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        宮腔粘連患者經(jīng)陰道超聲血流參數(shù)與子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)的關(guān)系

        2024-03-13 13:19:02
        關(guān)鍵詞:血清

        伍 娟

        湖南省懷化市中醫(yī)醫(yī)院B超科 418000

        宮腔粘連(intrauterine adhesion,IUA)是指發(fā)生在子宮內(nèi)膜損傷后的纖維化病變,相關(guān)資料顯示[1],女性流產(chǎn)后IUA的發(fā)生率可高達(dá)30%左右。該病患者臨床常表現(xiàn)為子宮生理功能缺失、月經(jīng)量減少、周期性腹痛、妊娠異常等情況,嚴(yán)重者可出現(xiàn)繼發(fā)性不孕不育,給患者的身心健康帶來(lái)了極大的危害[2]。因此一旦發(fā)現(xiàn)宮腔粘連的影像學(xué)表現(xiàn),應(yīng)積極采取有效的手段鑒別其患病情況,及早發(fā)現(xiàn)、積極治療。宮腔鏡檢查是目前診斷IUA的金標(biāo)準(zhǔn),但該方法屬于侵入性操作,對(duì)機(jī)體產(chǎn)生一定創(chuàng)傷,陰道二維超聲檢查也是診斷IUA的常用方法,二維超聲雖然可測(cè)量子宮內(nèi)膜厚度,但無(wú)法全面顯示出宮腔整體形態(tài),對(duì)診斷IUA存在一定困難[3]。陰道三維超聲血流參數(shù)可體現(xiàn)出檢查者宮腔血流灌注情況,子宮內(nèi)膜狀況與宮腔血供情況緊密聯(lián)系[4],但陰道超聲血流參數(shù)與子宮內(nèi)膜相關(guān)指標(biāo)之間是否存在關(guān)系尚不清楚。鑒于此,本研究特通過(guò)回顧性分析探討經(jīng)陰道超聲血流參數(shù)與宮腔粘連患者血清ER、PR、VEGF、LIF水平及子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)的關(guān)系,更深入挖掘陰道超聲檢查在此類(lèi)患者中的應(yīng)用價(jià)值。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 對(duì)醫(yī)院2018年10月—2019年10月收治的65例IUA患者的臨床資料(設(shè)為研究組)進(jìn)行回顧,同時(shí)回顧同時(shí)間段在醫(yī)院進(jìn)行全身體檢及陰道超聲檢查的61例健康者的體檢資料(設(shè)為對(duì)照組),均符合納入與排除標(biāo)準(zhǔn)。研究組:年齡23~45歲,平均年齡(35.38±4.36)歲;對(duì)照組:年齡22~48歲,平均年齡(36.45±5.07)歲。2組上述臨床資料相接近(P>0.05),本次研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)檢查證實(shí)研究組為IUA者,對(duì)照組均為健康者;(2)均實(shí)施子宮內(nèi)膜指標(biāo)檢測(cè)、陰道超聲檢查者;(3)IUA患者均有完整的臨床資料,對(duì)照組健康者均有完整的體檢資料;(4)患者同意對(duì)其臨床資料進(jìn)行分析,對(duì)照組健康者同意對(duì)其體檢資料進(jìn)行調(diào)閱和分析。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)重要臟器功能障礙者;(2)伴有急性感染者;(3)伴有其他類(lèi)型生殖系統(tǒng)疾病者;(4)免疫功能異常者;(5)存在精神、認(rèn)知或溝通障礙者;(6)依從性差者;(7)妊娠者;(8)近3個(gè)月內(nèi)獻(xiàn)血者;(9)陰道超聲檢查或子宮內(nèi)膜容受性指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果模糊不清、難以辨認(rèn)者。

        1.2 方法

        1.2.1 陰道三維超聲檢查方法:IUA患者與體檢者均利用GE-VolusonE8超聲診斷儀(美國(guó)GE公司)進(jìn)行檢查,檢查時(shí)間均為月經(jīng)周期的第18~20天,檢查所用陰道三維超聲探頭為RIC5-9,頻率為5~9MHz。排空膀胱,仰臥于檢查床上取截石位,采用探頭對(duì)子宮及其雙附件進(jìn)行檢查,取子宮長(zhǎng)軸矢狀切面作為起始平面,顯示屏上清晰顯出子宮輪廓及內(nèi)膜,之后固定探頭,調(diào)節(jié)三維取樣框范圍,包含整個(gè)宮腔,設(shè)定探頭掃查60°范圍,對(duì)子宮內(nèi)膜感興趣部位三維成像取樣,取樣時(shí)囑托檢查者屏住呼吸,之后進(jìn)行自動(dòng)掃描完成圖像采集取樣。取樣后,對(duì)所獲的圖像采用容積模式進(jìn)行三維重建,得到冠狀面、橫斷面、矢狀面3個(gè)平面的聲像圖,對(duì)其進(jìn)行勾畫(huà)可自動(dòng)得出血流指數(shù)(FI)、血管指數(shù)(VI)、血管化血流指數(shù)(VFI)。

        1.2.2 血清指標(biāo)水平的檢測(cè)方法:所有患者和對(duì)照組均于陰道三維超聲檢查當(dāng)天空腹抽取外周靜脈血5ml,按照3 500r/min轉(zhuǎn)速離心分離15min后,取上層清液分別采用放射免疫法、放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、白血病抑制因子(LIF)水平,所用試劑盒均購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司,所用全自動(dòng)生化分析儀為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司AU5800型。

        1.2.3 子宮內(nèi)膜指標(biāo)表達(dá)的檢測(cè)方法:所有患者進(jìn)行宮腔鏡檢查過(guò)程中提取子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本,將標(biāo)本進(jìn)行生理鹽水消毒,隨后在10%的甲醛溶液中穩(wěn)定,采用免疫組化檢測(cè)方法測(cè)定子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)水平,將穩(wěn)定后的組織經(jīng)石蠟包埋后切片,利用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白—過(guò)氧化物酶連接法進(jìn)行測(cè)定,滴加的鼠抗人ER、PR、VEGF、LIF抗體均由Lecia Novocastra公司提供,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,40℃條件下孵育過(guò)夜,沖洗,切片經(jīng)SP染色,置于CHK型號(hào)Olympus顯微鏡下以400×觀察,共選取5個(gè)視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,ER、PR定位于細(xì)胞核染色,VEGF、LIF定位于細(xì)胞質(zhì)染色,染色程度為無(wú)色、淡棕色、棕色、棕褐色,分別記為0分、1分、2分、3分,以染色范圍<5%、≥5%且<20%、≥20%且<50%、≥50%分別記為0分、1分、2分、3分,求染色程度與染色范圍評(píng)分的總和,將結(jié)果為0~1分者記為蛋白陰性表達(dá),否則記為蛋白陽(yáng)性表達(dá)。每個(gè)切片在高倍鏡下(10×40)進(jìn)行篩選,篩選出陽(yáng)性表達(dá)較強(qiáng)區(qū)域,利用Olympus顯微鏡圖像分析系統(tǒng)對(duì)隨機(jī)選擇的5個(gè)視野彩色圖像進(jìn)行采集與儲(chǔ)存,分析圖像時(shí)首先對(duì)陽(yáng)性目標(biāo)進(jìn)行彩色分割、編輯、定量分析,在取得滿意圖像后,計(jì)算出每個(gè)視野下陽(yáng)性目標(biāo)中的平均光密度(Mean optical density,MOD)值,MOD=sum(IOD)/sum(area)。

        1.3 觀察指標(biāo) (1)對(duì)比2組陰道超聲血流參數(shù)(FI、VI、VFI水平)變化情況。(2)對(duì)比2組血清ER、PR、VEGF、LIF水平。(3)統(tǒng)計(jì)研究組子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF (MOD值)表達(dá)情況。(4)研究組陰道超聲血流參數(shù)與血清子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)的相關(guān)性。

        2 結(jié)果

        2.1 2組陰道超聲血流參數(shù)對(duì)比 研究組FI、VI、VFI水平均低于對(duì)照組(P<0.05),見(jiàn)表1。

        表1 2組陰道超聲血流參數(shù)對(duì)比

        2.2 2組血清ER、PR、VEGF、LIF水平對(duì)比 研究組血清ER、PR水平均低于對(duì)照組(P<0.05),VEGF和LIF水平均高于對(duì)照組(P<0.05),見(jiàn)表2。

        表2 2組血清ER、PR、VEGF、LIF水平對(duì)比

        2.3 研究組子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF (MOD值)表達(dá)結(jié)果 研究組ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)水平(MOD值)分別為(9.74±1.54)、(7.45±1.09)、(2.35±0.27)、(2.59±0.31),見(jiàn)圖1。

        a b

        2.4 研究組陰道超聲血流參數(shù)與血清水平及子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)的相關(guān)性分析 研究組FI、VI、VFI均與血清ER、PR水平及子宮內(nèi)膜ER、PR表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05),與血清VEGF、LIF水平及子宮內(nèi)膜VEGF、LIF表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表3和表4。

        表3 患者陰道超聲血流參數(shù)與血清ER、PR、VEGF、LIF水平的相關(guān)性分析

        表4 患者陰道超聲血流參數(shù)與子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)的相關(guān)性分析

        3 討論

        IUA的發(fā)生機(jī)制尚不明確,宮腔手術(shù)操作不當(dāng)、宮腔感染、放射性環(huán)境等均可導(dǎo)致該病的發(fā)生,當(dāng)女性子宮內(nèi)膜發(fā)生損傷后,短時(shí)間內(nèi)膠原纖維會(huì)出現(xiàn)過(guò)度增生,隨之抑制機(jī)體的內(nèi)膜生長(zhǎng),一旦膠原纖維增生超過(guò)生理限度則會(huì)有瘢痕出現(xiàn),最終導(dǎo)致IUA的發(fā)生[6-7]。診斷IUA的常用方法有宮腔鏡、陰道超聲檢查等,但宮腔鏡檢查存在創(chuàng)傷大、疼痛等問(wèn)題,陰道二維超聲檢查不能全面顯示出宮腔情況,易出現(xiàn)誤診、漏診情況。三維陰道超聲檢查可清晰顯示出患者宮腔冠狀面圖像,可直觀觀察到全面宮腔情況,并可對(duì)患者子宮內(nèi)膜的血流信號(hào)進(jìn)行分析[8]。目前關(guān)于經(jīng)陰道超聲血流參數(shù)是否可作為評(píng)價(jià)IUA患者子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)情況的指標(biāo)尚不明確,仍需進(jìn)一步探討,探索IUA患者陰道超聲血流參數(shù)差異及其與子宮內(nèi)膜相關(guān)指標(biāo)表達(dá)的關(guān)系對(duì)此類(lèi)患者的診斷、治療具有重大的意義。

        本次研究發(fā)現(xiàn),研究組FI、VI、VFI水平均低于對(duì)照組,表明在IUA患者中經(jīng)陰道超聲血流參數(shù)均有典型的異常表現(xiàn),是反映患者疾病狀況的重要參考指標(biāo);研究組IUA患者子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)均存在異常。VI是患者血流信號(hào)的容積在感興趣區(qū)容積的占比;FI反映了感興趣區(qū)內(nèi)的血流平均速度,以0~100之間的數(shù)字表示;VFI可反映患者感興趣區(qū)內(nèi)血流灌注情況[9]。子宮內(nèi)膜與女性囊胚定位、侵入、胚胎著床緊密相關(guān),IUA患者因?yàn)檎尺B處內(nèi)膜無(wú)法正常生長(zhǎng),進(jìn)而導(dǎo)致其血供不佳,血流灌注減少,則表現(xiàn)為內(nèi)部血流信號(hào)弱,故通過(guò)計(jì)算子宮內(nèi)膜內(nèi)血流及血管指數(shù),可對(duì)IUA患者子宮內(nèi)膜血供、粘連情況進(jìn)行判斷[10]。LIF是一種多效性糖蛋白,在細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化中起到重要作用,表達(dá)水平隨著女性月經(jīng)情況發(fā)生變化。研究表明[11],LIF主要在子宮內(nèi)膜中發(fā)揮作用,通過(guò)調(diào)控細(xì)胞中的基因表達(dá)對(duì)胚胎著床結(jié)果產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響子宮內(nèi)膜相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)。雌、孕激素是影響子宮內(nèi)膜功能的重要激素,屬于蛋白質(zhì)分子,通過(guò)與其受體結(jié)合并相互作用,在子宮內(nèi)膜發(fā)育至容受狀態(tài)起到調(diào)節(jié)作用,直接影響胚胎著床、發(fā)育,故ER、PR的表達(dá)水平直接影響子宮內(nèi)膜的功能。VEGF是血管生成因子,具有誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖分裂、促使新血管生成的作用,VEGF表達(dá)水平可反映出子宮內(nèi)膜的血供情況,是胚胎著床過(guò)程中的重要影響因子。既往研究表明[12],在IUA患者中,ER、PR表達(dá)偏低,而VEGF、LIF表達(dá)水平偏高,本研究結(jié)果中血清ER、PR、VEGF、LIF水平及子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)結(jié)果與上述報(bào)道均相符,提示上述指標(biāo)均可作為評(píng)價(jià)IUA患者子宮內(nèi)膜功能的重要指標(biāo)。

        另外,本研究還發(fā)現(xiàn),研究組FI、VI、VFI均與血清ER、PR水平及子宮內(nèi)膜ER、PR表達(dá)均呈正相關(guān),與血清VEGF、LIF水平及子宮內(nèi)膜VEGF、LIF表達(dá)均呈負(fù)相關(guān),表明經(jīng)陰道超聲血流參數(shù)與宮腔粘連患者子宮內(nèi)膜功能有緊密的關(guān)系。分析其原因可能為:雌、孕激素及細(xì)胞生長(zhǎng)因子直接影響著患者的子宮內(nèi)膜功能,雌、孕激素通過(guò)對(duì)子宮內(nèi)膜發(fā)育至容受狀態(tài)的調(diào)節(jié),直接或間接使相關(guān)因子的表達(dá)水平出現(xiàn)變化,對(duì)子宮內(nèi)膜的血流狀況產(chǎn)生影響,進(jìn)而使經(jīng)陰道超聲檢查血流參數(shù)發(fā)生異常;VEGF、LIF的表達(dá)可顯著影響患者的子宮內(nèi)膜營(yíng)養(yǎng)狀況及血供情況,使患者血管、血流情況發(fā)生異常,對(duì)經(jīng)陰道超聲檢查血流參數(shù)產(chǎn)生一定影響[13]。

        綜上所述,IUA患者陰道超聲血流參數(shù)FI、VI,血清及子宮內(nèi)膜ER、PR等均有明顯異常,且陰道超聲血流參數(shù)與子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGF、LIF表達(dá)均有相關(guān)性,提示在IUA患者的診斷中可將陰道超聲血流參數(shù)作為參考,并將其作為評(píng)估子宮內(nèi)膜功能的重要依據(jù),充分利用陰道超聲檢查的價(jià)值。

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