郭盼 郭慶梅* 姚俊修 吳德軍

1.山東中醫(yī)藥大學(xué),山東 濟(jì)南 250355

2.山東省林業(yè)科學(xué)研究院/山東省林木遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250014

接骨木(SambucuswilliamsiiHance),又名扦扦活、九節(jié)風(fēng)、續(xù)骨木、木蒴藋,為忍冬科接骨木屬多年生落葉灌木或小喬木。接骨木始載于唐代《新修本草》,藥性平和,味甘苦,歸肝經(jīng),有續(xù)筋接骨、祛風(fēng)利濕、活血止痛的功效,可用于治療骨折腫痛、跌打損傷、外傷出血等疾病[1]?，F(xiàn)代研究表明接骨木的活性成分包括木脂素類、環(huán)烯醚萜類、黃酮及黃酮苷類、酚酸類等,有抗骨質(zhì)疏松、抗病毒、鎮(zhèn)痛、促進(jìn)骨折愈合等藥理作用[1-2]。

隨著人口老齡化程度的加劇,骨質(zhì)疏松癥逐漸成為世界范圍內(nèi)常見(jiàn)的骨骼疾病之一,傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為骨質(zhì)疏松癥屬“骨痿”“骨枯”等范疇,腎虛精虧,加之正虛邪侵及先天不足等因素,以致骨骼失養(yǎng),骨量減少,骨折風(fēng)險(xiǎn)增加[3];現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究顯示其發(fā)病機(jī)制為成骨細(xì)胞骨形成和破骨細(xì)胞骨吸收失衡。主要表現(xiàn)為骨量減少、骨強(qiáng)度降低、骨微結(jié)構(gòu)破壞、骨脆性增加及骨折風(fēng)險(xiǎn)增加[4]。目前用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物有雙膦酸鹽骨吸收抑制劑、雌激素和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、降血鈣素、組織蛋白酶K抑制劑、分子靶向藥物、成骨藥物、解偶聯(lián)劑-雷尼酸鍶和中藥單體活性成分[5],但患者長(zhǎng)期使用雌激素、雙膦酸鹽等部分西藥后,患骨壞死、血栓、乳腺癌等疾病的概率會(huì)增加[6-7],因此尋找安全性高、毒副作用小的藥物治療骨質(zhì)疏松癥非常必要。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)接骨木莖枝提取物具有較強(qiáng)的抗骨質(zhì)疏松活性,而且接骨木治療不會(huì)使大鼠的子宮重量增加,與雌激素替代療法治療骨質(zhì)疏松癥相比,減少了卵巢癌、乳腺癌等疾病發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)[2]。因此,探究接骨木提取物治療骨質(zhì)疏松癥的活性成分及機(jī)制,可能會(huì)發(fā)現(xiàn)新的安全性更高的藥物。本研究總結(jié)了國(guó)內(nèi)外關(guān)于接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的活性成分和作用機(jī)制的最新研究進(jìn)展,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用接骨木提供參考。

1 接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的活性成分

接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的研究主要集中于木脂素類、酚酸類、三萜類和黃酮類。其中以8-O-4' norlignan為主的8-O-4'類木脂素、以香草酸和阿魏酸為主的酚酸類、以白樺脂酸為主的三萜類、以葛根素為主的黃酮類均具有抗骨質(zhì)疏松的活性。

1.1 木脂素類

接骨木中的木脂素具有抗骨質(zhì)疏松、抗真菌、抗癌等藥理作用[8-9]。近年來(lái),接骨木中的木脂素類化合物在治療骨質(zhì)疏松癥方面的研究得到了重視,研究人員發(fā)現(xiàn)木脂素可以預(yù)防卵巢切除術(shù)導(dǎo)致的大鼠骨質(zhì)疏松,抑制骨密度降低,增加骨強(qiáng)度[8]。目前研究顯示木脂素通過(guò)促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖分化、抑制破骨細(xì)胞的生成和調(diào)控OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路及MAPK非基因組ER途徑等發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用[8,10-11]。

利用大孔樹(shù)脂對(duì)接骨木莖枝60%乙醇提取物進(jìn)行洗脫,研究不同洗脫物對(duì)骨質(zhì)疏松的影響,結(jié)果表明50%和95%乙醇洗脫物抗骨質(zhì)疏松活性最強(qiáng),并且這兩個(gè)洗脫物(因95%乙醇洗脫物的產(chǎn)率很低,以下稱為接骨木50%乙醇洗脫物)主要為木脂素類,說(shuō)明木脂素類有較強(qiáng)的抗骨質(zhì)疏松作用[11]。在去卵巢(ovariectomized,OVX)致骨質(zhì)疏松SD大鼠模型中,接骨木50%乙醇洗脫物在劑量為228 mg/kg時(shí)顯著增加了堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)mRNA、骨鈣素(bone glaprotein,BGP)mRNA及runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(runt related transcription factor 2,Runx2)mRNA的表達(dá),同時(shí)降低抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)mRNA和組織蛋白酶K(cathepsin K,Ctsk)mRNA的表達(dá),并且能通過(guò)增加骨小梁數(shù)量、骨連接密度及骨體積/總體積,減少骨小梁分離及降低結(jié)構(gòu)模型指數(shù),減弱OVX大鼠誘導(dǎo)的骨密度降低和骨小梁微結(jié)構(gòu)的破壞;228 mg/kg的接骨木50%乙醇洗脫物也可通過(guò)增大屈服應(yīng)力、屈服位移、極限荷載及模量等骨力學(xué)參數(shù),顯著抑制OVX大鼠骨強(qiáng)度的降低[8]。在OVX致骨質(zhì)疏松C57BL/6J小鼠模型中,500 mg/kg和1 000 mg/kg的接骨木莖枝60%乙醇提取物顯著降低尿鈣含量,并提高血清鈣水平,從而促進(jìn)成骨細(xì)胞的礦化,且接骨木莖枝60%乙醇提取物治療后,OVX小鼠的骨小梁數(shù)量增加及骨小梁分離減少[12]。1 000 mg/kg的接骨木莖枝60%乙醇提取物顯著增加了核心結(jié)合因子α1(core binding factor α1,Cbfa 1)mRNA的表達(dá),且該劑量下的骨密度、骨連接密度和骨小梁厚度增加[12]。8-O-4' norlignan{(7R,8 S)-1-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-2-[4-(3-hydroxypropyl)-2-methoxyphenoxy]-1,3-propane-diol,PPD}作為接骨木抗骨質(zhì)疏松作用的活性成分,在一定的濃度范圍(10-12～10-8mol/L)顯著增加了小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞MC3T3-E1和大鼠骨肉瘤細(xì)胞UMR106的增殖;在10-9mol/L和10-8mol/L時(shí),顯著促進(jìn)了MC3T3-E1細(xì)胞和UMR 106細(xì)胞的ALP活性;10-8mol/L的PPD增加了ALP mRNA、BGP mRNA的表達(dá)及促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的鈣沉積;在濃度為10-10mol/L和10-8mol/L時(shí),PPD上調(diào)了Runx2 mRNA和骨保護(hù)素(osteoprotegerin,OPG) mRNA表達(dá)水平,并通過(guò)調(diào)控MAPK介導(dǎo)的非基因組雌激素受體(estrogen receptor,ER)信號(hào)通路發(fā)揮治療骨質(zhì)疏松作用[10]。

1.2 酚酸類

接骨木中酚酸類化合物也具有治療骨質(zhì)疏松癥的作用,其可以促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖,調(diào)控MAPK及OPG/RANKL/RANK等信號(hào)通路發(fā)揮保護(hù)作用。酚酸類抗骨質(zhì)疏松活性的代表性成分有香草酸和阿魏酸。

一定濃度范圍內(nèi)(10-12～10-8mol/L)的香草酸(vanilic acid,VA)能刺激UMR106細(xì)胞增殖,10-8mol/L的VA上調(diào)UMR106細(xì)胞中ALP mRNA和OPG mRNA表達(dá)水平及增加BMSCs中的鈣沉積,10-12mol/L的VA顯著增加MC3T3-E1細(xì)胞的ALP活性,10-10mol/L和10-8mol/L的VA可增加UMR106細(xì)胞中BGP mRNA、Runx2 mRNA的表達(dá)和OPG/RANKL比例以及通過(guò)調(diào)控MAPK介導(dǎo)的非基因組ER信號(hào)通路,發(fā)揮治療骨質(zhì)疏松癥的作用[13]。

在OVX致骨質(zhì)疏松SD大鼠模型中,20 mg/kg 阿魏酸(ferulic acid,FA)能使骨小梁數(shù)量和連接增加,極限載荷和彈性模量升高,從而改善股骨生物力學(xué)性能[14]。氧化應(yīng)激是導(dǎo)致骨質(zhì)疏松的因素之一,FA能修復(fù)氧化應(yīng)激導(dǎo)致的大鼠成骨細(xì)胞鈣化結(jié)節(jié)數(shù)量減少及OPG等成骨功能相關(guān)基因表達(dá)水平的降低,從而恢復(fù)成骨細(xì)胞的增殖分化能力[15]。綜上,FA能夠在治療骨質(zhì)疏松癥方面發(fā)揮作用,接下來(lái)的研究需要進(jìn)一步證實(shí)阿魏酸的體內(nèi)有效性與安全性,以期為抗骨質(zhì)疏松藥物的研發(fā)提供相關(guān)依據(jù)。

1.3 三萜類

白樺脂酸(betulinic acid,BA)是三萜類發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用的活性成分,目前研究表明BA主要通過(guò)抑制破骨細(xì)胞分化起到治療骨質(zhì)疏松的作用[16]。在骨髓巨髓細(xì)胞中,10 μmol/mL的BA明顯下調(diào)了TRAP基因的表達(dá),從而抑制核因子-κβ受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞分化;同濃度的BA也調(diào)控破骨細(xì)胞分化過(guò)程中的MAPK、c-Fos及NFATc1信號(hào)通路,抑制ERK、JNK、p38蛋白的磷酸化及c-Fos轉(zhuǎn)錄因子和活化T細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子c1的表達(dá),從而抑制破骨細(xì)胞分化,發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用[16]。另外,在小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW 264.7中,接骨木莖枝60%乙醇提取物在劑量為1、10、100 μg/mL時(shí),能夠減少破骨細(xì)胞生成的數(shù)量,且在10 μg/mL時(shí)作用最佳[12]。因此接骨木三萜類可以直接調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的分化,發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用。

1.4 黃酮類

在鏈脲佐菌素誘發(fā)的昆明小鼠骨質(zhì)疏松實(shí)驗(yàn)中,與模型組相比,200 mg/kg和400 mg/kg的接骨木葉總黃酮提取物顯著升高了血清鈣和ALP水平,并降低P、TRAP及BGP水平,且總黃酮組的骨小梁增厚、骨密度增加、骨基質(zhì)增多、成骨細(xì)胞數(shù)目增多及破骨細(xì)胞減少[17]。另外在維甲酸所致小鼠骨質(zhì)疏松模型中,161 mg/kg和322 mg/kg的接骨木葉總黃酮提取物顯著升高了血清鈣及ALP水平,并且降低P、BGP及TRAP水平[18],以上結(jié)果表明接骨木葉總黃酮提取物對(duì)鏈脲佐菌素和維甲酸誘發(fā)的小鼠骨質(zhì)疏松,均有一定的治療效果。但研究建立的骨質(zhì)疏松模型具有局限性,且相關(guān)機(jī)制研究較匱乏,筆者認(rèn)為今后有必要通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)對(duì)接骨木葉抗骨質(zhì)疏松的具體作用通路深入探究,為接骨木葉治療骨質(zhì)疏松提供理論依據(jù)。

在C57BL/6小鼠骨質(zhì)疏松實(shí)驗(yàn)中,與OVX組相比,葛根素組骨小梁增多,骨髓腔變小,股骨組織結(jié)構(gòu)更致密;葛根素上調(diào)了PTEN、Catalase及Foxo1的基因表達(dá),其作用機(jī)制可能與PTEN-PI3K-AKT通路有關(guān)[19]。Ctsk是蛋白水解酶,能降解I型膠原蛋白,在骨吸收階段發(fā)揮作用[20]。有研究發(fā)現(xiàn),10 nmol/L、100 nmol/L及1 μmol/L的葛根素下調(diào)了TRAP mRNA及Ctsk mRNA表達(dá),從而顯著抑制破骨細(xì)胞的分化[21]。在OVX致骨質(zhì)疏松Wistar大鼠模型中,35 mg/kg的葛根素顯著升高了血清Ca、P水平,并且改善了OVX大鼠的骨組織結(jié)構(gòu),表現(xiàn)為骨小梁數(shù)量增多,骨皮質(zhì)變厚,髓腔明顯縮小等骨組織形態(tài)學(xué)參數(shù)的改變[22]。以上主要活性成分的相關(guān)化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

圖1 接骨木中具有抗骨質(zhì)疏松作用的化合物結(jié)構(gòu)

2 接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的機(jī)制研究

MAPK有4個(gè)亞族:ERK、p38、JNK和ERK5,根據(jù)亞族的不同組成了4條不同的MAPK通路,其中ERK MAPK通路是調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化與骨形成的重要信號(hào)傳導(dǎo)途徑[23]。OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)在調(diào)控骨代謝上有重要作用,接骨木通過(guò)調(diào)節(jié)OPG/RANKL系統(tǒng)抑制破骨細(xì)胞的生成,進(jìn)而抑制骨吸收[2]。OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路和ERK MAPK非基因組ER信號(hào)通路在骨的形成和吸收上有一定的影響,目前研究已證明這幾條信號(hào)通路與接骨木治療骨質(zhì)疏松有關(guān)。

2.1 OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路

OPG、RANKL和核因子-κB受體活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)均是腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)受體超家族成員,其中OPG和RANK均是RANKL的受體,RANKL和RANK結(jié)合會(huì)促進(jìn)破骨細(xì)胞分化,而OPG可以阻礙RANKL和RANK相互作用,競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合RANKL抑制破骨細(xì)胞的產(chǎn)生[24]。體外UMR106細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)可知,接骨木莖枝60%乙醇提取物能顯著上調(diào)UMR106細(xì)胞中OPG mRNA的表達(dá)以及下調(diào)RANKL mRNA的表達(dá)[2]。體內(nèi)研究OVX C57BL/6J小鼠脛骨實(shí)驗(yàn)[12]中,1 000 mg/kg接骨木莖枝60%乙醇提取物抑制了雌激素缺乏導(dǎo)致的OPG/RANKL的降低。綜上,接骨木在體內(nèi)外均通過(guò)上調(diào)OPG/RANKL mRNA表達(dá)比值抑制骨吸收,從而發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用。

2.2 ERK MAPK非基因組ER信號(hào)通路

雌激素可以通過(guò)經(jīng)典的ER途徑和MAPK非基因組ER途徑介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄作用[25]。接骨木活性成分中的VA和PPD是植物雌激素,可以在成骨細(xì)胞中發(fā)揮雌激素樣作用,肖輝輝等[10,13]對(duì)PPD及VA分別進(jìn)行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者均上調(diào)了ERK磷酸化及ERα的磷酸化位點(diǎn)絲氨酸118的表達(dá),說(shuō)明接骨木通過(guò)激活ERK MAPK非基因組ER信號(hào)通路來(lái)抑制骨質(zhì)疏松的發(fā)生。接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制如圖2。

圖2 接骨木治療骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制

3 接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的可能機(jī)制

大多數(shù)生理功能是由多個(gè)器官共同調(diào)節(jié)的,如骨骼的代謝與胃腸道等器官的調(diào)節(jié)密切相關(guān)[26-27],因此接骨木保護(hù)骨骼健康,可能與全身性代謝途徑和某些潛在的代謝物有關(guān)。有研究報(bào)道了接骨木50%乙醇洗脫物治療后,OVX大鼠的脂質(zhì)、氨基酸、色氨酸等代謝產(chǎn)物發(fā)生了顯著變化,推測(cè)這些代謝物可能參與了接骨木的抗骨質(zhì)疏松作用[8,28]。

3.1 氨基酸代謝途徑

支鏈氨基酸(branched chain amino acids,BCAA),尤其其中的亮氨酸,能增加骨小梁密度,對(duì)骨形成發(fā)揮正向作用[29-30]。色氨酸分為L(zhǎng)和D兩種,L-色氨酸能對(duì)成骨細(xì)胞的分化起作用[31]。在OVX老年大鼠模型中,228 mg/kg的接骨木50%乙醇洗脫物能上調(diào)BCAA和色氨酸水平[8],并且代謝組學(xué)分析表明,糞便中的酪氨酸和色氨酸代謝以及血液中的BCAA降解和骨質(zhì)疏松癥顯著相關(guān)[32],因此氨基酸代謝可能有助于接骨木的抗骨質(zhì)疏松作用。

色氨酸的代謝途徑有兩條,代謝物分別為犬尿氨酸和血清素,血清素又稱5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT),根據(jù)合成部位的不同可分為腸源性血清素和腦源性血清素,合成腸源性血清素占全身的95%[33]。血清素不能透過(guò)血腦屏障,因此外周5-HT主要是腸源性血清素。腸源性血清素可以通過(guò)5-HTR1b/CREB/Cyclins信號(hào)級(jí)聯(lián)來(lái)抑制成骨細(xì)胞增殖,叉頭框轉(zhuǎn)錄因子1(forkhead box O1,FOXO1)與成骨細(xì)胞的CREB和轉(zhuǎn)錄激活因子4(activating transcription factor-4,ATF4)有關(guān)。與OVX組相比,140 mg/kg接骨木50%乙醇洗脫物顯著上調(diào)了FOXO1的蛋白表達(dá)及下調(diào)ATF4的蛋白表達(dá),從而減少了FOXO1與ATF4的相互作用,同時(shí)增加了FOXO1與CREB的作用,最終起到促進(jìn)骨形成的效果[28]。色氨酸羥化酶1(tryptophan hydroxylase-1,TPH-1)是合成外周5-HT的限速合成酶,接骨木50%乙醇洗脫物對(duì)TPH-1高表達(dá)細(xì)胞進(jìn)行體外處理,發(fā)現(xiàn)1 μg/mL的接骨木50%乙醇洗脫物顯著降低了TPH-1 mRNA和蛋白的表達(dá),抑制5-HT的合成[8]。Xiao等[28]在此基礎(chǔ)之上,進(jìn)行體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在OVX致骨質(zhì)疏松SD大鼠模型中,140 mg/kg接骨木50%乙醇洗脫物能顯著抑制結(jié)腸中TPH-1蛋白的表達(dá),從而顯著降低了OVX大鼠的血清5-HT水平。腸道微生物可以調(diào)節(jié)腸道粘膜內(nèi)5-HT的合成,并且其中的瘤胃菌科UGC-014和糞桿菌真核菌群與大鼠骨密度呈負(fù)相關(guān),140 mg/kg接骨木50%乙醇洗脫物能顯著降低瘤胃菌科UGC-014和糞桿菌真核菌群的豐度,抑制5-HT的合成,使OVX大鼠骨密度增加[28]。接下來(lái)可以探究接骨木中的主要木脂素對(duì)腸道微生物群和5-HT合成的調(diào)節(jié)作用,進(jìn)一步證實(shí)木脂素的抗骨質(zhì)疏松作用。

3.2 脂質(zhì)代謝途徑

骨骼的健康與脂肪的不飽和指數(shù)有關(guān),飽和脂肪酸能利用非特異性過(guò)氧化作用生成活性氧,活性氧的積累會(huì)導(dǎo)致骨髓細(xì)胞的脂毒性,從而起到抑制成骨細(xì)胞的增殖和分化作用[34]。研究表明228 mg/kg的接骨木50%乙醇洗脫物上調(diào)了花生四烯酸、亞油酸和油酸這3種不飽和脂肪酸的水平,意味著228 mg/kg的接骨木50%乙醇洗脫物處理可能加速脂質(zhì)從飽和脂肪酸向不飽和脂肪酸的代謝,因此脂質(zhì)代謝可能是接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的重要代謝途徑之一[8]。

3.3 抗氧化作用的介導(dǎo)

相比于OVX組,在使用228 mg/kg的接骨木50%乙醇洗脫物處理大鼠后,抗氧化劑血清尿酸水平得到恢復(fù),超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶的水平升高,對(duì)甲酚硫酸鹽誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生的作用及氧化應(yīng)激標(biāo)記物丙二醛水平的增加受到抑制,氧化作用減弱,這表明接骨木50%乙醇洗脫物治療骨質(zhì)疏松癥的作用很可能與抗氧化系統(tǒng)的介導(dǎo)有關(guān)[8]。接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的可能機(jī)制如圖3。

圖3 接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的可能機(jī)制[8]

4 結(jié)語(yǔ)

國(guó)內(nèi)外研究表明接骨木能夠治療骨質(zhì)疏松和骨折,有較強(qiáng)的骨保護(hù)作用,這與古籍記載的接骨木續(xù)筋接骨的功效相一致。對(duì)接骨木發(fā)揮骨保護(hù)作用的有效部位研究主要集中在莖枝和根皮,葉和果實(shí)僅有少量研究。其中接骨木根皮在治療骨折方面有良好的活性,接骨木莖枝和葉在治療骨質(zhì)疏松癥方面有較好的藥理效果,此外接骨木果實(shí)中的紅景天苷和蘆丁均有一定的成骨作用,說(shuō)明接骨木果實(shí)具有治療骨質(zhì)疏松癥的潛力[35]。接骨木莖枝中含有多種治療骨質(zhì)疏松癥的成分,比如木脂素類、酚酸類、三萜類,其中木脂素類和酚酸類能通過(guò)影響成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)及調(diào)控ERK MAPK通路等,多途徑調(diào)節(jié)來(lái)減少骨質(zhì)疏松的發(fā)生。木脂素通過(guò)上調(diào)ALP、OPG和Runx2的mRNA水平及下調(diào)Ctsk和TRAP的mRNA水平來(lái)刺激成骨細(xì)胞的分化、抑制破骨細(xì)胞的生成;通過(guò)增加OPG/RANKL,調(diào)節(jié)OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路抑制破骨細(xì)胞生成;通過(guò)上調(diào)ERK磷酸化及增加ERα的磷酸化位點(diǎn)絲氨酸118的表達(dá),調(diào)控ERK MAPK非基因組ER信號(hào)通路促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化。另外,在全身性代謝過(guò)程中,木脂素類治療骨質(zhì)疏松可能與氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝的潛在代謝物有關(guān)。

盡管現(xiàn)代研究對(duì)接骨木及其活性成分在抗骨質(zhì)疏松方面的研究已不斷深入,但仍存在以下問(wèn)題:(1)對(duì)接骨木葉和果實(shí)治療骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)研究較少。在后期的實(shí)驗(yàn)研究中,可以比較接骨木莖枝和葉治療骨質(zhì)疏松癥的效果及對(duì)接骨木果實(shí)進(jìn)行藥效學(xué)驗(yàn)證,為接骨木葉和果實(shí)的深入研究提供依據(jù);(2)目前對(duì)接骨木抗骨質(zhì)疏松作用的研究大多基于體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),缺乏相關(guān)的臨床研究,且PPD、VA等接骨木活性成分的作用機(jī)制研究仍停留在體外實(shí)驗(yàn),其量-效-毒關(guān)系及成藥性也尚未系統(tǒng)闡述。后期應(yīng)加強(qiáng)對(duì)接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的臨床實(shí)驗(yàn)研究,同時(shí)對(duì)活性成分治療骨質(zhì)疏松癥的作用進(jìn)行體內(nèi)有效性及安全性評(píng)價(jià),為接骨木進(jìn)入臨床治療骨質(zhì)疏松癥奠定基礎(chǔ);(3)接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的信號(hào)通路缺少深入系統(tǒng)性研究,且不夠全面,中藥多途徑、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)決定了接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的信號(hào)通路應(yīng)有多條,其復(fù)雜性與交叉性可能是未來(lái)研究的重點(diǎn)與難點(diǎn)。后續(xù)對(duì)于接骨木治療骨質(zhì)疏松癥的信號(hào)通路應(yīng)進(jìn)行全面系統(tǒng)性研究,為中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松癥提供強(qiáng)有力的科學(xué)證據(jù)。