王 娟 于 文

西安開米股份有限公司，陜西西安，710075

除螨劑R301是一種高效、廣譜、安全的除螨殺菌劑，能夠添加到肥皂、洗衣粉、洗衣液等洗滌用品中，起到除螨殺菌的作用。市面上有些除螨洗衣液中添加除螨劑R301類成分，但是卻沒有相應(yīng)的檢測(cè)方法，文獻(xiàn)中大多是關(guān)于除螨劑R301的殺滅效果或者除螨洗衣液的合成工藝[1-2]。因此，研究并開發(fā)一個(gè)關(guān)于除螨洗衣液中防腐劑除螨劑R301含量的檢測(cè)方法很有必要，可以檢測(cè)除螨洗衣液中是否添加除螨劑R301及其含量，讓消費(fèi)者更放心地使用除螨洗衣液。為此，筆者采用高效液相色譜法，確定了適宜的檢測(cè)波長(zhǎng)，有效去除干擾，以期建立一種準(zhǔn)確性高、可靠性強(qiáng)、適用性廣的檢測(cè)方法。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器及試劑

儀器：UV6000LP（二極管陣列檢測(cè)器）液相色譜儀，Thermo Finnigan公司。

甲醇：色譜純，德國(guó)Merck公司。

除螨劑R301：標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98.0%，上海輕工業(yè)研究所有限公司）。

冰醋酸：分析純，重慶北碚精細(xì)化工廠。

超純水：自制。

95%乙醇：分析純。

1.2 色譜條件

色譜柱：AcclaimTM120A，250 mm×4.6 mm。

柱溫：室溫。

進(jìn)樣方式：20 μL閥進(jìn)樣。

檢測(cè)波長(zhǎng)：258 nm。

流速：1.0 mL/min。

流動(dòng)相：甲醇∶純水∶醋酸＝65∶35∶0.3，用0.45 μm濾膜過濾。

洗脫方式：等度洗脫。

1.3 溶液的配制及樣品處理

1.3.1 流動(dòng)相的配制

流動(dòng)相：將甲醇、純水、冰醋酸按65∶35∶0.3的比例混勻，用0.45 μm濾膜過濾，再用超聲振蕩脫氣10 min，備用。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

稱取1.048 5 g除螨劑R301標(biāo)準(zhǔn)樣品于100 mL容量瓶中，用95%乙醇稀釋至刻度，再繼續(xù)稀釋配制一系列不同質(zhì)量濃度的樣品（2.097 μg/mL、4.194 μg/mL、10.485 μg/mL、41.940 μg/mL、69.900 μg/mL、104.850 μg/mL、209.700 μg/mL）備用。

1.3.3 樣品溶液的制備

精確稱量5.0000 g樣品于50 mL容量瓶中，用95%乙醇稀釋，超聲振蕩，定容至刻度備用。

2 結(jié)果和討論

2.1 流動(dòng)相的選擇

主要進(jìn)行甲醇/水、甲醇/水/醋酸與乙腈/水、乙腈/水/醋酸的篩選，并根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整其配比，以達(dá)到最佳分離效果并減少干擾，最后看哪個(gè)體系比較適合除螨洗衣液中除螨劑R301的檢測(cè)。實(shí)際實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)乙腈/水/醋酸體系效果跟甲醇體系效果相似，但是乙腈成本高。經(jīng)過綜合比較分析，總結(jié)出流動(dòng)相為甲醇∶純水∶醋酸＝65∶35∶0.3（體積比，v/v）時(shí)，等度洗脫能達(dá)到最佳分離效果、基線平穩(wěn)和減少干擾，比較適合本項(xiàng)目檢測(cè)。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

除螨劑R301最大吸收波長(zhǎng)（圖1）為233 nm和258 nm。選擇258 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，通過添加法，把除螨劑R301加入洗衣液樣品中，得到樣品中添加除螨劑R301的紫外色譜圖，對(duì)比除螨劑R301的紫外色譜圖（圖2）、樣品的紫外色譜圖（圖3）及添加除螨劑R301的樣品溶液紫外色譜圖（圖4），判定出樣品中除螨劑R301的色譜峰。其目標(biāo)色譜峰與其他色譜峰分離度高，干擾峰少，提高了樣品中除螨劑R301的檢測(cè)精度，故選擇258 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

圖1 樣品光譜圖

圖2 除螨劑R301的紫外色譜圖

圖3 樣品的紫外色譜圖

圖4 樣品中添加除螨劑R301的紫外色譜圖

2.3 線性關(guān)系

在上述色譜條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，采用濃度-峰面積外標(biāo)法定量，配制質(zhì)量濃度為2.097 μg/mL、4.194 μg/mL、10.485 μg/mL、41.940 μg/mL、69.900 μg/mL、104.850 μg/mL、209.700 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1。由實(shí)驗(yàn)得線性回歸方程為y＝0.0002x-0.4479，R2＝1（圖5），其中y為除螨劑R301濃度（μg/mL）、x為除螨劑R301峰面積、r為相關(guān)系數(shù)，r值大于0.99，說明在除螨劑R301濃度為2.097～209.7 μg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好，除螨洗衣液樣品黏度較高，需要稀釋定容后進(jìn)樣檢測(cè)。

圖5 除螨劑R301標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性圖譜

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液

2.4 重復(fù)性

精確稱取1.048 5 g含除螨劑R301的樣品于100 mL容量瓶中，用95%乙醇溶解并稀釋到刻度，搖勻；吸取1 mL上述溶液于250 mL容量瓶中，用95%乙醇稀釋到刻度，搖勻，備用。按此方法配制6份溶液，進(jìn)行6次檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

由表2中實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，此樣品檢測(cè)結(jié)果RSD為2.65%，說明方法誤差小，具有良好的重復(fù)性。

2.5 精密度

精確稱取1.048 5 g含除螨劑R301的樣品于100 mL容量瓶中，用95%乙醇溶解并稀釋到刻度、搖勻；吸取1 mL上述溶液于100 mL容量瓶中，用95%乙醇稀釋到刻度，搖勻；再吸取1 mL上述溶液于25 mL容量瓶中，用純水稀釋到刻度，搖勻，備用。將此標(biāo)準(zhǔn)溶液檢測(cè)6次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 精密度實(shí)驗(yàn)

由表3中實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，RSD為2.16%，說明方法誤差小，精密度比較好。

2.6 回收率

回收率實(shí)驗(yàn)采取在已知含量（除螨劑R301含量6.65 μg/mL）的市售樣品1作為基質(zhì)樣品，加入已知質(zhì)量濃度的除螨劑R301標(biāo)準(zhǔn)溶液2；精確稱量5.000 0 g含除螨劑R301的樣品于50 mL容量瓶中，加入2 mL或4 mL濃度為104.85 μg/mL除螨劑R301標(biāo)準(zhǔn)溶液2，用95%乙醇溶解并稀釋至刻度，超聲振蕩，定容至刻度備用，利用選定的色譜條件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 回收率實(shí)驗(yàn)（n＝6）

由表4可知，回收率在99.1%～100.5%，滿足分析要求。

2.7 市售樣品的測(cè)試結(jié)果

精確稱量5.000 0 g市售樣品于50 mL容量瓶中，用95%乙醇稀釋，超聲振蕩，定容至刻度備用。測(cè)定樣品中的除螨劑R301含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。

表5 樣品中除螨劑R301的測(cè)試結(jié)果

由表5中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，兩組市售樣品的6次結(jié)果的RSD分別為1.72%和1.25%，說明方法誤差小，平行性比較好。

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法測(cè)定除螨洗衣液中除螨劑R301的含量，方法簡(jiǎn)便、迅速，精密度高。標(biāo)準(zhǔn)溶液在2.097～209.7 μg/mL線性相關(guān)，回收率為99.1%～100.5%。此方法精確、可靠，可作為產(chǎn)品質(zhì)量控制的檢測(cè)方法。