文章編號：1674-2419（2024）02-0165-04

作者簡介：聞祖銀（1977.3- ），男，壯族，廣西欽州人。欽州市欽南區(qū)黃屋屯鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村服務(wù)中心工程師。主要從事水產(chǎn)技術(shù)推廣工作。E-mail：2086213700@qq.com。

摘" 要：為研究不同水平的小球藻（Cholorella vulgaris）對草魚（Ctenopharyngodon idella）機(jī)體非特異性免疫功能的影響，確定小球藻在改善草魚機(jī)體免疫功能方面的最適添加水平。試驗選擇體重約20g、健康無病的草魚400尾，按照單因素試驗設(shè)計將其均分4個處理組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)25尾草魚。各組草魚依次投喂含有0%（對照組）、0.5%、1.0%、1.5%的小球藻的飼料。投喂60 d后，檢測各組草魚機(jī)體的非特異性免疫指標(biāo)。檢測結(jié)果顯示，與對照組比較，試驗2組和試驗3組草魚血清中堿性磷酸酶（ALP或AKP）活性顯著提高（Plt;0.05），溶菌酶（LZ）活性顯著提高（Plt;0.05），總抗氧化能力顯著提高（Plt;0.05）；超氧化物歧化酶活性顯著提高（Plt;0.05）；而小球藻對草魚血清中的酸性磷酸酶、過氧化氫酶活力未產(chǎn)生顯著性影響（Pgt;0.05）。研究結(jié)果表明，草魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中，添加1.0%和1.5%的小球藻可以顯著增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫力。

關(guān)鍵詞：小球藻（Cholorella vulgaris）；草魚（Ctenopharyngodon idella）；溶菌酶（LZ）；堿性磷酸酶（ALP或AKP）；超氧化物歧化酶（SOD）

中圖分類號：S965.112 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

草魚（Ctenopharyngodon idella）是中國主要的淡水魚養(yǎng)殖品種之一，養(yǎng)殖量巨大。草魚生長快、養(yǎng)殖成本低、肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富，備受養(yǎng)殖者的青睞。隨著中國草魚養(yǎng)殖規(guī)模的逐漸擴(kuò)大，養(yǎng)殖密度增大，導(dǎo)致養(yǎng)殖水體環(huán)境易污染、草魚機(jī)體免疫力下降、生長緩慢，進(jìn)而影響?zhàn)B殖的經(jīng)濟(jì)效益。在飼料中增加添加劑是解決草魚養(yǎng)殖過程中生長緩慢、改善水質(zhì)環(huán)境、提高機(jī)體免疫力的有效方式之一。其中小球藻（Cholorella vulgaris）在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用研究結(jié)果逐漸增多。小球藻是綠藻門單細(xì)胞藻類，外形呈球形，廣泛分布在自然界中。小球藻生長繁殖速度較快，光合效率較高。小球藻中含有多種營養(yǎng)物質(zhì)及活性成分，如蛋白質(zhì)、微量元素、脂類、多糖、胡蘿卜素等物質(zhì)，在水產(chǎn)動物養(yǎng)殖生產(chǎn)中具有廣泛的應(yīng)用前景。在中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）的養(yǎng)殖中，與對照組比較，使用適量的小球藻可以使中華絨螯蟹血清中的超氧化物歧化酶（Orgotein，Superoxide Dismutase SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（ALP或AKP）活性提高36.00%、34.82%、35.63%、87.30%，明顯改善了中華絨螯蟹的非特異性免疫力。在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）的養(yǎng)殖生產(chǎn)中，添加適量的小球藻可以提高凡納濱對蝦的成活率和生長性能，提高肌肉中脂肪酸、必需氨基酸含量，且小球藻的最適添加水平為1.0%。但目前，有關(guān)小球藻在草魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用研究結(jié)果比較少見。因此，該試驗以草魚為受試對象，探究不同水平的小球藻對草魚機(jī)體非特異性免疫力的影響，確定小球藻在改善草魚機(jī)體免疫力方面的最適添加水平，為小球藻在草魚的高效養(yǎng)殖生產(chǎn)中的推廣與利用提供一定的理論數(shù)據(jù)支撐。

1" 材料與方法

1.1" 草魚和小球藻

試驗草魚由廣西欽州市欽南區(qū)黃屋屯鎮(zhèn)屯西村養(yǎng)殖場提供。小球藻由深圳永晨實業(yè)有限公司提供，其粗蛋白含量為60.13%、粗脂肪含量為13.6%、粗灰分含量為5.49%。

1.2" 試驗設(shè)計

試驗選擇體重約20 g、健康無病的草魚400尾，按照單因素試驗設(shè)計將其均分4個處理組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)25尾草魚。各組草魚依次投喂含有0（對照組）、0.5%、1.0%、1.5%的小球藻的飼料，投喂60 d后，檢測各組草魚機(jī)體的非特異性免疫指標(biāo)。試驗草魚的基礎(chǔ)飼料以魚粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕等為蛋白源，以魚油、豆油為脂肪源，各原料粉碎后，逐級混勻，加入適量水，制成粒徑2 mm的顆粒飼料，試驗組草魚飼料分別加入0.5%、1.0%和1.5%的小球藻。試驗草魚的基礎(chǔ)日糧配方見表1。試驗分組處理見表2。

1.3" 飼養(yǎng)管理

試驗開始前，試驗草魚先馴養(yǎng)2周，期間飼喂基礎(chǔ)飼料。草魚飼養(yǎng)在圓桶中，直徑為0.8m。正式試驗期間，各組草魚投喂相應(yīng)的試驗飼料，每日投喂量約為草魚體重的3%～4%，每次投喂2 h后，吸出殘餌。每日監(jiān)測養(yǎng)殖水質(zhì)情況，pH值約為7.4，溶解氧大于6 mg/L。每日不間斷充氧。

1.4" 非特異性指標(biāo)的檢測

試驗最后一天，各組草魚晨飼之前，尾靜脈采血，用于檢測血清中的溶菌酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、丙二醛等非特異性免疫指標(biāo)。檢測方法參考試劑盒說明書，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5" 數(shù)據(jù)分析

各組草魚血清非特異性免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)采用SAS 9.5分析顯著性，LSD方法進(jìn)行組間數(shù)據(jù)的兩兩比較，結(jié)果用平均值表示，Plt;0.05表示數(shù)據(jù)差異顯著。

2" 結(jié)果

不同水平的小球藻對草魚血清非特異性免疫指標(biāo)的影響，見表3。從表3中數(shù)據(jù)可見，與對照組比較，試驗2組和試驗3組草魚血清中堿性磷酸酶活性顯著提高（Plt;0.05），溶菌酶活性顯著提高（Plt;0.05），總抗氧化能力顯著提高（Plt;0.05）；超氧化物歧化酶活性顯著提高（Plt;0.05）；而小球藻對草魚血清中的酸性磷酸酶、過氧化氫酶活力未產(chǎn)生顯著性影響（Pgt;0.05）。研究表明，草魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中，添加1.0%和1.5%的小球藻可以顯著增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫力。

3" 討論

水產(chǎn)動物血清中的非特異性免疫指標(biāo)主要包括溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶等。其中溶菌酶和堿性磷酸酶的活性可以衡量機(jī)體的免疫強(qiáng)弱。溶菌酶是一種堿性蛋白酶，可以阻止病原微生物的入侵，而堿性磷酸酶可以殺滅病原微生物。本試驗中，在草魚養(yǎng)殖中添加1.0%和1.5%的小球藻可以明顯提高溶菌酶和堿性磷酸酶活性，表明適量的小球藻可以改善草魚機(jī)體抵抗病原菌的能力。超氧化物歧化酶是動物機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶之一，可以清除體內(nèi)多余的自由基。該試驗中，在草魚養(yǎng)殖中添加1.0%和1.5%的小球藻可以明顯提高超氧化物歧化酶活性，表明小球藻可以顯著增強(qiáng)草魚機(jī)體的抗氧化能力。闕江龍等等研究了小球藻對草魚生長、免疫、肌肉品質(zhì)及消化酶活性的影響，發(fā)現(xiàn)適量的小球藻可以明顯提高草魚血清中總抗氧化能力、溶菌酶活性、堿性磷酸酶活性，且小球藻的最適添加水平為0.75%，與該研究結(jié)果類似。小球藻在改善草魚機(jī)體免疫力方面的添加量水平不同，可能是因為草魚體重、小球藻有效成分含量及養(yǎng)殖環(huán)境不同導(dǎo)致的。生產(chǎn)實踐中，可以根據(jù)試驗所用小球藻的營養(yǎng)水平確定最適的添加劑量，在保證提高草魚養(yǎng)殖效益的同時降低養(yǎng)殖成本。

4" 結(jié)論

該試驗結(jié)果表明，在草魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中添加適量的小球藻可以顯著提高草魚血清中溶菌酶、超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶活性及總抗氧化能力，明顯增強(qiáng)了草魚機(jī)體的非特異性免疫功能，且小球藻的最適添加水平為1.0%和1.5%。

參考文獻(xiàn)：

張梅，王洋.草魚養(yǎng)殖現(xiàn)狀及2023年市場預(yù)測.科學(xué)養(yǎng)魚，2023（8）：2-4.

潘軍，常曉川，韓業(yè)東.飼料發(fā)酵與淡水魚養(yǎng)殖研發(fā)應(yīng)用進(jìn)展.畜牧產(chǎn)業(yè)，2023（5）：62-69.

鄭善堅，胡金春，葉嘉政，等.開化清水草魚營養(yǎng)組成及肉質(zhì)品質(zhì)分析.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，64（6）：1343-1348.

郭倩倩，朱琳琳.草魚常見病蟲害防治技術(shù)初探.漁業(yè)致富指南，2022（10）：62-66.

閆新璐，劉倩倩，侯慶安，等.微藻的功能特性及其在食品中的應(yīng)用研究進(jìn)展.食品工業(yè)科技，2024，45（2）：392-400.

張雷鳴，劉煒，茆健強(qiáng)，等.飼料中小球藻添加量對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”生長性能的影響.水產(chǎn)養(yǎng)殖，2023，44（03）：14-19.

羅柳茵，李家泳，陳卓，等.小球藻在水產(chǎn)動物飼料中的應(yīng)用研究進(jìn)展.糧食與飼料工業(yè)，2016（6）：55-57+61.

陳穎，李文彬，孫勇如.小球藻生物技術(shù)研究應(yīng)用現(xiàn)狀及展望.生物工程進(jìn)展，1998（6）：11-15.

曹蘇珊，薛靜，王倩楠，等.小球藻遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)研究進(jìn)展.水產(chǎn)科學(xué)，2021，40（2）：294-300.

李玥睿，高金偉，張文慧，等.蛋白核小球藻粉和雨生紅球藻粉對中華絨螯蟹幼蟹生長和生理生化指標(biāo)的影響.飼料研究，2022，45（20）：49-54.

韓朝婕，陳屹洋，賀振楠，等.小球藻生長因子對凡納濱對蝦生長及營養(yǎng)成分的影響.水產(chǎn)科學(xué)，2022，41（6）：959-966.

蔡榮.小球藻醇提取物對花鱸幼魚生長作用及機(jī)理的初步研究.長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018.

丁立云，陳文靜，賀鳳蘭，等.不同脂肪源飼料對養(yǎng)成期彭澤鯽生長、體組成和血清生化指標(biāo)的影響.中國飼料，2021（5）：62-66.

闕江龍，饒毅，徐先棟，等.小球藻對草魚生長、免疫、消化酶活性和肌肉的影響.水產(chǎn)科學(xué)，2023，42（5）：839-846.

Effects of different levels of Chlorella vulgaris on the immune function of Ctenopharyngodon idellus

WEN Zuyin

（Qinzhou City Qinnan District Huangyutun Town Agricultural and Rural Service Center， Qinzhou 535033， Guangxi China）

Abstract：In order to study the effects of different levels of Chlorella vulgaris on the organismal non-specific immune function of grass carp （Ctenopharyngodon idella）， and to determine the optimal level of addition of Chlorella vulgaris in improving the organismal immune function of grass carp. In the experiment， 400 healthy and disease-free grass carp weighing about 20g were selected and divided into 4 treatment groups with 4 replicates each and 25 fish in each replicate according to the one-way experimental design. Each group was fed with 0% （control）， 0.5%， 1.0% and 1.5% chlorella vulgaris. After 60 d of feeding， the non-specific immunity indexes of the body of grass carp in each group were detected. The test results showed that compared with the control group， alkaline phosphatase （ALP or AKP） activity in the serum of grass carp in the test 2 and test 3 groups was significantly increased （Plt;0.05）， lysozyme （LZ） activity was significantly increased （Plt;0.05）， total antioxidant capacity was significantly increased （Plt;0.05）; and superoxide dismutase activity was significantly increased （Plt;0.05）; and the effect of Chlorella on the serum of grass carp was significantly increased （Plt;0.05）. The acid phosphatase and catalase activities in grass carp serum were not significantly affected （Pgt;0.05）. The results of this study indicated that the addition of 1.0% and 1.5% chlorella vulgaris could significantly enhance the non-specific immunity of grass carp in aquaculture production.

Keywords：chlorella vulgaris; Ctenopharyngodon idella; lysozyme （LZ）; alkaline phosphatase （ALP or AKP）; superoxide dismutase （SOD）