陳雨詩(shī) 劉禹熙 楊童寓丹 王新霞

(浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,浙江大學(xué)動(dòng)物分子營(yíng)養(yǎng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部(華東)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江省飼料與動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,杭州 310058)

我國(guó)是世界最大的養(yǎng)豬生產(chǎn)國(guó),豬肉是我國(guó)居民最主要消費(fèi)的肉類產(chǎn)品,我國(guó)生豬養(yǎng)殖90%以上都是“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬,其生長(zhǎng)速度快,但肉品質(zhì)欠佳,因此如何在當(dāng)前養(yǎng)殖現(xiàn)狀下提升豬肉品質(zhì)是亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題。影響豬肉品質(zhì)的因素有很多,但其生物學(xué)基礎(chǔ)主要與肌內(nèi)脂肪沉積和肌纖維類型密切相關(guān)[1],因此通過(guò)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控手段提高肌內(nèi)脂肪含量和肌纖維轉(zhuǎn)化是提升豬肉品質(zhì)、生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)豬肉的重要途徑。近年來(lái)的研究表明,姜黃素作為一種天然的酚類化合物,在調(diào)控動(dòng)物脂肪沉積方面具有顯著作用[2]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),姜黃素能影響動(dòng)物脂肪沉積和脂肪細(xì)胞成脂分化[3],姜黃素通過(guò)降低mRNA m6A去甲基化酶AlkB同源蛋白5(AlkB homolog 5,ALKBH5)的蛋白表達(dá),提高E3泛素連接酶腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子4(tumor necrosis factor receptor-associated factor 4,TRAF4)mRNA m6A修飾水平,m6A結(jié)合蛋白YTH結(jié)構(gòu)域家族蛋白1(YT521-B homology domains 1,YTHDF1)結(jié)合TRAF4并促進(jìn)其翻譯,導(dǎo)致TRAF4蛋白質(zhì)表達(dá)量顯著上升,促進(jìn)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)蛋白質(zhì)降解,最終抑制了動(dòng)物脂肪細(xì)胞的成脂分化。進(jìn)一步,本課題組將姜黃素應(yīng)用于金華豬養(yǎng)殖生產(chǎn),發(fā)現(xiàn)飼糧中添加300 mg/kg姜黃素能提高育肥期金華豬的飼料利用率,顯著降低了育肥期金華豬的背膘厚,提高肌內(nèi)脂肪含量,并改善肉品質(zhì)[4]。王斌等[5]研究也發(fā)現(xiàn),飼糧中添加400 mg/kg姜黃素能顯著降低育肥期“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬的背膘厚。

二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)屬于ω-3多不飽和脂肪酸,是增強(qiáng)人類大腦思維能力與記憶力、提高嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育的必需營(yíng)養(yǎng)素[6]。研究發(fā)現(xiàn),DHA在畜禽養(yǎng)殖中也具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、提高抗氧化能力和改善肉品質(zhì)等多種功效[7]。徐嘉璐等[8]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加丁酸鈉-DHA微膠囊包被制劑可提高育肥豬的生長(zhǎng)性能,改善血脂代謝。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),飼糧中補(bǔ)充DHA能將動(dòng)物骨骼肌的代謝模式由糖酵解模式向氧化磷酸化模式轉(zhuǎn)化,并增加骨骼肌中慢肌纖維的比例,機(jī)制研究顯示DHA可通過(guò)促進(jìn)m6A去甲基化酶肥胖相關(guān)蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)表達(dá)來(lái)降低DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4(DNA damage inducible transcript 4,Ddit4)mRNA m6A修飾水平,結(jié)合蛋白YTH結(jié)構(gòu)域家族蛋白2(YT521-B homology domains 2,YTHDF2)無(wú)法識(shí)別Ddit4導(dǎo)致Ddit4 mRNA的衰變減少,累積的Ddit4蛋白促進(jìn)了過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ共同激活劑1α(peroxisome proliferator activated receptor-gamma coactivator 1α,PGC1α)的表達(dá),從而通過(guò)提高線粒體的生物生成,增加了動(dòng)物肌肉中慢肌纖維的形成[9]?；谏鲜鲅芯拷Y(jié)果,本試驗(yàn)假設(shè)姜黃素和DHA聯(lián)合應(yīng)用在生豬養(yǎng)殖中能同時(shí)提高肌內(nèi)脂肪含量和改善肌纖維類型,從而達(dá)到綜合提升豬肉品質(zhì)的效果。因此,本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥期“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)及血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)的影響,重點(diǎn)分析姜黃素和DHA對(duì)育肥豬肌內(nèi)脂肪含量和肌纖維類型的影響,為姜黃素和DHA在育肥豬生長(zhǎng)中的聯(lián)合應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取初始平均體重為(90.76±0.45) kg的健康“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬54頭,隨機(jī)分為2組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)9頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.03%的姜黃素和2.50%的DHA。試驗(yàn)在浙江科強(qiáng)生態(tài)養(yǎng)殖有限公司進(jìn)行,預(yù)試期7 d,正試期40 d,整個(gè)過(guò)程中保證試驗(yàn)豬自由采食和飲水。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 樣本采集

試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇2頭健康且體重相近的試驗(yàn)豬(每組共6頭),禁食12 h后屠宰。采集背最長(zhǎng)肌,液氮速凍,用于肌內(nèi)氨基酸、脂肪酸測(cè)定和分子生物學(xué)指標(biāo)測(cè)定;采用頸靜脈采血法采集血液樣本,4 000 r/min離心10 min得到血清,用于血清生化指標(biāo)測(cè)定。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)

1.3.1 飼糧營(yíng)養(yǎng)成分

粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、鈣和總磷含量分別依據(jù)GB/T 6432—1994、GB/T 6433—2006、GB/T 6438—2007、GB/T 6436—2018和GB/T 6437—2018進(jìn)行測(cè)定,并根據(jù)總磷含量計(jì)算有效磷含量;氨基酸含量依據(jù)GB/T 18246—2000用高效液相色譜(HPLC)進(jìn)行測(cè)定;消化能計(jì)算方法為飼糧總能與糞能的差值。

1.3.2 生長(zhǎng)性能

于試驗(yàn)開(kāi)始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)在晨飼前逐頭稱重試驗(yàn)豬。試驗(yàn)期間每日記錄給料量、剩余料量和損耗料量,以重復(fù)為單位計(jì)算平均日采食量,同時(shí)根據(jù)試驗(yàn)豬的個(gè)體重量計(jì)算平均日增重和料重比。

1.3.3 胴體性狀及肉品質(zhì)

試驗(yàn)結(jié)束時(shí),按照《瘦肉型豬胴體性狀測(cè)定技術(shù)規(guī)范》(NY/T 825—2004)、《豬肉品質(zhì)測(cè)定技術(shù)規(guī)范》(NY/T 821—2019)分別測(cè)定胴體性狀和肉品質(zhì)。

胴體性狀指標(biāo)包括宰前體重、屠宰率、胴體重、胴體斜長(zhǎng)、背膘厚和眼肌面積。宰前體重為豬在屠宰前空腹24 h的體重;屠宰率為胴體重占宰前體重的百分比;胴體重為豬在放血、退毛后,去掉頭、蹄、尾和內(nèi)臟(保留板油、腎臟)的兩邊胴體總重量;胴體斜長(zhǎng)是胴體倒掛時(shí)從恥骨聯(lián)合前緣至第一肋骨與胸骨交界處的長(zhǎng)度;背膘厚為胴體中線肩部最厚處、最后肋、腰薦結(jié)合處3點(diǎn)的平均脂肪厚度;眼肌面積為胴體最后肋骨處背最長(zhǎng)肌的橫截面面積。

肉品質(zhì)指標(biāo)包括pH24 h、滴水損失、大理石紋評(píng)分、肉色評(píng)分、肉色(亮度、紅度、黃度)、肌內(nèi)脂肪含量和肌苷酸含量。pH24 h測(cè)定的部位為胴體倒數(shù)第1～2段胸椎段背最長(zhǎng)肌;滴水損失測(cè)定的部位為倒數(shù)第3～4胸椎段背最長(zhǎng)肌;大理石紋評(píng)分用5分制目測(cè)對(duì)比法評(píng)定新鮮肌肉;肉色評(píng)分和肉色測(cè)定的部位為倒數(shù)第3～4肋骨處的眼肌橫切面,采用色彩色差計(jì);肌肉中粗脂肪含量測(cè)定采用索式抽提法;肌肉中肌苷酸含量采用高效液相色譜法測(cè)定。

1.3.4 背最長(zhǎng)肌氨基酸和脂肪酸組成

背最長(zhǎng)肌中的氨基酸組成參照《食品中氨基酸的測(cè)定》(GB 5009.124—2016),利用日立氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定;背最長(zhǎng)肌中的脂肪酸組成參照《食品中脂肪酸的測(cè)定》(GB 5009.168—2016),利用氣相色譜儀分析測(cè)定。

1.3.5 血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)

生化指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所的商品試劑盒測(cè)定血清甘油三酯(TG)(貨號(hào)A110-1-1)、總膽固醇(TC)(貨號(hào)A111-1-1)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)(貨號(hào)A113-1-1)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)(貨號(hào)A112-1-1)含量;抗氧化指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所的商品試劑盒測(cè)定血清內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)(貨號(hào)A005)、超氧化物歧化酶(SOD)(貨號(hào)A001-1)活性和丙二醛(MDA)(貨號(hào)A003-1)含量及總抗氧化能力(T-AOC)(貨號(hào)A015-1);免疫相關(guān)指標(biāo)分別使用相應(yīng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒,通過(guò)多功能酶標(biāo)儀測(cè)定血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細(xì)胞介素-6β(IL-6β)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)含量和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性。

1.3.6 背最長(zhǎng)肌中相關(guān)基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平檢測(cè)

采用Trizol試劑盒(大連寶生物工程有限公司)提取豬背最長(zhǎng)肌中的總RNA,參照ABScript III RT Master Mix for qPCR逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(武漢愛(ài)博泰克生物科技有限公司)說(shuō)明書(shū),對(duì)總RNA樣品進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。采用熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)檢測(cè)背最長(zhǎng)肌中肌纖維類型[肌球蛋白重鏈Ⅰ(MyHCⅠ)、肌球蛋白重鏈Ⅱa(MyHCⅡa)、肌球蛋白重鏈Ⅱx(MyHCIIx)和肌球蛋白重鏈Ⅱb(MyHCIIb)]和脂肪代謝相關(guān)基因[固醇調(diào)控元件結(jié)合蛋白1(SREBP1)、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)酶(CD36)、脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP4)和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)]的mRNA相對(duì)表達(dá)水平。10 μL反應(yīng)體系:2×SYBR Green qPCR Master Mix 5 μL,cDNA 4 μL,上、下游引物各0.5 μL。反應(yīng)條件:95 ℃預(yù)變性3 min,95 ℃變性5 s,60 ℃退火35 s,共40個(gè)循環(huán)。根據(jù)且的基因和內(nèi)參基因β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)的閾值循環(huán)(Ct),采用2-ΔΔCt法計(jì)算樣品中各目的基因的mRNA相對(duì)表達(dá)水平。qPCR引物序列見(jiàn)表2。

表2 qPCR引物序列

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用GraphPad 9.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析,所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示,以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)中,生長(zhǎng)性能相關(guān)數(shù)據(jù)的試驗(yàn)豬重復(fù)數(shù)為n=27;胴體性狀和肉品質(zhì)指標(biāo),氨基酸和脂肪酸組成,血清生化、免疫和抗氧化指標(biāo)及基因表達(dá)相關(guān)數(shù)據(jù)的試驗(yàn)豬重復(fù)數(shù)均為n=6。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知,2組試驗(yàn)豬的初始體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的終末體重和平均日增重顯著增加(P<0.05),終末體重增加了3.07%,平均日增重增加了13.48%。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的平均日采食量和料重比顯著降低(P<0.05),平均日采食量降低了8.43%,料重比降低了10.27%。

表3 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬胴體性狀和肉品質(zhì)的影響

由表4可知,2組試驗(yàn)豬的宰前體重、胴體重、胴體斜長(zhǎng)和屠宰率均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的背膘厚顯著降低(P<0.05),眼肌面積顯著增加(P<0.05),背膘厚降低了14.16%,眼肌面積增加了12.88%。

表4 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬胴體性狀的影響

由表5可知,2組試驗(yàn)豬的肌肉pH24 h、大理石紋評(píng)分、肉色評(píng)分、肉色(亮度、紅度、黃度)和肌苷酸含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的肌肉滴水損失顯著降低(P<0.05),肌內(nèi)脂肪含量顯著增加(P<0.05),滴水損失降低了14.64%,肌內(nèi)脂肪含量增加了33.51%。

表5 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬肉品質(zhì)的影響

2.3 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬背最長(zhǎng)肌氨基酸和脂肪酸組成的影響

由表6可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的背最長(zhǎng)肌甘氨酸和脯氨酸含量顯著增加(P<0.05),甘氨酸含量增加了12.87%,脯氨酸含量增加了9.67%。2組試驗(yàn)豬的背最長(zhǎng)肌其他15種氨基酸含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表6 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬背最長(zhǎng)肌氨基酸組成的影響

由表7可知,試驗(yàn)共檢測(cè)出15種脂肪酸,包括5種飽和脂肪酸和10種不飽和脂肪酸,其中單不飽和脂肪酸5種,多不飽和脂肪酸5種。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的背最長(zhǎng)肌飽和脂肪酸含量顯著增加(P<0.05),其中主要是棕櫚油酸(C16∶1)和硬脂酸(C18∶0)含量顯著增加(P<0.05),棕櫚油酸含量增加了31.05%,硬脂酸含量增加了9.43%。

表7 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬背最長(zhǎng)肌脂肪酸組成的影響

2.4 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬肌肉肌纖維類型和脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

如圖1所示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的背最長(zhǎng)肌MyHCⅡa和MyHCⅡx的mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。

數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注*表示差異顯著(P<0.05)。圖2同。

如圖2所示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的背最長(zhǎng)肌SREBP1的mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。

圖2 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬肌肉脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

2.5 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)的影響

由表8可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的血清TG和TC含量顯著下降(P<0.05),TG含量下降了12%,TC含量下降了16.39%。2組試驗(yàn)豬的血清HDL-C和LDL-C含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的血清GSH-Px、SOD活性和T-AOC顯著增加(P<0.05),GSH-Px活性升高了24.03%,SOD活性升高了11.69%,T-AOC升高了6.42%;血清MDA含量顯著降低(P<0.05),MDA含量下降了10.84%。

表8 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬血清生化和抗氧化指標(biāo)的影響

由表9可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的血清IgG、IgM和IL-4含量顯著增加(P<0.05),IgG含量升高了3.00%,IgM含量升高了12.50%,IL-4含量升高了6.44%;試驗(yàn)組的血清ALT和AST活性顯著降低(P<0.05),ALT活性降低了11.72%,AST活性降低了11.55%。2組試驗(yàn)豬的血清lgA、IL-6β和L-10含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表9 飼糧中添加姜黃素和DHA對(duì)育肥豬血清免疫指標(biāo)的影響

3 討 論

近年來(lái),大量研究發(fā)現(xiàn)姜黃素在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用主要表現(xiàn)在提高生長(zhǎng)性能。在斷奶仔豬上的研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加200和300 mg/kg姜黃素能顯著提高斷奶仔豬平均日增重[10]。歐陽(yáng)坤等[11]在海南屯昌豬上的研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加200、400和600 mg/kg姜黃素均能提高其平均日增重,并降低料重比。張靖等[12]研究發(fā)現(xiàn),在基礎(chǔ)飼糧中添加200、300和400 mg/kg姜黃素能不同程度地提高育肥豬平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。大量研究也證實(shí)了DHA能夠提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能,Ribeiro等[13]研究發(fā)現(xiàn),21～35日齡的肉雞飼糧中添加7.4%的DHA能顯著增加體增重。在育肥豬上的研究發(fā)現(xiàn),丁酸鈉-DHA微囊包被劑可提高育肥豬的平均日采食量和平均日增重[8]。本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn),飼糧中添加姜黃素和DHA后,育肥豬的平均日增重顯著增加,平均日采食量和料重比顯著下降,說(shuō)明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能改善育肥豬的飼料轉(zhuǎn)化率,而姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用改善育肥豬生長(zhǎng)性能的機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。

酮體性狀指標(biāo)能直接體現(xiàn)豬的胴體品質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn),姜黃素能通過(guò)抑制脂肪細(xì)胞分化、下調(diào)脂肪酸合成代謝通路、促進(jìn)能量消耗或調(diào)節(jié)腸道微生物組成等生物學(xué)機(jī)制來(lái)減少脂質(zhì)沉積,緩解肥胖[14]。Wei等[15]研究發(fā)現(xiàn),增加生長(zhǎng)豬飼糧中的DHA含量,能通過(guò)增加肌肉中胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)和胰島素受體的表達(dá)促進(jìn)肌肉中蛋白質(zhì)的合成。本試驗(yàn)中,飼糧中添加姜黃素和DHA能顯著降低育肥豬的背膘厚,并顯著提高眼肌面積,表明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能在一定程度上改善育肥豬的胴體品質(zhì)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用還降低了育肥豬的肌肉滴水損失,并顯著增加了肌內(nèi)脂肪含量,與課題組前期在育肥期金華豬[4]的試驗(yàn)結(jié)果一致,說(shuō)明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)育肥豬的肉品質(zhì)有一定改善作用。

豬肉中氨基酸的含量和組成情況與品質(zhì)和風(fēng)味息息相關(guān)[16],也是評(píng)價(jià)肉品質(zhì)的重要指標(biāo),必需氨基酸含量決定了肌肉蛋白質(zhì)品質(zhì),而鮮味氨基酸則為肌肉風(fēng)味提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。甘氨酸是鮮味氨基酸之一,能通過(guò)增強(qiáng)蛋白質(zhì)合成促進(jìn)肌肉細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育[17],而脯氨酸有增強(qiáng)肌肉質(zhì)量的作用[18]。本試驗(yàn)中,飼糧中添加姜黃素和DHA顯著提高了育肥豬肌肉中甘氨酸和脯氨酸含量,表明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能提高育肥豬的肉品質(zhì)和風(fēng)味。研究顯示,飼糧中添加姜黃素或DHA均能改善動(dòng)物肌肉脂肪酸組成,增加多不飽和脂肪酸含量[19-20]。Yang等[21]研究發(fā)現(xiàn),對(duì)人類健康有益的中性脂肪酸硬脂酸和有益脂肪酸棕櫚油酸在豬肉中與較高的肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)。在本試驗(yàn)中,姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用增加了肌肉棕櫚油酸和硬脂酸含量,進(jìn)一步表明姜黃素通過(guò)改善肌肉中脂肪酸組成提高肌內(nèi)脂肪含量。

SREBP1是調(diào)節(jié)肌內(nèi)脂肪合成的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子[22]。本試驗(yàn)中,飼糧中添加姜黃素和DHA顯著上調(diào)了育肥豬背最長(zhǎng)肌中SREBP1的表達(dá)。由此可知,在背最長(zhǎng)肌中,姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用可能是通過(guò)促進(jìn)脂質(zhì)合成從而提高肌內(nèi)脂肪含量。肌纖維類型是影響肉品質(zhì)的重要因素。本試驗(yàn)中,姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用顯著上調(diào)了育肥豬背最長(zhǎng)肌中氧化型肌纖維MyHCⅡa和中間型肌纖維MyHCⅡx的表達(dá),說(shuō)明姜黃素和DHA通過(guò)增加氧化型肌纖維含量從而改善豬肉品質(zhì)。

血清指標(biāo)可以反映動(dòng)物機(jī)體的代謝和健康狀況。育肥豬生長(zhǎng)緩慢,主要是脂肪沉積,測(cè)定育肥豬血清脂質(zhì)相關(guān)指標(biāo)可分析育肥豬機(jī)體的脂質(zhì)代謝和脂肪沉積能力。本試驗(yàn)中,血清甘油三酯和總膽固醇含量下降,說(shuō)明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能有效降低血脂水平,提高育肥豬脂質(zhì)代謝能力。轉(zhuǎn)氨酶是肝臟損傷的標(biāo)志指標(biāo)[23]。本試驗(yàn)中,姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能顯著降低育肥豬血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性,說(shuō)明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能有效改善育肥豬的肝臟脂質(zhì)代謝。

姜黃素具有獨(dú)特的多酚結(jié)構(gòu),能夠與細(xì)胞內(nèi)的自由基結(jié)合產(chǎn)生穩(wěn)定的酚類化合物,進(jìn)而清除活性氧抑制氧化損傷,同時(shí)還能提高多種抗氧化酶的活性,提高細(xì)胞抗氧化能力[24]。涂尾龍等[25]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加姜黃素能提高育肥豬血清SOD活性,同時(shí)降低MDA含量。DHA等多不飽和脂肪酸能通過(guò)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酶等的作用調(diào)節(jié)活性氧(ROS)水平,還能通過(guò)自身的過(guò)氧化反應(yīng)起到抗氧化效果[26]。在柴達(dá)木福牛上的研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加富含DHA的微藻可顯著提高柴達(dá)木福牛血清SOD活性和總抗氧化能力[27]。本試驗(yàn)中,通過(guò)對(duì)血清抗氧化指標(biāo)檢測(cè)和分析發(fā)現(xiàn),相比于對(duì)照組,飼糧中添加姜黃素和DHA能顯著降低血清MDA含量,增加血清GSH-Px、SOD活性和T-AOC。由此可見(jiàn),姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能有效調(diào)節(jié)育肥豬的抗氧化能力,提高機(jī)體健康水平。

動(dòng)物對(duì)感染的免疫反應(yīng)與免疫球蛋白含量密切相關(guān)。IgG、IgM和IgA是保護(hù)動(dòng)物免受感染的主要免疫球蛋白[28]。細(xì)胞因子分泌通常是激活先天宿主防御系統(tǒng)和調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫反應(yīng)的關(guān)鍵[29]。本試驗(yàn)中,姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能顯著增加血清IgG、IgM和IL-4含量,說(shuō)明姜黃素和DHA的聯(lián)合應(yīng)用能提高育肥豬的免疫能力。

4 結(jié) 論

飼糧中添加0.03%的姜黃素和2.50%的DHA能提高育肥期“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬的飼料利用率,通過(guò)降低背膘厚、背最長(zhǎng)肌滴水損失和提高肌內(nèi)脂肪含量改善肉品質(zhì),并提升血清脂質(zhì)代謝、抗氧化及免疫能力。