張曉卓，劉新佳，莘 策，賈 穎

（山西中醫(yī)藥大學，山西 晉中 030619）

銀屑病，中醫(yī)稱為“白疕”，典型臨床癥狀為紅斑或斑塊，并伴有鱗屑和瘙癢。銀屑病是一種免疫介導的慢性炎癥性皮膚病，可影響全身多個系統(tǒng)，嚴重者可危及心血管系統(tǒng)，增加代謝綜合征的發(fā)生概率[1]。銀屑病的發(fā)病原因及機制至今尚未明確，目前多認為與遺傳因素、環(huán)境因素、免疫應答異常等有關(guān)[2]。銀屑病在我國的發(fā)病率逐年上升，北方多于南方，男性多于女性。在治療方面，患者大多采用局部外用西藥、系統(tǒng)用藥或生物制劑，采用中藥、水療、光療等療法的僅占13.27%[3]。中醫(yī)藥治療銀屑病方法多樣，療效確切，副作用少，有很大的研究空間。賈穎教授在多年的臨床工作中發(fā)現(xiàn)，口服土槐丹四物湯結(jié)合外用復方秦柏洗劑治療銀屑病效果顯著。為進一步明確其療效、探究其作用機理，本研究通過觀察口服土槐丹四物湯聯(lián)合外用復方秦柏洗劑對銀屑病小鼠模型皮損、小鼠陰道上皮細胞有絲分裂、小鼠耳腫脹模型的影響，研究口服土槐丹四物湯聯(lián)合外用復方秦柏洗劑對銀屑病的治療作用。

1 材 料

1.1 動物 ICR小鼠96只，SPF級，雌雄各半，體質(zhì)量（25.25±2.67）g，購自北京斯貝福實驗動物科技有限公司，動物生產(chǎn)合格證號：SCXK（京）2019-0010。小鼠飼養(yǎng)于山西中醫(yī)藥大學動物房，所有小鼠均飼養(yǎng)于同一飼養(yǎng)室，室溫（23±2）℃，12 h光照/黑夜循環(huán)，相對濕度55%～65%，自由飲水，常規(guī)飼料喂養(yǎng)。實驗前所有小鼠均適應性喂養(yǎng)1周。實驗所涉及動物研究的有關(guān)材料及取材，均符合山西中醫(yī)藥大學醫(yī)學倫理審查委員會要求（批準編號：2021DW259）。

1.2 藥物與試劑 5%咪喹莫特乳膏（四川明欣藥業(yè)有限責任公司，批號：H20030129）；戊酸雌二醇片（DELPHARM Lille S.A.S公司，批號：J20171038）；生理鹽水（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號：H51021156）；卡泊三醇軟膏（上海勵奧醫(yī)藥咨詢有限公司，批號：HJ20160069）；甲氨蝶呤片（江蘇知原藥業(yè)股份有限公司，批號：H20223032）；石蠟（批號：69018961）、甲醛（批號：10010018）、二甲苯（批號：10023418）、無水乙醇（批號：10092680）、30%H2O2（批號：10011218）均購自上海國藥集團；廣譜二抗（批號：D-3004）、DAB濃縮型試劑盒（批號：FL-6001）均購自上海長島生物技術(shù)有限公司；蘇木素（珠海貝索生物技術(shù)有限公司，批號：71409）；中性樹脂（上海宇淳生物科技有限公司，批號：PAB180017）。

復方秦柏洗劑，方藥組成：秦皮60 g，側(cè)柏葉30 g，桑葉30 g，當歸30 g，白芍15 g。土槐丹四物湯，方藥組成：土茯苓30 g，生地黃30 g，熟地黃12 g，當歸15 g，牡丹皮15 g，赤芍15 g，生槐花30 g，生薏苡仁30 g，蟬蛻10 g，生甘草10 g，丹參30 g，白花蛇舌草30 g。以上所有藥物由山西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院中藥房提供，并經(jīng)山西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院賈穎教授鑒定為正品。復方秦柏洗劑制備：將上述藥物混勻后按比例進行煎煮取藥液約1 000 mL，生藥質(zhì)量濃度約為0.165 g/mL，冷卻后以保鮮膜封口，放置冰箱4 ℃下冷藏備用。土槐丹四物湯制備：將上述藥物混勻后進行煎煮，煎煮至生藥質(zhì)量濃度約0.67 g/mL，冷卻后4 ℃冷藏備用。

1.3 儀器 CX41正置顯微鏡（OLYMPUS公司）；SQ2125石蠟切片機（徠克公司）；PPTHK-21B攤片機（徠克公司）；Pipetman移液器（吉爾森P型移液器）；HI1210水浴鍋（Leica公司）；D5100數(shù)碼相機（NIKON公司）；20～200 μL移液器（Finnpipette公司）；37 ℃電熱恒溫培養(yǎng)箱（武漢一恒蘇凈科學儀器有限公司）；恒溫烘箱（上海恒一科學儀器有限公司）；988洗板機（Tianshi公司）；RT-6100型450 nm波長酶標儀（Rayto公司）；TG16W微量高速離心機（長沙湘智離心機儀器有限公司）；TGL16M臺式高速冷凍離心機（上海盧湘儀離心機儀器有限公司）；HT-111B恒溫搖床（上海赫田科學儀器有限公司）；AE1204型120 g/0.1 mg電子分析天平（上海良平公司）；JY98-IIIN細胞破碎儀（EasyWeLL系列）。

2 方法

2.1 口服土槐丹四物湯聯(lián)合外用復方秦柏洗劑對小鼠陰道上皮有絲分裂的影響

2.1.1 分組 將48只雌性小鼠隨機分為空白組、模型組、卡泊三醇組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組，每組8只。

2.1.2 造模 實驗開始前，模型組、卡泊三醇組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組均使用戊酸雌二醇灌胃（10 mg/mL），0.2 mL/次，1次/d，連續(xù)3 d，使小鼠陰道上皮處于雌激素期[4]。空白組小鼠使用等量的0.9%NaCl溶液進行灌胃。3 d后統(tǒng)計小鼠的陰道上皮有絲分裂細胞數(shù)，模型組與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表明造模成功。

2.1.3 給藥 開始給藥時，卡泊三醇組使用卡泊三醇乳膏進行陰道內(nèi)涂擦，30 mg/cm2，2次/d[5]。復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組使用復方秦柏洗劑進行陰道內(nèi)濕敷，10 min/次，2次/d?？瞻捉M、模型組、土槐丹四物湯組使用等量的0.9%NaCl溶液進行陰道內(nèi)濕敷。土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組采用土槐丹四物湯水煎劑灌胃。土槐丹四物湯成人每日劑量為257 g，給藥劑量參照70 kg成人與20 g小鼠體表面積換算公式計算（等效劑量比值為0.002 6），經(jīng)換算小鼠需給藥33.41 g/（kg·d），2次/d。空白組、模型組、卡泊三醇組、復方秦柏洗劑組使用等量的0.9%NaCl溶液進行灌胃，連續(xù)14 d。末次給藥統(tǒng)一于08：00：00進行，以減少晝夜節(jié)律對細胞有絲分裂結(jié)果的影響。

同樣地，目前微信公眾平臺也有很多易用的第三方編輯、開發(fā)平臺。我們可以借助微管家、微盟、微企通、微訊云端等第三方開發(fā)平臺，跳過復雜的程序開發(fā)過程，方便快捷地建立微網(wǎng)站，實現(xiàn)內(nèi)容的管理。APP開發(fā)與微信公眾平臺開發(fā)對比如表1所示。

2.1.4 觀察指標 （1）陰道上皮有絲分裂指數(shù)：取一部分陰道組織以4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，組織切片，用HE染色，通過光學顯微鏡觀察有絲分裂的基底細胞，計算陰道上皮有絲分裂指數(shù)，即每100個基底細胞中有絲分裂細胞個數(shù)。（2）陰道組織中STAT3、P-STAT3表達：將另一部分陰道上皮組織固定48 h后洗滌，采用50%乙醇、70%乙醇、85%乙醇、95%乙醇直至純乙醇脫水，進行透明、浸蠟、包埋、切片后，二甲苯脫蠟，經(jīng)100%乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、雙蒸水水化，0.01 mmol/mL檸檬酸鈉緩沖溶液中抗原修復，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，封閉非特異性抗原，滴加一抗，加HRP標記二抗，DAB染色，自來水沖洗，蘇木精復染，0.1%鹽酸酒精分化，脫水、透明、封片，顯微鏡拍照，測定組織中STAT3、P-STAT3光密度值。

2.2 口服土槐丹四物湯聯(lián)合外用復方秦柏洗劑對咪喹莫特誘導的銀屑病皮損改善作用

2.2.1 分組 將48只雄性小鼠隨機分為空白組、模型組、甲氨蝶呤組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組，每組8只。

2.2.2 造模 用剃須刀在小鼠背部剔出2 cm×2 cm的無毛發(fā)區(qū)，然后用脫毛膏進一步脫去殘留毛根。模型組、甲氨蝶呤組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組每天用5%咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部皮膚，62.5 mg/次，1次/d，連續(xù)7 d[6]?？瞻捉M小鼠使用等量的凡士林涂抹背部皮膚，連續(xù)7 d。7 d后模型組小鼠背部皮膚可見鱗屑、紅斑、皮膚增厚等癥狀。且模型組PASI總評分與空白組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表示造模成功。

2.2.3 給藥 甲氨蝶呤組小鼠予甲氨蝶呤灌胃，1 mg/（kg·d），0.2 mL/次，1次/d[6]。土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組小鼠予土槐丹四物湯水煎劑灌胃，33.41 g/（kg·d），2次/d。空白組、模型組、復方秦柏洗劑組小鼠予等量的0.9%NaCl溶液灌胃，連續(xù)7 d。復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組使用復方秦柏洗劑進行小鼠背部皮膚濕敷，用藥濃度為0.165 g/mL，10 min/次，2次/d?？瞻捉M、模型組、甲氨蝶呤組、土槐丹四物湯組小鼠使用等量的0.9%NaCl溶液進行背部皮膚涂擦。

2.2.4 觀察指標 （1）PASI評分：觀察記錄小鼠給藥7 d后的皮損變化，根據(jù)PASI標準對小鼠皮損處紅斑、鱗屑、浸潤進行評分，并計算總評分。①紅斑顏色：0分為無紅斑，1分為輕微紅斑，2分為中度紅斑，3分為重度紅斑，4分為極重度紅斑。②鱗屑覆蓋面積：0分為無鱗屑覆蓋，1分為散在細鱗屑覆蓋，2分為大部皮損部有鱗屑覆蓋，3分為全部皮損有鱗屑覆蓋，4分為整體皮膚為皮損。③斑塊厚度：0分為正常皮膚，1分為皮損輕微高出正常皮膚，2分為皮損微隆，3分為皮損肥厚，4分為整體皮膚皮損。各項指標的得分加權(quán)為PASI評分[7]。（2）血清STAT3、IFN-γ、IL-17和IL-23：末次給藥1 h后，摘取小鼠眼球取血，室溫靜置1 h后，3 000 r/min（離心半徑6 cm），離心10 min，取血清，參照ELISA試劑盒說明書，檢測血清STAT3、IFN-γ、IL-17和IL-23。

2.3 口服土槐丹四物湯聯(lián)合外用復方秦柏洗劑對小鼠耳腫脹模型的抑制作用

2.3.1 分組 將48只雄性小鼠隨機分為空白組、模型組、甲氨蝶呤組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組，每組8只。

2.3.3 造模 末次給藥1 h后，除空白組外，其余各組于右耳廓正反兩面均勻涂二甲苯20 μL以建立耳腫脹模型[8]。30 min后，小鼠右耳與左耳相比出現(xiàn)明顯腫脹，且模型組小鼠耳腫脹度與空白組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表示造模成功。

2.3.4 觀察指標 （1）小鼠耳腫脹度：小鼠右耳涂二甲苯溶液30 min后，用打孔器取下兩邊耳廓相同部位的耳片，計算小鼠耳腫脹度。耳腫脹度=右耳切片質(zhì)量-左耳切片質(zhì)量。（2）小鼠右耳組織學檢查：小鼠耳片稱重后，立刻將耳片用4%多聚甲醛固定，并進行修剪，自動脫水機脫水，石蠟包埋，切片，烤片，二甲苯脫蠟，依次浸于經(jīng)100%乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、雙蒸水水化，染色，脫水透明，封片。用光學顯微鏡觀察充血、水腫、變性、增生、炎性變化等情況。（3）耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ表達：將小鼠耳的其余部分固定48 h后洗滌，采用50%乙醇、70%乙醇、85%乙醇、95%乙醇直至乙醇純脫水，進行透明、浸蠟、包埋、切片后，二甲苯脫蠟，經(jīng)100%乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、雙蒸水水化，0.01 mmol/mL檸檬酸鈉緩沖溶液中抗原修復，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，封閉非特異性抗原，滴加一抗，加HRP標記二抗，DAB染色，自來水沖洗，蘇木精復染，0.1%鹽酸酒精分化，脫水、透明、封片，顯微鏡拍照，測定組織中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ的光密度值。

2.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 27.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料以“均數(shù)±標準差”（±s）表示，計量資料符合正態(tài)分布且方差齊，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果

3.1 對小鼠陰道上皮有絲分裂的影響

3.1.1 各組小鼠陰道上皮有絲分裂指數(shù)比較 模型組小鼠陰道上皮有絲分裂指數(shù)高于空白組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。模型組小鼠陰道上皮處于雌激素周期。復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組、卡泊三醇組小鼠陰道上皮有絲分裂指數(shù)均低于模型組（P＜0.05）；土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠陰道上皮有絲分裂指數(shù)與卡泊三醇組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖1～2）

圖1 各組小鼠陰道上皮有絲分裂指數(shù)比較 （±s，n=8）

圖2 各組小鼠陰道上皮細胞有絲分裂的組織學檢查（HE，×400）

3.1.2 各組小鼠陰道上皮中STAT3、P-STAT3光密度值比較 模型組小鼠陰道上皮中P-STAT3、STAT3光密度值高于空白組（P＜0.05）；復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組、卡泊三醇組小鼠陰道上皮中P-STAT3、STAT3光密度值均低于模型組（P＜0.05）；復方秦柏洗劑組小鼠陰道上皮中P-STAT3、STAT3光密度值與土槐丹四物湯組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；復方秦柏洗劑組小鼠陰道上皮中P-STAT3、STAT3光密度值高于卡泊三醇組（P＜0.05）；土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠陰道上皮中P-STAT3、STAT3光密度值與卡泊三醇組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖3～4）

圖3 各組小鼠陰道上皮中STAT3、P-STAT3 光密度值比較（±s，n=8）

圖4 各組小鼠陰道上皮病理圖 （免疫組化，×200）

3.2 對咪喹莫特誘導的銀屑病皮損改善作用

3.2.1 各組小鼠PASI總評分比較 除空白組外，其余各組小鼠涂抹咪喹莫特7 d后，皮膚出現(xiàn)明顯紅斑、鱗屑、浸潤，并且皮損不斷增厚。造模7 d后，除空白組外，其余各組間PASI總評分比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。給藥7 d后，甲氨蝶呤組、土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠PASI總評分均低于模型組（P＜0.05）；土槐丹四物湯組小鼠PASI總評分與復方秦柏洗劑組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組小鼠PASI總評分均高于甲氨蝶呤組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠PASI總評分與甲氨蝶呤組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖5）

圖5 各組小鼠PASI 總評分比較 （±s，n=8）

3.2.2 各組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23水平比較 模型組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23水平高于空白組（P＜0.05）；甲氨蝶呤組、土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23水平均低于模型組（P＜0.05）；土槐丹四物湯組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23水平與復方秦柏洗劑組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23水平均高于甲氨蝶呤組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23水平與甲氨蝶呤組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖6）

圖6 各組小鼠血清STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23 水平比較（±s，n=8）

3.3 對小鼠耳腫脹模型的抑制作用

3.3.1 各組小鼠耳腫脹度比較 模型組小鼠耳腫脹度高于空白組（P＜0.05）；甲氨蝶呤組、土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠耳腫脹度均低于模型組（P＜0.05）；土槐丹四物湯組小鼠耳腫脹度與復方秦柏洗劑組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組小鼠耳腫脹度均高于甲氨蝶呤組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠耳腫脹度與甲氨蝶呤組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖7）

圖7 各組小鼠耳腫脹度比較 （±s，n=8）

3.3.2 小鼠右耳HE切片觀察 模型組小鼠右耳組織可見表皮層和真皮層壞死，結(jié)締組織增生修復（黑色箭頭），伴有大量的中性粒細胞及單核細胞浸潤（藍色箭頭），軟骨層增厚，彎曲，軟骨細胞增生（黃色箭頭）。土槐丹四物湯組小鼠右耳組織皮下明顯水腫（黑色箭頭），結(jié)構(gòu)疏松，真皮層大量的膠原纖維溶解（藍色箭頭），少量的中性粒細胞和淋巴細胞浸潤（黃色箭頭）。復方秦柏洗劑組小鼠右耳組織表皮輕度增厚（黑色箭頭），皮下輕度水腫（藍色箭頭），結(jié)構(gòu)疏松，可見少量的中性粒細胞和淋巴細胞浸潤（黃色箭頭）。甲氨蝶呤組小鼠右耳組織皮下輕度水腫（黑色箭頭），結(jié)構(gòu)疏松，真皮層少量膠原纖維溶解（藍色箭頭），散在的中性粒細胞和淋巴細胞浸潤（黃色箭頭）。土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠右耳組織真皮層可見排列整齊的膠原纖維，未見明顯的炎癥細胞浸潤。（見圖8）

圖8 各組小鼠右耳組織學檢查 （HE，×200）

3.3.3 各組小鼠耳組織中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值比較 模型組小鼠耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值高于空白組（P＜0.05）；甲氨蝶呤組、土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組、土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值均低于模型組（P＜0.05）；土槐丹四物湯組小鼠耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值與復方秦柏洗劑組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；土槐丹四物湯組、復方秦柏洗劑組小鼠耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值均高于甲氨蝶呤組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；土槐丹四物湯+復方秦柏洗劑組小鼠耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值與甲氨蝶呤組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（見圖9～10）

圖9 各組小鼠耳組織IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值比較 （±s，n=8）

圖10 各組小鼠耳組織病理圖 （免疫組化，×200）

4 討論

中醫(yī)典籍中關(guān)于銀屑病的記載較為豐富，歷代醫(yī)家對銀屑病的病因病機進行了補充完善。在明代以前，大多數(shù)醫(yī)家認為銀屑病主要由外邪侵犯而發(fā)病。明代之后“內(nèi)外因共同致病”的理論被廣泛認可，近代各醫(yī)家對銀屑病有了更為全面的認識。趙炳南認為銀屑病是由內(nèi)有“血熱”，加之飲食不節(jié)、情志不遂、外邪侵擾等因素共同作用而成；朱仁康提出銀屑病發(fā)病的始末離不開“血熱風燥”；顧伯華提出銀屑病主要是由于“營血虧虛”復感外邪而發(fā)；趙尚華在總結(jié)前人觀點的基礎(chǔ)上，提出銀屑病病因病機多為“血熱風燥，日久蘊毒”。

目前尚無可以完全根治銀屑病的方法。近年來中醫(yī)藥治療銀屑病，基本上圍繞血、熱、燥、風、濕、毒等因素進行組方用藥。土槐丹四物湯是趙尚華總結(jié)出的經(jīng)驗方，由《太平惠民和劑局方》中的加味四物湯增加土茯苓、槐花、牡丹皮等藥物而成。方中土茯苓、槐花、白花蛇舌草合用，清熱解毒；丹參、牡丹皮、赤芍、生地黃清熱涼血，活血養(yǎng)陰；當歸、熟地黃補血活血；生薏苡仁與土茯苓、白花蛇舌草、生甘草相配伍，不僅可使熱從小便去，還可健脾滲濕，顧護脾胃；蟬蛻可疏散肌表熱邪，散熱止癢。全方從血熱立法，表里兼顧、內(nèi)外分消，共奏清熱解毒、涼血活血之功效。復方秦柏洗劑中秦皮、桑葉清熱燥濕，疏散風熱；側(cè)柏葉、當歸、白芍涼血活血，養(yǎng)陰潤燥。全方散中寓補，清中有養(yǎng)，使邪熱得散，肌膚得養(yǎng)。

前期研究表明土槐丹四物湯可能通過降低血清中炎癥因子的表達來治療銀屑病[9]?，F(xiàn)代研究表明，復方秦柏洗劑具有抗炎、抗過敏、鎮(zhèn)痛等作用；秦皮中的秦皮甲素、秦皮乙素等香豆素類成分，具有顯著的抗炎作用和抗過敏作用[10]；側(cè)柏葉能夠通過抑制花生四烯酸代謝等途徑發(fā)揮抗炎作用，且側(cè)柏葉中的側(cè)柏葉粗多糖成分可提高機體免疫力和抗氧化能力，從而達到抗腫瘤的效果[11]；桑葉提取物能夠抑制COX和LOX酶活性，雙重抑制花生四烯酸，產(chǎn)生抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用[12]；當歸可通過抑制IL-6、NO、TNF-α、IL-1β和PGE2等炎癥介質(zhì)的釋放，來產(chǎn)生抗炎、鎮(zhèn)痛等作用[13]。

細胞增殖、分化、凋亡及炎癥反應均與STAT3通路有密切關(guān)系，STAT3對銀屑病的發(fā)生發(fā)展有重要影響。P-STAT3是STAT3的活化形式。活化的STAT3可進入細胞核內(nèi)與特定的靶基因DNA應答元件結(jié)合，調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄，誘導Bcl-2、Survivin、Bcl-xl、Mcl-1等抗凋亡基因和c-Myc、cy-clinD1、VEGF等調(diào)控細胞周期基因的表達[14]。IFN-γ為Th1型細胞因子，能夠通過誘導角質(zhì)形成細胞表達角質(zhì)蛋白17，促使角質(zhì)形成細胞過度增生，與銀屑病的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系[15]。銀屑病患者的血清、皮損及非皮損皮膚中IFN-γ水平升高，且血清和皮損中的IFN-γ水平與銀屑病的嚴重程度相關(guān)[16]。IL-23在免疫中主要發(fā)揮致炎效應，可誘導產(chǎn)生TNF-α，并放大炎癥反應[17]。IL-17是Th17細胞分泌的最重要前炎癥細胞因子，可誘導促炎性細胞因子（IL-6、TNF-α）及趨化因子（MCP-1、MIP-2和MMP-9）表達，引起組織細胞局部浸潤、組織破壞和炎癥反應，同時IL-17對中性粒細胞的增殖、成熟、趨化行為，以及T細胞的活化具有協(xié)同刺激作用[18-19]。在皮膚組織中，IL-17可誘導角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生TNF-α、VEGF、IL-8、GM-CSF和CXCL10等細胞因子[20]，誘導炎癥反應和促進血管形成。IL-6作為一種由巨噬細胞、Th2細胞、B細胞等生成的多效前炎癥細胞因子，對原始T淋巴細胞向Th17細胞轉(zhuǎn)化有十分重要的影響[21]。IL-6已被證實在銀屑病的發(fā)病過程中發(fā)揮著十分重要的作用，目前已成為銀屑病炎癥活動標志及治療反應指標之一[22]。

本實驗觀察了口服土槐丹四物湯、外用復方秦柏洗劑以及兩者聯(lián)合使用對咪喹莫特誘導的銀屑病樣皮損的改善作用，以及對小鼠陰道上皮的有絲分裂、小鼠耳腫脹的抑制作用，并分析了小鼠陰道上皮組織中P-STAT3、STAT3光密度值、小鼠耳組織中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ光密度值以及小鼠血清中STAT3、IFN-γ、IL-17、IL-23表達水平。結(jié)果表明，口服土槐丹四物湯、外用復方秦柏洗劑均能抑制小鼠陰道上皮有絲分裂，降低小鼠STAT3、P-STAT3、IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ表達，從而進一步達到治療銀屑病的目的?？诜粱钡に奈餃?lián)合外用復方秦柏洗劑的治療效果優(yōu)于兩者單獨使用。口服土槐丹四物湯聯(lián)合外用復方秦柏洗劑是治療銀屑病的有效手段，可進一步在臨床推廣。