王裕玉 付 寧 安美玲 張永明 崔 凱 張永勤 郭曉華 王君霞 郭見(jiàn)軍*

(1. 日照職業(yè)技術(shù)學(xué)院海洋技術(shù)系,日照 276826;2. 水產(chǎn)增養(yǎng)殖安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,合肥 230031;3. 山東美佳集團(tuán)有限公司,日照 276800; 4.日照市海洋與漁業(yè)研究院,日照 276800)

魚(yú)粉因其適口性好、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高和消化率高而被廣泛用作水產(chǎn)飼料的動(dòng)物蛋白質(zhì)源[1]。魚(yú)粉的用量和質(zhì)量在很大程度上決定了水產(chǎn)飼料的質(zhì)量和養(yǎng)殖效益。然而,由于過(guò)度捕撈和環(huán)境污染等引起海洋漁業(yè)資源衰減,據(jù)估計(jì),魚(yú)粉產(chǎn)量未來(lái)將會(huì)維持在年產(chǎn)500萬(wàn)t左右,而水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的增長(zhǎng)對(duì)魚(yú)粉的需求越來(lái)越大,這種供求關(guān)系的不平衡導(dǎo)致魚(yú)粉價(jià)格飆升,進(jìn)而增加飼料和養(yǎng)殖成本,從而嚴(yán)重制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展[2]。因此,在保證魚(yú)類(lèi)正常生長(zhǎng)、健康和產(chǎn)品品質(zhì)的前提下,急切需要尋找能夠部分甚至完全替代魚(yú)粉的蛋白質(zhì)源,以節(jié)約飼料成本,提高養(yǎng)殖效益。

我國(guó)每年產(chǎn)生1 000萬(wàn)～1 800萬(wàn)t水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物,其中,魚(yú)頭、魚(yú)骨、魚(yú)鱗、魚(yú)皮、內(nèi)臟和碎肉等占原料魚(yú)體質(zhì)量的40%～55%[3]。水產(chǎn)加工副產(chǎn)物富含蛋白質(zhì)、膠原蛋白、必需氨基酸、多不飽和脂肪酸、類(lèi)胡蘿卜素、礦物質(zhì)和生物活性成分等,具有極高的利用價(jià)值,但是其不易儲(chǔ)存,易氧化酸敗,會(huì)造成嚴(yán)重的環(huán)境污染[4-6]。目前,水產(chǎn)加工副產(chǎn)物大多用于生產(chǎn)低值魚(yú)粉,這造成了資源的極大浪費(fèi)。如何充分利用水產(chǎn)加工副產(chǎn)物這一廉價(jià)蛋白質(zhì)源是解決飼料蛋白質(zhì)原料短缺的重要途徑之一,也是科研工作者和整個(gè)飼料行業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)。豆粕被認(rèn)為是水產(chǎn)飼料中替代魚(yú)粉的優(yōu)質(zhì)植物蛋白質(zhì)源之一,但是其適口性差、含有抗?fàn)I養(yǎng)因子、必需氨基酸不平衡的缺點(diǎn)限制了其在水產(chǎn)飼料中的使用量[7]。

發(fā)酵被認(rèn)為是提高動(dòng)物和植物蛋白質(zhì)源營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要手段之一。利用微生物發(fā)酵可將蛋白質(zhì)源中對(duì)動(dòng)物有毒有害的物質(zhì)或不能完全消化吸收的物質(zhì)進(jìn)行降解,從而產(chǎn)生易被動(dòng)物消化吸收的蛋白質(zhì)、活性肽和游離氨基酸以及有機(jī)酸和酶類(lèi)等,從而提高蛋白質(zhì)源的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[8-10]。研究結(jié)果顯示,微生物固態(tài)發(fā)酵水產(chǎn)加工副產(chǎn)物和植物蛋白質(zhì)源適量替代魚(yú)粉時(shí),可補(bǔ)充魚(yú)蝦類(lèi)所需游離氨基酸和不飽和脂肪酸等營(yíng)養(yǎng)素以及多肽、乳酸等生物活性成分、平衡飼料氨基酸組成、降低飼料成本、減少環(huán)境污染[10-13]。因此,將水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物加入到循環(huán)經(jīng)濟(jì)的產(chǎn)業(yè)鏈中,具有廣闊的應(yīng)用前景。

大口黑鱸具有生長(zhǎng)快、肉質(zhì)鮮美、無(wú)肌間刺和適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),深受消費(fèi)者和養(yǎng)殖者青睞,已成為我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)之一[14]。據(jù)中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒數(shù)據(jù),2022年大口黑鱸養(yǎng)殖總產(chǎn)量為80.2萬(wàn)t,占淡水魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖產(chǎn)量的2.96%[15]。目前,大口黑鱸配合飼料中魚(yú)粉用量達(dá)40%～54%,導(dǎo)致養(yǎng)殖成本過(guò)高[16]。截至目前,鮮見(jiàn)發(fā)酵鯖魚(yú)加工副產(chǎn)物(FFPW)在大口黑鱸飼料中應(yīng)用的相關(guān)研究報(bào)道。因此,本試驗(yàn)以大口黑鱸幼魚(yú)[(5.87±0.04) g]為試驗(yàn)對(duì)象,研究FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)生長(zhǎng)、飼料利用、體組成、血清生化指標(biāo)、肝臟抗氧化能力及消化酶活性、腸道健康等方面的影響,以期為大口黑鱸幼魚(yú)配合飼料中FFPW的合理應(yīng)用提供技術(shù)支持,促進(jìn)大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)綠色健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚(yú)粉為主要蛋白質(zhì)源,魚(yú)油為脂肪源,輔以酵母、血粉、玉米蛋白粉、維生素預(yù)混料、礦物質(zhì)預(yù)混料、膽堿、磷脂等原料,配制基礎(chǔ)飼料。FFPW由山東某集團(tuán)有限公司提供,是由鯖魚(yú)加工副產(chǎn)物與豆粕按照1∶1比例混合,添加植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母等固態(tài)發(fā)酵而成,活菌數(shù)6.7×108CFU/g。FFPW中粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量分別為45.20%和12.01%。以FFPW分別替代基礎(chǔ)飼料(FFPW0)中10%、20%和40%的魚(yú)粉,分別標(biāo)記為FFPW10、FFPW20和FFPW40,配制4種等氮等能試驗(yàn)飼料。飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。飼料氨基酸組成見(jiàn)表2。

表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

表2 飼料氨基酸組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))

配制飼料前,所有原料經(jīng)過(guò)粉碎過(guò)60目篩。準(zhǔn)確稱量飼料原料,先將固體原料混合均勻,然后再加入魚(yú)油和磷脂,手工將油脂顆粒搓細(xì),混勻,最后添加30%水,再次混勻,雙螺桿顆粒飼料機(jī)(河南鄭州威龍機(jī)械,KL-210型)擠壓成條狀(粒徑1.5 mm),60 ℃烘干,封口袋包裝,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 養(yǎng)殖管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在日照職業(yè)技術(shù)學(xué)院水生物繁養(yǎng)殖實(shí)訓(xùn)中心循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行。試驗(yàn)用大口黑鱸幼魚(yú)購(gòu)自金澄福生物科技(蘇州)有限公司,為當(dāng)年人工孵化的同一批魚(yú)苗。試驗(yàn)用魚(yú)暫養(yǎng)于纖維玻璃鋼養(yǎng)殖池(直徑2 m,水深60 cm),采用基礎(chǔ)飼料馴養(yǎng)2周,使其適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境和試驗(yàn)飼料。

試驗(yàn)在循環(huán)水養(yǎng)殖玻璃缸(1.00 m×0.45 m×0.45 m)中進(jìn)行,試驗(yàn)開(kāi)始前,試驗(yàn)魚(yú)饑餓24 h。試驗(yàn)挑選出360尾健康無(wú)病、規(guī)格一致[(5.87±0.04) g]的幼魚(yú),隨機(jī)為4個(gè)組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30尾魚(yú)。每種飼料隨機(jī)投喂3缸魚(yú),每天飽飼投喂2次(08:00和17:00)。投喂前除去糞便等污物。整個(gè)養(yǎng)殖期間,水流量0.3 L/min,溫度為(25.0±0.5) ℃,溶解氧含量為6.5～7.2 mg/L,pH為7.8～8.2,氨氮含量低于0.15 mg/L,光照周期為12h L/12 h D。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)10周。

1.3 樣品收集

養(yǎng)殖結(jié)束后,試驗(yàn)魚(yú)饑餓24 h,準(zhǔn)確稱每缸魚(yú)總重,記錄魚(yú)總數(shù);每缸隨機(jī)取5尾魚(yú),測(cè)量體質(zhì)量、體長(zhǎng),分離內(nèi)臟團(tuán)、肝臟并稱重,計(jì)算肥滿度、肝體比和臟體比;取肌肉、腸道和肝臟并保存于-20 ℃冰箱,分別用于測(cè)定肌肉成分、消化酶和抗氧化酶活性;每缸隨機(jī)取3尾魚(yú),-20 ℃冰箱中保存,用于測(cè)定全魚(yú)成分。每缸隨機(jī)取5尾魚(yú),MS-222麻醉,尾靜脈取血,4 ℃冰箱靜置2 h,5 000 r/min離心10 min,取上清液,-20 ℃保存。每缸選取3尾魚(yú),分離腸道并固定于4%多聚甲醛,用于制作腸道切片。

1.4 分析方法

體成分的測(cè)定:分別采用凱氏定氮法、索氏抽提法、灼燒法和烘干恒重法測(cè)定飼料、全魚(yú)和肌肉中粗蛋白質(zhì)(GB/T 6432—2018)、粗脂肪(GB/T 6433—2006)、粗灰分(GB/T 6438—2007)和水分(GB/T 6435—2014)含量。

血清生化指標(biāo)的測(cè)定:采用全自動(dòng)生化分析儀(邁瑞 BS-400, 深圳)測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性及總蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)含量。

肝臟抗氧化指標(biāo)的測(cè)定:將肝臟樣品按照重量∶體積=1∶9的比例加入9倍體積的生理鹽水,高速勻漿,然后于4 ℃,3 000 r/min,離心10 min,取上清液,用于測(cè)定總抗氧化能力(T-AOC)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、總超氧化物氣化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定,具體測(cè)定過(guò)程參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

腸道消化酶活性的測(cè)定:采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定腸道胰蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶活性。

腸道組織切片:將固定好的腸道樣品轉(zhuǎn)入75%乙醇溶液中,進(jìn)行乙醇梯度脫水,石蠟包埋,Leica RM2016型病理切片機(jī)切片(厚度為4 μm),蘇木精-伊紅染色,中性樹(shù)膠封片。應(yīng)用Image-Pro P1us 6.0分析軟件測(cè)量絨毛長(zhǎng)度、絨毛寬度和肌層厚度,并采用正置光學(xué)顯微鏡(Nikon Eclipse E100)拍照。

1.5 計(jì)算公式

成活率(SR,%)=100×(試驗(yàn)結(jié)束時(shí)尾數(shù))/(試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)尾數(shù));增重率(WGR,%)=100×(魚(yú)終末體重-魚(yú)初始體重)/魚(yú)初始體重;特定生長(zhǎng)率(SGR,%/d)=100×(ln魚(yú)終末體重-ln魚(yú)初始體重)/養(yǎng)殖周期;飼料系數(shù)(FCR)=試驗(yàn)期間投料量/魚(yú)凈增重;攝食率(FI, %/d)=100×試驗(yàn)期間投料量/[(魚(yú)終末體重+魚(yú)初始體重)/2×養(yǎng)殖周期];蛋白質(zhì)效率(PER)=魚(yú)凈增重/蛋白質(zhì)攝取量;肥滿度(CF,g/cm3)=100×體重/體長(zhǎng)3;肝體比(HSI,%)=100×肝重/體重;臟體比(VSI,%)=100×內(nèi)臟重/體重。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。先作單因素方差分析(one-way ANOVA),若各組之間差異顯著,再作Duncan氏多重比較,P<0.05表示差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)生長(zhǎng)、飼料效率和形態(tài)指數(shù)的影響

由表3可知,大口黑鱸幼魚(yú)成活率為96.67%～100.00%,各組之間差異不顯著(P>0.05)。與FFPW0組相比,FFPW替代10%～40%魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸終末體重、增重率和特定生長(zhǎng)率無(wú)顯著影響(P>0.05),FFPW20組顯著高于FFPW40組(P<0.05),而與FFPW10組差異不顯著(P>0.05);FFPW替代飼料中10%～40%魚(yú)粉對(duì)攝食率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率、肥滿度和臟體比無(wú)顯著影響(P>0.05)。FFPW20組肝體比顯著高于FFPW0組和FFPW40組(P<0.05),而與FFPW10組差異不顯著(P>0.05)。

表3 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)生長(zhǎng)、飼料效率和形態(tài)指數(shù)的影響

2.2 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)體成分的影響

由表4可知,FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸全魚(yú)粗灰分、肌肉粗蛋白質(zhì)和粗灰分含量影響不顯著(P>0.05)。隨著FFPW替代比例的升高,全魚(yú)水分和粗蛋白質(zhì)含量呈降低的趨勢(shì),尤其是FFPW20組,而全魚(yú)粗脂肪含量的變化趨勢(shì)正好相反。肌肉粗脂肪含量隨FFPW替代比例的升高而逐漸升高,其中,FFPW0組顯著低于FFPW20組和FFPW40組(P<0.05);FFPW0組肌肉水分含量顯著高于FFPW替代組(P<0.05),FFPW替代組之間肌肉水分含量差異不顯著(P>0.05)。

表4 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸體成分的影響

2.3 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知,FFPW替代10%～40%魚(yú)粉對(duì)血清ALT 、AST 、ALP活性及TC 、LDL含量無(wú)顯著影響(P>0.05);隨著FFPW替代比例的增加,血清TP含量逐漸升高,而血清GLU、TG含量逐漸降低,尤其是FFPW40組變化顯著(P<0.05)。

表5 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

2.4 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知,FFPW替代10%～40%魚(yú)粉對(duì)肝臟T-SOD、CAT活性和T-AOC以及MDA含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表6 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

2.5 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)腸道消化酶活性和腸道結(jié)構(gòu)的影響

由表7可知,FFPW替代10%～40%魚(yú)粉時(shí),腸道脂肪酶、α-淀粉酶和胰蛋白酶活性有升高的趨勢(shì),但是差異不顯著(P>0.05)。FFPW對(duì)腸道組織的影響結(jié)果顯示,飼料中添加FFPW對(duì)腸道絨毛寬度影響不顯著(P>0.05),FFPW0組魚(yú)腸道絨毛長(zhǎng)度顯著高于FFPW替代組(P<0.05),而肌層厚度低于FFPW替代組(P<0.05)(表8和圖1)。

VL:絨毛長(zhǎng)度;VW:絨毛寬度;TML:肌層厚度。

表7 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)腸道消化酶活性的影響

表8 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

3 討 論

3.1 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)生長(zhǎng)和飼料效率的影響

水產(chǎn)加工副產(chǎn)物富含蛋白質(zhì)、氨基酸、多不飽和脂肪酸、礦物質(zhì)和生物活性物質(zhì)等,是未來(lái)作為水產(chǎn)飼料蛋白質(zhì)源的重要來(lái)源之一,通過(guò)生物技術(shù)的方法提高其利用率,將會(huì)產(chǎn)生明顯的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益[10]。采用微生物發(fā)酵或酶解技術(shù)來(lái)處理水產(chǎn)加工副產(chǎn)物/植物性蛋白質(zhì)源,可改善其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、降解抗?fàn)I養(yǎng)因子、平衡氨基酸和提高適口性等,且酶菌協(xié)同效果更佳,適量的發(fā)酵產(chǎn)品添加到水產(chǎn)飼料中具有積極的效果[10,17-20]。本試驗(yàn)中,FFPW可替代大口黑鱸幼魚(yú)飼料中10%～40%魚(yú)粉而不會(huì)影響其成活率、生長(zhǎng)性能和飼料利用率,這表明FFPW可替代10%～40%魚(yú)粉作為大口黑鱸幼魚(yú)飼料的蛋白質(zhì)源。這可解釋為采用植物乳桿菌固態(tài)發(fā)酵鯖魚(yú)加工副產(chǎn)物與豆粕混合物,可將大分子蛋白質(zhì)降解成易被魚(yú)類(lèi)消化吸收小肽和游離氨基酸等,充分降解大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,產(chǎn)生的有機(jī)酸降低pH而且產(chǎn)品醬香濃郁,有助于提高飼料的適口性和蛋白質(zhì)消化吸收[21]。Abdul Kader等[12]研究也發(fā)現(xiàn),發(fā)酵豆粕與魷魚(yú)副產(chǎn)物(1∶1)替代12%～36%魚(yú)粉對(duì)牙鲆(Paralichthysolivaceus)特定生長(zhǎng)率無(wú)顯著影響。類(lèi)似地,以漁副產(chǎn)物和植物蛋白質(zhì)混合發(fā)酵產(chǎn)物適量替代魚(yú)粉對(duì)真鯛(Pagrusmajor)[11, 13]、尖齒胡鯰(Clariasgariepinus)[22]、尼羅羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus)[23]和印度囊鰓鯰(Heteropneustesfossilis)[24]的生長(zhǎng)和健康無(wú)顯著影響。低魚(yú)粉(30%)飼料中添加8%發(fā)酵魚(yú)溶漿顯著改善大菱鲆(Scophthalmusmaximus)幼魚(yú)對(duì)飼料蛋白質(zhì)的利用率,并緩解高含量植物蛋白質(zhì)引起的生長(zhǎng)性能下降,且與高魚(yú)粉組(50%)生長(zhǎng)性能無(wú)顯著差異[25]。在魚(yú)粉含量為9%的基礎(chǔ)飼料中,鮮雜魚(yú)和豆粕(1∶1)混合發(fā)酵蛋白可替代奧尼羅非魚(yú)稚魚(yú)飼料中2/3魚(yú)粉及魚(yú)種飼料中100%魚(yú)粉而不影響其生長(zhǎng),而100%替代引起羅非魚(yú)稚魚(yú)生長(zhǎng)性能顯著降低[26]。在真鯛[11,13]和牙鲆[12, 17]的研究中發(fā)現(xiàn),過(guò)量添加混合發(fā)酵豆粕與水產(chǎn)副產(chǎn)物導(dǎo)致生長(zhǎng)和飼料利用率顯著降低。這是因?yàn)樗a(chǎn)加工副產(chǎn)品中骨骼比例大,其添加量過(guò)量引起飼料粗灰分含量過(guò)高,進(jìn)而降低魚(yú)類(lèi)對(duì)飼料蛋白質(zhì)和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率及生長(zhǎng)[27-28],這可能是限制其在飼料中應(yīng)用的主要因素。以上結(jié)果表明,水產(chǎn)飼料中添加水產(chǎn)加工副產(chǎn)物和植物蛋白質(zhì)混合發(fā)酵產(chǎn)物是可行的,但適宜添加水平因魚(yú)的種類(lèi)和生長(zhǎng)階段、水產(chǎn)加工副產(chǎn)物和植物蛋白質(zhì)源比例、發(fā)酵工藝和發(fā)酵產(chǎn)物添加量等的不同而存在差異。

3.2 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)體成分的影響

全魚(yú)和肌肉成分是評(píng)價(jià)水產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo),其與飼料成分密切相關(guān)。本研究中,隨著FFPW替代比例的升高,肌肉水分、全魚(yú)水分和粗蛋白質(zhì)含量呈降低的趨勢(shì),而肌肉和全魚(yú)粗脂肪含量逐漸升高,這與研究者對(duì)印度囊鰓鯰[24]的研究結(jié)果一致,但與一些研究結(jié)果[11,25]相反。魚(yú)體脂肪含量升高可能是由于飼料蛋氨酸含量不足減緩了肉堿的合成,進(jìn)而抑制了脂肪酸β-氧化,而魚(yú)體蛋白質(zhì)含量降低可能是因?yàn)轱暳系鞍彼岵蛔銓?dǎo)致體蛋白質(zhì)合成受阻[29]。還有研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵豆粕與魷魚(yú)副產(chǎn)物替代魚(yú)粉對(duì)牙鲆全魚(yú)體成分無(wú)顯著影響,而替代48%魚(yú)粉導(dǎo)致魚(yú)體蛋氨酸和苯丙氨酸含量及蛋白質(zhì)沉積顯著降低[12]。類(lèi)似地,海產(chǎn)品副產(chǎn)物和大豆蛋白作為蛋白質(zhì)源不會(huì)影響魚(yú)體成分[13,17]。

3.3 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)血清生化指標(biāo)及肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是反映水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)生理和健康狀況的重要指標(biāo)[30]。乳酸菌發(fā)酵鯖魚(yú)糜對(duì)原發(fā)性高血壓小鼠有顯著的降膽固醇和降血糖作用[31]。高血脂大鼠灌喂2.5～10 mL/(kg·d)鳀魚(yú)發(fā)酵制品均可顯著降低其血清TC和TG含量和提高高密度脂蛋白膽固醇含量,這表明發(fā)酵水產(chǎn)品副產(chǎn)物能夠促進(jìn)高血脂大鼠的脂肪代謝,降低血脂含量[32]。本試驗(yàn)中,FFPW替代10%～40%魚(yú)粉對(duì)血清AST、ALT和ALP活性以及TC和LDL含量無(wú)顯著影響,這說(shuō)明FFPW替代40%魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸肝臟功能無(wú)顯著影響。隨著FFPW替代比例的增加,血清TP含量逐漸升高,而血清GLU和TG含量逐漸降低,尤其是FFPW40組變化顯著。血清TP含量升高,這說(shuō)明適量添加FFPW有利于提高機(jī)體免疫力和代謝水平,促進(jìn)蛋白質(zhì)的吸收利用。發(fā)酵豆粕與魷魚(yú)副產(chǎn)物(1∶1)替代魚(yú)粉對(duì)牙鲆血清GLU、TG含量和轉(zhuǎn)氨酶活性無(wú)顯著影響,但是提高血清TP含量和溶菌酶活性,減少致病菌數(shù)量[12]。在真鯛[11,13]、牙鲆[17]和大口黑鱸[18]的研究中也得到了類(lèi)似的結(jié)果。不同研究者得出的血清生化指標(biāo)數(shù)據(jù)存在差異可能與魚(yú)類(lèi)生理狀態(tài)和對(duì)蛋白質(zhì)源的吸收能力不同有關(guān)。

3.4 FFPW替代魚(yú)粉對(duì)大口黑鱸幼魚(yú)腸道消化酶活性和腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

魚(yú)類(lèi)的消化能力受消化酶活性的影響,并最終影響生長(zhǎng)和健康[45]。本試驗(yàn)中,飼料中FFPW替代10%～40%魚(yú)粉對(duì)腸道脂肪酶、α-淀粉酶和胰蛋白酶活性無(wú)顯著影響,這是因?yàn)槎蛊砂l(fā)酵可降解大部分抗?fàn)I養(yǎng)因子,減輕豆粕對(duì)腸道的損傷,因而腸道消化酶活性未受到負(fù)面影響。研究者對(duì)羅非魚(yú)[26]和青魚(yú)[37]的研究也得到了類(lèi)似結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn),隨著海鮮副產(chǎn)品和大豆蛋白混合物添加水平的增加,粗蛋白質(zhì)消化率呈下降趨勢(shì)[13]。相反地,以5.4%蝦水解物和11.2%發(fā)酵豆粕聯(lián)合替代大口黑鱸飼料中魚(yú)粉可顯著提高蛋白質(zhì)和氨基酸消化率[46]。胃蛋白酶活性隨發(fā)酵蛋白替代量的增加而逐漸升高[23],這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)源經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的可溶性蛋白、寡糖和多肽可刺激酶的分泌,有助于提高蛋白質(zhì)的消化和吸收[8-9,47]。此外,發(fā)酵產(chǎn)生的有機(jī)酸有利于促進(jìn)酶活性[23]。

腸道結(jié)構(gòu)的完整性是消化食物和吸收營(yíng)養(yǎng)的前提條件及維持黏膜免疫功能的重要保障,其中腸道絨毛寬度、長(zhǎng)度和肌層厚度是反映腸道結(jié)構(gòu)和吸收能力的重要指標(biāo)[48]。大豆等植物蛋白質(zhì)中的抗?fàn)I養(yǎng)因子在一定程度上會(huì)損傷魚(yú)類(lèi)腸道組織形態(tài)和腸黏膜屏障功能,引起腸炎病,從而降低消化酶活性和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收率,最終會(huì)抑制魚(yú)類(lèi)的免疫力和生長(zhǎng)[9,49-50]。目前,尚未見(jiàn)水產(chǎn)加工副產(chǎn)物和植物蛋白質(zhì)混合發(fā)酵對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物腸道結(jié)構(gòu)影響的相關(guān)報(bào)道。本研究表明,FFPW替代10%～40%魚(yú)粉組腸道絨毛長(zhǎng)度顯著低于FFPW0組,但是肌層厚度高于FFPW0組,這說(shuō)明FFPW和豆粕混合發(fā)酵對(duì)腸道結(jié)構(gòu)具有一定的促進(jìn)作用,有助于改善腸道功能,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收,從而改善生產(chǎn)和健康狀況。這與大多數(shù)有關(guān)發(fā)酵蛋白質(zhì)源替代魚(yú)粉對(duì)腸道結(jié)構(gòu)的影響規(guī)律[51-52]一致。發(fā)酵蛋白質(zhì)源對(duì)魚(yú)類(lèi)腸道結(jié)構(gòu)的改善可能與發(fā)酵產(chǎn)生的酶類(lèi)、有機(jī)酸、益生菌、小肽及黃酮類(lèi)等活性物質(zhì)有關(guān)[53]。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)條件下,FFPW可替代大口黑鱸飼料中10%～40%魚(yú)粉而不會(huì)影響其生長(zhǎng)、飼料效率、肝臟抗氧化能力、腸道消化酶活性和腸道健康。

致謝：

感謝日照職業(yè)技術(shù)學(xué)院海洋技術(shù)系張新明教授對(duì)文稿所提的寶貴意見(jiàn)。