宋立民，王 宇，徐林通，馬 林，丁子元，姜巨峰，劉肖蓮

(天津市水產(chǎn)研究所，天津 300221)

小丑魚初孵仔魚口裂較小，且一般適宜在水溫(28±3)℃、鹽度20～25的環(huán)境下生長，因此一般選擇SS 型輪蟲作為飼喂餌料。褶皺臂尾輪蟲生命力強、繁殖快、營養(yǎng)豐富、大小適宜、易于培養(yǎng)，是多種魚的開口餌料。通過等位酶研究，Gómez A 等(1995)將該種輪蟲群體分為L、SM 和SS 型3 類，其中SS 型平均體長為(148.7±1.3)微米，平均體寬為(120±0.9)微米(Ciros P J 等，2001)。2022年項目組在天津某水產(chǎn)養(yǎng)殖公司建立了SS型輪蟲培養(yǎng)體系，現(xiàn)將技術(shù)總結(jié)如下。

一、設(shè)施設(shè)備

培養(yǎng)容器規(guī)格為100 厘米×50 厘米×40 厘米的玻璃鋼水槽，配置2 千瓦的加熱棒1 個、1.5 千瓦的充氣泵1只，配套氣石、氣管等。

二、常規(guī)理化指標

培育水溫參考楊章聯(lián)(2006)和江巍(2009)的研究結(jié)果以及自身生產(chǎn)條件，設(shè)定為27～28℃。鹽度參考陳世杰(2004)的方法并結(jié)合小丑魚繁育實際情況，設(shè)定為26～28。光照通過添加白熾燈調(diào)節(jié)，強度為4 400～10 000 勒克斯。光照白天采用自然光、上半夜用燈光，實行光暗比為18∶6的環(huán)境模式(曾憲凱等，2005)。

三、水環(huán)境條件

1.溶氧

高密度輪蟲養(yǎng)殖水體一般需要增加氣石以充入空氣，其作用不僅是為了保障輪蟲生存、繁殖所需的溶氧供應(yīng)，而且能夠起到攪水、防止局部缺氧、使輪蟲和餌料分布均勻的作用，同時由于氣提作用，也能夠使臟物得以聚集，方便清理。雖然褶皺臂尾輪蟲能夠適應(yīng)較廣的溶氧范圍，但從生產(chǎn)實際看，為更高效、穩(wěn)定保證輪蟲的供應(yīng)，有條件的養(yǎng)殖單位可采用劉青華等(2004)的方法，即使用純氧代替空氣作為輪蟲養(yǎng)殖水體的溶氧來源，通過維持高濃度的溶氧可使輪蟲生產(chǎn)密度大大提高。筆者根據(jù)小丑魚的繁育規(guī)模和實際條件，確定SS 型輪蟲培養(yǎng)時溶氧不低于5 毫克/升。

2.pH

pH偏低，表明水環(huán)境酸度增加，水體CO2含量較高，溶氧的飽和值下降，該條件下輪蟲對食物的消化吸收率及孤雌生殖能力均會降低，且某些腐生性敵害生物在酸性條件下也易大量繁殖，嚴重影響輪蟲存活。反之，pH 偏高，則預(yù)示水體環(huán)境非離子氨含量可能增加。因此輪蟲養(yǎng)殖環(huán)境中pH 的設(shè)定和調(diào)節(jié)是獲得高產(chǎn)的必要條件，試驗過程中參考陳世杰(2004)，設(shè)定pH 為8±0.2，并通過換水、沖氣及使用弱酸、弱堿性試劑如小蘇打和冰醋酸等實現(xiàn)pH 的穩(wěn)定。在調(diào)節(jié)輪蟲養(yǎng)殖水環(huán)境pH 時，需要避免幅度過大、對輪蟲造成過度刺激，這就要求對水體環(huán)境pH 的觀察要做到經(jīng)常性和規(guī)律性，一般為每天上、下午各1 次，并做好記錄。

3.氨氮

養(yǎng)殖水環(huán)境總氨氮中的非離子氨是限制褶皺臂尾輪蟲增殖的重要因子，一般情況下高濃度氨氮對輪蟲增殖不利。褶皺臂尾輪蟲可耐受總氨氮濃度為6～10 毫克/升，但養(yǎng)殖水體中非離子氨濃度不能超過1 毫克/升。養(yǎng)殖過程中，氨氮濃度需要每天進行監(jiān)測，若超過臨界值，即采取添加新水或者換水操作，日常生產(chǎn)中可以通過添加一定量硝化細菌來控制養(yǎng)殖環(huán)境的氨氮水平。

4.培養(yǎng)用水

培養(yǎng)用水主要經(jīng)過沙濾、去重金屬離子、紫外燈消毒處理后使用。

四、管理操作

1.接種

經(jīng)培育試驗發(fā)現(xiàn)，SS 型輪蟲接種密度宜在100～150個/毫升，密度過低不利于進行投喂，很難取得群體效益，易造成殘餌過多，同時導(dǎo)致大量原生動物增殖。當接種輪蟲密度超過220 個/毫升時，對投喂和換水等管理操作要求較高，水環(huán)境各項指標變化較快，會對輪蟲產(chǎn)生應(yīng)激影響，此時若不采取稀釋措施，會產(chǎn)生大量休眠卵，非常不利于輪蟲擴繁生產(chǎn)。

2.換水

整體換水操作會損失較多的輪蟲卵，易導(dǎo)致輪蟲增長率迅速下降，并且可能造成輪蟲劇烈應(yīng)激和死亡。因此項目組采用每5天完成1次全換水的做法，吸污與循序漸進式換水相結(jié)合，每天對槽壁尤其是邊角和底部的殘餌、糞便等進行吸污，并通過沉淀和光誘法過濾回收吸出的輪蟲，換掉培養(yǎng)槽1/5～1/4的水。

3.餌料投喂

接種初期采用自培養(yǎng)小球藻2.5×106個細胞/毫升進行輪蟲擴培，之后按照每毫升1 個輪蟲∶(2 萬～10 萬)個藻細胞的比例采用濃縮小球藻投喂。根據(jù)自培養(yǎng)小球藻產(chǎn)量，每天以補水的形式，適當補加新鮮活藻液。養(yǎng)殖過程中的投喂量可根據(jù)水體顏色和水面泡沫產(chǎn)生情況進行控制，當水體顏色變淺，表明藻類已被大量消耗，此時應(yīng)適當補加藻液。一般情況下養(yǎng)殖水體表面泡沫顏色較綠，有可能為投餌量過多所致；泡沫顏色發(fā)白，可能為投餌量過少所致；泡沫顏色為灰褐色，則表明投餌量較適宜。

4.除雜

(1)懸濁物。主要由糞便、殘餌(死藻)、殘體(殼)等及其聚合物組成，量多時會影響收獲作業(yè)，并易滋生病原菌等，可定時采用100～120 目抄網(wǎng)去除。

(2)病原菌。輪蟲培養(yǎng)環(huán)境中，常寄生弧菌屬、不動桿菌屬、假單胞菌屬細菌，若其數(shù)量劇增，可影響輪蟲生產(chǎn)，并在投喂小丑魚后導(dǎo)致魚苗發(fā)病?？稍趽Q水后添加一定數(shù)量的有益菌，如添加光合細菌250 毫克/升，用于抑制有害菌、改善水質(zhì)，并為輪蟲提供營養(yǎng)。

(3)原生動物。輪蟲培養(yǎng)環(huán)境中，常寄生一些鞭毛蟲如滴蟲、波豆蟲以及纖毛蟲如游仆蟲、尾絲蟲等，條件適宜時這些原生動物迅速增加，不僅會消耗有益于輪蟲增殖的細菌，而且會與輪蟲競爭生存空間，對輪蟲生產(chǎn)極為不利，在投喂小丑魚后使魚苗患病風險增加。生產(chǎn)中可結(jié)合換水操作，使用400目左右的篩絹網(wǎng)過濾處理。

(4)橈足類、鹵蟲。對于混雜的橈足類、鹵蟲等，它們的存在與輪蟲產(chǎn)生空間和餌料的競爭，其排泄物會污染養(yǎng)殖環(huán)境，造成生產(chǎn)管理成本增加，在用輪蟲投喂魚苗時帶入育苗池有可能黏附在仔魚身上誘發(fā)魚病。因此需要定時采用100～120目抄網(wǎng)去除。

5.輪蟲計數(shù)

(1)吸管法。采用標準移液管校正1 毫升的吸管，數(shù)出1 毫升有幾滴，并重復(fù)2 次，取平均值。使用小燒杯在輪蟲培養(yǎng)槽充氣頭周圍取樣，用校正吸管吸取燒杯中的樣本，滴1滴在凹玻片上計數(shù)輪蟲數(shù)量，每個樣本觀測5～10 滴，檢測3 個樣本，根據(jù)(滴數(shù)/毫升)×(輪蟲數(shù)/滴)計算出輪蟲密度。若樣本中輪蟲密度較高，可先進行定量稀釋，再按照上述方法計數(shù)。

(2)浮游生物計數(shù)框法。根據(jù)輪蟲密度高低選擇0.1、0.5 或1 毫升浮游生物計數(shù)框，在解剖鏡或者顯微鏡下完成計數(shù)。

6.日常觀察

一是采用透明度較好的燒杯或吸管等容器，在養(yǎng)殖池中隨機取樣，對光觀察，可見生長良好的輪蟲游動迅速、輪盤轉(zhuǎn)動活躍、趨光性強；二是顯微鏡下觀察，生長良好的輪蟲個體壯碩、攝食情況良好、胃腸飽滿，多數(shù)帶夏卵。

五、收獲

采用間疏采收方式。水溫為27℃條件下，經(jīng)過3 天培育，輪蟲密度即可翻倍，而當密度≥200 個/毫升時，繁殖力下降，此時可以通過采收或者擴大培養(yǎng)空間等措施才能使輪蟲正常繁殖。具體操作為：使用400 目紗絹袋，通過虹吸(自吸或水泵)、光誘、網(wǎng)撈等方式將輪蟲集中，清洗后轉(zhuǎn)入小丑魚苗種培育車間進行投喂。