白甜 黃大躍 劉欣 張興平 利繼東 徐兵劃 顧妍 劉璐 張雪蓮 謝蕓霞 黃雅嫻 孫玉東
摘要: 枯萎病、蔓枯病和白粉病是常見(jiàn)的西瓜真菌性病害,嚴(yán)重影響西瓜的產(chǎn)業(yè)發(fā)展。為篩選出具有枯萎病、蔓枯病、白粉病抗性的西瓜品種或材料,為抗病育種奠定基礎(chǔ),本研究對(duì)44個(gè)西瓜品種或材料分別進(jìn)行枯萎病小種1、小種2、蔓枯病、白粉病苗期抗性鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),蘇創(chuàng)3號(hào)、蘇夢(mèng)5號(hào)、2103WMH0120、2108WME0002兼抗枯萎病小種1、蔓枯病、白粉病3種病害。其中,蘇創(chuàng)3號(hào)與同屬于中果紅瓤類(lèi)型的早佳相比,枯萎病小種1病情指數(shù)下降了95.24%,蔓枯病病情指數(shù)下降了43.99%,白粉病病情指數(shù)下降了52.20%;蘇夢(mèng)5號(hào)與同屬于小果紅瓤類(lèi)型的早春紅玉相比,枯萎病小種1病情指數(shù)下降了96.03%,蔓枯病病情指數(shù)下降了38.89%,白粉病病情指數(shù)下降了51.32%;2103WMH0120與同屬于小果紅瓤類(lèi)型的早春紅玉相比,枯萎病病情指數(shù)下降了98.73%,蔓枯病病情指數(shù)下降了39.75%,白粉病病情指數(shù)下降了69.48%;2108WME0002與同屬于小果黃瓤類(lèi)型的小蘭相比,枯萎病小種1病情指數(shù)下降了98.65%,蔓枯病病情指數(shù)下降了30.90%,白粉病病情指數(shù)下降了51.04%。另外也有不少材料分別表現(xiàn)出了對(duì)枯萎病小種1、枯萎病小種2、蔓枯病、白粉病的抗性。通過(guò)本次試驗(yàn),對(duì)江蘇徐淮地區(qū)自主培育的多個(gè)西瓜品種及重要西瓜材料的苗期抗病性進(jìn)行了初步評(píng)估,為今后抗病品種的推廣及抗病育種工作的開(kāi)展奠定了重要基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞: 西瓜;枯萎病;蔓枯??;白粉??;抗性評(píng)價(jià)
中圖分類(lèi)號(hào):S436.5 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A
文章編號(hào):1002-1302(2024)02-0123-08
西瓜產(chǎn)業(yè)是我國(guó)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展的支柱產(chǎn)業(yè)之一[1]。我國(guó)是西瓜生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó),2020年我國(guó)西瓜產(chǎn)量占世界產(chǎn)量的59.3%,人均消費(fèi)量是世界平均水平的3.2倍[2-3]。近年來(lái),大棚西瓜栽培發(fā)展較快,但由于大棚高溫高濕的環(huán)境條件,連年重茬種植,栽培管理不合理,病害防治不規(guī)范等原因,導(dǎo)致田間西瓜病害種類(lèi)增多,程度加重,直接影響著西瓜的產(chǎn)量和品質(zhì),大大降低了西瓜的商品價(jià)值,對(duì)西瓜的生產(chǎn)造成了很大威脅[4-6]。
西瓜常見(jiàn)病害中真菌性病害的發(fā)生較為嚴(yán)重,其中,枯萎病、蔓枯病、白粉病這3種病害的發(fā)生十分普遍。為減輕病害的危害,選育抗病品種是防治這些病害比較理想的方法之一,而開(kāi)展對(duì)西瓜材料的抗性鑒定是抗病育種的關(guān)鍵。本試驗(yàn)通過(guò)室內(nèi)人工接種,對(duì)江蘇徐淮地區(qū)淮陰農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所蔬菜中心多年來(lái)自主培育的多個(gè)西瓜品種及重要的西瓜材料進(jìn)行了苗期枯萎病、蔓枯病和白粉病的抗病性鑒定,以期為今后西瓜抗病品種的選育及推廣提供參考依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
供試材料:表1為本研究所鑒定的西瓜材料信息。
供試菌株:西瓜枯萎病病菌(Fusarium oxysporum f. sp. niveum)小種1和小種2,由北京大學(xué)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究院饋贈(zèng);西瓜蔓枯病病菌DB-20 (Stagonosporopsis cucurbitacearum),由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院饋贈(zèng);西瓜白粉病病菌采集于淮安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院科研創(chuàng)新基地西瓜種植大棚,經(jīng)鑒定該白粉病病菌屬于單囊殼白粉菌(Podosphaera xanthii,簡(jiǎn)稱(chēng)Px)中的小種2F。
1.2 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)
本次試驗(yàn)于2022年9月15日到2022年12月12日,在淮安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院科研創(chuàng)新基地進(jìn)行。
1.3 方法
1.3.1 材料準(zhǔn)備
需鑒定的西瓜材料種子經(jīng)5%次氯酸鈉溶液浸種10 min后,采用清水沖洗,然后置于恒溫培養(yǎng)箱中32 ℃催芽。待胚根長(zhǎng)至0.5 cm時(shí),將用于枯萎病抗性鑒定的西瓜材料播于裝有珍珠巖的塑料育苗平盤(pán)內(nèi);將用于蔓枯病和白粉病抗性鑒定的材料播于裝有育苗基質(zhì)的32孔育苗穴盤(pán)內(nèi)。生長(zhǎng)室條件設(shè)置為(25±2) ℃ 16 h/(15±2) ℃ 8 h(晝/夜),濕度(65±20)%。確保生長(zhǎng)室無(wú)病蟲(chóng)害,統(tǒng)一肥水管理。
1.3.2 苗期枯萎病抗性鑒定方法
枯萎病病菌接種方法:接種方法參考閆聞等的孢子浸根法[7]。在其基礎(chǔ)上做適當(dāng)改進(jìn),具體為待播種于珍珠巖中的西瓜材料子葉展平,第1張真葉稍出頭即可接種枯萎病。將西瓜幼苗連根輕輕從珍珠巖中拿出,用清水洗掉根部的珍珠巖;接著將西瓜幼苗的根部在濃度為(2~5)×106 個(gè)/mL的枯萎病分生孢子懸浮液中浸15~20 s,該過(guò)程一直采用根攪拌孢子懸浮液;最后將浸過(guò)孢子懸浮液的苗子栽到裝有基質(zhì)的72孔穴盤(pán)中。接種后將植株置于生長(zhǎng)室,澆透水;發(fā)病期間保證穴盤(pán)里的基質(zhì)是濕的但不向下滴水(保證濕度的同時(shí)避免孢子懸浮液流失)。保持生長(zhǎng)室溫度(25±2) ℃ 16 h/(18±2) ℃ 8 h(晝/夜),濕度(90±20)%。于接種后15 d進(jìn)行鑒定材料的病情等級(jí)統(tǒng)計(jì)。
枯萎病發(fā)病等級(jí)標(biāo)準(zhǔn):參照王冠等的標(biāo)準(zhǔn),接種枯萎病后劃分7個(gè)等級(jí)。0級(jí)無(wú)癥狀;1級(jí)子葉邊緣黃化,植株生長(zhǎng)正常;3級(jí)子葉枯萎,植株生長(zhǎng)發(fā)育變緩;5級(jí)植株失水,表現(xiàn)枯萎;7級(jí)整株枯萎死亡[8]。
枯萎病抗性等級(jí)劃分:以病情指數(shù)為指標(biāo)進(jìn)行抗性評(píng)估,病情指數(shù)(DI)=100×∑(各級(jí)病葉數(shù)×各級(jí)代表值)/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高級(jí)代表值)。西瓜材料對(duì)枯萎病的抗性等級(jí)根據(jù)病情指數(shù)分為5級(jí),分別為高抗(HR):0 1.3.3 苗期蔓枯病抗性鑒定方法 蔓枯病病菌接種方法:待播種于基質(zhì)中的西瓜材料第3張真葉完全展開(kāi)即可接種蔓枯病病菌。接種蔓枯病病菌采用點(diǎn)滴接菌法,采用微量移液器在接種部位點(diǎn)滴 10 μL 蔓枯病病菌孢子懸浮液。接種部位為第1、2、3張真葉,每張葉片沿葉脈共滴5滴病菌孢子懸浮液,每張葉片葉柄中間滴1滴,第2張葉的葉腋處滴加1滴,每株共19個(gè)接種點(diǎn)。接種完用噴壺均勻噴灑清水保持葉片濕潤(rùn),并采用保濕罩罩住,勿要挪動(dòng),防止孢子懸浮液滴落。接種后保持24 h黑暗,保濕72 h。中間持續(xù)觀察西瓜苗發(fā)病情況, 感病對(duì)照完全發(fā)病即可揭開(kāi)保濕罩,如發(fā)病不明顯可繼續(xù)保濕至完全發(fā)病,但保濕時(shí)間不宜超過(guò)5 d。保持生長(zhǎng)室晝/夜溫度(25±2) ℃ 16 h/(18±2) ℃ 8 h,濕度(90±20)%。于接種后4、6 d進(jìn)行發(fā)病等級(jí)統(tǒng)計(jì)。 蔓枯病發(fā)病等級(jí)標(biāo)準(zhǔn):0級(jí)無(wú)癥狀;1級(jí)接菌位置零星可見(jiàn)點(diǎn)狀病斑,植株長(zhǎng)勢(shì)健康;3級(jí)接菌位置可見(jiàn)點(diǎn)狀病斑不擴(kuò)展,植株長(zhǎng)勢(shì)健康;5級(jí)接菌葉片均發(fā)病且病斑擴(kuò)展,病斑面積<1/2接菌面積;7級(jí)接菌第2或第3張葉片死亡或病斑擴(kuò)展連片,病斑面積>1/2 接菌面積;9級(jí)接菌第2和第3張葉片死亡或植株死亡。 蔓枯病抗性評(píng)價(jià)指標(biāo):以病情指數(shù)為指標(biāo)進(jìn)行抗性評(píng)估,西瓜材料對(duì)枯萎病的抗性等級(jí)根據(jù)病情指數(shù)分為5級(jí),分別為高抗(HR):0 1.3.4 苗期白粉病抗性鑒定方法 白粉病接種方法:待播種于基質(zhì)中的西瓜材料生長(zhǎng)至2葉1心期即可接種白粉病病菌。接種白粉病病菌采用噴霧接種法。采用小型手待噴霧器將濃度約為1×105個(gè)/mL 的分生孢子懸浮液均勻地噴于西瓜葉片,在葉片上形成一層薄霧即可。接種后先黑暗保濕12~16 h,之后保持晝/夜溫度(26±2) ℃/(18±2) ℃,濕度(75±10)%,弱光。接種后切忌在葉片上澆水,以免將葉片上的孢子沖走。于接種后15 d進(jìn)行病情等級(jí)統(tǒng)計(jì)。 白粉病病情等級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):參照曹燕燕等的標(biāo)準(zhǔn),接種白粉病后劃分5個(gè)等級(jí)。0級(jí)葉片干凈,無(wú)白粉病斑;1級(jí)病斑面積占葉面積的1/3以下,白粉狀病斑模糊不清;2級(jí)病斑面積占葉面積的1/3~2/3,白粉狀病斑較為明顯,但分散不連片;3級(jí)病斑面積占葉面積的2/3以上,白粉狀病斑連片,葉片開(kāi)始變黃;4級(jí)白粉層濃厚,由葉緣向里變褐;5級(jí)葉片變褐壞死斑面積占葉面積的2/3以上,葉緣上卷[9]。 白粉病抗性評(píng)價(jià)指標(biāo):西瓜材料對(duì)白粉病的抗性評(píng)價(jià)根據(jù)病情指數(shù)分為5級(jí),分別為高抗(HR):0 2 結(jié)果與分析 2.1 西瓜品種及材料對(duì)枯萎病小種1的抗性評(píng)價(jià) 對(duì)編號(hào)1~42的西瓜材料進(jìn)行苗期枯萎病小種1浸根法接種,統(tǒng)計(jì)病情等級(jí)并計(jì)算相關(guān)指標(biāo)。由表2可知,枯萎病抗病對(duì)照11S742表現(xiàn)為高抗枯萎病小種1,感病對(duì)照1302WME023表現(xiàn)為高感枯萎病小種1,證明接種結(jié)果有效??剐澡b定結(jié)果具體如下:(1)雜交種西瓜中, 中果紅瓤類(lèi)型有4個(gè)品種表現(xiàn)為高抗,分別是蘇創(chuàng)3號(hào)、2107WME0439、2007WMH0009和2107WME0449; 2111WME0001表現(xiàn)為抗??;其余4個(gè)品種表現(xiàn)為高感。分析結(jié)果可知,蘇創(chuàng)3號(hào)、2107WME0439、2007WMH0009、2107WME0449、2111WME0001、蘇創(chuàng)4號(hào)苗期對(duì)枯萎病小種1的抗性均優(yōu)于早佳。(2) 雜交種西瓜中,小果紅瓤類(lèi)型有6個(gè)品種表現(xiàn)為高抗,分別是蘇夢(mèng)5號(hào)、蘇夢(mèng)9號(hào)、2107WME0443、 1901WMG001、2103WMH0120、2107WME0460;有4個(gè)抗病品種,分別是蘇夢(mèng)2號(hào)、蘇夢(mèng)6號(hào)、蘇夢(mèng)7號(hào)、蘇夢(mèng)10號(hào);僅有對(duì)照品種早春紅玉表現(xiàn)為高感。分析結(jié)果可知,該類(lèi)型中所有的西瓜品種對(duì)枯萎病小種1的抗性均優(yōu)于早春紅玉。(3)雜交種西瓜中,小果黃瓤類(lèi)型有2個(gè)品種表現(xiàn)為高抗,分別是2108WME0002、2205WMH0005;其余品種表現(xiàn)為感病。分析結(jié)果可知,2108WME0002、2205WMH0005對(duì)枯萎病小種1的抗性均優(yōu)于小蘭。(4)自交系材料中,除了2206WMH0326對(duì)枯萎病小種1表現(xiàn)為高感,其余都表現(xiàn)高抗。 2.2 西瓜品種及材料對(duì)枯萎病小種2的抗性評(píng)價(jià) 對(duì)編號(hào)1~42的西瓜材料進(jìn)行苗期枯萎病小種2浸根法接種,統(tǒng)計(jì)病情等級(jí)并計(jì)算相關(guān)指標(biāo)。由表3可知,枯萎病抗病對(duì)照11S742表現(xiàn)為高抗枯萎病小種2,感病對(duì)照1302WME023表現(xiàn)為高感枯萎病小種2,證明接種結(jié)果有效??剐澡b定結(jié)果具體如下:(1)雜交種西瓜中,不論是中果紅瓤類(lèi)型還是小果紅瓤類(lèi)型、小果黃瓤類(lèi)型的西瓜品種均表現(xiàn)為感病。(2)自交系材料中, 有3份材料表現(xiàn)為抗病,分別是2205WMH0018、2205WMH0026、2205WMH0109; 有4份材料表現(xiàn)為中抗,分別是2206WMH0344、2205WMH0014、2205WMH0030、2205WMH0149;其余材料表現(xiàn)為感病。從抗性鑒定結(jié)果可知,大部分西瓜材料對(duì)枯萎病小種2表現(xiàn)為感病,因此,推測(cè)目前淮安地區(qū)枯萎病的優(yōu)勢(shì)小種為小種2。 2.3 西瓜品種及材料對(duì)蔓枯病的抗性評(píng)價(jià) 對(duì)編號(hào)1~34、42、43的西瓜材料進(jìn)行苗期蔓枯病活體點(diǎn)接法接種,統(tǒng)計(jì)病情等級(jí)并計(jì)算相關(guān)指標(biāo)。由表4可知,蔓枯病抗病對(duì)照PI482276對(duì)蔓枯病表現(xiàn)為抗病,感病對(duì)照G38表現(xiàn)為感病,證明接種結(jié)果有效??剐澡b定結(jié)果具體如下:(1)雜交種西瓜中,中果紅瓤類(lèi)型有3個(gè)品種表現(xiàn)為抗病,分別是蘇創(chuàng)3號(hào)、蘇創(chuàng)5號(hào)和2111WME0001;有3個(gè)品種表現(xiàn)為中抗,分別是蘇創(chuàng)1號(hào)、2107WME0439和2107WME0449, 其余品種表現(xiàn)為感病。分析結(jié)果可知,蘇創(chuàng)3號(hào)、蘇創(chuàng)5號(hào)、2111WME0001、蘇創(chuàng)1號(hào)、2107WME0439和2107WME0449對(duì)蔓枯病的抗性均優(yōu)于早佳。(2)雜交種西瓜中,小果紅瓤類(lèi)型的品種2107WME0443表現(xiàn)為抗?。挥?個(gè)品種表現(xiàn)為中抗,分別是蘇夢(mèng)5號(hào)、蘇夢(mèng)6號(hào)、蘇夢(mèng)7號(hào)、蘇夢(mèng)10號(hào)、1901WMG001和2103WMH0120;其余品種表現(xiàn)為感病,分析結(jié)果可知,2107WME0443、蘇夢(mèng)5號(hào)、蘇夢(mèng)6號(hào)、蘇夢(mèng)7號(hào)、蘇夢(mèng)10號(hào)、1901WMG001和2103WMH0120對(duì)蔓枯病的抗性?xún)?yōu)于早春紅玉。(3)雜交種西瓜中,小果黃瓤類(lèi)型的品種2108WME0002表現(xiàn)為中抗,其余品種表現(xiàn)為感病。分析結(jié)果可知,2108WME0002對(duì)蔓枯病的抗性?xún)?yōu)于小蘭。(4)自交系材料中,材料2206WMH0326表現(xiàn)為高抗;有3份材料表現(xiàn)為抗病,分別是2206WMH0332、2206WMH0344和2205WMH0018;有2份材料表現(xiàn)為中抗,分別是2205WMH0014和2205WMH0026;其余表現(xiàn)為感病。 2.4 西瓜品種對(duì)白粉病的抗性表現(xiàn) 對(duì)編號(hào)1~24、40、44的西瓜材料進(jìn)行苗期白粉病病菌噴霧接種,統(tǒng)計(jì)病情等級(jí)并計(jì)算相關(guān)指標(biāo)。由表5可知,白粉病抗病對(duì)照11S742對(duì)白粉病表現(xiàn)為抗病,感病對(duì)照12S94-5表現(xiàn)為高感,證明接種結(jié)果有效??剐澡b定結(jié)果具體如下:(1)雜交種西瓜中,中果紅瓤類(lèi)型的品種蘇創(chuàng)5號(hào)表現(xiàn)為抗病,蘇創(chuàng)1號(hào)和蘇創(chuàng)3號(hào)表現(xiàn)為中抗,其余表現(xiàn)為感病。分析結(jié)果可知,蘇創(chuàng)5號(hào)、蘇創(chuàng)1號(hào)和蘇創(chuàng)3號(hào)對(duì)白粉病的抗性?xún)?yōu)于早佳。(2) 雜交種西瓜中,小果紅瓤類(lèi)型的品種2103WMH0120表現(xiàn)為抗?。惶K夢(mèng)2號(hào)和蘇夢(mèng)5號(hào)表現(xiàn)為中抗;其余表現(xiàn)為高感。分析結(jié)果可知,2103WMH0120、 蘇夢(mèng)2號(hào)和蘇夢(mèng)5號(hào)對(duì)白粉病的抗性?xún)?yōu)于早春紅玉。(3)雜交種西瓜中,小果黃瓤類(lèi)型的品種除小蘭外,均表現(xiàn)為中抗白粉病。 3 討論 近年來(lái),設(shè)施栽培西瓜發(fā)展迅速,給廣大瓜農(nóng)帶來(lái)了顯著的經(jīng)濟(jì)效益,與此同時(shí),由于大棚高溫高濕的環(huán)境條件,栽培管理不合理,病害防治不規(guī)范,連年重茬種植等原因,導(dǎo)致田間病害日益加重。其中,枯萎病、蔓枯病、白粉病等真菌病害是制約西瓜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。目前,防治這些病害主要依賴(lài)化學(xué)防治,但化學(xué)藥劑有毒有害,給人類(lèi)及自然環(huán)境帶來(lái)嚴(yán)重?fù)p傷,選育抗病品種是預(yù)防這些病害發(fā)生最有效的途徑。近年來(lái),隨著西瓜基因組信息的公布,為西瓜抗病基因的挖掘奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ),越來(lái)越多的科研工作者展開(kāi)了關(guān)于西瓜病害的抗性研究,而開(kāi)展對(duì)西瓜品種及材料的抗性鑒定是開(kāi)展這些研究的重要基礎(chǔ)。 本試驗(yàn)通過(guò)室內(nèi)人工接種,對(duì)江蘇徐淮地區(qū)淮陰農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所蔬菜中心多年來(lái)自主培育的多個(gè)西瓜品種及重要的西瓜材料進(jìn)行了苗期枯萎病、蔓枯病和白粉病的抗病性鑒定,分析結(jié)果可知,有4個(gè)兼抗枯萎病小種1、蔓枯病及白粉病3種病害的西瓜或材料。其中,蘇創(chuàng)3號(hào)與同屬于中果紅瓤類(lèi)型的早佳相比,枯萎病病情指數(shù)下降了95.24%,蔓枯病病情指數(shù)下降了43.99%,白粉病病情指數(shù)下降了52.20%;蘇夢(mèng)5號(hào)與同屬于小果紅瓤類(lèi)型的早春紅玉相比,枯萎病病情指數(shù)下降了96.03%,蔓枯病病情指數(shù)下降了38.89%,白粉病病情指數(shù)下降了51.32%;2103WMH0120與同屬于小果紅瓤類(lèi)型的早春紅玉相比,枯萎病病情指數(shù)下降了98.73%,蔓枯病病情指數(shù)下降了39.75%,白粉病病情指數(shù)下降了69.48%;2108WME0002與同屬于小果黃瓤類(lèi)型的小蘭相比,枯萎病病情指數(shù)下降了98.65%,蔓枯病病情指數(shù)下降了30.90%,白粉病病情指數(shù)下降了51.04%(表6)。另外也有不少材料分別表現(xiàn)出了對(duì)枯萎病小種1、枯萎病小種2、蔓枯病、白粉病的抗性。 通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn),有部分品種在抗病方面存在明顯優(yōu)勢(shì),可加大對(duì)于這些品種的推廣,從而促進(jìn)西瓜市場(chǎng)品種多樣化發(fā)展。而對(duì)于抗病表現(xiàn)較好的西瓜材料,可用于下一步的育種試驗(yàn),為西瓜抗病育種奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 參考文獻(xiàn): [1] 馬 超,宮國(guó)義,曾劍波,等. 北京市西瓜甜瓜品種構(gòu)成現(xiàn)狀分析[J]. 中國(guó)瓜菜,2019,32(11):91-93. 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