梁鈺梅，李 可，林籽汐，李曉梅，周勁松，廖茂雯，林昊然，朱永清，李華佳,*，劉 剛,*

（1.四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川成都 610000；2.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，四川成都 610000；3.四川省葡萄酒與果酒行業(yè)協(xié)會(huì)，四川成都 610000）

藍(lán)莓（Vacciniumspp.）又稱越橘，富含總酚、黃酮等功能活性成分，具有抗氧化、抗癌和抑菌等多種功效，已被聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織列為人類五大健康食品之一[1]。藍(lán)莓具有很高的種植效益和巨大的市場(chǎng)潛力，已成為全球第二大漿果[2-3]。我國(guó)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展起步較晚，但發(fā)展速度最快，商業(yè)化栽培由2000 年的10 hm2陡增至2020 年的6.64 萬(wàn)hm2，總產(chǎn)量34.72萬(wàn)噸，占全球的29.24%，目前我國(guó)引進(jìn)的藍(lán)莓品種有150 多種，除用于鮮食外，其加工果比例高達(dá)53.9%[2-4]。

原料是加工的第一車間，藍(lán)莓的表型性狀和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)特性決定了其用途及加工性能，而品種是決定原料質(zhì)量的決定性因素。因此，不同品種藍(lán)莓加工適宜性各不相同?；ㄇ嗨睾扛叩倪m宜于花青素產(chǎn)品開(kāi)發(fā)，酸甜適口的果實(shí)適宜于鮮食以及果干、果膏等產(chǎn)品加工，香氣突出、糖度較高的果實(shí)適宜于果酒等加工，出汁率較高、有機(jī)酸含量低的適宜于果汁或復(fù)合飲料加工[5-7]。因此，對(duì)藍(lán)莓品質(zhì)質(zhì)量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)是藍(lán)莓資源開(kāi)發(fā)利用的基礎(chǔ)。目前已有部分研究開(kāi)展了相關(guān)研究，并對(duì)品種進(jìn)行了分類。如張素敏等[8]通過(guò)果實(shí)外觀、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)及加工性能指標(biāo)的觀測(cè)與分析，對(duì)12 個(gè)遼南露地栽培藍(lán)莓品種果實(shí)加工性能評(píng)價(jià)，并篩選出‘日出’、‘藍(lán)金’、‘北衛(wèi)’為理想的加工原料。朱詩(shī)慧等[9]對(duì)遼寧主栽的10 個(gè)品種藍(lán)莓理化和營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定分析，并結(jié)合聚類分析對(duì)其加工適應(yīng)性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，明確了‘杜克’、‘日出’適宜鮮食；‘伯克利’、‘北陸1’和‘北青’適宜加工果汁果酒；‘圣云’、‘北陸3’適宜加工果醬，以上研究為藍(lán)莓種植和精深加工品種選擇提供了可參考的科學(xué)依據(jù)。

果實(shí)品質(zhì)評(píng)價(jià)是選育優(yōu)良品種的關(guān)鍵性因素。研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)莓果實(shí)品質(zhì)性狀的變異與基因型密切相關(guān)，還與氣候、地區(qū)、生長(zhǎng)條件、土壤質(zhì)量等有關(guān)[10]。品種選擇區(qū)域化特征明顯，北方地區(qū)經(jīng)過(guò)十幾年的品種布局優(yōu)化，品種選擇趨于穩(wěn)定成熟，而南方產(chǎn)區(qū)依然表現(xiàn)為多品種種植的生產(chǎn)狀態(tài)。目前關(guān)于南方產(chǎn)區(qū)藍(lán)莓品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)研究所包含的品種和地區(qū)較少，綜合品質(zhì)特征側(cè)重點(diǎn)也不一樣。且對(duì)于四川地區(qū)引種藍(lán)莓的綜合質(zhì)量評(píng)價(jià)鮮有報(bào)道，僅有許文靜等[11]研究四川地區(qū)藍(lán)莓‘園藍(lán)’、‘藍(lán)雨’、‘萊格西’等6 個(gè)品種的綜合評(píng)價(jià)，陳昌琳等[12]研究表明四川地區(qū)南方高叢藍(lán)莓“春高”及“法新”綜合品質(zhì)優(yōu)于其他4 個(gè)品種這兩項(xiàng)報(bào)道。因此，本文以四川省主栽的9 個(gè)藍(lán)莓品種為研究對(duì)象，對(duì)外形、理化、風(fēng)味物質(zhì)組成、功能活性成分及抗氧化活性等方面進(jìn)行解析，并進(jìn)一步通過(guò)主成分分析綜合評(píng)判明確不同品種的加工適應(yīng)性及用途，為南方區(qū)域藍(lán)莓品種合理布局以及精深加工原料選擇提供科學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

本研究樣品‘雙豐’、‘萊格西’、‘微三’、‘巴爾德溫’、‘都克’、‘博尼法西’、‘薄霧’、‘燦爛’、‘晚秋’9 個(gè)品種的藍(lán)莓果實(shí) 均采集自四川省巴中市通江縣安優(yōu)生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司有機(jī)藍(lán)莓種植基地，于商品成熟期采收；3，5-二硝基水楊酸（DNS）試劑、福林酚試劑、無(wú)水碳酸鈉、三氯化鋁、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品等 成都市科隆化學(xué)品有限公司；ABTS 法、FRAP 法、DPPH法總抗氧化能力試劑盒 蘇州科銘生物技術(shù)有限公司；琥珀酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸、奎尼酸、蘋(píng)果酸、乙酸、葡萄糖、蔗糖、果糖標(biāo)準(zhǔn)品 上海源葉生物科技有限公司。

A11 分析研磨機(jī) 德國(guó)艾卡公司；855 型全自動(dòng)滴定儀 瑞士萬(wàn)通公司；PHS-3C pH 計(jì) 上海雷磁公司；HROMA METEA CR-400 色差儀 柯尼卡美能達(dá)；1260 HPLC 高效液相色譜 美國(guó)安捷倫技術(shù)公司；Intuvo900-597b 氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀 日本島津公司；PAL-1 手持型糖度計(jì) 日本愛(ài)拓公司；DHG-9070 電熱鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 不同品種藍(lán)莓外觀特征的測(cè)定 果實(shí)密度：采用密度法測(cè)量，密度為質(zhì)量與體積之比。

果形指數(shù)：每個(gè)品種藍(lán)莓隨機(jī)選取30 顆無(wú)機(jī)械損傷的果實(shí)，利用游標(biāo)卡尺測(cè)定果實(shí)的橫、縱徑，通過(guò)橫縱徑計(jì)算果形指數(shù)。

單果重：采取直接稱重法，每個(gè)品種藍(lán)莓隨機(jī)選取30 個(gè)新鮮無(wú)機(jī)械損傷的果實(shí)，計(jì)算單果重，結(jié)果取平均值。

出汁率：參照馬艷弘等[13]的方法并做些許修改，將藍(lán)莓果實(shí)用分析研磨機(jī)打碎后，將果漿離心（4000 r/min，20 min）后過(guò)濾備用，稱取果漿和濾液的質(zhì)量計(jì)算出汁率。

色差：分別選擇30 個(gè)完好的不同品種藍(lán)莓果實(shí)，測(cè)定藍(lán)莓果皮赤道線上分布均勻的三個(gè)部位的L*、a*、b*值。

1.2.2 不同品種藍(lán)莓理化特征的測(cè)定 還原糖、總糖：參考孫文等[14]的方法，采用3，5-二硝基水楊酸法（DNS）測(cè)定。將藍(lán)莓果實(shí)用液氮冷凍后，使用分析研磨機(jī)打碎為藍(lán)莓樣品備用。還原糖測(cè)定前處理：稱0.5 g 樣品，加入50 mL 水搖勻后，50 ℃水浴保溫20 min，定容至100 mL。過(guò)濾后取濾液為還原糖樣品待用?？偺菧y(cè)定前處理：稱取0.5 g 藍(lán)莓樣品，加入6 mol/L HCL 10 mL，蒸餾水15 mL，于沸水浴中水解30 min，冷卻后加入6 mol/L NaOH 溶液調(diào)pH至中性，并定容至100 mL，過(guò)濾后取濾液為總糖樣品待用。以葡萄糖（0.2、0.4、0.6、0.8、1 mg/mL）標(biāo)準(zhǔn)溶液為對(duì)照品作標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)結(jié)果以葡萄糖當(dāng)量表示。然后分別向試管中加入0.5 mL 還原糖樣品、總糖樣品和葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液與0.5 mL DNS 試劑，混合均勻后水浴加熱5 min 后加入4 mL 蒸餾水稀釋后用酶標(biāo)儀在540 nm 處測(cè)得吸光度值。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線為：y=0.6385x+0.0005，R2=0.9998。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出還原糖和總糖的含量。

可溶性固形物、總酸、pH：將藍(lán)莓果使用分析研磨機(jī)破碎，經(jīng)過(guò)離心（4000 r/min，10 min），取上清液備用?？扇苄怨绦挝锊捎肞AL-1 型糖度計(jì)測(cè)定，總酸采用全自動(dòng)滴定分析儀測(cè)定，pH 采用pH 計(jì)測(cè)定，每個(gè)品種平行測(cè)定三次，結(jié)果取平均值。

糖組分及含量的測(cè)定：采用高效液相色譜測(cè)定，參照Tina 等[15]的方法并略作修改。取藍(lán)莓樣品2 g用15 mL 水超聲提?。ㄊ覝?00 W）30 min 后過(guò)濾，將三次濾液合并定容至50 mL 后經(jīng)0.22 μm 微孔濾膜過(guò)濾后得藍(lán)莓提取液備用。將藍(lán)莓提取液稀釋5 倍后經(jīng)0.22 μm 微孔濾膜過(guò)濾備用。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別稱取0.1000 g 葡萄糖、果糖，用超純水定容至100 mL，配制成1 mg/mL 的混合糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再依次稀釋成5、10、20、50、100 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)使用液，經(jīng)0.22 μm 濾膜過(guò)濾后備用。HPLC 條件：色譜柱：Aminex/Hiplex-Ca 分析柱（300 mm×7.8 mm）；流動(dòng)相：100% UP 水；流速：0.6 mL/min；進(jìn)樣量：20 μL；柱溫80 ℃。蒸發(fā)光檢測(cè)器條件，氮?dú)饬魉伲? mL/min；漂移管溫度：70 ℃；蒸發(fā)管溫度：80 ℃。

有機(jī)酸組分及含量的測(cè)定：采用高效液相色譜測(cè)定，取上述糖組分測(cè)定配制的藍(lán)莓提取液經(jīng)0.22 μm 濾膜過(guò)濾后備用。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別稱取0.10 g 蘋(píng)果酸、檸檬酸、奎寧酸、琥珀酸，用超純水定容至100 mL，配制成1 mg/mL 的混合酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再依次稀釋成5、10、20、50、100 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)使用液，經(jīng)0.22 μm 濾膜過(guò)濾后備用。HPLC 條件：色譜柱：Aminex HPX-87H 分析柱（300 mm×7.8 mm）；流動(dòng)相：100% 0.005 mol/L H2SO4；流速：0.6 mL/min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫30 ℃。有機(jī)酸/糖對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線方程見(jiàn)表1。

表1 有機(jī)酸/糖對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Table 1 Standard curve equation for organic acid/sugar reference standard

總酚含量的測(cè)定：采用福林酚比色法對(duì)酚類物質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)，具體參考Sung 等[16]方法略有改動(dòng)。取藍(lán)莓樣品0.5 g 加入30 mL 80%的甲醇溶液超聲提取30 min 后過(guò)濾，將樣品重復(fù)提取三次，將濾液合并定容至100 mL。取提取液250 μL 和250 μL福林酚混勻反應(yīng)5 min 后加入500 μL 水和250 μL 7.5%無(wú)水碳酸鈉避光反應(yīng)30 min 后再在740 nm處測(cè)定吸光度。以沒(méi)食子酸（0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06 mg/mL）為對(duì)照品作標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)結(jié)果以沒(méi)食子酸當(dāng)量表示?？偡訕?biāo)準(zhǔn)曲線為y=15.51x+0.0582，R2=0.999。

黃酮含量的測(cè)定：用AlCl3顯色法[17]測(cè)定，取藍(lán)莓樣品0.5 g 加入3 mL 無(wú)水乙醇超聲提取30 min后過(guò)濾，將三次濾液合并定容至10 mL。取1 mL 提取液加入300 μL 亞硝酸鈉（5 g/100 mL）和4 mL 蒸餾水混勻，5 min 后加入1 mL 三氯化鋁（10 g/100 mL）溶液，混勻放置5 min，加入2 mL（4 g/100 mL）的NaOH 和2.4 mL 的蒸餾水，25 ℃條件下振蕩混勻2 min，10 min 后在510 nm 處檢測(cè)吸光度，以（0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 mg/mL）蘆丁為標(biāo)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.6183x+0.0494，R2=0.9998。

抗氧化能力的測(cè)定：藍(lán)莓總抗氧化能力按照抗氧化試劑盒（DPPH 法、ABTS 法、FRAP 法）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行測(cè)定。Trolox 作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行抗氧化能力檢測(cè)，樣品的抗氧化能力用Trolox 濃度（μmol/mL）來(lái)表示。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2013 和IBM.SPSS Statistics 23.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。采用IBM.SPSS Statistics 23.0 進(jìn)行單因素方差分析、Duncan 差異顯著性分析（P＜0.05 為顯著），Pearson 相關(guān)性分析（P＜0.05 為顯著相關(guān)）以及主成分分析。數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用Graphpad prism7.0 作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種藍(lán)莓的外觀特征分析

表2 不同藍(lán)莓品種的外觀特征Table 2 Appearance characteristics of different blueberry varieties

9 個(gè)品種藍(lán)莓果形指數(shù)變化范圍為0.73～0.89。根據(jù)果形分類參考標(biāo)準(zhǔn)，0.6～0.8 為扁圓形，0.8～0.9 為圓形或近圓形，0.9～1.0 為橢圓形或圓錐形，大于1.0 為長(zhǎng)圓形[18]，可知9 個(gè)藍(lán)莓品種可分為圓形和扁圓形兩類，其中‘都克’、‘巴爾德溫’、‘晚秋’為圓形，其余6 個(gè)品種都為扁圓形。陳昌琳等[12]、王學(xué)瑛等[19]研究結(jié)果也表明藍(lán)莓品種主要為圓形和扁圓形，通過(guò)對(duì)比不同研究結(jié)果可知，相同品種果形指數(shù)研究結(jié)果高度一致，分析其原因在于藍(lán)莓果形指數(shù)主要是由遺傳因素決定的[20]。

單果重是反映果實(shí)的生產(chǎn)性能和商品性的重要指標(biāo)，在數(shù)量一致的前提下，在一定范圍內(nèi)單果重越大果實(shí)的產(chǎn)量越高，商品性也越佳。9 個(gè)品種單果重的范圍為0.91～1.65 g，其中‘巴爾德溫’的單果重最大，‘博尼法西’的單果重最小，為0.91 g。相較于其他研究結(jié)果[18,21]，本研究9 個(gè)品種藍(lán)莓單果重均較偏小，可能與種植模式（有機(jī)栽培）、種植環(huán)境等有關(guān)。出汁率可反映果實(shí)的加工性能，研究表明不同品種藍(lán)莓果實(shí)受果膠含量影響出汁率也各不相同[21]。本研究中9 個(gè)藍(lán)莓品種的出汁率在44.47%～59.38%，其中‘雙豐’、‘微三’和‘博尼法西’三個(gè)品種出汁率＜50%，更適宜于果脯、果干類加工。‘薄霧’的出汁率最高，其次是‘萊格西’和‘都克’，更適宜于果汁、果酒等產(chǎn)品加工。

研究表明，藍(lán)莓的色澤不僅是外觀指標(biāo)，同時(shí)還與果實(shí)中功能活性成分總酚、花青素含量密切相關(guān)，L*值越低、a*、b*值越高的品種花青素含量越高[22]。9 個(gè)品種藍(lán)莓L*值介于25.33～32.40 之間，a*值的范圍在-1.44～4.12 之間，不同品種之間存在明顯差異。其中‘燦爛’和‘微三’與其他品種色澤品質(zhì)差異較大，L*低于其他品種，a*、b*值高于其他品種，其顏色最深，與這兩個(gè)品種花青素、總酚等含量較高有關(guān)。

2.2 不同品種藍(lán)莓的理化特征分析

還原糖、總糖、可溶性固形物（SSC）、pH 和總酸（TA）是反映果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)的基礎(chǔ)理化指標(biāo)，多個(gè)藍(lán)莓品種的理化特征品種間都表現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），其中變異系數(shù)較大的是總酸（35.51%）和固酸比（61.69%），pH 變異系數(shù)最小。

還原糖、總糖和可溶性固形物均常用來(lái)反映果實(shí)營(yíng)養(yǎng)和風(fēng)味品質(zhì)等，同時(shí)可溶性固形物還由于其易于實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)而用于果實(shí)成熟度的判定，是果實(shí)品質(zhì)分析非常重要的指標(biāo)[19,23]。由表3 可知，還原糖含量在82.77～110.38 mg/g 之間，總糖含量在106.15～135.61 mg/g 之間，還原糖和總糖的含量差值不大且表現(xiàn)出較高的一致性，總糖含量高的一般還原糖含量也比較高，說(shuō)明藍(lán)莓中糖主要以還原糖存在。‘都克’的總糖和還原糖含量均最高，總糖含量最低的為‘燦爛’，還原糖含量最低的為‘博尼法西’。SSC 范圍為9.44%～13.54%，略低于魏鑫等[24]的報(bào)道（10.03%～14.75%），其中‘巴爾德溫’含量最高、其次是‘雙豐’，‘燦爛’最低。

表3 不同藍(lán)莓品種的主要理化特征Table 3 Main physicochemical characteristics of different blueberry varieties

9 個(gè)品種藍(lán)莓TA、固酸比、pH 變化范圍分別為0.57%～2.03%、5.31～22.15、2.70～3.04。其中TA含量前三的分別為‘博尼法西’、‘薄霧’、‘萊格西’，最小的為‘都克’，pH 較低的為‘薄霧’、‘燦爛’和‘微三’，均低于2.8，‘巴爾德溫’和‘晚秋’pH 較高，均高于3.0，TA 含量和pH 之間相關(guān)性不大，且TA 變異系數(shù)較大但pH 變異系數(shù)較小，可能與藍(lán)莓中酸主要以弱酸為主且不同品種藍(lán)莓中酸組成有關(guān)。固酸比變異系數(shù)大主要與不同品種藍(lán)莓酸的差異較大有關(guān)，說(shuō)明相較于SSC，酸可能是主導(dǎo)藍(lán)莓甜酸風(fēng)味變化的主要原因。

2.3 不同品種藍(lán)莓的糖酸組分的含量比較

糖和酸的組成和含量決定果實(shí)的口感和加工性能[25]，因此本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步對(duì)糖和有機(jī)酸組成及含量進(jìn)行了分析。由表4 可以得出，9 個(gè)品種藍(lán)莓果實(shí)中可溶性糖主要有葡萄糖和果糖，變化范圍分別在28.15～35.99 mg/g、39.20～54.26 mg/g 之間，與張素敏等[8]研究結(jié)果一致。‘都克’的葡萄糖和果糖含量都最高（35.99、54.26 mg/g），‘博尼法西’的葡萄糖和果糖含量都最低（28.15、39.20 mg/g）。9 個(gè)藍(lán)莓品種的葡萄糖含量除‘都克’和‘博尼法西’之間有顯著性差異（P＜0.05），其他品種之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），不同品種間果糖含量有顯著性差異（P＜0.05），說(shuō)明果糖為影響不同種類藍(lán)莓差異的主要物質(zhì)，是引起甜味差異的物質(zhì)基礎(chǔ)。

表4 不同藍(lán)莓品種糖酸組分的含量Table 4 Composition and content of organic acids and sugars in different blueberry varieties

不同品種的藍(lán)莓有機(jī)酸含量不同，具有顯著性差異（P＜0.5）。檸檬酸和奎寧酸的變異系數(shù)很高（＞49%），為藍(lán)莓中最主要的酸，與相關(guān)研究報(bào)道一致[26]。除了‘都克’、‘微三’、‘晚秋’的6 個(gè)藍(lán)莓品種的檸檬酸含量都大于6 mg/g，為檸檬酸積累型?！伎恕ⅰ⑷?、‘晚秋’的奎寧酸含量最高（＞45 mg/g），顯著高于其他品種（＜9 mg/g），為奎寧酸積累型。蘋(píng)果酸的變化范圍為2.11～2.94 mg/g，琥珀酸的變化范圍為2.47～4.77 mg/g，其中‘都克’、‘微三’、‘晚秋’的蘋(píng)果酸和琥珀酸含量最高，都無(wú)顯著性差異（P＞0.05），‘萊格西’的蘋(píng)果酸、奎寧酸、琥鉑酸含量都是最低的。此外，本研究的果糖含量大于葡萄糖，與張素敏等[8]研究遼寧的12 種藍(lán)莓果實(shí)果糖和葡萄糖含量相當(dāng)?shù)慕Y(jié)果不一致。研究發(fā)現(xiàn)沙棘漿果的果糖、葡萄糖和總糖含量隨海拔升高和緯度降低而降低，蘋(píng)果酸的含量隨著海拔升高和緯度的降低而增加[27]，營(yíng)口藍(lán)莓比威海藍(lán)莓含糖量高，酸含量低[28]。由此可得出產(chǎn)地差異和品種多樣性會(huì)影響水果的糖酸特性。

對(duì)荷爾德林詩(shī)與希臘精神的闡釋，就和海德格爾一貫的對(duì)西方傳統(tǒng)形而上學(xué)的批判一起，成為他政治事件經(jīng)歷——參與、決裂——的一種非?？陀^冷靜解釋。因此，事實(shí)并非如大部分人所認(rèn)為的那樣，海德格爾固執(zhí)并且拒絕反省，因此對(duì)這段經(jīng)歷一直保持沉默。晚年他延續(xù)了對(duì)其政治事件的所謂沉默的態(tài)度，可以看作是其思想道路的自然寫(xiě)照。

2.4 不同品種藍(lán)莓的功能特征分析

2.4.1 不同品種藍(lán)莓總酚、黃酮含量分析 總酚和黃酮是藍(lán)莓中最主要的功能活性成分。由圖1 可知，不同種藍(lán)莓總酚和黃酮的含量差異顯著（P＜0.05），黃酮的含量在1.37～1.95 mg/g，‘微三’的黃酮含量最高，‘巴爾德溫’的黃酮含量最低，該研究結(jié)果高于前人的研究[11]?！┠岱ㄎ鳌目偡雍孔罡撸?.71 mg/g），其次是 ‘燦爛’和‘晚秋’，最低的為‘薄霧’（0.87 mg/g）?？偡拥姆秶陀谠S文靜等[11]（1.64～5.78 mg/g）、熊穎等[29]（1.73～4.63 mg/g）的研究，雖然之前的研究表明野生藍(lán)莓的總酚含量大于栽培藍(lán)莓[30]，但萊格西（1.34 mg/g）的總酚含量高于Ehlenfeldt等[31]所研究的野生藍(lán)莓‘萊格西’（0.65 mg of GAE/g of fw）。研究表明藍(lán)莓中的酚類化合物及其抗氧化活性取決于品種、基因型、成熟時(shí)間、植物組織類型、生長(zhǎng)條件、收獲時(shí)間及儲(chǔ)存條件，高海拔區(qū)域藍(lán)莓功能活性成分也較高[32-34]。本研究中部分藍(lán)莓品種總酚、黃酮含量高于其他研究相同品種，可能是與本研究所選取的樣本生長(zhǎng)于高海拔區(qū)域（1000～1200 米）和有機(jī)種植方式有關(guān)?？偟膩?lái)看‘微三’、‘博尼法西’、‘燦爛’和‘晚秋’的黃酮和總酚含量都較高，抗氧化活性物質(zhì)含量較高。

圖1 不同品種藍(lán)莓的總酚和黃酮含量Fig.1 Contents of total phenols and flavonoids in different varieties of blueberries

2.4.2 不同品種藍(lán)莓抗氧化能力分析 通過(guò)鐵離子還原能力（ferric ion reducing antioxidant power，F(xiàn)RAP）法、DPPH 自由基和ABTS+自由基清除能力對(duì)藍(lán)莓果實(shí)的抗氧化能力進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果以Trolox 濃度表示，見(jiàn)圖2。不同品種藍(lán)莓果實(shí)的抗氧化能力存在顯著性差異（P＜0.05）。不同方法所測(cè)的總抗氧化能力有些許的不同，三種方法所測(cè)的總抗氧化能力最高的都是‘微三’，采用DPPH 法、FRAP 法測(cè)得‘燦爛’的抗氧化能力在9 個(gè)藍(lán)莓品種都較低，而ABTS 法所測(cè)的較高。除此之外，采用FRAP 法、ABTS 法測(cè)得‘博尼法西’的抗氧化能力顯著大于‘晚秋’（P＜0.05），但DPPH 法測(cè)得結(jié)果相反，‘晚秋’的抗氧化能力顯著大于‘博尼法西’（P＜0.05）。因?yàn)槿N方法采用的原理不同，且不同藍(lán)莓品種所含有的抗氧化物質(zhì)的種類與含量差異顯著，因此不同方法所測(cè)得抗氧化能力有差異性?？偟膩?lái)看，‘微三’、‘博尼法西’、‘都克’的抗氧化能力較好，‘燦爛’、‘晚秋’的抗氧化能力較差。其中‘燦爛’（9.39 μmol/mL）的DPPH自由基清除能力最差，與之前的研究報(bào)道較為一致[29]。

圖2 不同品種藍(lán)莓的抗氧化活性Fig.2 Antioxidant activities of different varieties of blueberries

研究表明藍(lán)莓總酚含量高其抗氧化能力就高[35]。但‘燦爛’、‘晚秋’的黃酮和總酚含量較高，抗氧化能力低。此外藍(lán)莓的抗氧化能力不僅與抗氧化物質(zhì)含量有關(guān)，還取決于其植物化學(xué)成分、結(jié)構(gòu)和氧化還原電位。Buratti 等[36]指出酚類化合物的抗氧化能力與其還原能力有關(guān)，還原能力取決于酚環(huán)上羥基或甲氧基的數(shù)量和位置等結(jié)構(gòu)因素。Dhrumit 等[37]表明總抗氧化能力可能是各種植物化學(xué)物質(zhì)的功能，共同或協(xié)同作用，并取決于各種化合物和環(huán)境因素的拮抗作用。王彥淇等[38]還報(bào)道出總酚的組成越復(fù)雜抗氧化能力越強(qiáng)，因此后續(xù)可進(jìn)一步分析‘燦爛’、‘晚秋’的總酚組成。

2.5 主要質(zhì)量指標(biāo)相關(guān)性分析

為了探究9 個(gè)藍(lán)莓品種的主要指標(biāo)是否存在相關(guān)性，運(yùn)用Pearson 相關(guān)系數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，皮爾遜相關(guān)系數(shù)r的絕對(duì)值越接近1 則兩個(gè)指標(biāo)間的相關(guān)性越強(qiáng)，反之越接近0 相關(guān)性越弱。結(jié)果如圖3 所示，其中紅色代表正相關(guān)，藍(lán)色代表負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)越大其顏色越深，即指標(biāo)間相關(guān)性越強(qiáng)。由圖3 可知，9 個(gè)藍(lán)莓品種的23 個(gè)指標(biāo)之間相關(guān)性存在差異，果形指數(shù)與單果重（0.629）呈正相關(guān)，在蘋(píng)果中也有類似研究[39]。果形指數(shù)和pH、TA 存在顯著正相關(guān)（P＜0.05）；單果重與pH 存在顯著正相關(guān)（P＜0.05），與FRAP 存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；密度和SSC、pH、L*值存在顯著正相關(guān)（P＜0.05）；pH 和SSC 存在極顯著正相關(guān)（P＜0.01）、和FRAP 存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；葡萄糖和果糖存在極顯著正相關(guān)（P＜0.01），相關(guān)系數(shù)為0.93，與張素敏等[8]研究結(jié)果一致。檸檬酸與總糖、葡萄糖、果糖存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與Jia 等[28]結(jié)果吻合，本研究結(jié)果表明‘都克’的葡萄糖、果糖和總糖含量都最高，檸檬酸含量低；‘博尼法西’的葡萄糖、果糖和總糖含量都最低，檸檬酸含量高。總酚和a*呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），奎寧酸和黃酮存在極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；FRAP 和DPPH 存在顯著正相關(guān)（P＜0.05）；抗氧化能力與總酚、黃酮含量呈正相關(guān)，與相關(guān)文獻(xiàn)相符[30]。

圖3 9 個(gè)藍(lán)莓品種的感官特征、理化特征、加工特征的相關(guān)性分析Fig.3 Correlation analysis of sensory characteristics,physicochemical characteristics and processing characteristics of 9 varieties of blueberries

除此之外果形指數(shù)與pH、葡萄糖與果糖、黃酮與檸檬酸等的相關(guān)系數(shù)絕對(duì)值都大于0.5，說(shuō)明指標(biāo)之間相關(guān)性強(qiáng)，本實(shí)驗(yàn)所測(cè)定藍(lán)莓的23 個(gè)指標(biāo)相互之間存在一定的相關(guān)性，表明原始數(shù)據(jù)所映射的信息有重復(fù)，因此接下來(lái)采用主成分分析進(jìn)行指標(biāo)簡(jiǎn)化。

2.6 主成分分析及綜合評(píng)價(jià)

采用主成分分析對(duì)藍(lán)莓的評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行降維分析。由表5 可得到特征值大于1 的前4 個(gè)主成分，累加貢獻(xiàn)率為86.92%，說(shuō)明可以用這4 個(gè)不相關(guān)的綜合指標(biāo)來(lái)反映藍(lán)莓質(zhì)量特征的大部分信息。主成分載荷矩陣反映了各指標(biāo)在主成分中的作用方向及大小程度。見(jiàn)表6，PC1 的貢獻(xiàn)率為37.25%，檸檬酸的負(fù)向載荷權(quán)數(shù)最大，總糖、蘋(píng)果酸的正向載荷權(quán)數(shù)最大，主要與糖酸有關(guān)，而糖酸與藍(lán)莓消費(fèi)者的偏好密不可分，所以果實(shí)風(fēng)味可作為第一主成分；而檸檬酸和總糖、蘋(píng)果酸存在顯著負(fù)相關(guān)性（P＜0.05），因此可將檸檬酸作為第一主成分的代表性指標(biāo)。PC2 的貢獻(xiàn)率為24.69%，SSC、pH、果實(shí)密度、L*的正向載荷權(quán)數(shù)最大，F(xiàn)RAP、a*、b*的負(fù)向載荷權(quán)數(shù)最大，可選取果實(shí)表觀特征為第二主成分；而pH 與SSC、密度存在顯著正相關(guān)性（P＜0.05），與FRAP 存在顯著負(fù)相關(guān)性（P＜0.05），b*與a*存在顯著正相關(guān)（P＜0.05），與L*存在極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），因此可將pH、b*作為第二主成分的代表性指標(biāo)。PC3 的貢獻(xiàn)率為14.56%，總酚、DPPH 與黃酮的正向載荷權(quán)數(shù)最大，其值分別為0.680、0.584、0.483，單果重的負(fù)向載荷權(quán)數(shù)最大，其值為-0.620，可知正向作用大于負(fù)向作用，因此果實(shí)功能特征為第三主成分，而總酚、DPPH、黃酮之間不存在顯著相關(guān)性（P＞0.05），所以它們?yōu)榈谌鞒煞值暮诵闹笜?biāo)。PC4 的貢獻(xiàn)率為10.42%，出汁率的正向載荷權(quán)數(shù)最大，其與果實(shí)加工密切相關(guān)，所以可將加工特征作為第四主成分，出汁率為第四主成分的代表性指標(biāo)?；诖?，藍(lán)莓質(zhì)量評(píng)價(jià)的核心質(zhì)量指標(biāo)為檸檬酸、pH、b*、總酚、DPPH、黃酮、出汁率。

表5 主成分的特征值、貢獻(xiàn)率和累加貢獻(xiàn)率Table 5 Eigenvalue of the principal components and their contribution rates and cumulative contribution rates

表6 主成分的特征矢量與載荷矩陣Table 6 Eigenvectors and loading matrices of principal components

式中，X 為原始變量標(biāo)準(zhǔn)化處理后數(shù)值。

以各主成分對(duì)應(yīng)的貢獻(xiàn)率作為權(quán)重，對(duì)各主成分得分進(jìn)行加權(quán)求和得到綜合評(píng)分：F=0.372F1+0.246F2+0.146F3+0.104F4，通過(guò)計(jì)算得到不同品種藍(lán)莓得分如表7，得分高低反映藍(lán)莓綜合品質(zhì)的高低，綜合評(píng)分由高到低依次為‘巴爾德溫’＞‘雙豐’＞‘微三’＞‘都克’＞‘薄霧’＞‘燦爛’＞‘博尼法西’＞‘萊格西’＞‘晚秋’。同時(shí)，通過(guò)主成分分析結(jié)果和王香君等[5]和韓斯等[40]研究結(jié)果可知，‘萊格西’、‘燦爛’和‘雙豐’F2得分排名較高，果實(shí)外觀品質(zhì)好、固酸比適中、出汁率較高而酸度低，適合鮮食[28,41-42]?！蜖柕聹亍ⅰ伎恕?、‘微三’果實(shí)風(fēng)味優(yōu)、抗氧化能力較好，加工品質(zhì)好，綜合排名高，適合加工成果汁果酒類產(chǎn)品[43]。除此之外‘微三’、‘都克’的黃酮、總酚含量高，抗氧化能力也較高，具有開(kāi)發(fā)潛力，適宜于功能性產(chǎn)品開(kāi)發(fā)?！§F’可溶性固形物含量低、糖酸比低、果實(shí)口感不佳；‘博尼法西’的果實(shí)風(fēng)味和功能成分得分排名最低；‘晚秋’的果實(shí)外觀品質(zhì)不好、抗氧化能力差，綜合排名最低，這三個(gè)品種鮮食特性和加工特性均不突出。

表7 不同品種藍(lán)莓的主成分得分和綜合評(píng)估Table 7 Principal component scores and comprehensive scores in different varieties of blueberries

3 結(jié)論

果實(shí)品質(zhì)評(píng)價(jià)是對(duì)不同品種果實(shí)品質(zhì)特性的解析，為生產(chǎn)者和消費(fèi)者品種選擇提供科學(xué)依據(jù)，是育種工作中的重要一環(huán)。通過(guò)對(duì)9 個(gè)品種藍(lán)莓的外觀指標(biāo)、理化指標(biāo)及甜酸風(fēng)味物質(zhì)組成進(jìn)行比較分析，并結(jié)合相關(guān)性分析和主成分分析，對(duì)9 個(gè)品種綜合品質(zhì)進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，9 個(gè)品種藍(lán)莓的品質(zhì)特征存在差異，且不同指標(biāo)之間存在一定的相關(guān)性。通過(guò)主成分分析提取的4 個(gè)主成分，篩選出藍(lán)莓品質(zhì)評(píng)價(jià)的核心質(zhì)量指標(biāo)為檸檬酸、pH、b*、總酚、DPPH、黃酮、出汁率，并通過(guò)綜合評(píng)價(jià)解析了不同品種特性及適宜的用途?！R格西’、‘燦爛’和‘雙豐’適合鮮食，‘巴爾德溫’、‘都克’、‘微三’適宜于果汁和果酒等液態(tài)類產(chǎn)品開(kāi)發(fā)，‘微三’、‘都克’適宜于功能性產(chǎn)品開(kāi)發(fā)?！§F’、‘博尼法西’、‘晚秋’相較于其它品種綜合評(píng)分較低。該研究為消費(fèi)者根據(jù)需求選擇適宜的藍(lán)莓品種以及栽培、貯藏保鮮等提供科學(xué)參考。

? The Author(s) 2024.This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).