近年來,我國水禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速,現(xiàn)已成為世界上飼養(yǎng)水禽最多的國家。細(xì)小病毒是引起水禽疫病的重要病原之一,制約我國水禽養(yǎng)殖業(yè)的健康快速發(fā)展。做好水禽細(xì)小病毒病的防控,意義重大。本文概述了水禽細(xì)小病毒病的臨床癥狀、診斷方法和防控措施,旨在為該病的診斷及防控等相關(guān)研究提供一定的參考。
1" 病原簡介
水禽細(xì)小病毒(Waterfowl parvovirus,WPVs)為細(xì)小病毒科(Parvoviridae)、細(xì)小病毒亞科(Parvovirinae)、依賴病毒屬(Dependoparvovirus)成員。WPVs病毒粒子無囊膜結(jié)構(gòu),直徑約為21 nm。WPVs基因組全長約5.1 kb,為單股線性DNA[1]。WPVs包括經(jīng)典鵝細(xì)小病毒(Goose parvovirus,GPV)、新型鵝細(xì)小病毒(Novel goose parvovirus-related virus,NGPV)和番鴨細(xì)小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)。GPV為經(jīng)典毒株,可引起雛鵝和番鴨小鵝瘟;NGPV為GPV變異株,引起鴨短喙侏儒綜合征;MDPV僅侵害番鴨,具有致病性,引起“三周病”[2]。
2" 流行病學(xué)
1961年我國學(xué)者首次從雛鵝體內(nèi)分離到GPV,主要感染4周齡以內(nèi)的番鴨和雛鵝;1周齡以內(nèi)的易感雛鵝感染后,死亡率可達(dá)100%;2~3周齡感染的,發(fā)病率可達(dá)100%,死亡率為10%~60%;3~4周齡感染的,無臨床癥狀,形成亞臨床感染。
2015年在我國大量鴨群中出現(xiàn)鴨短喙侏儒綜合征,主要感染10~40日齡鴨群,該病主要發(fā)生于櫻桃谷鴨和半番鴨。發(fā)病率在10%~30%之間,嚴(yán)重者達(dá)40%。
1980年我國學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)MDPV,3周齡以內(nèi)的番鴨發(fā)病率在27%~62%之間,死亡率為22%~43%不等,20日齡后表現(xiàn)為零星發(fā)病。發(fā)病率與死亡率與免疫狀態(tài)和被感染鴨的日齡密切相關(guān)[3]。
3" 臨床癥狀
3.1" 小鵝瘟
根據(jù)感染病程的發(fā)展過程,該病可以分為:最急性型、急性型和亞急性型。最急性型常發(fā)生于7日齡以內(nèi)的雛鵝,臨床表現(xiàn)為突然發(fā)病,傳播速度和死亡速度快,死亡雛鵝的喙、爪尖發(fā)紺,發(fā)病率高達(dá)100%,死亡率達(dá)95%以上。急性型多發(fā)生于14日齡以內(nèi)的雛鵝,臨床表現(xiàn)為精神沉郁、食欲廢絕、行動(dòng)障礙,排黃白色或黃綠色帶有氣泡的稀便;病死前兩腿麻痹和抽搐。15日齡以上的雛鵝感染小鵝瘟后常表現(xiàn)為亞急性型,癥狀較輕,一般表現(xiàn)為食欲不振、消瘦,病程在5~7 d不等。
3.2" 鴨短喙侏儒綜合征
感染鴨在5~6日齡開始發(fā)病。發(fā)病初期,表現(xiàn)為精神萎靡,10日齡左右出現(xiàn)生長發(fā)育受阻,羽毛發(fā)育障礙,俗稱毛刺鴨。短喙,舌頭突出外漏,不靈活,影響采食,影響骨骼發(fā)育。隨后出現(xiàn)機(jī)體消瘦,腿部無力,運(yùn)動(dòng)障礙等。此疾病,在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)造成淘汰率增加,在加工環(huán)節(jié)影響產(chǎn)品品質(zhì)。
3.3" 番鴨細(xì)小病毒病
番鴨細(xì)小病毒只侵害番鴨,一般感染3周齡以內(nèi)的番鴨,因此該病也叫三周病。該病可根據(jù)病程長短分為:最急性型、急性型和亞急性型。6日齡以內(nèi)的番鴨,常表現(xiàn)為最急性型,病程短,幾小時(shí)出現(xiàn)死亡;7~14日齡的,表現(xiàn)為急性型,精神沉郁,運(yùn)動(dòng)障礙,腹瀉,病程2~4 d不等;2周齡以上的,主要表現(xiàn)為亞急性型,病程一般為5~7 d不等,患病鴨精神委頓,行走遲緩,死亡率低。病愈鴨有脫毛現(xiàn)象,影響生長發(fā)育,成為僵鴨。
4" 剖檢病變
4.1" 小鵝瘟
小鵝瘟的特征性病變?yōu)榧毙钥ㄋ?纖維素性壞死性腸炎。急性型病例一般表現(xiàn)為全身敗血性變化,全身脫水,心肌蒼白,肝臟腫大。
4.2" 鴨短喙侏儒綜合征
剖檢可見鴨舌腫脹,變形;肝臟出血;胰腺可見針尖大小的白色壞死點(diǎn);胸腺腫大,出血;腸粘膜出血;骨密度降低,骨質(zhì)疏松。
4.3" 番鴨細(xì)小病毒病
全身敗血性病變,心肌松弛,心臟變圓。特征性病變主要表現(xiàn)在空腸中,后段明顯膨脹,剖開腸管可見腸管內(nèi)有大量的炎性滲出物、脫落的腸粘膜和腸內(nèi)容物。十二指腸和直腸等部分腸黏膜有不同程度的充出血。
5" 診斷方法
根據(jù)水禽細(xì)小病毒臨床癥狀和剖檢病變進(jìn)行初步診斷,確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷,包括病原的分離與鑒定、血清學(xué)診斷及分子生物學(xué)診斷等方法。血清學(xué)診斷方法包括中和試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。目前使用較多的是分子生物學(xué)診斷方法,包括LAMP、PCR和熒光定量PCR等。PCR檢測方法可通過軟件設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物,擴(kuò)增出目的條帶,對條帶進(jìn)行測序比對分析,以確定病原。
6" 防控措施
加強(qiáng)衛(wèi)生消毒和飼養(yǎng)管理,減少水禽應(yīng)激,提高水禽抵抗力是防控水禽細(xì)小病毒病的有效方法。加強(qiáng)疫苗免疫是防控該病的有效措施,目前防控該病的疫苗有減毒活疫苗、滅活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗和病毒活載體疫苗。
國內(nèi)外最早用來預(yù)防WPVs的疫苗為減毒活疫苗。減毒活疫苗主要是通過接種鵝胚或細(xì)胞進(jìn)行傳代獲得低毒力的毒株。我國學(xué)者于1962年研制出針對種鵝的小鵝瘟活疫苗,隨后又相繼研制出針對雛鵝、雛番鴨、番鴨等的弱毒疫苗。減毒活疫苗的作用機(jī)制主要在VP1蛋白,該結(jié)構(gòu)蛋白受體結(jié)合位點(diǎn)附近的序列發(fā)生變化,可能是毒株毒力減弱的原因。
滅活疫苗的優(yōu)點(diǎn)為安全性高、生產(chǎn)工藝簡單且不存在病毒擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn),臨床上常常用作加強(qiáng)免疫。國內(nèi)外有很多學(xué)者將毒株滅活制備滅活疫苗,接種鴨、鵝,均能獲得抗體保護(hù)。
亞單位疫苗只含有致病源的一部分,無致病性,不存在擴(kuò)散病毒的風(fēng)險(xiǎn),安全性更高。國內(nèi)外學(xué)者通過構(gòu)建重組質(zhì)粒進(jìn)行原核、真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)出目的蛋白,可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生高水平的抗體。
核酸疫苗是一種新型疫苗,其優(yōu)點(diǎn)為制造簡單,無需冷藏常溫下即可穩(wěn)定存在。當(dāng)接種核酸疫苗后,重組質(zhì)粒進(jìn)入機(jī)體細(xì)胞核中,在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄翻譯構(gòu)建抗原,表達(dá)的抗原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性的免疫應(yīng)答,包括體液免疫和細(xì)胞免疫,具有很好的免疫原性。有學(xué)者研究表明,基因疫苗誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫均優(yōu)于弱毒疫苗,今后在市場上具有廣闊的應(yīng)用前景。
病毒活載體疫苗接種機(jī)體后不僅對載體產(chǎn)生免疫保護(hù),也對插入基因的相應(yīng)病原產(chǎn)生免疫保護(hù)。已有學(xué)者將鵝副黏病毒作為載體表達(dá)GPV的VP3蛋白,免疫雛鵝后產(chǎn)生了中和GPV和鵝副黏病毒的中和抗體?;钶d體疫苗為構(gòu)建多聯(lián)多價(jià)疫苗提供了便利。在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中,我們可根據(jù)自己的實(shí)際情況選擇相適應(yīng)的疫苗[4]。對于已經(jīng)感染的水禽可注射相應(yīng)的抗體來進(jìn)行治療[5]。
參考文獻(xiàn):
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[2]" 何信群,蘇敬良,徐玉,李來旭,李閣,劉哲君,明月月.鴨源新型鵝細(xì)小病毒YJDS-19-16株的分離鑒定及VP3基因序列分析[J].中國動(dòng)物檢疫,2023,40(07):17-23.
[3]" 張帥.新型鵝細(xì)小病毒感染抑制鴨骨骼發(fā)育的分子機(jī)制研究[D].博士學(xué)位論文.泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2023.
[4]" 汪宏才,馬瑤,商雨,曾哲,張蓉蓉,溫國元,羅青平.水禽細(xì)小病毒疫苗研究進(jìn)展[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2022,61(S1):20-24.
[5]" 賀大林,唐熠,刁有祥.當(dāng)前肉鵝主要疫病的流行情況及防控對策[J].中國禽業(yè)導(dǎo)刊,2022,39(09):38-41.