王澤錦，胡素俠，戚應(yīng)杰

（1.安徽理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院，安徽 淮南 232063；2.安徽理工大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽 淮南 232007；3.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)附屬第一醫(yī)院感染病院檢驗(yàn)科，安徽 合肥 230036）

結(jié)核病(tuberculosis，TB)是一種傳染性疾病，由結(jié)核分枝桿菌（MTB）引起，多通過空氣進(jìn)行傳播，常見癥狀為咳嗽、發(fā)熱、盜汗、體重減輕等。結(jié)核病感染人數(shù)約占全球的1/4，每天約4 000人死于該病，近30 000人感染可預(yù)防、治愈的結(jié)核病[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計(jì)2021年約有1 060萬人患結(jié)核病，患病人數(shù)與2020年相比增加4.5%，其中160萬人死于結(jié)核病[包括18.7萬人類免疫性缺陷病毒（簡稱HIV）陽性者][2]。結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷是發(fā)現(xiàn)傳染源的主要方法，但傳統(tǒng)檢測方法周期長、靈敏度低，無法滿足臨床需求。因此聯(lián)合運(yùn)用新的輔助診斷方法，對全球結(jié)核病研究和防控具有重要意義。本研究將從細(xì)菌學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)的相關(guān)檢測及結(jié)核病組學(xué)研究等方面總結(jié)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷的現(xiàn)狀與進(jìn)展，并作如下綜述。

1 結(jié)核病細(xì)菌學(xué)檢測

目前，結(jié)核病的細(xì)菌學(xué)檢測仍是診斷感染結(jié)核病的金標(biāo)準(zhǔn)。痰涂片和培養(yǎng)是應(yīng)用最廣泛的結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù), 常見方法為抗酸涂片染色法、熒光染色法、傳統(tǒng)結(jié)核菌固體培養(yǎng)和全自動結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)儀快速檢測。

1.1 涂片染色與熒光染色技術(shù)萋尼氏抗酸染色痰涂片顯微鏡檢查是最經(jīng)典的結(jié)核分枝桿菌檢測方法，具有經(jīng)濟(jì)、迅速、操作簡單的優(yōu)點(diǎn)，但靈敏度較低。有研究對抗酸染色陽性病例進(jìn)行分析，在收集的結(jié)核抗酸染色14 060例樣本中，陽性307例，陽性率為2.18%[3]。可見此方法出現(xiàn)假陰性的情況較多，受主觀因素和標(biāo)本質(zhì)量影響較大。熒光染色則運(yùn)用熒光提高顯微鏡檢查的靈敏度，但由于價(jià)格昂貴目前難以普及。

1.2 培養(yǎng)技術(shù)傳統(tǒng)固態(tài)培養(yǎng)法靈敏度略高于涂片法，是鑒定活菌的可靠方法，還可進(jìn)一步進(jìn)行菌種鑒定和藥敏試驗(yàn)；但其培養(yǎng)時(shí)間長，需4～6周才能檢測到菌種，且無法區(qū)分結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌。培養(yǎng)儀的原理是基于液體培養(yǎng)法，以全自動分枝桿菌培養(yǎng)監(jiān)測儀為（BD公司，型號：BACTEC MGIT960）代表，其通過測定液體培養(yǎng)基中氧氣消耗量來判定 MTB有無生長。王巍等[4]比較了羅氏培養(yǎng)法與BACTEC MGIT960檢測系統(tǒng)在肺結(jié)核中的應(yīng)用，結(jié)果顯示BACTEC MGIT960培養(yǎng)陽性率為67.6%，羅氏培養(yǎng)陽性率為53.3%，且前者檢測周期明顯縮短。但也存在該技術(shù)對實(shí)驗(yàn)室生物安全級別要求高、成本高等缺點(diǎn)，不能大規(guī)模普及。因此，應(yīng)聯(lián)合其他輔助診斷方法提高陽性檢出率，在此基礎(chǔ)上尋找細(xì)菌學(xué)證據(jù)。

2 結(jié)核病免疫學(xué)檢測

免疫學(xué)檢測方法包括TB抗原和抗體檢測、多種抗體聯(lián)合檢測、結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（tuberculin skin test，TST）、γ-干擾素釋放試驗(yàn)（interferon-γ release assays，IGRAs）、重組結(jié)核桿菌融合蛋白（ESAT6-CFP10，EC）皮膚試驗(yàn)等。

2.1 結(jié)核病抗原和抗體檢測技術(shù)TB 抗原包括菌體細(xì)胞、結(jié)核菌素（PPD）、脂阿拉伯甘露聚糖（LAM)、熱休克蛋白65（HSP）抗原、早期分泌性抗原靶-6（ESAT-6) 等。由于抗原成分復(fù)雜且存在交叉抗原，所以，目前通過技術(shù)對抗原進(jìn)行表達(dá)和純化，大量制備TB蛋白質(zhì)成分以檢測人體內(nèi)是否存在抗體。膠體金免疫層析法檢測結(jié)核病患者中特異性結(jié)核抗體免疫球蛋白（Ig）G／IgM 的靈敏度為41.15%、特異度為91.67%[5]，可見多種抗原和抗體聯(lián)合檢測有助于提高檢測的敏感性，但仍受患者年齡、檢測的抗體類型(IgG、IgM、 IgA) 、結(jié)核病感染類型等多方面因素的影響。

2.2 結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)技術(shù)TST是實(shí)驗(yàn)室診斷方法之一，是基于Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)原理建立的皮膚試驗(yàn)，具有快速、簡單、低成本的優(yōu)點(diǎn)，但特異性較低，曾接種卡介苗(BCG)或接觸非結(jié)核分枝桿菌的環(huán)境均可導(dǎo)致TST假陽性。

2.3 γ-干擾素釋放試驗(yàn)技術(shù)IGRAs原理為機(jī)體初次感染結(jié)核分枝桿菌后致敏T淋巴細(xì)胞，再次感染時(shí)γ-干擾素在內(nèi)的細(xì)胞因子釋放，通過檢測γ-干擾素判斷感染狀況。劉珍敏等[6]對299名兒童研究對象進(jìn)行結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）、涂片檢查，與TST比較靈敏度和特異度，結(jié)果顯示T-SPOT.TB靈敏度遠(yuǎn)高于TST，且標(biāo)本獲取方便，能快速診斷。

雖然IGRAs具有較好的診斷價(jià)值，但測試費(fèi)用昂貴，對實(shí)驗(yàn)室設(shè)備要求較高，給結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家?guī)磔^大壓力。WHO在2022年發(fā)表的報(bào)告中指出[7]：基于特定抗原的新結(jié)核桿菌抗原皮膚試驗(yàn)(TBSTs)已經(jīng)開始被研究，這些試驗(yàn)結(jié)合更簡單的皮膚試驗(yàn)和高特異性的IGRAs，將可能成為結(jié)核感染診斷的有效工具。

2.4 EC皮膚試驗(yàn)技術(shù)2021年的一項(xiàng)研究顯示：EC皮膚試驗(yàn)與T-SPOT.TB試驗(yàn)相比，EC皮膚試驗(yàn)顯示出較高的特異性和靈敏度，具有良好的安全性和較高的診斷準(zhǔn)確性[8]。此外，EC皮膚試驗(yàn)在HIV感染者診斷中也顯示出價(jià)值，無論是否接種卡介苗，EC皮膚試驗(yàn)對HIV感染者均有較高的診斷價(jià)值。因此，EC皮膚試驗(yàn)可能是一種有效的替代診斷試驗(yàn)，用于HIV流行率高和卡介苗接種高的環(huán)境或人群，但尚未得到系統(tǒng)的審查，因此還需進(jìn)一步研究。

3 結(jié)核病分子生物學(xué)檢測

早診斷、早隔離、早治療能夠減少肺結(jié)核發(fā)病和死亡，但MTB生長緩慢，通過傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢查難以快速確診，而分子生物學(xué)診斷可更快地進(jìn)行病原檢測。目前，應(yīng)用分子生物學(xué)診斷結(jié)核病的方法主要包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）技術(shù)、線性探針分析 (LPA)技術(shù)、基因芯片技術(shù)、基因組測序技術(shù)、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）技術(shù)等。

3.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)PCR通過在體外模擬體內(nèi)DNA復(fù)制的過程獲得大量DNA，包括變性、退火、延伸三個(gè)階段。PCR是傳統(tǒng)的分子生物學(xué)檢測方法，成本低、方法成熟、有較好的檢出率，但存在易污染、非特異性擴(kuò)增、會導(dǎo)致假陽性等缺點(diǎn)。因此產(chǎn)生了很多改進(jìn)的方法，例如即時(shí)檢驗(yàn)（point of care testing，POCT）技術(shù)、熒光定量（real-time）PCR技術(shù)、數(shù)字 PCR (digital PCR，dPCR)技術(shù)。

3.1.1 即時(shí)檢驗(yàn)技術(shù) POCT是一種集核酸提取、檢測、擴(kuò)增為一體的新型結(jié)核分子診斷技術(shù)，無需在特定的分子實(shí)驗(yàn)室操作，該技術(shù)主要用于門診及住院的疑似結(jié)核病患者初篩及鑒別診斷中，可在2 h內(nèi)從痰液等樣本中檢測是否存在結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群，能夠極大提高結(jié)核病病原學(xué)陽性率，更好地服務(wù)于臨床并提高診療水平。于佳佳等[9]首次成功建立并驗(yàn)證了針對MTB的PCR-CRISPR檢測技術(shù)具有敏感度與特異度高、穩(wěn)定性好、成本低等特點(diǎn)?；贑RISPR/Cas的超敏診斷技術(shù)為TB診斷提供了可能，且可能適合于POCT。

3.1.2 熒光定量PCR技術(shù) Gene Xpert MTB/RIF檢測是基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR原理的一種檢測技術(shù)，可在2 h內(nèi)檢測樣本中是否存在結(jié)核分枝桿菌及是否耐藥，是目前最快的結(jié)核病分子診斷技術(shù)之一，可以準(zhǔn)確地排除非結(jié)核分枝桿菌，并分離鑒定出RIF抗性。該方法操作簡便、檢測準(zhǔn)確性高、污染概率小，但價(jià)格昂貴、培養(yǎng)陰性菌量少且對HIV患者的靈敏度不夠。為彌補(bǔ)這些不足，Gene Xpert MTB/RIF Ultra（簡稱Xpert Ultra）增加了兩種MTB檢測分子靶標(biāo)(IS1081 和IS6110)以提高檢測靈敏度，并且有更低的TB檢測限（LOD），與Gene Xpert MTB/RIF特異性相當(dāng)[10]。因此Ultra可顯著提高結(jié)核病的檢測率，尤其是對于低細(xì)菌性患者。對于肺外結(jié)核的診斷，一項(xiàng)研究顯示Xpert Ultra對76例行CSF培養(yǎng)的結(jié)核性腦膜炎患者檢測敏感度明顯高于MGIT 960培養(yǎng)[11]。此外，Xpert Ultra在HIV陽性患者中表現(xiàn)出高靈敏度。Xpert Ultra 在標(biāo)本含菌量少、肺外結(jié)核和艾滋病合并結(jié)核患者中的靈敏度較好。自2021年來，WHO建議將糞便與痰一起作為一種標(biāo)本類型用于Xpert Ultra檢測結(jié)核病的初始測定，可在緊急情況時(shí)作為首選方法[12]。對于兒童來講，痰液難以獲得，可選擇糞便代替檢測，但該技術(shù)特異性較低，且成本較高，還需進(jìn)一步研究。

3.1.3 數(shù)字 PCR技術(shù) dPCR是一種比熒光定量PCR具有更高靈敏度和絕對定量的微量DNA鑒定技術(shù)，是基于單分子PCR方法進(jìn)行計(jì)數(shù)的核酸定量，絕對定量不受標(biāo)準(zhǔn)曲線影響，具有高靈敏度、低樣本需求量低、高耐受性等特點(diǎn)。研究顯示可使用dPCR來調(diào)查MTB的異耐受性，通過對katG和rpoB基因進(jìn)行熒光定量PCR突變檢測，確定結(jié)核分枝桿菌的異質(zhì)性耐藥率，這兩種基因通常分別與異煙肼和利福平耐藥有關(guān)[13]。微滴數(shù)字PCR（droplet digital PCR, ddPCR）能夠檢測出突變株和野生型菌株，這使其成為早期診斷和管理耐藥結(jié)核病的寶貴工具，同時(shí)也印證早期發(fā)現(xiàn)和管理耐藥結(jié)核病對于控制結(jié)核病進(jìn)展的重要性。數(shù)字PCR技術(shù)還未能獲得大量臨床研究，這也有可能是與其儀器設(shè)備和試劑昂貴有關(guān)，還需進(jìn)一步研究。

3.2 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)LAMP技術(shù)是一種新的核酸擴(kuò)增方法，具有簡單、快速、操作簡便的特點(diǎn)。該技術(shù)在靈敏度、特異性和檢測范圍等指標(biāo)上優(yōu)于PCR技術(shù)。其不依賴熱循環(huán)設(shè)備而實(shí)現(xiàn)高通量快速檢測，檢測成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR。但因其靈敏度高，開蓋容易形成氣溶膠污染，易造成假陽性。有研究將LAMP技術(shù)與傳統(tǒng)方法（涂片鏡檢和MGIT 960）相比，結(jié)果顯示TB-LAMP檢測MTB的效能更高,且涂片鏡檢和TB-LAMP并聯(lián)合檢測肺泡灌洗液的敏感性更好[14]，這提示LAMP技術(shù)可作為診斷兒童肺結(jié)核的替代試驗(yàn)。對于結(jié)核性腦膜炎的診斷，LAMP技術(shù)陽性率高、耗時(shí)短，能早期獲得結(jié)果[15]，表明LAMP技術(shù)對于早期診斷結(jié)核性腦膜炎具有較好的參考意義。

3.3 線性探針分析技術(shù)LPA技術(shù)是通過應(yīng)用生物素標(biāo)記引物進(jìn)行DNA的擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物變性后與固定在尼龍膜上的特異寡核苷酸探針進(jìn)行雜交，通過酶聯(lián)免疫顯色法顯示結(jié)果，其是耐多藥結(jié)核病檢測方法之一。該方法具有較高的靈敏度和特異度，且檢測速度快。利用該技術(shù)的儀器比較有代表性的為INNO-LiPA Rif.TB和MTBDRplus。2008年WHO批準(zhǔn)使用一線探針法基因型MTBDRplus v1.0，用于快速檢測耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)；2011年，新版本的LPA技術(shù)出現(xiàn)基因型MTBDRplus v2.0[16]。二線結(jié)核病藥物耐藥性基因（基因型MTBDRsL v2.0）2015年出現(xiàn)，用于檢測與氟喹諾酮(FQs)和二線注射藥物(SLDIs)耐藥性相關(guān)的突變，Singh等[17]研究表明基因型MTBDRsL v2.0檢測FQ和SLIDs的特異性分別為92.31%和100.00%，靈敏度為100.00%。MTBDRsL是目前可檢測廣泛耐藥結(jié)核的分子診斷技術(shù)，但是該方法的成本較高，仍是耐多藥結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家的問題之一。

3.4 基因芯片技術(shù)基因芯片又稱DNA芯片，測序原理為雜交測序法，通過與一組已知序列的核酸探針雜交進(jìn)行核酸序列測定，得出一組序列完全互補(bǔ)的探針序列，進(jìn)而重組出靶核酸的序列。該方法將多種探針固定在支持物上，可一次性對樣品大量序列進(jìn)行檢測和分析，具有自動化程度高、操作序列多、檢測效率高的優(yōu)點(diǎn)，可用于菌種的鑒定及耐藥性檢測。2018年，有研究證明生物芯片技術(shù)對RIF和INH耐藥及耐多藥結(jié)核病檢測具有良好的敏感度和特異度，值得在我國臨床推廣[18]。其中生物芯片對RIF檢測的敏感度為86.08%，特異度為97.7%；對INH耐藥的敏感度為79.36%，特異度為98.71%，對MDR-TB檢測的敏感度為78.01%，特異度為98.86%。此外，對于涂陽肺結(jié)核患者M(jìn)TB菌種鑒定，基因芯片法對結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群鑒定符合度為100.00%，可較好的鑒定結(jié)核分枝桿菌菌種，并與常規(guī)菌培養(yǎng)結(jié)果具有高度一致性[19]。相較于痰涂片、痰培養(yǎng)方法，基因芯片技術(shù)可提高陽性檢出率，但是基因芯片仍然存在著許多難以解決的問題，例如技術(shù)成本昂貴、復(fù)雜、重復(fù)性差、分析泛圍較狹窄等，還需進(jìn)一步研究。

3.5 基因組測序技術(shù)基因測序是一種新型基因檢測技術(shù)，主要測序原理是循環(huán)微陣列法。其可以預(yù)測多種疾病，是將提純化后的基因組核酸使用高通量測序儀進(jìn)行測序，獲取細(xì)菌基因組DNA序列。靶向二代測序（TNGS）可應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌復(fù)合體耐藥性相關(guān)基因突變中，識別耐藥性[20]，以糞便為標(biāo)本并為難以提供呼吸道標(biāo)本的肺結(jié)核患者提供了獲得關(guān)鍵診斷信息的機(jī)會。宏基因組二代測序（mNGS）由于其全面性，被認(rèn)為是可能取代傳統(tǒng)方法的微生物學(xué)方法，是一種很有前途的傳染病檢測技術(shù)，mNGS診斷結(jié)核病經(jīng)meta分析的靈敏度和特異度分別為70%和99%[21]。全基因組測序（WGS）可獲得詳細(xì)的細(xì)菌全基因序列,分析耐藥基因突變從而預(yù)測其耐藥表型。WGS可以是結(jié)核病耐藥監(jiān)測和確定治療方案的一種重要方法，雖有明顯優(yōu)勢，但是由于操作繁瑣且價(jià)格高昂，僅在發(fā)達(dá)國家及低負(fù)擔(dān)結(jié)核病國家開展。

3.6 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)MALDITOF MS是近年發(fā)展起來的一種質(zhì)譜技術(shù)，已成為檢測和鑒定多肽、蛋白質(zhì)、多糖、核苷酸、糖蛋白、高聚物及多種合成聚合物的強(qiáng)有力工具。其主要對微生物的核糖體蛋白組進(jìn)行分析，形成不同的指紋圖譜，與數(shù)據(jù)庫中已知菌種的鑒定譜圖進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)聚類分析，獲得未知樣本的鑒定結(jié)果。該方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、分辨率高、圖譜簡明、質(zhì)量范圍廣及速度快等特點(diǎn)，且可大量檢測。MALDI-TOF MS診斷肺結(jié)核涂陰或無痰肺結(jié)核敏感度為68.5%[22]，優(yōu)于其他方法，有較好的應(yīng)用前景。與基因芯片相比，MALDI-TOF MS分析時(shí)間短、簡單、快速、成本低且可以區(qū)分結(jié)核分枝菌與非結(jié)核分枝菌。此外，MALDI-TOF MS也可用于結(jié)核分枝桿菌耐藥性評估。MALDI-TOF MS技術(shù)在MTB藥敏檢測中表現(xiàn)出良好的靈敏度和特異度，但其無法鑒定不能被培養(yǎng)的細(xì)菌，只能鑒定培養(yǎng)陽性的細(xì)菌，可以作為臨床判斷的補(bǔ)充。

4 結(jié)核病組學(xué)相關(guān)研究進(jìn)展

近年來，結(jié)核病組學(xué)研究發(fā)展迅速，其較高的特異度及靈敏度為進(jìn)一步快速診斷結(jié)核病、區(qū)分潛伏性肺結(jié)核（LTBI）與活動性肺結(jié)核（ATB）提供強(qiáng)有力的支持，為深入了解結(jié)核病的發(fā)病機(jī)制、耐藥機(jī)制及尋找新的治療靶點(diǎn)提供了重要的幫助，具有較好的臨床應(yīng)用前景。在結(jié)核病的組學(xué)研究中，基因組學(xué)研究是最早開展的領(lǐng)域之一，通過使用高通量DNA測序和生物信息學(xué)來分析整個(gè)基因組的功能和結(jié)構(gòu)。在1998年首次對結(jié)核分枝桿菌H37Rv菌株進(jìn)行了全基因組測序，結(jié)果顯示基因表達(dá)產(chǎn)物中40%蛋白質(zhì)有精確的功能[23]。如今隨著技術(shù)不斷發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)有許多改良的新方法，前文已詳細(xì)表述過，現(xiàn)不作過多敘述。

4.1 基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)的生物標(biāo)志物轉(zhuǎn)錄組學(xué)是從RNA水平篩選結(jié)核相關(guān)的特異性差異表達(dá)基因，從而確定生物標(biāo)志物，可有效預(yù)測結(jié)核病進(jìn)展。研究篩選出的3個(gè)轉(zhuǎn)錄標(biāo)志(FCGR1A、ZNF296和C1QB)可區(qū)分ATB和LTBI[24]，其中AUC為97.3%，為結(jié)核病患者靶向治療提供可能。此外對于耐藥檢測具有重要意義，2021年的一項(xiàng)研究顯示7個(gè)基因(TRIM1、9、21、32、33、56、66)能夠區(qū)分利福平耐藥菌株的感染，為RR-TB的發(fā)病機(jī)制提供了新的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)[25]。

4.2 基于蛋白組學(xué)的生物標(biāo)志物蛋白組學(xué)通過分析正常與病理個(gè)體之間蛋白質(zhì)組的差異，為疾病找到新的診斷途徑，設(shè)計(jì)新的治療靶點(diǎn)，利用蛋白組學(xué)篩選結(jié)核病生物標(biāo)志物提高結(jié)核病診斷準(zhǔn)確性。結(jié)核病相關(guān)蛋白質(zhì)可作為潛在的診斷標(biāo)志物用于區(qū)分 LTBI 和ATB。賀仁忠等[26]篩選出8個(gè)蛋白標(biāo)志物，其中Rv1441c、R0494可作為鑒別LTBI和ATB的候選標(biāo)志物。Yang等[27]篩選出8個(gè)蛋白生物標(biāo)志物（I-TAC、I-309、MIG、顆粒溶素、FAP、MEP1B、弗林蛋白酶和LYVE-1），在區(qū)分結(jié)核和非結(jié)核的驗(yàn)證隊(duì)列中AUC為0.915，特異度為84%，敏感度為75%。2021年對161名參與者痰液進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)a-1-酸性糖蛋白兩種亞型（即：ORM1和ORM2）在TB抗原檢測時(shí)顯著增加，可能成為肺結(jié)核顯著的生物標(biāo)志物[28]。

4.3 基于代謝組學(xué)的生物標(biāo)志物代謝組學(xué)是研究生物系統(tǒng)在特定條件下的整體代謝水平，可揭示結(jié)核病發(fā)病和耐藥過程中代謝產(chǎn)物的變化，從而發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)。2022一項(xiàng)研究通過GC-MS和LC-MS/MS分析研究結(jié)核分枝桿菌感染對血清代謝組的影響，發(fā)現(xiàn)了7種代謝物在區(qū)分肺結(jié)核患者與健康組時(shí)表現(xiàn)出較好的性能，可能成為新的生物標(biāo)志物[29]。Berney等[30]利用代謝組學(xué)技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，宿主體內(nèi)S-腺苷甲硫氨酸和蛋氨酸的消耗可導(dǎo)致MTB無法增殖和死亡，因此為開發(fā)有效的抗結(jié)核化療提供了極好的靶點(diǎn)，但作用機(jī)制未完全清楚。代謝組學(xué)研究目前比較少，因此可以通過多組學(xué)聯(lián)合分析，更全面地了解結(jié)核病菌在感染過程中的作用機(jī)制，從而發(fā)現(xiàn)更多的治療靶點(diǎn)。

5 小結(jié)

綜上，當(dāng)前結(jié)核病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法種類非常多，從傳統(tǒng)的試驗(yàn)方法到現(xiàn)在的測序等，有著全方位的研究和探索。各種方法原理上有較大差異，在結(jié)核病診斷中需要綜合運(yùn)用多種技術(shù)和手段，包括痰液檢測、血液檢測、免疫學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷等。臨床需根據(jù)各種診斷方法的優(yōu)缺點(diǎn)選擇最佳方法，而診斷技術(shù)也需不斷發(fā)展和完善，找到一個(gè)具有高靈敏度、高特異度、更加可靠的方法。對于兒童、免疫功能低下等患者，目前診斷及治療還需進(jìn)一步研究。