顏若曦

國家藥品監(jiān)督管理局 食品藥品審核查驗中心，北京 100076

生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)是關(guān)系國計民生、國家安全的戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)，其創(chuàng)新發(fā)展是健康中國建設(shè)的重要內(nèi)容。生物制品與化學藥品、中藥相比，其生產(chǎn)質(zhì)量管理的特殊性主要集中在生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備、分析檢測等生物相關(guān)專業(yè)技術(shù)內(nèi)容[1]，其中生產(chǎn)設(shè)備是生物制品生產(chǎn)必不可少的要素，涉及到所有的生產(chǎn)和包裝工序，也是特殊性較凸顯的方面。近年來，隨著生物工程技術(shù)、一次性使用系統(tǒng)的快速發(fā)展和應用，生物制品生產(chǎn)設(shè)備也展現(xiàn)出了新的變化和特點，特別是歐洲藥品管理局、藥品檢查合作計劃（PIC/S）和世界衛(wèi)生組織新修訂的無菌藥品附錄發(fā)布后，對生產(chǎn)設(shè)備污染控制要求進行了進一步提升和細化[2]。無論是人工操作的簡單設(shè)備，或是由計算機化系統(tǒng)控制的自動化復雜設(shè)備，其生產(chǎn)設(shè)備必須符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）的要求，必須符合其預定用途，且不對藥品質(zhì)量產(chǎn)生任何不利影響，其設(shè)計、制造、安裝和改造必須能防止對藥品的污染和交叉污染，并便于維護和清潔。國內(nèi)外生物制品GMP 規(guī)定對生物制品生產(chǎn)設(shè)備的核心要求可以概括為4 個方面：一是生產(chǎn)設(shè)備設(shè)計和安裝必須符合其預定用途，且便于清潔和維護；二是生產(chǎn)設(shè)備被正確的安裝，且在其設(shè)計的標準范圍內(nèi)運行、使用；三是制定了預防性維護和校準活動計劃，且按計劃開展，并在標準操作規(guī)程中予以規(guī)定；四是生產(chǎn)設(shè)備不會對生物制品帶來毒害物質(zhì)（如一次性使用系統(tǒng)的可提取物和浸出物研究、設(shè)備的潤滑劑、冷卻劑等），且在運行使用（包括維護、校準）中能防止對產(chǎn)品的污染。

近年來，在國內(nèi)外生物制品生產(chǎn)現(xiàn)場檢查中發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)設(shè)備方面的問題較為突出，對世界衛(wèi)生組織生物制品檢查的缺陷統(tǒng)計顯示涉及生產(chǎn)設(shè)備的缺陷居于首位[3]，這體現(xiàn)出在生物制品行業(yè)中一些生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)設(shè)備生命周期管理中存在的不足。對生物制品生產(chǎn)設(shè)備的檢查是基于GMP 標準規(guī)定開展的，檢查內(nèi)容主要包括生產(chǎn)設(shè)備管理與程序規(guī)定、設(shè)計與選型、確認與校準、使用與監(jiān)測、維護與維修（即預防性維護、糾正性維護）、清潔、標識、數(shù)據(jù)和記錄、退役管理等方面。從生產(chǎn)設(shè)備生命周期角度進行考慮，結(jié)合近年來檢查中的常見問題[1,3-4]，本研究從藥品檢查角度對生物制品生產(chǎn)設(shè)備進行分析，通過以疫苗、抗體類藥物為代表的無菌生物制品常用生產(chǎn)設(shè)備的要點和問題的研究，重點從生產(chǎn)設(shè)備符合其預定用途、有效防止污染和交叉污染兩個核心角度對無菌生物制品原液生產(chǎn)設(shè)備、制劑生產(chǎn)設(shè)備和一次性使用系統(tǒng)的檢查要點進行總結(jié)和分析，并列舉了國內(nèi)外生物制品檢查典型問題，探討在各類檢查和自查中如何提高對生物制品生產(chǎn)設(shè)備的檢查實效，同時也為生物制品行業(yè)進一步加強生產(chǎn)設(shè)備的管理提供參考。

1 生物制品原液生產(chǎn)設(shè)備檢查分析

目前較典型的疫苗、單克隆抗體等生物制品原液生產(chǎn)通常由上游工藝（如菌毒種復蘇和擴增、工作細胞復蘇、細胞擴增、發(fā)酵培養(yǎng)和收獲等）、下游工藝（如離心、深層過濾、親和色譜、病毒滅活、離子交換色譜、納濾、超濾濃縮等）和原液制備工藝（如配制、除菌過濾、灌裝等）組成，其中常見生產(chǎn)設(shè)備包括培養(yǎng)箱、生物反應器、離心機、深層過濾系統(tǒng)、色譜系統(tǒng)、病毒滅活設(shè)備、除病毒過濾系統(tǒng)、超濾系統(tǒng)、除菌/減菌過濾系統(tǒng)。針對液體除菌/減菌過濾系統(tǒng)的要求在原液、制劑階段基本一致，原液生產(chǎn)中需要額外注意的是不能忽視對培養(yǎng)基、緩沖液除菌過濾系統(tǒng)的驗證、使用、監(jiān)測和評估。

1.1 培養(yǎng)箱

主要用于生物制品生產(chǎn)早期階段菌毒種、細胞的復蘇、擴增，重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）設(shè)備確認是否包括適宜的空載和滿載溫度分布試驗、滿載熱穿透試驗、振搖速度、CO2濃度（適用時）；（2）設(shè)備使用過程中的溫度、振搖速度、CO2濃度監(jiān)測和記錄。參考缺陷：規(guī)定每3 年對細胞復蘇用培養(yǎng)箱進行一次確認缺少依據(jù)和合理評估；在設(shè)備確認或常規(guī)監(jiān)測中均未進行過CO2的測量和記錄。

1.2 生物反應器

對于生物發(fā)酵工序（包括分批、補料和灌流培養(yǎng)），關(guān)鍵參數(shù)和指標通常包括溫度、pH 值、培養(yǎng)時間、空氣/氣體噴射速度（溶氧值）、攪拌轉(zhuǎn)速（波浪式生物反應器為搖擺角度、速度）、進料/灌流成分和速度、目標種子/細胞密度、膜尺寸（對于灌流培養(yǎng)）、質(zhì)量或體積、密封性。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）對關(guān)鍵參數(shù)和指標的校準、確認、監(jiān)測和記錄，其中注意監(jiān)測、取樣可能導致污染的控制；（2）清潔和滅菌，包括驗證、程序規(guī)定、實施情況和效果。參考缺陷：確認存在多項不足，包括未對滅菌后保壓性能進行確認、噴淋球覆蓋效果確認照片（核黃素熒光下）顯示僅覆蓋部分內(nèi)表面、生物指示劑未放置于末端管路。

1.3 離心機

離心是收獲階段常用方式之一，主要用于自細胞基質(zhì)中分離產(chǎn)品，從操作方式上一般包括間隙式離心機、連續(xù)流離心機兩類。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）離心時間/進料速度、離心間隔/排放間隔、離心轉(zhuǎn)速、離心溫度等參數(shù)的監(jiān)測和確認；（2）離心機清潔、消毒、污染和交叉污染控制，包括對離心操作中可能形成氣溶膠的控制措施和評估。參考缺陷：碟片離心機清洗驗證未對設(shè)備內(nèi)部葉片等最難清洗位置進行檢查和確認；收獲間現(xiàn)場標識已清潔的2 臺落地離心機轉(zhuǎn)子內(nèi)部仍殘留少量菌泥。

1.4 深層過濾系統(tǒng)

通常采用分子大小、分子間相互作用原理在生物制品發(fā)酵后去除細胞、碎片等雜質(zhì)，重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）過濾膜包的管理，包括驗收、使用、清潔和對應的驗證；（2）過濾參數(shù)設(shè)置和過程監(jiān)測。參考缺陷：深層濾板的清洗程序描述不詳細，如未詳細規(guī)定氫氧化鈉浸泡后深層濾板的沖洗方式、未規(guī)定最終沖洗用冷注射用水溫度；清潔驗證中未規(guī)定最終沖洗水的細菌內(nèi)毒素標準，且缺少評估。

1.5 色譜系統(tǒng)

主要用于分離、富集所需產(chǎn)品，一般包括分子排阻色譜、親和色譜、離子交換色譜、反相色譜和疏水色譜。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）色譜柱填料，包括填料類型、填料體積、裝填過程的體積流量和壓力、可浸出物檢測情況、純化曲線一致性、單產(chǎn)品單工序?qū)Ｓ们闆r、使用次數(shù)的驗證和評估；（2）日常使用、清潔和維護，包括色譜關(guān)鍵參數(shù)標準（如上樣體積、線體積流量、洗脫體積流量、填料高度、柱高度、梯度、溫度等）和收集標準，色譜系統(tǒng)的準備、拆卸、使用前對填料和色譜柱檢查的程序文件，清潔程序和清潔驗證，清潔后貯存條件，部件檢查和預防性更換等[5]。參考缺陷：多產(chǎn)品共用色譜柱缺少防止交叉污染風險的支持性證據(jù)和風險評估；清潔驗證中未考慮離子交換色譜、分子篩色譜使用后清潔前后的保持時限；針對填料凝膠最大使用次數(shù)的驗證不充分，未評估不同使用次數(shù)凝膠間洗脫曲線的一致性，未設(shè)置蛋白去除率的可接受標準。

1.6 病毒滅活設(shè)備

目前常用的病毒滅活方法一般包括低溫甲醛滅活法、低pH 值孵放法、β-丙內(nèi)酯法等，滅活設(shè)備主要是提供滅活場所并保證滅活條件。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）病毒滅活設(shè)備關(guān)鍵參數(shù)（包括pH 值、時間、溫度等）的確認和監(jiān)測；（2）病毒滅活前后交叉污染控制措施的有效性，包括必要的轉(zhuǎn)罐、傳輸軟管的滅活、設(shè)備使用后的清潔和消毒等。參考缺陷：滅活罐性能確認未規(guī)定具體模擬物料，僅描述為1 200 L 液體；用于37%甲醛滅活的設(shè)備未確認攪拌速度（影響混合均勻性）和滅活溫度。

1.7 除病毒過濾系統(tǒng)

是指通過分子大小原理在生物生產(chǎn)工藝中去除病毒的設(shè)備，其核心為過濾器，通常包括直流/常規(guī)過濾、分流過濾，作為生物制品下游生產(chǎn)的工序之一，一般屬于低生物負載的非無菌操作[6]。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）過濾器的選擇、驗證和驗收，如流體與過濾器兼容性、顆粒物、可浸出物、可提取物、毒性測試、病毒/噬菌體挑戰(zhàn)測試、最差情況的病毒滯留能力、吸附性、濾過條件（如體積流量或壓差、切向流超濾壓力降、濾過終點）、過濾器滅菌等內(nèi)容的驗證或評估；（2）完整性測試，包括測試方法的適用性、使用前及/或后進行測試要求、測試記錄和異常情況處理等。參考缺陷：未對除病毒過濾濾芯進行吸附性研究和驗證。

1.8 超濾系統(tǒng)

一般用于病毒滅活后中間產(chǎn)品的純化，采用加壓膜分離技術(shù)，基于分子大小進行進一步純化。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）超濾關(guān)鍵參數(shù)的確認和/或監(jiān)測，如膜包（包括截留相對分子質(zhì)量、膜包面積、完整性檢測、水通量測試、重復使用次數(shù)等）、跨膜壓（進/出濾過液壓力）、體積流量、壓力增量、溫度、緩沖液組成和用量等；（2）超濾系統(tǒng)的清潔和保存，特別是使用前后的清洗、使用后膜包的保存條件、保存液種類和更換頻率。參考缺陷：超濾系統(tǒng)清潔驗證中僅進行淋洗水取樣，未采用擦拭法，且未進行取樣回收率研究；超濾膜包更換前僅進行了水通量檢測，未進行完整性檢測，未規(guī)定達到最大使用次數(shù)時的檢測要求。

1.9 培養(yǎng)基/緩沖液配制系統(tǒng)

在生物制品原液生產(chǎn)階段，涉及到大量培養(yǎng)基、緩沖液的配制和使用。重點關(guān)注內(nèi)容考慮：（1）培養(yǎng)基、緩沖液配制準確性保證，涉及質(zhì)量、體積、攪拌速度、溫度等參數(shù)控制；（2）配制后滅菌、取樣、儲存和運輸?shù)拳h(huán)節(jié)的污染控制。參考缺陷：配制罐清潔驗證取樣點未包括最難清潔位置。

2 生物制品制劑生產(chǎn)設(shè)備檢查分析

無菌生物制品制劑生產(chǎn)設(shè)備與常規(guī)無菌制劑生產(chǎn)設(shè)備基本一致，涉及中間產(chǎn)品配制、灌封、軋蓋、燈檢等工序，生物制品制劑階段常見生產(chǎn)設(shè)備包括：除菌過濾系統(tǒng)、洗瓶機、隧道式滅菌干燥機、灌裝加塞機、冷凍干燥機、軋蓋機、全自動燈檢機、脈動真空滅菌柜等。由于生物制品本身、行業(yè)高速創(chuàng)新發(fā)展的特殊性等因素，在檢查關(guān)注要點和發(fā)現(xiàn)問題方面與其他藥品相比仍存在一些差異。

2.1 除菌過濾系統(tǒng)

重點關(guān)注內(nèi)容為除菌過濾驗證是否能代表實際的過濾參數(shù)、過濾器完整性檢測、過濾器的滅菌和使用等。一些典型缺陷，如未進行除菌過濾驗證或驗證不充分，存在試驗或確認項目不完整、已完成驗證不能代表實際待過濾介質(zhì)和實際工藝；完整性檢測操作不規(guī)范，對異常情況調(diào)查處理不充分；最終除菌過濾系統(tǒng)沒有最大程度地接近灌裝線、沒有最大程度地減少最終除菌過濾后和灌裝之間所需的無菌連接次數(shù)等[7]。需要注意的是：在生物制品生產(chǎn)中，通常會使用氣體除菌過濾器，對于參與生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵氣體過濾器（即過濾與中間產(chǎn)品直接接觸的氣體，如灌裝階段的氮氣、凍干機真空后補氣、吹-灌-封設(shè)備用氣等），注意重點關(guān)注其無菌要求和滅菌影響、完整性檢測的時間和頻次；對于非關(guān)鍵氣體或排氣過濾器（如培養(yǎng)罐進氣和排氣、設(shè)備清潔后干燥用壓縮空氣等），注意其使用期間壓差監(jiān)測和定期的完整性檢測，特別是需長時間安裝的氣體過濾器，在安裝時和更換前進行完整性測試，并基于風險確定最長使用時間和過程監(jiān)測項目。

2.2 洗瓶機

主要用于去除玻璃小瓶的細菌內(nèi)毒素、化學物質(zhì)和顆粒物。重點關(guān)注內(nèi)容：（1）針對不同規(guī)格小瓶清洗參數(shù)規(guī)定和定期檢查，如清洗程序設(shè)計、清洗壓力、洗瓶速度、洗瓶溫度和時間、針頭深度、針頭中心位置、清洗針完好情況監(jiān)測、過濾器完整性檢測、清洗過程取樣監(jiān)測等，同時關(guān)注運輸、卸載、裝載、清洗過程中對玻璃小瓶損害和污染的風險控制[8]；（2）設(shè)備確認，特別是對清洗效果的確認以及與實際清洗參數(shù)一致性。參考缺陷：設(shè)備確認報告和記錄無法證明有效的關(guān)鍵清潔參數(shù)（壓力、體積流量、針頭位置等）的范圍或設(shè)置值；未對小瓶清潔進行適宜的驗證，設(shè)備確認范圍未覆蓋程序文件規(guī)定的全面參數(shù)范圍（如超聲波：0.4～0.9 kW，壓縮空氣壓力：0.2～0.6 MPa，注射用水壓力：0.1～0.6 MPa，循環(huán)水壓力：0.2～0.6 MPa，循環(huán)水溫度：40～60 ℃）；設(shè)備確認未考慮進行生物負載的測試。

2.3 隧道式滅菌干燥機

主要用于去除清洗后玻璃小瓶的細菌內(nèi)毒素和微生物。重點關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認的充分性，特別是在運行確認、性能確認中是否包括過濾器完整性、懸浮粒子、風速、氣流平衡和壓差、傳送速度（暴露時間）、裝載模式和最差裝載條件（足夠空間以保證空氣流通）、溫度分布（空載、滿載和負載）、最差操作條件（最短時間、最低溫度設(shè)定、最大單位面積質(zhì)量的容器等）、探頭位置、熱穿透試驗（包括對離開隧道烘箱物品溫度已冷卻至對產(chǎn)品安全溫度的確認）、細菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗（細菌內(nèi)毒素水平下降3 個對數(shù)單位），生物指示劑試驗（微生物殘存概率不低于1×10?6）、清洗速度與傳送速度、灌裝速度的關(guān)系等項目的確認；（2）使用、監(jiān)測和維護方面，關(guān)注實際生產(chǎn)中傳送速度等關(guān)鍵參數(shù)是否包括在確認范圍內(nèi)，預熱段、加熱段和冷卻段之間壓差梯度、溫度監(jiān)測，高效過濾器完整性測試頻率（如每半年）和更換周期的合理性，冷卻段清潔和滅菌方式的有效性（尤其是在干預操作后），設(shè)備夜間模式和正常模式對內(nèi)部潔凈環(huán)境保護能力的評估（特別是正常模式時冷卻段與設(shè)備房間之間的壓差），設(shè)備維護中對傳送帶磨損程度、門密封性等項目的檢查。參考缺陷：除設(shè)備確認外，生產(chǎn)時未對屬于A 級區(qū)域的冷卻段進行塵埃粒子監(jiān)測；設(shè)備確認中未充分評估和控制隧道式滅菌干燥機與灌裝間、清洗間壓差可能導致的風險（特別是冷區(qū)段與清洗間之間）。

2.4 灌裝加塞機

用于在A 級潔凈環(huán)境下對生物制品進行分裝和加塞。重點關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認與使用中的關(guān)鍵參數(shù)和項目（如灌裝速度、裝量精度、加塞效果、必要時的充氮或抽真空效果等），以及在理瓶、傳輸全過程對玻璃小瓶造成損害的風險；（2）除生產(chǎn)設(shè)備本身外，還需關(guān)注整個灌裝線設(shè)計布局（包括RABS、傳送軌道、操作空間等）和生產(chǎn)過程可能導致的潛在污染風險，如A 級區(qū)、延展層流潔凈環(huán)境確認和監(jiān)測[9]、氣流煙霧試驗、設(shè)備的清潔和消毒、無菌工藝模擬試驗[10]、RABS 手套完整性檢測和更換、最終的除菌過濾濾器是否盡可能的接近灌裝點等。參考缺陷：無菌灌裝過程中，每小時檢查一次裝量（每個灌裝針頭一瓶），但該企業(yè)常規(guī)批量為45 萬瓶，不能從小樣本中得出灌裝一致性的結(jié)論，應充分證明分裝體積的均一性和分裝過程控制的合理性；未評估不銹鋼針頭可能對玻璃小瓶造成損害的風險；未基于使用風險確定合理的灌裝機對應RABS 手套滅菌和完整性檢測頻次；對無菌工藝模擬試驗中灌裝機發(fā)生碎瓶的事件未進行偏差記錄、調(diào)查和處理。

2.5 真空冷凍干燥機

用于生物制品的冷凍干燥。重點關(guān)注內(nèi)容：（1）針對預凍、一次干燥（升華）和二次干燥（解吸附）等凍干程序的關(guān)鍵功能、關(guān)鍵參數(shù)和關(guān)鍵指標的確認，如真空泄漏量、擱板升降溫速率、擱板溫度均勻性和控溫精度、冷凝器降溫性能和捕水能力、波紋管完整性測試、抽真空能力和真空控制測試、在線清洗覆蓋率、在線滅菌效力、凍干曲線以及產(chǎn)品均勻性、外觀、水分、溶液濁度、裝量差異、復溶效果等；（2）污染控制措施和潛在風險，包括在線滅菌（SIP）和在線清洗（CIP）的確認和實際應用、進出料系統(tǒng)或操作、潔凈環(huán)境和布局、與其余關(guān)聯(lián)設(shè)備的交互邏輯功能、凍干與SIP/CIP 計算機化系統(tǒng)和電子數(shù)據(jù)管控情況等。參考缺陷：針對真空冷凍干燥機使用前的SIP，未能提供可靠數(shù)據(jù)和實際執(zhí)行證據(jù)；現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)凍干機軟件按時區(qū)顯示時間為17:34，而不是實際的11:34，導致產(chǎn)生的數(shù)據(jù)與產(chǎn)品實際冷凍干燥活動時間不一致；規(guī)定每2 年對凍干機進行一次再確認（包括蒸汽滅菌、溫度分布等項目），缺少文件證明和合理理由；凍干機確認未顯包括探頭位置的證據(jù)來證明生產(chǎn)中使用的負載模式的有效滅菌，確認標準中未考慮平衡時間。

2.6 軋蓋機

用于西林瓶包裝生物制品最終的無菌密封操作。重點關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備是否包括軋蓋前后剔廢（如缺塞、翹塞、膠塞高度異常、無蓋、掛蓋異常等）、負壓抽風捕塵等功能，設(shè)備確認是否包括軋蓋頭壓力范圍、軋蓋速度等關(guān)鍵參數(shù)、是否包括自動掛蓋成功率、爆瓶率、剔廢功能和剔廢成功率、軋蓋缺陷率、密封完整性測試等項目，并能證明符合預期用途；（2）污染控制措施是否進行了針對性的評估和設(shè)計，如振蕩盤的清潔消毒方式，環(huán)境監(jiān)測位置、項目和頻次。參考缺陷：除軋蓋速度外，其他關(guān)鍵參數(shù)未經(jīng)過確認和評估；西林瓶軋蓋機的再確認中未對膠塞位置檢測和剔除功能進行確認；扭矩測試儀確認報告中未將西林瓶軋蓋后扭矩檢測數(shù)值標準與微生物挑戰(zhàn)試驗或軋蓋壓力衰減試驗進行關(guān)聯(lián)，也未與軋蓋機“刀頭”數(shù)量進行關(guān)聯(lián)。

2.7 自動燈檢機

主要用于無菌密封后生物制品的可見異物、外觀缺陷、容器完整性檢測。針對目前常見的無菌生物制品包裝方式預灌封注射器和玻璃瓶-膠塞-鋁蓋包裝，使用自動燈檢設(shè)備時，重點關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認是否能證明其等同于或優(yōu)于人工檢查（KNAPP 測試大于或等于100%[11]），對于同時負責完整性檢測的設(shè)備（如高壓檢漏）還需關(guān)注其適用性確認（注意包括陽性對照樣品孔徑、制作方式）；（2）設(shè)備使用階段，關(guān)注是否在設(shè)備啟動之前進行確認，是否使用代表性缺陷樣品挑戰(zhàn)設(shè)備的性能，注意對代表性缺陷樣品的管控、設(shè)備燈檢不合格產(chǎn)品的處置、各類燈檢缺陷限度標準規(guī)定等。參考缺陷：對于首次燈檢不符合的小瓶再次復檢的操作在性能確認報告中缺少對應支持性數(shù)據(jù)，設(shè)備檢測的準確性存疑；性能確認參數(shù)不完整，如未包括設(shè)備配備的攝像頭數(shù)量和分辨率、分辨率傳感器格式和數(shù)據(jù)存儲等；使用從人工燈檢發(fā)現(xiàn)的缺陷樣品對自動燈檢機進行校準，但沒有關(guān)于所選缺陷樣品類型的規(guī)范，以更好地控制自動目視檢查的拒收水平。

2.8 脈動真空滅菌柜

生物制品生產(chǎn)過程中極少使用濕熱滅菌的方式對產(chǎn)品進行滅菌操作，但對生產(chǎn)中有關(guān)工器具、潔凈服、緩沖液、稀釋劑等的滅菌仍是主要的滅菌設(shè)備，對于脈動真空滅菌通常包括預熱、脈動、升溫、滅菌、干燥和冷卻等環(huán)節(jié)。重點關(guān)注內(nèi)容：（1）設(shè)備確認的充分性和有效性、與實際滅菌操作的一致性[12]；（2）使用和維護中，重點包括對滅菌物品裝載方式、滅菌關(guān)鍵參數(shù)監(jiān)測、滅菌效果監(jiān)測項目和頻次（如BD 測試、化學指示卡）、關(guān)鍵維護項目和頻次等內(nèi)容。參考缺陷：分裝車間脈動真空滅菌柜確認中溫度探頭、生物指示劑未放在蒸汽較難穿透的硅膠管內(nèi)中間位置，確認報告中顯示裝載方式與分裝車間現(xiàn)場的裝載方式示意圖不一致，現(xiàn)場滅菌裝載規(guī)定不完善（如未明確分裝工器具在不銹鋼桶內(nèi)的具體擺放位置、硅膠管纏繞方式等）；企業(yè)共14 種脈動真空滅菌裝載方式，但針對每種具體的裝載方式未根據(jù)風險評估結(jié)果確定確認時溫度探頭和生物指示劑的位置；規(guī)定BD 測試每年隨驗證做1 次，未基于有效風險評估確認該測試頻次的合理性；確認用生物指示劑，未確認或評估其孢子數(shù)量。

3 一次性使用系統(tǒng)檢查分析

一次性使用系統(tǒng)是一種生產(chǎn)工藝設(shè)備解決方案，通常由聚合材料組件裝配而成。近年來，隨著單克隆抗體、疫苗等生物制品的持續(xù)發(fā)展，一次性使用系統(tǒng)技術(shù)也迅速升級，在生物制藥領(lǐng)域（包括單克隆抗體藥物、疫苗、血液制品、細胞治療產(chǎn)品等）已經(jīng)有了較廣泛的應用，如細胞培養(yǎng)、發(fā)酵、收獲、離心、純化、混合、儲存、冷凍、解凍、濾過等生物制造工序中?；谝淮涡允褂孟到y(tǒng)的特殊性[13-14]，檢查中需要重點關(guān)注的內(nèi)容主要包括一次性使用系統(tǒng)對生物制品和對應工藝的適用性驗證和評估（如工藝驗證、產(chǎn)品兼容性、吸附、顆粒物、可提取物、可浸出物等）、針對供應商發(fā)起變更對生物處理系統(tǒng)及其驗證狀態(tài)影響的變更控制程序和執(zhí)行情況（包括必要的再驗證）、供應商資質(zhì)確認（包括無菌保證能力）和質(zhì)量協(xié)議、一次性使用系統(tǒng)接收質(zhì)量標準和使用前檢查標準、使用過程中與使用前后一次性使用系統(tǒng)完整性檢查、在極端條件和復雜操作下（如凍融、熱合、機械密封、組裝、人工搬運、取樣等）的完整性和對產(chǎn)品的影響。

在生物制品生產(chǎn)現(xiàn)場檢查中涉及一次性使用系統(tǒng)的一些典型問題：（1）企業(yè)未基于工藝需求和實際使用情況對一次性使用系統(tǒng)袋子和組件的完整性測試方法進行充分的確認，在缺少合理理由和證明的情況下僅按供應商提供的信息進行測試；（2）關(guān)于一次性使用系統(tǒng)組裝的泄漏檢測限值和標準缺少記錄和證明；（3）未基于無菌連接設(shè)備的預期用途進行充分驗證，沒有適當?shù)拇胧﹣泶_保無菌連接中使用組件的完整性，盡管生產(chǎn)中對所用一次性使用系統(tǒng)儲液袋使用后進行了完整性測試，然而對一次性使用系統(tǒng)未按照預期用途進行測試；（4）原液一次性使用系統(tǒng)儲液袋未進行風險評估，未開展供應商現(xiàn)場審計，也未制定入廠檢驗標準并開展入廠檢驗，進廠時僅核對生產(chǎn)商提供的合格證書，使用后未進行必要的完整性檢測，針對可浸出性研究僅進行了12 個月（低于原液儲存時間18 個月）；（5）對于一次性使用系統(tǒng)儲液袋泄漏的偏差調(diào)查處理未能找到根本原因并制定有效控制措施。

4 結(jié)語

當前，生物醫(yī)藥已成為全球新一輪科技變革中科技含量高、創(chuàng)新密集、投資最活躍的領(lǐng)域，生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的創(chuàng)新發(fā)展是落實創(chuàng)新驅(qū)動發(fā)展戰(zhàn)略的重要組成部分，是健康中國建設(shè)的重要基礎(chǔ)[15]。生物制品不僅僅成為保護人類健康的產(chǎn)品，也成為出國家間科技、經(jīng)濟和綜合實力角逐的體現(xiàn)[16]。生物制品生產(chǎn)設(shè)備作為生物制品生產(chǎn)關(guān)鍵要素之一，在實現(xiàn)產(chǎn)品、確保質(zhì)量、提高生產(chǎn)效率、保障安全和追溯性等方面都具有不可或缺的重要作用。除生物技術(shù)外，生物制品生產(chǎn)設(shè)備還涉及藥機工程行業(yè)，屬于多技術(shù)、多專業(yè)的交叉科學，技術(shù)專業(yè)性和復雜性較高。本研究從檢查視角，基于“污染控制策略”中設(shè)備、組件部分的內(nèi)容[17]，結(jié)合近年來國內(nèi)外生物制品檢查發(fā)現(xiàn)的問題、趨勢、風險等因素對無菌生物制品常見生產(chǎn)設(shè)備檢查的重點關(guān)注內(nèi)容進行探討，希望為檢查員在對設(shè)備系統(tǒng)的檢查中提供借鑒，從“系統(tǒng)性”和“專業(yè)性”兩方面進一步提高檢查實效，更好地助力我國生物制品行業(yè)的健康發(fā)展。生物制品生產(chǎn)企業(yè)可參考關(guān)于生產(chǎn)設(shè)備的重點內(nèi)容和問題分析，結(jié)合法規(guī)指南要求、產(chǎn)品和工藝特點進一步優(yōu)化完善生物制品生產(chǎn)設(shè)備的生命周期管理，盡可能在設(shè)計選型階段最大限度地降低可能的問題和潛在風險，更好地保證產(chǎn)品質(zhì)量。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突