3 名受試者組成。第一個(gè)劑量組每個(gè)受試者間隔60天給藥，第二組和第三組的后續(xù)受試者間隔21天給藥以審查安全性和有效性。該試驗(yàn)將持續(xù)5年，目前仍在招募志愿者[41]。

4.2 采用慢病毒載體的基因治療

體外基因治療通過(guò)收集患者體細(xì)胞并從中獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）[42]，使用慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)入iPSC 中，再自體移植回患者體內(nèi)，提供穩(wěn)定的基因表達(dá)并將缺失的基因傳遞給不分裂細(xì)胞，例如神經(jīng)元[43]。Wakabayashi等[44]成功地將這種方法應(yīng)用于MPSⅡ小鼠模型。他們向8～9周齡小鼠移植含有IDS基因慢病毒載體的造血干細(xì)胞。在小鼠接受移植后，大腦皮層，肝和心臟中觀察到IDS酶活性增加和GAGs水平降低。此外，自噬相關(guān)底物（如p62）在大腦中下降到正常范圍。與MPS Ⅱ小鼠相比，移植小鼠中沒(méi)有出現(xiàn)神經(jīng)元功能的惡化。

2022 年，Miles 等[45]設(shè)計(jì)了用慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)的造血干細(xì)胞，該載體攜帶由MNDU 3 啟動(dòng)子調(diào)控的人類IDS基因，MNDU3啟動(dòng)子由骨髓增生性肉瘤病毒長(zhǎng)末端重復(fù)序列U3區(qū)域去除負(fù)調(diào)控區(qū)生成，驅(qū)動(dòng)IDS基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。將造血干細(xì)胞通過(guò)尾靜脈輸注6～8周齡MPSⅡ雄性小鼠。治療組小鼠顴弓變薄，血漿和組織（包括回腸、盲腸、結(jié)腸、脾、肺、腎、心、眼和脊髓）中出現(xiàn)超生理水平的IDS酶活性，足以使GAGs 處于正常值。在Barnes 迷宮和條件性恐懼實(shí)驗(yàn)中治療組小鼠表現(xiàn)優(yōu)于野生型小鼠。值得注意的是，治療組小鼠大腦中的IDS 酶水平恢復(fù)到野生型小鼠的10%～20%，足以降解腦中堆積的糖胺聚糖并防止神經(jīng)認(rèn)知功能缺陷的出現(xiàn)。

4.3 基因組編輯技術(shù)

ZFN由DNA識(shí)別域和DNA剪切域兩部分組成。DNA剪切域由核酸內(nèi)切酶Fok I組成，當(dāng)兩個(gè)Fok I結(jié)合到一起時(shí)就能對(duì)DNA進(jìn)行剪切?；谶@個(gè)原理，鋅指核酸酶成功實(shí)現(xiàn)了DNA 的定位和剪切，再結(jié)合外源導(dǎo)入的目的基因以及細(xì)胞自帶的DNA 修復(fù)系統(tǒng)，便可實(shí)現(xiàn)基因編輯[46]。此前已有使用鋅指核酸酶在白蛋白基因座靶向插入人凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ，糾正血友病A，B 小鼠模型凝血功能障礙。白蛋白基因在肝細(xì)胞中的表達(dá)水平非常高，而且肝臟相對(duì)于其他組織進(jìn)行基因?qū)牒腕w內(nèi)編輯的可操作性更強(qiáng)[47]。在此基礎(chǔ)上，Laoharawee等[48]給6～9周齡的雄性MPSⅡ小鼠注射了3種遞增劑量的AAV2/8載體（分別為2.5×1011，5×1011和1.5×1012基因組拷貝數(shù)/鼠），利用ZFN 在白蛋白基因座內(nèi)含子1處靶向插入IDS基因。各劑量組MPSⅡ小鼠肝、脾、腎、肺、心和肌肉中IDS 酶活性升高和GAG 含量均明顯降低，腦中GAGs沒(méi)有明顯的下降。其中，高劑量組MPS Ⅱ小鼠認(rèn)知功能沒(méi)有進(jìn)一步惡化?；谂R床前研究中表現(xiàn)出較好的療效，第一項(xiàng)基于基因編輯的體內(nèi)基因療法的多中心Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)在MPS Ⅱ患者中啟動(dòng)（NCT03041324）。該試驗(yàn)通過(guò)靜脈輸注給予受試者SB‐913（ZFN1、ZFN2、攜帶hIDS的AAV2/6），將IDS基因靶向置入受試者肝細(xì)胞基因組中，在高表達(dá)內(nèi)源性白蛋白基因座的控制下發(fā)揮作用。試驗(yàn)包括三組不同劑量（分別為5×1012，1×1013和5×1013vg/kg），共招募9名志愿者[49]。在治療后16 周，中劑量組受試者的尿中HS 和DS 較基線有所下降（尿GAG下降51%，硫酸皮膚素下降32%，硫酸類肝素下降61%）；然而，未檢測(cè)到血漿IDS 活性的升高[50]。截至治療后36 周，受試者較入組前血漿中沒(méi)有顯著IDS 酶升高和uGAG 的下降。目前，這項(xiàng)試驗(yàn)已于2022年10月終止，在為期10年的長(zhǎng)期隨訪研究（ST‐IVPRP‐LT01，NCT04628871）中繼續(xù)監(jiān)測(cè)該藥的安全性。

CRISPR/Cas 9 技術(shù)目前尚未在MPS Ⅱ模型上進(jìn)行相關(guān)報(bào)道，2018 年Schuh 在MPS I 模型小鼠采用攜帶CRISPR/Cas9質(zhì)粒和陽(yáng)離子脂質(zhì)體進(jìn)行基因治療，血清中出現(xiàn)持續(xù)6個(gè)月的α‐L‐艾杜糖醛酸酶活性增加，肺和心臟中GAGs減少[51]。

5 總結(jié)

基于ERT和HSCT的MPSⅡ特異性治療能夠顯著改善預(yù)后，但兩者都有一定局限?；蛑委熥鳛橐环N嶄新的療法，能夠長(zhǎng)期提供缺陷酶的表達(dá)，通過(guò)交叉校正機(jī)制，經(jīng)過(guò)基因修飾后的細(xì)胞能夠產(chǎn)生和釋放溶酶體酶，被其他細(xì)胞和器官吸收[52]。體外基因療法大多采用慢病毒載體，但目前仍然在臨床前研究階段，還需要進(jìn)一步分析體外療法的療效和安全性。體內(nèi)基因療法在取得一定進(jìn)展的同時(shí)，也依然存在遞送和表達(dá)等問(wèn)題。顱內(nèi)注射給藥會(huì)導(dǎo)致大腦組織損傷以及有限的載體分布和不均勻的空間覆蓋，系統(tǒng)性AAV遞送（靜脈注射）又難以特異性靶向特定細(xì)胞類型。此外，人體內(nèi)可能會(huì)存在傳統(tǒng)AAV的中和抗體或不能充分跨越生物屏障（如血腦屏障）。同時(shí)也要考慮到治療確診時(shí)間較晚的患者無(wú)法逆轉(zhuǎn)已經(jīng)造成的損傷。早期診斷并發(fā)現(xiàn)癥狀前MPS患者，可能是未來(lái)提升基因治療效率中與技術(shù)開(kāi)發(fā)同樣重要的環(huán)節(jié)[53]。