范秋麗 陶正國(guó) 李 輝 茍鐘勇 王一冰 林廈菁 葉金玲 張 賽 蔣守群*

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所,豬禽種業(yè)全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省畜禽育種與營(yíng)養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州 510640;2.廣州立達(dá)爾生物科技股份有限公司,廣州 510663)

天然植物提取物因綠色、安全和環(huán)保等特點(diǎn)已被廣泛應(yīng)用于畜禽無抗養(yǎng)殖。倒捻子素又稱山竹黃酮,是一種從山竹果殼中提取的雙苯吡酮類化合物,主要分為α、β、γ-倒捻子素,不僅具有植物激素樣作用,同時(shí)可抑制環(huán)氧化酶和神經(jīng)鞘磷脂酶、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,在炎癥、腫瘤和激素相關(guān)疾病治療方面具有一定的效果[1-3]。木豆素是從木豆葉中提取的一種芪類化合物,具有抑菌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤和降血糖等藥理作用[4-5]。研究發(fā)現(xiàn),0.4～1.6 μg/mL α-倒捻子素可顯著抑制金黃色葡萄球菌誘發(fā)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)[6];5 μmol/L α-倒捻子素可通過調(diào)節(jié)Toll樣受體4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信號(hào)通路炎癥因子的表達(dá)抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的IEC-6細(xì)胞炎癥[7];100 mg/(kg·d) α-倒捻子素可提高免疫抑制小鼠免疫器官指數(shù)和脾臟淋巴細(xì)胞增殖率以及自然殺傷(NK)細(xì)胞活性[8];3.75～15.00 μmol/L α-倒捻子素可通過磷脂酰肌醇-3-羥激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/過氧化物酶體增殖物受體γ共激活因子-1α(PGC-1α)信號(hào)通路介導(dǎo)沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶3(SIRT3)失活,從而減輕碘酸鈉誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性和氧化損傷[9];1～8 μmol/L木豆素可通過抑制氧化和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡來保護(hù)皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷[10];0.05～0.50 μmol/L木豆素可通過調(diào)節(jié)核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)/抗氧化反應(yīng)元件(ARE)信號(hào)通路相關(guān)基因和蛋白表達(dá)水平提高HepG2細(xì)胞的抗氧化作用[11]?；讦?倒捻子素和木豆素具有以上抗炎、抗氧化和提高免疫功能等作用,且其在肉雞上的應(yīng)用研究目前尚無報(bào)道。因此,本試驗(yàn)根據(jù)前期預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,以1～40日齡818肉雞為試驗(yàn)對(duì)象,研究30 mg/kg山竹提取物(α-倒捻子素)和300 mg/kg木豆提取物(木豆素)對(duì)其生長(zhǎng)性能、脂質(zhì)代謝、抗氧化能力、免疫功能、腸道健康和肉品質(zhì)的影響,為山竹和木豆提取物在肉雞健康、高效養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

山竹提取物有效成分為α-倒捻子素,含量50%;木豆提取物有效成分為木豆素,含量2%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用600只初始體重(38.16±0.03) g且狀態(tài)良好的1日齡818肉雞公雛,按照體重一致原則隨機(jī)分為4個(gè)組,分別為對(duì)照組(飼喂基礎(chǔ)飼糧)、抗生素組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+500 mg/kg恩拉霉素)、山竹提取物組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+30 mg/kg山竹提取物)、木豆提取物組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+300 mg/kg木豆提取物),每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)25只。試驗(yàn)期40 d,分為1～21日齡和22～40日齡2個(gè)階段。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,不同飼養(yǎng)階段飼糧營(yíng)養(yǎng)水平參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制,且不同組相同飼養(yǎng)階段營(yíng)養(yǎng)水平保持一致?？股?、山竹和木豆提取物按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)的添加水平等量替代預(yù)混料中的統(tǒng)糠。基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞于地面平養(yǎng),地面鋪放谷殼,自由采食顆粒料和飲水。各組飼養(yǎng)管理和環(huán)境條件一致,每天自然光照和人工光照相結(jié)合,白天自然光照,夜間人工光照,保持雞舍清潔衛(wèi)生。按照常規(guī)操作程序和免疫流程進(jìn)行飼養(yǎng)和免疫,每天觀察雞只健康狀況、采食量和死亡雞情況。

1.5 樣品采集與制備

試驗(yàn)第40天20:00斷料供水,次日08:00每重復(fù)挑選接近平均體重的2只雞,翅靜脈采集全血5 mL于抗凝管中,3 500 r/min離心10 min分離血漿,于-80 ℃保存?zhèn)錅y(cè)血漿生化指標(biāo)。采血后的試雞頸部放血致死,剖取空腸,剪取中間腸段用生理鹽水清洗干凈內(nèi)容物,濾紙吸干表面水分,載玻片刮取黏膜裝于2 mL滅菌管中于-20 ℃保存?zhèn)錅y(cè)細(xì)胞因子含量。采集盲腸內(nèi)容物于滅菌的5 mL離心管中,于-20 ℃保存?zhèn)錅y(cè)微生物區(qū)系。剖取2側(cè)胸肌,去除表面筋膜和脂肪,左側(cè)用于測(cè)定屠宰后45 min和24 h肉色以及pH,右側(cè)用于測(cè)定滴水損失和剪切力。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.6.1 飼糧營(yíng)養(yǎng)水平

飼糧表觀代謝能、氨基酸和非植酸磷含量依據(jù)《中國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表(2019年第30版)》各原料數(shù)值進(jìn)行計(jì)算;粗蛋白質(zhì)、鈣和總磷含量分別參照GB/T 6432—2018[12]、GB/T 6436—2018[13]和GB/T 6437—2018[14]方法進(jìn)行測(cè)定。

1.6.2 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)第40天20:00斷料供水,次日08:00以重復(fù)為單位稱重,統(tǒng)計(jì)耗料量,計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和死亡率。

死亡率(%)=(死亡雞數(shù)量/總雞數(shù)量)×100。

1.6.3 血漿生化指標(biāo)

血漿總蛋白(TP)、尿酸(UA)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、丙二醛(MDA)含量以及總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和總抗氧化能力(T-AOC)測(cè)定試劑盒均購(gòu)買于南京建成生物工程研究所,各指標(biāo)測(cè)定步驟和結(jié)果計(jì)算嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。血漿三碘甲腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒購(gòu)買于廣州步前生物科技有限公司,具體測(cè)定方法和結(jié)果計(jì)算嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。以上所有血漿生化指標(biāo)均在多功能酶標(biāo)儀(SYNERGY H1,BioTek,美國(guó))上讀數(shù)。

1.6.4 空腸黏膜細(xì)胞因子含量

空腸黏膜樣品10%勻漿液的制備以及總蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法參考范秋麗等[15]的方法操作,腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)和白細(xì)胞介素-22(IL-22)ELISA試劑盒均購(gòu)買于廣州步前生物科技有限公司,具體測(cè)定方法和結(jié)果計(jì)算嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.6.5 盲腸微生物區(qū)系

參考Tao等[16]的方法進(jìn)行盲腸微生物DNA提取、16S rDNA V3～V4可變區(qū)域擴(kuò)增、文庫(kù)構(gòu)建、測(cè)序和物種注釋,分析計(jì)算基于操作分類單元(OTU)的盲腸微生物門、屬水平相對(duì)豐度、α多樣性和β多樣性。

1.6.6 肉品質(zhì)

左側(cè)胸肌分別使用色差儀(CR-410型,美能達(dá)公司,日本)和便攜式pH計(jì)(Testo-205,深圳市吉格機(jī)電設(shè)備有限公司)測(cè)定屠宰后45 min和24 h肉色及pH。右側(cè)胸肌在固定位置取10 g左右稱重記錄,懸掛于吹氣后的封口袋中,4 ℃冷庫(kù)保存24 h后取出稱重記錄,計(jì)算滴水損失;剩余右側(cè)胸肌4 ℃保存24 h后置于90 ℃水浴鍋中,待樣品中心溫度升至70 ℃取出,流水冷卻后取樣,滿足寬度(1.0 cm)×厚度(1.0 cm)×長(zhǎng)度(1.5 cm),采用質(zhì)構(gòu)儀(Instron 4411型,英斯特朗公司,美國(guó))測(cè)定剪切力。

滴水損失(%)=100×(滴水前重量-滴水后重量)/滴水前重量。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0軟件中的one-way ANOVA過程進(jìn)行單因素方差分析,當(dāng)處理效應(yīng)差異顯著時(shí)進(jìn)行Duncan氏法多重比較,P<0.05為差異顯著,試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)均用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 山竹和木豆提取物對(duì)1～40日齡肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知,與對(duì)照組相比,抗生素組和山竹提取物組肉雞終末體重和平均日增重均顯著升高(P<0.05)。不同組間肉雞平均日采食量、料重比和死亡率均無顯著差異(P>0.05)。

表2 山竹和木豆提取物對(duì)1～40日齡肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

由表3可知,與對(duì)照組相比,抗生素組和山竹提取物組肉雞血漿TP含量顯著升高(P<0.05);山竹提取物組血漿UA、GLU和MDA含量顯著降低(P<0.05),且血漿GLU含量顯著低于抗生素組(P<0.05);木豆提取物組血漿TG和TC含量顯著降低(P<0.05),且顯著低于抗生素組(P<0.05);抗生素組、山竹提取物組和木豆提取物組血漿T3含量顯著升高(P<0.05);山竹提取物組血漿T4含量和T-AOC均顯著升高(P<0.05),且血漿T-AOC顯著高于抗生素組(P<0.05)。不同組間血漿T-SOD活性無顯著差異(P>0.05)。

表3 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

2.3 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞空腸黏膜細(xì)胞因子含量的影響

由表4可知,與對(duì)照組相比,山竹提取物組和木豆提取物組肉雞空腸黏膜TNF-α和IL-6含量均顯著降低(P<0.05),且山竹提取物組空腸黏膜IL-6含量顯著低于抗生素組(P<0.05);山竹提取物組空腸黏膜IL-10含量顯著升高(P<0.05),且顯著高于抗生素組(P<0.05)。不同組間空腸黏膜IL-22含量無顯著差異(P>0.05)。

表4 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞空腸黏膜細(xì)胞因子含量的影響

2.4 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞盲腸微生物區(qū)系的影響

2.4.1 α多樣性分析

本試驗(yàn)24個(gè)盲腸內(nèi)容物樣品共獲得1 882 616條高質(zhì)量序列,平均長(zhǎng)度為412.22 nt。OTU聚類結(jié)果顯示,24個(gè)樣品共獲得14 914個(gè)OTU,聚類為252個(gè)門、431個(gè)綱、857個(gè)目、1 237個(gè)科以及2 221個(gè)屬。由表5可知,不同組間肉雞盲腸微生物的Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)、Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)和Coverage指數(shù)均無顯著差異(P>0.05)。

表5 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞盲腸微生物α多樣性的影響

2.4.2 β多樣性分析

如圖1所示,基于加權(quán)UniFrac(圖1-A)和非加權(quán)UniFrac(圖1-B)距離主坐標(biāo)分析(PCoA)結(jié)果表明,主成分(PC)1和PC2對(duì)樣品差異的貢獻(xiàn)值分別為41.55%、23.96%和13.11%、11.48%。山竹提取物組和木豆提取物組樣品和抗生素組樣品有明顯的分開,重疊部分不多。加權(quán)UniFrac綜合主要物種進(jìn)化關(guān)系、種類和其相對(duì)豐度分析,結(jié)果顯示4個(gè)組樣品菌群組成有相似部分,又有不同部分;非加權(quán)UniFrac主要對(duì)物種的存在和進(jìn)化關(guān)系分析,結(jié)果顯示抗生素組、山竹提取物和木豆提取物組的物種比對(duì)照組的更為豐富。綜上說明,抗生素、山竹提取物和木豆提取物的添加改變了盲腸微生物中菌群組成,且菌群物種更為豐富。

C:對(duì)照組樣品 samples in control group;A:抗生素組樣品 samples in antibiotic group;M:山竹提取物組樣品 samples in mangosteen group;P:木豆提取物組樣品 samples in pigeonpea group。

2.4.3 門和屬水平下的菌群結(jié)構(gòu)

如圖2所示,各組肉雞盲腸微生物在門水平上主要由厚壁菌門(Firmicutes)和擬桿菌門(Bacteroidota)組成,兩者共占門水平的80%以上(圖2-A)。各組肉雞盲腸微生物在屬水平上組成主要為擬桿菌屬(Bacteroides)、另枝菌屬(Alistipes)、巴恩斯氏菌屬(Barnesiella)、魏斯氏菌屬(Weissella)、雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、腸球菌屬(Enterococcus)、布勞特氏菌屬(Blautia)、埃希氏菌-志賀氏菌屬(Escherichia-Shigella)和糞桿菌屬(Faecalibacterium),分別占屬水平的11.56%～35.57%、8.28%～16.07%、1.52%～7.31%、0.12%～4.20%、0.10%～3.90%、0.45%～10.74%、0.71%～5.10%、0.15%～3.62%和2.33%～7.59%(圖2-B)。

C:對(duì)照組 control group;A:抗生素組 antibiotic group;M:山竹提取物組 mangosteen group;P:木豆提取物組 pigeonpea group。下圖同 the same as below。

肉雞盲腸微生物相對(duì)豐度大于1%的菌屬見表6。與對(duì)照組相比,抗生素組肉雞盲腸中擬桿菌屬相對(duì)豐度升高,山竹提取物組盲腸擬桿菌屬相對(duì)豐度降低,但差異均不顯著(P>0.05);木豆提取物組盲腸腸球菌屬相對(duì)豐度顯著升高(P<0.05)。不同組間盲腸另枝菌屬、巴恩斯氏菌屬、糞桿菌屬、魏斯氏菌屬、雙歧桿菌屬、布勞特氏菌屬、埃希氏菌-志賀氏菌屬和糞桿菌屬相對(duì)豐度均無顯著差異(P>0.05)。

表6 肉雞盲腸微生物在屬水平下的優(yōu)勢(shì)菌群分布

2.4.4 物種聚類分析

肉雞盲腸微生物物種豐富度聚類分析如圖3所示,不同組間的物種豐度聚類明顯分開。飼糧添加抗生素后提高了瘤胃球菌屬扭矩群(Ruminococcus_torques_group)、擬桿菌屬、Mucispirillum和魏斯氏菌屬相對(duì)豐度,添加山竹提取物后提高了糞桿菌屬、巴恩斯氏菌屬、另枝菌屬、普雷沃氏菌科_UCG-001(Prevotellaceae_UCG-001)和假單胞菌屬(Pseudomonas)相對(duì)豐度,添加木豆提取物后提高了埃希氏菌-志賀氏菌屬、假單胞菌屬和腸球菌屬相對(duì)豐度。

Faecalibacterium:糞桿菌屬;Oscillospiracea_UCG-005:顫螺菌科_UCG-005;Barnesiella:巴恩斯氏菌屬;Alistipes:另枝菌屬;Prevotellaceae_UCG-001:普雷沃氏菌科_UCG-001;Pediococcus:片球菌屬;Escherichia-Shigella:埃希氏菌-志賀氏菌屬;Pseudomonas:假單胞菌屬;Enterococcus:腸球菌屬;Blautia:布勞特氏菌屬;Bifidobacterium:雙歧桿菌屬;Ruminococcus_torques_group:瘤胃球菌屬扭矩群;Bacteroides:擬桿菌屬;Weissella:魏斯氏菌屬。

2.5 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響

由表7可知,與對(duì)照組相比,抗生素組、山竹提取物組和木豆提取物組肉雞屠宰后45 min和24 h胸肌肉色亮度(L*)值以及滴水損失均顯著降低(P<0.05);山竹提取物組和木豆提取物組屠宰后45 min和24 h胸肌肉色紅度(a*)值顯著升高(P<0.05),且山竹提取物組顯著高于抗生素組(P<0.05)。不同組間屠宰后45 min和24 h胸肌肉色黃度(b*)值和pH以及剪切力均無顯著差異(P>0.05)。

表7 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響

3 討 論

3.1 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

抗生素因具有防治動(dòng)物疾病和促生長(zhǎng)的作用,使其在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用飛速發(fā)展,但同時(shí)由于濫用抗生素導(dǎo)致的公共安全問題也日益突出,制約畜牧業(yè)的發(fā)展,因此尋找綠色、安全的抗生素替代品成為了現(xiàn)階段動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)[17]。雙苯吡酮類又稱氧雜蒽酮類,是山竹果殼中最主要也是研究最多的活性物質(zhì),從本質(zhì)上來說是黃酮類的一種特殊結(jié)構(gòu),其中已分離的化合物中α-倒捻子素含量最高[18]。木豆素屬于二苯乙烯衍生物,是典型的芪類化合物,同時(shí)天然芪類化合物又是具有豐富結(jié)構(gòu)和生物活性的多酚類化合物[19]。目前,α-倒捻子素和木豆素在畜禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究暫無報(bào)道,但黃酮類和多酚類已被證明可提高畜禽生長(zhǎng)性能[20-21]。本研究結(jié)果表明,30 mg/kg山竹提取物在不影響肉雞平均日采食量和料重比的情況下可顯著提高終末體重和平均日增重,且可達(dá)到抗生素添加效果;300 mg/kg木豆提取物也提高了肉雞終末體重和平均日增重,但效果不顯著,說明α-倒捻子素和木豆素的添加對(duì)肉雞的生長(zhǎng)均有促進(jìn)作用。

3.2 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

血漿生化指標(biāo)可反映動(dòng)物生理代謝狀態(tài),其中TP和UA含量主要反映蛋白質(zhì)的吸收、合成和分解,TP含量升高,UA含量降低,表明動(dòng)物體對(duì)蛋白質(zhì)吸收增強(qiáng);GLU含量在一定程度反映了動(dòng)物體能量代謝水平,其含量降低,表明機(jī)體對(duì)GLU的利用升高;TG和TC含量反映動(dòng)物體脂質(zhì)代謝水平,TG和TC含量降低有利于高血脂癥的預(yù)防[22-23]。本研究結(jié)果表明,30 mg/kg山竹提取物顯著提高了肉雞血漿TP含量,同時(shí)降低了血漿UA和GLU含量;300 mg/kg木豆提取物顯著降低了血漿TG和TC含量,說明α-倒捻子素的添加可提高機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)和葡萄糖的利用,木豆素的添加可調(diào)節(jié)脂代謝,有利于心血管疾病的預(yù)防,此結(jié)果也與前人報(bào)道的天然芪類成分具有調(diào)節(jié)高脂血癥的結(jié)果[24]相似。血液中T3和T4含量的升高使得胞內(nèi)部分RNA聚合酶活性升高,影響蛋白質(zhì)的合成,提高體內(nèi)氮沉積,進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)[25]。本研究結(jié)果表明,山竹和木豆提取物的添加均可升高肉雞血漿T3含量,且山竹提取物的添加升高了血漿T4含量,此研究結(jié)果與前人報(bào)道相似,同時(shí)也與山竹提取物的添加提高了氮沉積和生長(zhǎng)性能的結(jié)果一致。MDA含量以及T-SOD活性和T-AOC常用來作為評(píng)價(jià)機(jī)體抗氧化能力強(qiáng)弱的指標(biāo),MDA含量降低,T-SOD活性和T-AOC升高,表明機(jī)體抗氧化能力增強(qiáng)[26]。本研究結(jié)果表明,30 mg/kg山竹提取物可顯著降低肉雞血漿MDA含量,提高T-AOC,此結(jié)果與Fu等[27]應(yīng)用α-倒捻子素降低LPS/D-半乳糖胺誘導(dǎo)的急性肝衰竭小鼠肝臟MDA含量和Tatiya-Aphiradee等[28]應(yīng)用α-倒捻子素降低潰瘍性結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸MDA含量結(jié)果相似,說明山竹提取物的添加可通過降低脂質(zhì)過氧化物含量和提高抗氧化酶活性提高肉雞抗氧化能力。

3.3 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞腸道健康的影響

腸道細(xì)胞因子含量是評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能和腸道健康的重要指標(biāo),促炎細(xì)胞因子TNF-α和IL-6含量降低、抑炎細(xì)胞因子IL-10含量升高,表明機(jī)體免疫功能增強(qiáng)[29-30]。研究報(bào)道,α-倒捻子素不僅可分別降低對(duì)乙酰氨基酚引起的急性肝衰竭小鼠血清TNF-α含量和佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠血清中TNF-α含量[31-32],還可降低LPS刺激的人牙齦成纖維細(xì)胞中IL-6的表達(dá)水平[33]。本研究結(jié)果表明,山竹和木豆提取物的添加均可降低肉雞空腸黏膜TNF-α和IL-6含量,且山竹提取物的添加可提高空腸黏膜IL-10含量,此結(jié)果與Huang等[34]應(yīng)用木豆素降低LPS刺激小鼠巨噬細(xì)胞中TNF-α和IL-6含量的結(jié)果相似,說明山竹和木豆提取物的添加均可通過降低空腸促炎細(xì)胞因子含量提高肉雞免疫功能。

腸道菌群復(fù)雜多樣,其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定是維持屏障功能的重要因素,本研究結(jié)果表明,雖然山竹和木豆提取物的添加對(duì)盲腸微生物菌群α多樣性指數(shù)無顯著影響,但增加了物種組成和豐富度。擬桿菌屬可降解植物多糖和碳水化合物,產(chǎn)生乙酸鹽和丙酸鹽,提高腸道代謝功能;另枝菌屬和糞桿菌屬可產(chǎn)生丁酸鹽,通過上調(diào)抗菌肽的表達(dá)降低機(jī)體炎癥反應(yīng)[35-36];巴恩斯氏菌屬豐度越高,脾臟和肝臟中的邊緣帶B細(xì)胞和不變自然殺傷T細(xì)胞就越多[37];瘤胃球菌屬能夠參與食物消化,產(chǎn)生丙酸和丁酸維持腸道屏障功能[38];魏斯氏菌屬具有類乳酸菌的作用,可被用來作為食品發(fā)酵的益生菌產(chǎn)生風(fēng)味物質(zhì)[39];腸球菌雖然可感染動(dòng)物,但在多數(shù)情況下是不致病的。本研究結(jié)果表明,抗生素的添加提高了肉雞盲腸擬桿菌屬、瘤胃球菌屬和魏斯氏菌屬相對(duì)豐度,木豆提取物的添加提高了盲腸腸球菌屬相對(duì)豐度,同時(shí)山竹提取物的添加可在一定程度上提高盲腸另枝菌屬、糞桿菌屬、巴恩斯氏菌屬和普雷沃氏菌科_UCG-001相對(duì)豐度,此結(jié)果與Sultan等[40]報(bào)道的α-倒捻子素可作為抗菌藥物降低有害病原菌的生長(zhǎng)結(jié)果相似,同時(shí)也與柴曉瑩等[41]應(yīng)用葡萄糖氧化酶提高蛋雞盲腸普雷沃氏菌科_UCG-001相對(duì)豐度降低炎癥發(fā)生的結(jié)果相似,說明山竹提取物的添加可通過提高有益菌的生長(zhǎng)改善肉雞腸道健康。

3.4 山竹和木豆提取物對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響

肉色、pH 和剪切力是評(píng)價(jià)肌肉感官品質(zhì)和貨架期的重要指標(biāo),肌紅蛋白含量是決定肌肉肉色的關(guān)鍵因素,其與氧結(jié)合后呈鮮紅色,未與氧結(jié)合呈紫紅色,肌肉的抗氧化能力越強(qiáng),肉色越穩(wěn)定[42]。本研究結(jié)果表明,山竹和木豆提取物的添加顯著降低了肉雞屠宰后45 min和24 h胸肌肉色L*值,升高a*值,此結(jié)果與本試驗(yàn)中兩者的添加提高了肉雞抗氧化能力的結(jié)果相吻合。滴水損失與肉在運(yùn)輸和冷凍儲(chǔ)藏過程的水分流失相關(guān),滴水損失減小,肉在冷凍和運(yùn)輸過程中的水分流失也相應(yīng)減少[43]。本研究結(jié)果表明,山竹和木豆提取物的添加均顯著降低了肉雞胸肌滴水損失,以上說明兩者的添加均可通過改善肉雞胸肌肉色和滴水損失提高肉品質(zhì)。

4 結(jié) 論

① 30 mg/kg山竹提取物可提高肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化能力、腸道免疫功能和有益菌群相對(duì)豐度,改善肉色、降低滴水損失。

② 300 mg/kg木豆提取物可降低肉雞血脂含量,提高腸道免疫功能,改善肉色、降低滴水損失。

③ 30 mg/kg山竹提取物可代替抗生素添加于1～40日齡818肉雞飼糧中。