摘 要：目的：對(duì)發(fā)生在某度假村的感染性腹瀉疫情進(jìn)行調(diào)查分析，查明原因，制定防控策略，控制疫情蔓延。方法：采用現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)二者結(jié)合分析，查找引起感染性腹瀉的致病因子。結(jié)果：本次疫情共搜索發(fā)現(xiàn)確診病例和疑似病例42例，病例臨床癥狀主要表現(xiàn)為發(fā)熱、嘔吐、腹瀉。其中發(fā)熱為26人，占比61.90%；有嘔吐癥狀為22人，占比58.38%；出現(xiàn)腹瀉癥狀的人數(shù)較多，為35人，占比83.33%。對(duì)其中17例病例進(jìn)行肛拭子采樣，分別采用熒光PCR檢測(cè)核酸和細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)檢測(cè)，最終在14例肛拭子標(biāo)本中檢測(cè)出諾如病毒GⅡ型。結(jié)論：根據(jù)病例的臨床癥狀、流行病學(xué)調(diào)查分析和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果判定引起此次小木屋度假村暴發(fā)感染性腹瀉疫情的病原微生物為諾如病毒GⅡ型。

關(guān)鍵詞：感染性腹瀉；諾如病毒；流行病學(xué)調(diào)查；實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

Investigation and Laboratory Analysis of an Outbreak of Norovirus Infectious Diarrhea in a Resort

CHENG Dejun， LUO Dalin

（Shucheng County Center for Disease Control and Prevention， Lu’an 231300， China）

Abstract： Objective： To investigate and analyze the infectious diarrhea epidemic in a resort， identify the causes， formulate prevention and control strategies， and control the spread of the epidemic. Method： Field epidemiological investigation and laboratory sampling were used to find the pathogenic factors causing infectious diarrhea. Result： A total of 42 confirmed and suspected cases have been identified， with the main clinical symptoms including fever， vomiting and diarrhea. Among them， 26 （61.90%） were febrile. 22 patients （58.38%） had vomiting symptoms. The number of people with diarrhea symptoms was more， 35 people， accounting for 83.33%. Field anal swabs were collected from 17 cases， nucleic acid detection by fluorescent PCR and bacteriological culture detection by bacterial culture. Finally， norovirus GⅡ type was detected in 14 cases. Conclusion： According to the clinical symptoms， epidemiological investigation and laboratory test results， the pathogenic microorganism causing the outbreak of infectious diarrhea in the chalet resort was norovirus type GⅡ.

Keywords： infectious diarrhea; norovirus; epidemiological investigation; laboratory test

感染性腹瀉是指由病毒、細(xì)菌或寄生蟲等病原微生物引起的胃腸道感染，臨床癥狀主要表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、嘔吐和發(fā)熱等[1]。最常見(jiàn)的為細(xì)菌性腹瀉和病毒性腹瀉。其中，病毒性腹瀉主要由諾如病毒和輪狀病毒等引起。諾如病毒，又稱諾瓦克病毒，它具有很強(qiáng)的感染力和致病力，10個(gè)病毒粒子就能感染致病，具有高度傳染性，尤其在集體生活場(chǎng)所易暴發(fā)感染，如學(xué)校、托幼機(jī)構(gòu)、工廠和養(yǎng)老院等[2-4]。本研究基于2023年4月15日舒城縣某度假村發(fā)生的一起以“嘔吐、腹痛、腹瀉”為主要癥狀的暴發(fā)疫情，綜合利用現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，以確定疫情暴發(fā)的原因，為今后處置類似疫情提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象

本次調(diào)查對(duì)象為該度假村相關(guān)工作人員中符合病例定義的疑似病例和確診病例。疑似病例是2023年4月11日以來(lái)在高峰鄉(xiāng)小木屋度假村入住或工作的人員，以及出現(xiàn)腹痛、腹瀉（≥3次/24 h）、發(fā)熱（≥37.3 ℃）、嘔吐、惡心等癥狀之一的人員。確診病例是2023年4月11日以來(lái)在高峰鄉(xiāng)小木屋度假村入住或工作的人員，以及出現(xiàn)腹痛、腹瀉（≥3次/24 h）、嘔吐、惡心等癥狀，并伴有發(fā)熱，且在患者生物標(biāo)本中檢出目標(biāo)致病因子的人員。

1.2 試劑與儀器

SC增菌液；GN增菌液；腸道菌增菌肉湯；諾如病毒核酸檢測(cè)提取、擴(kuò)增試劑，江蘇碩世。

江蘇碩世全自動(dòng)核酸提取儀（SSNP-3000A）；ABI核酸擴(kuò)增儀（QuantSudio5）；BHC-1300IIA2型生物安全柜。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 樣本采集

根據(jù)搜索出來(lái)的病例，對(duì)其中癥狀較重且沒(méi)有經(jīng)過(guò)治療的人員進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)采樣，共采集17份肛拭子標(biāo)本，及時(shí)放入滅活的病毒采樣管和相應(yīng)的細(xì)菌增菌液中保存。另采集食品和環(huán)境標(biāo)本8份一起及時(shí)帶回實(shí)驗(yàn)室，開(kāi)展后續(xù)檢測(cè)工作。

1.3.2 細(xì)菌學(xué)檢測(cè)

采集的所有標(biāo)本按照《細(xì)菌性腹瀉臨床實(shí)驗(yàn)室診斷操作指南》（WS/T 498—2017）進(jìn)行常規(guī)的食源性腸道致病菌檢測(cè)。

1.3.3 諾如病毒核酸檢測(cè)

吸取病毒采樣液200 μL，用碩世SSNP-3000A全自動(dòng)核酸提取儀磁珠法進(jìn)行病毒核酸提取，吸取待檢液5 μL，加入配制好的擴(kuò)增反應(yīng)體系中，進(jìn)行擴(kuò)增，按照碩世的諾如病毒GⅠ/GⅡ型核酸檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）配制擴(kuò)增反應(yīng)體系20 μL，ABIQ5熒光PCR儀上反應(yīng)條件設(shè)置為50 ℃逆轉(zhuǎn)錄10 min；95 ℃滅活5 min；95 ℃變性10 s，55 ℃退火/延伸30 s（末端收集熒光），45循環(huán)。選擇FAM、VIC和ROX這3個(gè)熒光通道。

2 結(jié)果與分析

2.1 基本情況

該度假村位于舒城縣偏遠(yuǎn)山區(qū)的一個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，從2023年4月10日開(kāi)始接待參加我縣某單位培訓(xùn)人員370名（男335人，女35人）入住，同時(shí)有賓館和食堂從業(yè)人員16名（男3人，女13人）共同入住。住宿條件較差，8人間，分上下鋪，住宿較擁擠。該度假村一日提供三餐，所有人員均在食堂就餐，食堂統(tǒng)一提供餐具，采取桌餐形式，所用食材均為當(dāng)天采購(gòu)的新鮮食材，未使用冷凍食品。食堂操作間較狹小，衛(wèi)生環(huán)境較差。

2.2 臨床癥狀

此次疫情共搜索到病例42例，其中疑似病例28例，確診病例14例，病例的臨床表現(xiàn)主要為發(fā)熱（61.90%）、惡心（61.90%）、嘔吐（58.38%）、腹痛（66.67%）、腹瀉（83.33%），有少數(shù)病例出現(xiàn)乏力、頭暈等癥狀。主要臨床癥狀見(jiàn)表1。

2.3 流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

2.3.1 首發(fā)病例

周某某，男，42歲，南港鎮(zhèn)村干部，學(xué)員，2023年4月10日入住該度假村參加培訓(xùn)，住宿為8人間，宿舍分上下鋪。4月11日6：00左右出現(xiàn)腹瀉，最多腹瀉5次/d、稀水樣便，伴發(fā)熱37.5 ℃，4月12日20點(diǎn)到藥店購(gòu)買消炎藥自行服用，癥狀未緩解，4月13日返回南港鎮(zhèn)缸窯村家中，后前往村衛(wèi)生室，衛(wèi)生室給予補(bǔ)液等對(duì)癥治療，于4月14日下午癥狀消失。

2.3.2 發(fā)病時(shí)間分布

2023年4月11日早晨，首發(fā)病例出現(xiàn)臨床癥狀，12—13日出現(xiàn)病例散發(fā)，發(fā)病人數(shù)于4月14日達(dá)最高峰，為22例，4月15日進(jìn)行疫情處置后，發(fā)病人數(shù)開(kāi)始下降，至4月18日疫情結(jié)束。某度假村感染性腹瀉病例發(fā)病時(shí)間分布見(jiàn)圖1。

2.3.3 人群與空間分布

（1）人群分布。此次疫情發(fā)病人員均為小木屋度假村參加培訓(xùn)的人員，度假村工作人員包括食堂工作人員都沒(méi)有發(fā)病。培訓(xùn)人員中男女均有病例發(fā)生，男女性別比為9.50∶1，男性罹患率為11.24%（38/338），女性罹患率為8.33%（4/48），不同性別罹患率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.367，P=0.545）。發(fā)病年齡在28～58歲，發(fā)病以30～40歲年齡段為主，占52.38%（22/42）。

（2）空間分布。培訓(xùn)人員的培訓(xùn)地點(diǎn)是在同一間會(huì)議室，座位不固定；戶外訓(xùn)練均在度假區(qū)內(nèi)的戶外拓展基地活動(dòng)。住宿均為8人間，分上下鋪，住宿較擁擠。宿舍空間較小，衛(wèi)生環(huán)境差。參加培訓(xùn)人員370名（男335人，女35人），賓館和食堂從業(yè)人員16名（男3人，女13人）共同入住。所有人員共分別居住于50間宿舍，其中北樓共兩層，上下各20間房間，均住滿培訓(xùn)人員；南樓一層為餐廳，二樓為房間，培訓(xùn)人員住宿其中10間，如圖2所示。

42例病例中，居住于北樓一層的罹患率為8.75%（14/160），二層為14.38%（23/160），居住于南樓的罹患率為7.58%（5/66），不同樓層人員罹患率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.507，P=0.173）。42例病例分別住在南北兩樓的13間房間內(nèi)。首發(fā)病例周某某，居住于北樓二層206房間，4月11日6：00左右發(fā)病，在房間衛(wèi)生間腹瀉，中午共同在餐廳用餐；同宿舍另外兩人于4月12日發(fā)??；從4月13—17日，其他房間人員陸續(xù)發(fā)病，每日均有不同房間的多人出現(xiàn)癥狀。

2.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

2.4.1 細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果

17份肛拭子標(biāo)本經(jīng)增菌培養(yǎng)，肛拭子序號(hào)為3#、5#、6#的腸道菌增菌肉湯渾濁，12#、15#、16#的GN增菌液渾濁，所有標(biāo)本的SC增菌液均清晰透明，渾濁的增菌液接種于SS平板和MAC平板，37 ℃，培養(yǎng)20 h。SS平板和MAC平板上面均為紅色菌落，沒(méi)有見(jiàn)到無(wú)色透明菌落。食品及環(huán)境樣本（8份）的GN、SC、腸道菌增菌肉湯均清晰透明。所有標(biāo)本均未檢測(cè)出常見(jiàn)食源性腸道致病菌。

2.4.2 諾如病毒核酸檢測(cè)結(jié)果

17份肛拭子標(biāo)本經(jīng)熒光PCR檢測(cè)，有14份樣品諾如病毒核酸GⅡ型陽(yáng)性。

2.5 食品衛(wèi)生學(xué)調(diào)查

本次疫情調(diào)查，共采集17份肛拭子標(biāo)本，其中14份肛拭子標(biāo)本諾如病毒核酸GⅡ型陽(yáng)性。食品及環(huán)境標(biāo)本共采集8份，其中含5份環(huán)境標(biāo)本及3份食品標(biāo)本，諾如病毒核酸陰性，因沒(méi)有食物留樣，食品樣本為前一天食物的原材料，另外所有標(biāo)本均未檢出常見(jiàn)食源性腸道致病菌。

3 結(jié)論與討論

諾如病毒感染的潛伏期通常為24～48 h，感染發(fā)病一般以輕癥為主，最常見(jiàn)的癥狀有腹瀉、嘔吐和發(fā)熱等。該病毒傳播途徑多樣，包括食物、水源、接觸傳播和氣溶膠傳播等[5]。預(yù)防措施包括保持手部衛(wèi)生、避免食用污染食物和不飲用生水等。治療方法主要是對(duì)癥治療，以維持患者的水電解質(zhì)平衡。雖然諾如病毒感染性腹瀉一般具有自限性，但在小部分免疫力低下的特殊人群中也可以引發(fā)并發(fā)癥，甚至出現(xiàn)死亡病例。諾如病毒感染性腹瀉在全球范圍引起多次流行，常常造成嚴(yán)重的公共衛(wèi)生事件[6]。

根據(jù)《諾如病毒感染暴發(fā)調(diào)查和預(yù)防控制技術(shù)指南》（2015版）要求，現(xiàn)場(chǎng)疫情處置時(shí)，需要對(duì)病人標(biāo)本、環(huán)境標(biāo)本、食品標(biāo)本和水質(zhì)標(biāo)本等進(jìn)行采樣，開(kāi)展諾如病毒核酸檢測(cè)。本次現(xiàn)場(chǎng)處置疫情由于多種原因，只采集了肛拭子標(biāo)本，沒(méi)有對(duì)食品標(biāo)本和環(huán)境標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)合病例臨床癥狀，流行病學(xué)特征，以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，判定此次感染性腹瀉由諾如病毒GⅡ型引起，此次暴發(fā)疫情很可能是由首發(fā)病例從度假村外面感染后，傳染給了同行的培訓(xùn)人員。由于住宿環(huán)境較差，共同吃住，8人一間寢室，上下鋪，空間擁擠，人群密集且近距離接觸。此外，諾如病毒傳染性較強(qiáng)，可通過(guò)首發(fā)病例在人群中迅速傳播[7]。

針對(duì)此次疫情，可采取如下處置措施。①密切關(guān)注后續(xù)發(fā)病情況，癥狀嚴(yán)重的病例送往醫(yī)院進(jìn)行治療，輕癥人員居家觀察。②立即暫停此次培訓(xùn)活動(dòng)，等待病例康復(fù)后，經(jīng)舒城縣疾控中心評(píng)估后再次舉行培訓(xùn)。③指導(dǎo)度假村進(jìn)行通風(fēng)消毒工作，即嘔吐物先消毒，后清掃，再消毒；在抽水馬桶中投放含氯消毒劑對(duì)排泄物和潔具消毒，所有餐具煮沸消毒。④加強(qiáng)健康教育宣傳，增強(qiáng)人們對(duì)感染性腹瀉的自我防護(hù)意識(shí)。

初春季節(jié)是各種傳染病暴發(fā)流行高峰期，因此加強(qiáng)民宿、度假村等人群住宿密集場(chǎng)所的衛(wèi)生管理，增強(qiáng)人們的傳染病防控意識(shí)就顯得格外重要。舒城縣疾控中心需要加強(qiáng)監(jiān)督力度，督促度假村等公共場(chǎng)所嚴(yán)格落實(shí)從業(yè)人員健康管理、食品環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)督等相關(guān)防控措施。同時(shí)，也需要增強(qiáng)人們對(duì)傳染病的報(bào)告意識(shí)與對(duì)腸道傳染病的自我防護(hù)意識(shí)，發(fā)現(xiàn)疫情應(yīng)及時(shí)報(bào)告，預(yù)防此類事件的再次發(fā)生[8]。有效防止傳染病流行，需要相關(guān)人員根據(jù)不同傳染病的特點(diǎn)，運(yùn)用多種形式普及傳染病防治知識(shí)，開(kāi)展多種形式的健康教育，培養(yǎng)個(gè)人養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣[9]。

參考文獻(xiàn)

[1]魏開(kāi)心，石安琪，曹慜，等.寧夏地區(qū)2019—2020年諾如病毒所致感染性腹瀉流行特征和病原學(xué)分析[J].病毒學(xué)報(bào)，2023，39（1）：96-104.

[2]林艷艷，邢子偉，譚翰清.1起學(xué)校諾如病毒急性胃腸炎暴發(fā)的病原學(xué)檢測(cè)[J].中國(guó)校醫(yī)，2018，32（4）：272-274.

[3]章忠輝，楊汝奔，葉曉新.一起農(nóng)村生活源水污染引起的諾如病毒感染性胃腸炎暴發(fā)調(diào)查與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)志，2022，32（9）：1146-1148.

[4]章國(guó)寶，應(yīng)麗紅，胡肖雄，等.一起建設(shè)工地諾如病毒聚集性疫情的調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2020，30（2）：227-228.

[5]張麗，胡艷.一起學(xué)校諾如病毒感染引起的胃腸炎暴發(fā)疫情調(diào)查[J].現(xiàn)代疾病預(yù)防控制，2023，34（5）：380-382.

[6]徐銳權(quán)，吳文俊，王可欣，等.2016—2018年廣州兒童腹瀉諾如病毒檢測(cè)及流行狀況分析[J].中華臨床實(shí)驗(yàn)室管理電子雜志，2021，9（1）：29-33.

[7]汪自然，陳雨，伊潔，等.諾如病毒RNA檢測(cè)的性能驗(yàn)證與臨床應(yīng)用[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2022，40（2）：96-100．

[8]甘俊英，龔磊，侯賽，等.一起游學(xué)團(tuán)諾如病毒感染性腹瀉暴發(fā)疫情的流行病學(xué)調(diào)查[J].安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2023，29（1）：39-42.

[9]孫寶影，丁德超.一起教育培訓(xùn)機(jī)構(gòu)諾如病毒感染性腹瀉暴發(fā)調(diào)查[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2022，28（4）：308-310.