黎美霞，陶 蕾，王曉潔，何昕孺，米 佳，戴國禮,3，張 波,*，徐文娣

（1.寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞科學(xué)研究所，國家枸杞工程技術(shù)研究中心，寧夏銀川 750002；2.北方民族大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，寧夏銀川 750021；3.北方民族大學(xué)經(jīng)濟(jì)林遺傳改良創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)，寧夏銀川 750021）

寧夏枸杞（Lycium barbarumL.）的干燥果實(shí)枸杞子是我國傳統(tǒng)藥食同源中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》具有預(yù)防老年黃斑性病變、抗氧化、抗腫瘤、改善視力等作用[1-2]。枸杞子主要功效成分為枸杞多糖、甜菜堿、類胡蘿卜素及類胡蘿卜素酯、維生素C、多種氨基酸及微量元素K、Na、Ca、Mg、Cu、Fe、Mn、Zn、P 等成分。甜菜堿、枸杞多糖、黃酮、氨基酸、總糖等物質(zhì)決定著果實(shí)的營養(yǎng)及藥用性，其含量是評價(jià)食品和中藥藥材品質(zhì)的一項(xiàng)重要指標(biāo)[3]。建立寧夏枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素評價(jià)體系，有助于明確礦物質(zhì)元素與主要功效物質(zhì)間關(guān)系，本研究將枸杞品質(zhì)指標(biāo)與礦物質(zhì)元素指標(biāo)結(jié)合完善補(bǔ)充寧夏枸杞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系，為枸杞品質(zhì)遺傳改良與種質(zhì)創(chuàng)新奠定理論基礎(chǔ)。

枸杞綜合評價(jià)分析多以主栽品種在不同生態(tài)區(qū)品質(zhì)差異研究為主，如張曉煜等[4]選取6 省（區(qū)）多點(diǎn)‘寧杞1 號’干果樣品，選出4 個(gè)藥用和4 個(gè)商品品質(zhì)因子作為評價(jià)枸杞綜合品質(zhì)的因子，反映氣候波動和年季變化對枸杞品質(zhì)的影響；張波等[5]研究寧夏、青海、新疆3 個(gè)產(chǎn)區(qū)的‘寧杞1 號’、‘寧杞5 號’和‘寧杞7 號’寧夏枸杞外在品質(zhì)和內(nèi)在活性成分，發(fā)現(xiàn)干果枸杞總糖、多糖、甜菜堿等含量因產(chǎn)區(qū)而異；同時(shí)，也有對枸杞品質(zhì)性狀進(jìn)行綜合評價(jià)的研究；如王艷平等[6]以寧夏、內(nèi)蒙產(chǎn)區(qū)‘寧杞1 號’和‘寧杞7 號’干果樣品，基于灰色關(guān)聯(lián)度法分析評價(jià)，建立了以多糖、黃酮、浸出物、抗氧化性、水分、灰分6 個(gè)指標(biāo)的評價(jià)模型，更科學(xué)、更全面反映枸杞子質(zhì)量。趙建華等[7]針對不同果色枸杞鮮果品質(zhì)性狀指標(biāo)間的相互關(guān)系，構(gòu)建枸杞鮮果品質(zhì)性狀的綜合評價(jià)體系，發(fā)現(xiàn)紅色鮮果綜合品質(zhì)表現(xiàn)較優(yōu)，黑色鮮果綜合品質(zhì)表現(xiàn)較差。

對于枸杞中礦物質(zhì)元素的研究主要集中在其含量差異，如開建榮等[8]利用電感耦合等離子體質(zhì)譜對寧夏枸杞中55 種礦物元素在不同成熟階段的含量進(jìn)行跟蹤測定，證明大部分礦物元素的吸收和積累存在時(shí)間差異。蔣金花等[9]建立了微波消解-電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）同時(shí)測定枸杞中22 種元素方法，對不同產(chǎn)地枸杞中無機(jī)元素的含量進(jìn)行比較，K、P、Na 含量最高，微量元素中Al、Zn、Cu、Mn、Ni、Ba、Se 含量較高，有害元素含量均未超過其限量；還有相關(guān)施肥[10-11]、非生物脅迫對枸杞品質(zhì)影響研究[12]的報(bào)道?，F(xiàn)有研究不僅反映了相同的枸杞種質(zhì)在不同生態(tài)產(chǎn)區(qū)品質(zhì)存在差異，不同種質(zhì)的枸杞或成熟度不同的同種質(zhì)枸杞在相同的生態(tài)產(chǎn)區(qū)品質(zhì)也存在差異，也反映了枸杞果實(shí)中各種礦物質(zhì)含量的差異。

但目前研究大多是將品質(zhì)指標(biāo)和礦質(zhì)營養(yǎng)分開分析，缺乏對枸杞主要品質(zhì)指標(biāo)和礦物質(zhì)元素綜合評價(jià)分析，未針對枸杞新品種選育方向和優(yōu)良種質(zhì)利用提出建議。礦物質(zhì)的動態(tài)平衡會影響到功效活性成分的累積，本研究從不同品種（系）枸杞果實(shí)主要品質(zhì)指標(biāo)和主要礦物質(zhì)元素著手，開展功效成分含量與主要礦物質(zhì)元素的相關(guān)性研究與綜合評價(jià)分析，篩選出品質(zhì)優(yōu)良的枸杞種質(zhì)，以期為枸杞定向育種和遺傳改良核心親本選擇提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

試驗(yàn)在寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞科學(xué)研究所進(jìn)行，試材選用60 份枸杞品種（系）皆來自寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞研究所資源圃，其中除了主栽品種外，很多為本課題組選育的優(yōu)系。該資源圃位于寧夏回族自治區(qū)銀川市西夏區(qū)蘆花臺試驗(yàn)地，東經(jīng)106°09′，北緯38°39'，為中溫帶干旱大陸性氣候，干旱少雨、日照充足，年平均氣溫8.5 ℃左右，年平均日照時(shí)數(shù)2800～3000 h，年平均降水量200 mm，試驗(yàn)地土壤以淡灰鈣土為主，其pH 為8.2～8.7[13]。7 月初選擇不同種質(zhì)健壯的枸杞樹統(tǒng)一掛牌標(biāo)記，7 月中旬分別從枸杞樹冠中部外圍，圍繞樹體東西南北4 個(gè)方向選擇成熟度一致的枸杞鮮果，帶果柄采摘，揀選出明顯破裂、不成熟的枸杞鮮果，同時(shí)清除雜物，將清選后的枸杞鮮果浸泡在堿水中15～20 s 后取出放置在烘盤上，枸杞入烘房后35～40 ℃保溫2～3 h，升溫到40～45 ℃保溫8 h，升溫到50～55 ℃保溫8 h，取出放入自封袋中。品種（系）概況見表1；所用試劑均為分析純。

表1 實(shí)驗(yàn)材料編號與名稱Table 1 Experimental material number and name

1260 高效液相色譜儀、G6410 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國安捷倫；RE-5286 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠；UV755B 紫外可見光分光光度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司；ZX4 渦旋混勻儀 意大利 VELP。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

枸杞總糖含量參照中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18672-2014 附錄B-滴定法測定；多糖含量參照中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18672-2014 中附錄A 分光光度法測定；水分含量參照GB5009.3-2016減壓烘干方法測定；脂肪含量參照GB/T5009.6-2016索氏抽提法測定；蛋白質(zhì)含量參照GB5009.5-2016分光光度法測定[14]；甜菜堿含量參考潘菲等[15]的液相色譜法測定；類胡蘿卜素含量參考鄭堅(jiān)強(qiáng)等[16]的分光光度法測定；黃酮含量參考張自萍等[17]的微波提取法測定；氨基酸總量參考丁春瑞等[18]利用氨基酸自動分析儀測定；各元素成分含量參考王亞盟等[19]微波消解法測定。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 計(jì)算各指標(biāo)的均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)[20]，根據(jù)平均值（X）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）將測量性狀分為10 等 級，1 級＜X-2s，2 級＜X-1.5s，3 級＜X-1s，......，10 級≥X+2s，中間每級相差0.5s，通過計(jì)算每一級的相對頻率（Pi）來計(jì)算Shannon’多樣性指數(shù)（H'）[21]。遺傳多樣性指數(shù)：H'=-ΣPilnPi，其中，Pi 為某性狀第i 級別的種質(zhì)份數(shù)占總種質(zhì)材料的百分比即相對頻率。

運(yùn)用SPSSv20.0 將原始數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化，進(jìn)行因子分析；用Excel 進(jìn)行層次分析，運(yùn)用SPSSv20.0 構(gòu)建因子分析評價(jià)體系，用SPSSAU 構(gòu)建灰色關(guān)聯(lián)分析法評價(jià)體系，運(yùn)用Origin Pro 進(jìn)行聚類分析與相關(guān)性分析[22-23]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同種質(zhì)枸杞相關(guān)指標(biāo)的變異特征分析

寧夏枸杞相關(guān)指標(biāo)的變化情況如表2 所示，測定60 份枸杞種質(zhì)的16 項(xiàng)指標(biāo)，各指標(biāo)變異系數(shù)較大，變異系數(shù)范圍在6.917%～52.272%。其中，變異系數(shù)較高指標(biāo)有Se、Zn、Ca、Mn，其變異系數(shù)分別為52.272%、48.780%、34.780%、31.578%；變異系數(shù)較低指標(biāo)有總糖、氨基酸總量、B，其變異系數(shù)分別為6.917%、8.676%、10.540%。不同種質(zhì)間鮮果品質(zhì)性狀存在較大變異，可為篩選優(yōu)良枸杞種質(zhì)創(chuàng)造選擇空間。

表2 枸杞干果主要品質(zhì)指標(biāo)與礦物質(zhì)元素多樣性分析Table 2 Main quality indexes and mineral elements diversity analysis of dried fruit of Lycium barbarum L.

2.2 枸杞種質(zhì)中各指標(biāo)分布規(guī)律

60 份枸杞種質(zhì)品質(zhì)指標(biāo)的含量分布箱線圖（圖1）可以看出，總糖在45.0～46.0 g/100 g 的品種數(shù)量最多，占總數(shù)量的18.3%，總糖含量較高的品種為‘寧農(nóng)杞1 號’、‘寧杞8 號’和‘寧農(nóng)杞2 號’；多糖主要分布在2.0～2.5 g/100 g 之間，約占總資源的48.3%，其中多糖含量較高的品種為‘14-02-03-21’和‘14-04-02-02’；甜菜堿主要分布在0.50～0.75 g/100 g 之間，約占總資源的55%，甜菜堿含量較高的種質(zhì)為‘寧杞7 號’、‘寧杞3 號’、‘寧杞8 號’和‘09-03’；類胡蘿卜素主要分布在0.4～0.5 g/100 g 之間，約占總資源的40%，類胡蘿卜素含量較高的為‘14-04-03-13’、‘14-06-11-12’、‘14-01-02-14’和‘14-03-01-05’；黃酮主要分布在1.0～1.5 g/100 g 之間，約占總資源的55%，含量較高的種質(zhì)為‘寧農(nóng)杞3 號’、‘寧農(nóng)杞9 號’、‘寧杞2 號’、‘寧杞6 號’、‘寧杞7 號’和‘寧杞3 號’；蛋白質(zhì)主要分布在9.0～12.0 g/100 g 之間，約占總資源的60%，含量較高的種質(zhì)為‘14-04-03-13’和‘寧農(nóng)杞3 號’；脂肪主要分布在3.00～4.00 mg/kg 之間，約占總資源的55%，含量較高的為‘14-04-03-13’、‘14-03-01-05’和‘寧農(nóng)杞9 號’；水分含量主要分布在12.15～13.27 g/100 g 之間，約占總資源的47%，含量較高的為‘14-04-03-13’、‘14-06-11-12’和‘寧農(nóng)杞9 號’；氨基酸總量主要分布在9.7～10.5 mg/100 g 之間，約占總資源的41.7%，含量較高的種質(zhì)為‘14-01-03-21’、‘14-03-09-05’、‘14-04-03-13’。

圖1 60 份枸杞種質(zhì)果實(shí)營養(yǎng)成分含量差異Fig.1 Differences of nutritional contents in 60 germplasm fruits of Lycium barbarum L.

礦物質(zhì)元素在60 份枸杞種質(zhì)中的分布情況箱線圖（圖2）可以看出，Mn 元素含量范圍4.65～14.21 mg/kg，含量由高到低依次為‘寧農(nóng)杞3 號’、‘14-87’和‘寧農(nóng)杞9 號’；Zn 元素含量范圍3.69～24.69 mg/kg，含量較高的種質(zhì)為‘寧杞2 號’、‘寧杞3 號’、‘寧杞5 號’和‘16-16’；Fe 元素含量范圍37.62～122.6 mg/kg，‘14-01-03-21’、‘14-06-11-12’和‘14-06-03-04’ 含量較高；Ca 元素含 量范圍214.0～1051.0 mg/kg，‘寧農(nóng)杞9 號’、‘寧農(nóng)杞1 號’和‘寧農(nóng)杞3 號’含量較高；Mg 元素含量范圍668.52～1518.00 mg/kg，‘14-02-03-21’、‘14-04-03-13’和‘14-03-03-11’含量較高；B 元素含量范圍7.45～12.65 mg/kg，含量較高的種質(zhì)為‘寧農(nóng)杞9 號’、‘14-03-03-11’、‘寧杞4 號’；Se 元素含量范圍0.008～0.095 mg/kg，‘16-20-11-11’、‘小麻葉’、‘14-16’、‘寧農(nóng)杞9 號’和‘14-Z235’含量較高。

圖2 60 份枸杞種質(zhì)果實(shí)礦物質(zhì)元素含量差異Fig.2 Differences of mineral elements contents in 60 germplasm fruits of Lycium barbarum L.

在各個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)含量較高的種質(zhì)中有三種枸杞種質(zhì)多個(gè)指標(biāo)含量均高，分別是‘寧農(nóng)杞9 號’、‘寧農(nóng)杞3 號’和‘14-04-03-13’，在這60 份材料中這三種種質(zhì)為優(yōu)良種質(zhì)，將這個(gè)結(jié)果與后面的總和評價(jià)進(jìn)行對比。

2.3 不同種質(zhì)枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素綜合評價(jià)分析

2.3.1 不同種質(zhì)枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素相關(guān)性分析 通過60 份不同種質(zhì)枸杞的16 項(xiàng)果實(shí)性狀指標(biāo)相關(guān)性分析（圖3），結(jié)果表明，品質(zhì)性狀指標(biāo)間存在相關(guān)性，總糖含量與黃酮含量、甜菜堿含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；多糖含量與甜菜堿含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；甜菜堿含量與類胡蘿卜素含量、脂肪含量呈顯著性負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；類胡蘿卜素含量與黃酮含量呈極顯著性負(fù)相關(guān)（P＜0.01），與脂肪含量和氨基酸總量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；黃酮含量與脂肪含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）；蛋白質(zhì)含量與脂肪含量、氨基酸總量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）。同時(shí)，總糖含量與類胡蘿卜素含量、蛋白質(zhì)含量、氨基酸總量含量、脂肪含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。

圖3 果實(shí)營養(yǎng)成分與礦物質(zhì)元素相關(guān)性分析Fig.3 Correlation analysis of fruit nutrients with mineral elements

常量元素和微量元素指標(biāo)也存在顯著相關(guān)性，其中Ca 含量與Mn 含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；Mg 含量與Se 含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05），與Fe 含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；Mn 含量與Se 含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）。同時(shí)Mg 含量與Zn 含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）；Mn 含量與Fe 含量呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與Zn 含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）；Zn 含量與Se 含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。

品質(zhì)性狀指標(biāo)與常量元素和微量元素指標(biāo)也存在極顯著相關(guān)性，總糖含量、甜菜堿含量與Zn 含量，多糖含量與Fe 含量，類胡蘿卜素含量與Mg、Se 含量，黃酮含量與B、Zn 和Ca 含量，脂肪含量與Se、Mg 含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；總糖含量與類胡蘿卜素含量，蛋白質(zhì)含量與Zn 含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）；綜上，Zn、Mg 及Se 含量與枸杞關(guān)鍵品質(zhì)性狀的含量存在極顯著相關(guān)性，說明品質(zhì)指標(biāo)與礦物質(zhì)元素指標(biāo)間相互影響，抑制或促進(jìn)代謝物的積累過程。

2.3.2 不同種質(zhì)枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素指標(biāo)因子分析 對16 項(xiàng)枸杞果實(shí)功效成分指標(biāo)進(jìn)行因子分析（表3），前8 個(gè)因子的累積貢獻(xiàn)率為85.591%，即前8 個(gè)因子所含信息量占總信息量的85.591%，表明前8 個(gè)因子可以用于枸杞果實(shí)功效成分評價(jià)。根據(jù)這16 個(gè)指標(biāo)在8 個(gè)因子中的總占比，選出的代表性指標(biāo)分別為多糖、黃酮、類胡蘿卜素、脂肪、Mg、Fe、Ca、B、Se，這9 項(xiàng)指標(biāo)為枸杞干果主要功效成分綜合評價(jià)指標(biāo)。

表3 枸杞種質(zhì)果實(shí)品質(zhì)及礦物質(zhì)元素指標(biāo)因子分析Table 3 Factor analysis of fruit quality and mineral elements index on germplasm of Lycium barbarum L.

2.3.3 不同種質(zhì)枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素層次分析 將篩選的9 項(xiàng)核心評價(jià)指標(biāo)依據(jù)層次分析法，采用1～9 標(biāo)度法構(gòu)建判斷矩陣（表4～表5）[24]。對矩陣一致性進(jìn)行檢驗(yàn)，判斷矩陣一致性比率（consistent ratio，CR）均小于0.1，通過一次性檢驗(yàn)。將9 項(xiàng)指標(biāo)分成了營養(yǎng)因子、常量元素因子和微量元素因子三類，通過層次分析法最終確定多糖、黃酮、類胡蘿卜素、脂肪、Mg、Fe、Ca、B、Se 這9 項(xiàng)核心評價(jià)指標(biāo)權(quán)重分別為0.138、0.373、0.269、0.22、0.606、0.394、0.474、0.123、0.403。

表4 準(zhǔn)則層評價(jià)指標(biāo)及類型Table 4 Criterion level evaluation index and type

表5 指標(biāo)層評價(jià)指標(biāo)判別矩陣及一致性檢驗(yàn)Table 5 Discriminant matrix and consistency test for evaluation index of index layer

2.3.4 不同種質(zhì)枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素綜合評價(jià) 選擇所篩選的9 項(xiàng)核心評價(jià)指標(biāo)作為綜合評價(jià)的指標(biāo)體系，前8 個(gè)因子累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為85.591%，提取前8 個(gè)因子信息進(jìn)行分析，其中因子1 主要代表類胡蘿卜素、脂肪、Se 和Mg；因子2 主要代表多糖、Fe；因子3 主要代表黃酮、Ca、B；因子4 主要代表B；提取前8 因子所對應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率為權(quán)重，對60 份枸杞種質(zhì)材料完成基于因子分析法的枸杞干果品質(zhì)評價(jià)，見表6。

表6 枸杞種質(zhì)干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素綜合評價(jià)Table 6 Comprehensive evaluation on quality and mineral elements of dried fruit germplasm of Lycium barbarum L.

以9 項(xiàng)核心評價(jià)指標(biāo)作為灰色關(guān)聯(lián)分析法的指標(biāo)體系，結(jié)合層次分析法確定的指標(biāo)權(quán)重，對60 份枸杞種質(zhì)材料利用灰色關(guān)聯(lián)分析法進(jìn)行綜合評價(jià)。由表6 可知，2 種評價(jià)方法獲得的綜合排序差異小，排名前6 的種質(zhì)材料基本一致?！畬庌r(nóng)杞9 號’、‘14-04-03-13’、‘14-02-03-21’、‘14-06-11-12’、‘14-01-02-14’和‘寧農(nóng)杞3 號’在因子分析法評價(jià)結(jié)果中得分明顯較高，‘寧農(nóng)杞9 號’、‘14-02-03-21’、‘寧農(nóng)杞3 號’、‘14-06-11-12’、‘14-04-03-13’和‘14-01-02-14’在灰色關(guān)聯(lián)分析法評價(jià)結(jié)果中與參考值關(guān)聯(lián)度較高，‘寧農(nóng)杞9 號’在2 種評價(jià)方法結(jié)果中得分和關(guān)聯(lián)度值高于其他材料。以上結(jié)果說明，2 種評價(jià)方法皆可篩選出果實(shí)品質(zhì)優(yōu)異的種質(zhì)資源材料，其中‘寧農(nóng)杞9 號’、‘14-04-03-13’、‘寧農(nóng)杞3 號’、‘14-02-03-21’、‘14-01-02-14’和‘14-06-11-12’果實(shí)綜合品質(zhì)較高。

2.3.5 不同種質(zhì)枸杞干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素聚類分析 選擇所篩選的9 項(xiàng)核心評價(jià)指標(biāo)作為依據(jù)，對60 份枸杞種質(zhì)進(jìn)行熱圖聚類分析，將60 份不同種質(zhì)的枸杞中相似的分為一類，以便于利用核心種質(zhì)作為親本。分析結(jié)果如圖4 所示，越接近紅色代表該指標(biāo)數(shù)值越大，越接近藍(lán)色代表該指標(biāo)數(shù)值越小[25]。歐氏距離為8.63 時(shí)全部種質(zhì)材料可劃分為五大類：

圖4 不同枸杞種質(zhì)聚類分析熱圖Fig.4 Cluster analysis heatmap of different germplasms of Lycium barbarum L.

第Ⅰ類有1 份材料為‘寧農(nóng)杞9 號’，此類種質(zhì)黃酮和脂肪含量，Ca、Se 和B 含量高；

第Ⅱ類有15 份材料分別為‘寧農(nóng)杞1 號’、‘中科綠州’、‘寧杞2 號’、‘寧杞4 號’、‘寧杞3 號’、‘寧杞6 號’、‘寧杞7 號’、‘寧杞1 號’、‘蒙杞1 號’、‘09-06’、‘09-03’、‘寧杞8 號’、‘寧農(nóng)杞2 號’、‘寧杞5 號’和‘16-16’，此類種質(zhì)黃酮和B 含量高，類胡蘿卜素、脂肪含量低；

第Ⅲ類含有9 份材料分別為‘14-02-07-07’、‘14-02-03-21’、‘14-04-02-02’、‘14-03-02-03’、‘14-06-10-17’、‘14-06-11-12’、‘14-06-03-04’、‘14-01-03-21’和‘14-04-03-13’，此類種質(zhì)多糖和Fe 元素含量較高，黃酮含量低；

第Ⅳ類含有2 份材料分別為‘寧1-2（小麻葉）’和‘寧農(nóng)杞3 號’，此類種質(zhì)類胡蘿卜素、黃酮含量較高，Ca、Se 含量高；

第Ⅴ類含有33 份材料分別為’16-14-5-4’、‘14-3-3-11’、‘14-3-2-7’、‘16-16-9-2’、‘14-Z44’、‘14-3-1-5’、‘14-1-2-14’、‘16-16-7-6’、‘14-3-33’、‘14-3-9-5’、‘16-14-8-9’、‘14-3-3-7’、‘14-6-10-22’、‘14-401’、‘16-16-8-16’、‘14-3-2-6’、‘16-17-5-6’、‘JC14-2’、‘Z168’、‘14-16’、‘16-1-4-3’、‘16-21-8-10’、‘14-87’、‘14-104’、‘16-20-11-11’、‘Z235’、‘16-21-7-8’、‘寧1-10（大麻葉）’、‘14-3-2-8’、‘Z46’、‘16-1-3-5’、‘14-3-4-14’和‘14-2-3-20’，此類種質(zhì)類胡蘿卜素、Mn、Se 含量高，黃酮、B 含量低。

9 項(xiàng)核心評價(jià)指標(biāo)分成三大類，第一類指標(biāo)含有1 項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)（黃酮），1 項(xiàng)微量元素指標(biāo)（B）和常量元素（Ca）；第二類指標(biāo)含有1 項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)（多糖），1 項(xiàng)微量元素指標(biāo)（Fe）；第三類指標(biāo)含有2 項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)（類胡蘿卜素和脂肪），1 項(xiàng)微量元素指標(biāo)（Se），1 項(xiàng)常量元素指標(biāo)（Mg）。聚類結(jié)果顯示黃酮含量與B 含量，多糖含量和Fe 含量，類胡蘿卜素和Mg 含量聚類關(guān)系較近，這與相關(guān)性分析的結(jié)果一致。

3 討論

3.1 枸杞干果品質(zhì)評價(jià)方法的確定

作物品種評價(jià)方法已逐步由定性和單一指標(biāo)發(fā)展到多指標(biāo)定量綜合評價(jià)，由此構(gòu)建起來的綜合評價(jià)體系較為客觀、全面、科學(xué)。統(tǒng)計(jì)數(shù)學(xué)、灰色系統(tǒng)理論、系統(tǒng)科學(xué)等學(xué)科的發(fā)展為這種綜合評價(jià)體系的構(gòu)建奠定了基礎(chǔ)[26]。作物品種評價(jià)方法主要包括層次分析法、百分制記分法、模糊數(shù)學(xué)法、灰色系統(tǒng)分析法、主成分分析、因子分析和聚類分析等[27]，不同方法的數(shù)學(xué)原理不同，且各具特點(diǎn)?；疑P(guān)聯(lián)度法是根據(jù)比較數(shù)列與參考數(shù)列的關(guān)聯(lián)情況確定樣本的質(zhì)量級別的方法因子分析法是把一些具有錯綜復(fù)雜關(guān)系的變量歸結(jié)為少數(shù)幾個(gè)無關(guān)的新的綜合因子的一種多變量統(tǒng)計(jì)分析方法[28-29]。鄭國保等[30]針對不同生育期水分脅迫條件下寧夏枸杞果實(shí)的品質(zhì)分析與綜合評價(jià)，在盛果期和秋果期均進(jìn)行中度脅迫處理可以提高果實(shí)的綜合品質(zhì)。王艷平等[6]通過灰色關(guān)聯(lián)度法分析評價(jià)枸杞子質(zhì)量，以6 個(gè)指標(biāo)（多糖、黃酮含量、浸出物、抗氧化性、水分、灰分）建立的評價(jià)模型能夠更科學(xué)、更全面地反映枸杞子質(zhì)量。趙建華等[7]針對不同果色枸杞鮮果品質(zhì)性狀指標(biāo)間的相互關(guān)系，利用相關(guān)性分析、因子分析、層次分析法構(gòu)建了枸杞鮮果品質(zhì)性狀的綜合評價(jià)體系。本項(xiàng)研究所用評價(jià)方法都是大量用于品質(zhì)評價(jià)中的方法，有些方法的科學(xué)性在枸杞品質(zhì)評價(jià)中也被檢驗(yàn)過，從方法選擇上來說科學(xué)、客觀，能夠全面滿足在本項(xiàng)研究的需要。

3.2 枸杞干果品質(zhì)評價(jià)指標(biāo)的選擇

本研究參照國家標(biāo)準(zhǔn)枸杞GB/T18672-2014 中所規(guī)定的理化指標(biāo)進(jìn)行測定，同時(shí)將甜菜堿、黃酮、類胡蘿卜素、氨基酸總量，常量元素Ca、Mg 和微量元素的Mn、Zn、Fe、B、Se 等反映營養(yǎng)成分的指標(biāo)納入評價(jià)體系，綜合反映枸杞果實(shí)品質(zhì)。常量元素K、Na 也是品質(zhì)指標(biāo)評價(jià)的重要礦質(zhì)元素，由于枸杞在制干過程中需要添加碳酸鉀或者碳酸鈉作為破蠟劑，雖然在后期制備測定的過程中得到充分的洗脫，但是為避免對相關(guān)實(shí)驗(yàn)科學(xué)性的干擾，所以本研究未將K、Na 作為礦質(zhì)元素指標(biāo)進(jìn)行選擇，對于微量元素Se 的選擇，主要由于寧夏中衛(wèi)等地土壤富含Se 元素，通過對Se 元素的測定建立枸杞干果Se 含量的標(biāo)準(zhǔn)值，為同類其他實(shí)驗(yàn)樣品的測定提供參考依據(jù)。

3.3 枸杞干果品質(zhì)評價(jià)結(jié)果的分析

寧夏枸杞種質(zhì)干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素相關(guān)性分析與聚類熱圖結(jié)果顯示具有較強(qiáng)的一致性?？偺呛颗cZn 含量，黃酮和Ca 含量，多糖和Fe 含量具有顯著正相關(guān)關(guān)系，但也存在一些差異，黃酮和Ca 含量、多糖和Fe 含量、甜菜堿和總糖含量這三組指標(biāo)在聚類熱圖中體現(xiàn)出相關(guān)性，但在相關(guān)性分析中并未顯著相關(guān)。綜合評價(jià)篩選出的5 份優(yōu)異種質(zhì)優(yōu)良種質(zhì)‘寧農(nóng)杞3 號’、‘寧農(nóng)杞9 號’、‘14-06-11-12’、‘14-02-03-21’和‘14-04-03-13’，其中‘寧農(nóng)杞9 號’屬于第Ⅰ類，其黃酮和脂肪含量，Ca、Se 和B 含量高；‘寧農(nóng)杞3 號’屬于Ⅳ類，類胡蘿卜素、黃酮含量較高，Ca、Se 含量高；‘14-06-11-12’、‘14-02-03-21’和‘14-04-03-13’屬于第Ⅲ類，此類種質(zhì)多糖和Fe 元素含量較高，黃酮含量低。所篩選出的5 份優(yōu)質(zhì)種質(zhì)均是這三個(gè)類群中的優(yōu)異種質(zhì)。

4 結(jié)論

60 份種質(zhì)干果種質(zhì)營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)元素含量存在顯著性差異，總糖含量、甜菜堿含量與Zn 含量，多糖含量與Fe 含量，類胡蘿卜素含量與Mg、Se 含量，黃酮含量與B、Zn 和Ca 含量，脂肪含量與Se、Mg 含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；總糖含量與類胡蘿卜素含量，蛋白質(zhì)含量與Zn 含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）；優(yōu)良種質(zhì)‘寧農(nóng)杞3 號’、‘寧農(nóng)杞9 號’、‘14-06-11-12’、‘14-02-03-21’和‘14-04-03-13’可作為枸杞定向育種和遺傳改良核心親本選擇。寧夏枸杞種質(zhì)干果品質(zhì)及礦物質(zhì)元素綜合評價(jià)分析，初步揭示了干果品質(zhì)與常/微量元素含量間的關(guān)系，為開展枸杞品質(zhì)育種提供了參考依據(jù)。

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