鄒敏，孫應(yīng)中，魏艷妮，官煥春

作者單位：重慶市開州區(qū)人民醫(yī)院麻醉科，重慶 405400

阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，主要表現(xiàn)為漸行性記憶減退、認(rèn)知功能減退等，其主要病理特征是神經(jīng)細(xì)胞外β 淀粉樣蛋白（amyloid-β，Aβ）沉積［1］。海馬區(qū)作為學(xué)習(xí)和記憶的關(guān)鍵腦區(qū)，在AD 早期階段極易受到損害［2］。七氟烷是目前臨床上普遍使用的吸入式揮發(fā)性麻醉劑［3］，研究表明，七氟烷吸入可增加Aβ的寡聚肽沉積產(chǎn)生神經(jīng)毒性［4］，通過上調(diào)腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α 和白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1β 等炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡，以及隨后的認(rèn)知障礙。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，七氟烷對(duì)老年大鼠認(rèn)知能力有顯著的損傷［5］。因此，對(duì)于術(shù)前患有AD 或具有AD 傾向的病人應(yīng)用七氟烷后，是否進(jìn)一步加重其認(rèn)知功能障礙仍有待探討。2021 年8 月至2022 年8 月，本研究擬評(píng)價(jià)七氟烷吸入對(duì)Aβ 誘導(dǎo)的AD 模型大鼠認(rèn)知功能障礙及海馬組織神經(jīng)炎癥和神經(jīng)元凋亡的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無特定病原體級(jí)12 周齡雄性Sprague-Dawley 大鼠32 只，體質(zhì)量230～280 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，使用許可證號(hào)：SYXK（京）2021-0010，飼養(yǎng)于重慶市開州人民醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。大鼠置于自然光照條件下，室內(nèi)溫度約25 ℃，相對(duì)濕度約50%；給予大鼠自由飲食，適應(yīng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。本研究符合一般動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理學(xué)原則。

1.2 主要試劑材料寡聚Aβ1-40溶液（Sigma，美國(guó)）；兔源單克隆膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）抗體、兔源單克隆離子鈣接頭蛋白分子1（IBA1）抗體、兔源單克隆B 淋巴細(xì)胞瘤-xL（Bcl-xL）抗體、兔源多克隆胱天蛋白酶-9（caspase-9）抗體、兔源單克隆腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）抗體和兔源單克隆晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）（Santa Cruz，美國(guó)）；兔源多克隆β 肌動(dòng)蛋白（β-actin）抗體（BioVision，美國(guó)）；Aβ1-40酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒（碧云天，上海）；七氟烷（恒瑞醫(yī)藥有限公司，上海）。

1.3 動(dòng)物模型的建立和分組

1.3.1 雙側(cè)海馬內(nèi)注射Aβ1-40構(gòu)建AD 模型配置濃度為5 g/L 的Aβ1-40溶液，37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1 周后4 ℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。腹腔注?0%水合氯醛（250 mg/kg）麻醉，將大鼠固定于腦立體定位儀上，注射部位選擇在海馬CA1 區(qū)（前囟后3.0 mm，中線外側(cè)2.2 mm，顱骨表面下3.5 mm）。2 個(gè)不銹鋼注射器通過引導(dǎo)套管插入尖端下方0.5 mm 處，在5 min 內(nèi)將2 μL 的0.6%生理鹽水（NS）或Aβ1-40溶液輕輕地緩慢注入CA1 區(qū)兩側(cè)。留針10 min，使注射溶液充分浸潤(rùn)。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組采用隨機(jī)數(shù)字表法，將32只大鼠分為四組：NS+氧氣組、NS+七氟烷組、Aβ+氧氣組和Aβ+七氟烷組，每組8只。

1.3.3 七氟烷吸入注射NS 或Aβ1-4014 d 后，各組大鼠分別暴露于2.5%七氟烷或30%氧氣中4 h。七氟烷的吸入方法描述如下：大鼠在自制的麻醉室（50 cm×30 cm×30 cm）吸入七氟烷。麻醉室保持在37 ℃溫水浴中，內(nèi)部有2個(gè)通氣孔：上層通氣孔與麻醉泵相連，下層通氣孔與氣體監(jiān)測(cè)器相連。首先在麻醉室中用5%的七氟烷對(duì)NS+七氟烷組和Aβ+七氟烷組的大鼠進(jìn)行麻醉，2 min 后大鼠昏迷，用2.5%七氟烷和30%氧氣持續(xù)吸入4 h（流速1.5 L/min）。NS+氧氣組和Aβ+氧氣組大鼠在麻醉室中僅給予30%氧氣吸入4 h。

1.4 觀察吸入七氟烷大鼠的生命體征NS+七氟烷組和Aβ+七氟烷組大鼠吸入5%七氟烷輕度麻醉后，將血?dú)夥治鰞x動(dòng)脈導(dǎo)管插入大鼠頸動(dòng)脈，另一端連接壓力傳感器。監(jiān)測(cè)大鼠持續(xù)吸入2.5%七氟烷4 h 的血液動(dòng)力學(xué)參數(shù)：平均動(dòng)脈壓（MAP）、心率、pH、動(dòng)脈血二氧化碳分壓（PaCO2）、動(dòng)脈血氧分壓（PaO2）和碳酸氫根（HCO3-）。

1.5 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)（MWM）水迷宮的主要組成部分是一個(gè)圓形水池（直徑160 cm，高50 cm），并根據(jù)池壁上的4 個(gè)等距點(diǎn)分為4 個(gè)相等的象限（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ）。平臺(tái)放置在第Ⅳ象限中心的水面下2 cm 處，其直徑為15 cm。游泳試驗(yàn)的方法如下：將大鼠放在4 個(gè)不同象限的水池中，面對(duì)池壁，允許大鼠自由游動(dòng)，直到找到隱藏在水底的平臺(tái)。用Any-Maze 視頻追蹤系統(tǒng)記錄大鼠的游泳速度和逃逸潛伏期（大鼠從進(jìn)入水中到爬上平臺(tái)的時(shí)間）。若大鼠在90 s 內(nèi)沒有找到平臺(tái)，它們將被引導(dǎo)到平臺(tái)上休息30 s，逃逸潛伏期被記錄為90 s。定位航行試驗(yàn)后1 d，四組大鼠接受雙側(cè)海馬內(nèi)注射NS 或Aβ，14 d 后，在2.5%七氟醚或30%氧氣中暴露4 h。暴露后7 d，所有大鼠接受第2 次MWM。移除平臺(tái)，對(duì)所有大鼠進(jìn)行空間探測(cè)測(cè)試，并記錄探索原始平臺(tái)的時(shí)間。然后，平臺(tái)被移到原來象限的另一側(cè)（第Ⅱ象限）。所有大鼠在新平臺(tái)上接受了4 次測(cè)試。測(cè)試前，將大鼠放在新平臺(tái)上30 s，然后按照上述方法進(jìn)行測(cè)試，并記錄游泳速度和逃逸潛伏期。取4次結(jié)果的平均值作為每只大鼠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.6 ELISA 測(cè)定大鼠海馬區(qū)Aβ1-40脫頸處死大鼠后，收集海馬組織樣本，立即放入冰NS（25 mL/g）中。用勻漿器在4 ℃下研磨海馬組織。4 ℃離心（2 500 r/min，半徑10 cm，15 min）獲取上清液，轉(zhuǎn)移至干凈的小型離心管中。根據(jù)試劑盒說明書，用ELISA 法測(cè)量組織上清液中Aβ1-40表達(dá)水平，采用酶標(biāo)儀在450 nm處讀取吸光度。

1.7 蛋白質(zhì)印跡法采集海馬區(qū)標(biāo)本并置于冰磷酸緩沖鹽溶液（PBS）中，4 ℃下加入蛋白裂解緩沖液和蛋白酶抑制劑，用勻漿器研磨海馬組織。裂解1 h，4 ℃、12 000 r/min（半徑10 cm）離心20 min。蛋白-銅螯合化學(xué)試劑法檢測(cè)樣本蛋白含量，煮沸變性。應(yīng)用聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)40 μg 總蛋白進(jìn)行電泳。濕轉(zhuǎn)將蛋白轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜上，8%脫脂牛奶封閉非特異性蛋白1 h，分別置于抗IBA1抗體（1∶500）、抗GFAP 抗體（1∶500）、抗Bcl-xL 抗體（1∶1 000）、抗caspase-9 抗體（1∶2 000）、抗RAGE 抗體（1∶1 000）和抗BDNF 抗體（1∶1 000）中4 ℃過夜，辣根過氧化物酶結(jié)合的二抗室溫孵育1 h。采用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法顯示蛋白條帶，Image-Pro Plus 6.0 軟件進(jìn)行灰度分析。

1.8 免疫組織化學(xué)染色海馬組織取出后用10%多聚甲醛固定24 h，常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片（5 μm）。將切片與GFAP（1∶1 000）或IBA1（1∶500）抗體在4 ℃下孵育至少18 h。辣根過氧化物酶結(jié)合的山羊抗兔免疫球蛋白G 抗體（1∶500）作為二抗在室溫下孵育1 h，PBS 清洗，封片。光鏡下拍照記錄，放大倍數(shù)為400倍。

1.9 實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）用組織勻漿器在Qiagen 裂解緩沖液中提取組織中的總RNA，并按照說明書用Qiagen RNeasy 小柱進(jìn)行RNA 純化。使用NanoDrop ND-1000 分光光度計(jì)對(duì)RNA 進(jìn)行定量，并根據(jù)說明書，用NuGEN's Ovation 系統(tǒng)進(jìn)行擴(kuò)增和生物素標(biāo)記。將50 ng 的RNA 加入SYBR qPCR 混合液中進(jìn)行qRT-PCR。分組樣品中的目標(biāo)基因表達(dá)以β-actin 進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。引物序列設(shè)計(jì)如下，IL-1β 正向：5′-GCTGTGGCAGCTACCTATGTCTTG-3′，反向：5′-AGGTCGTCATCATCCCACGAG-3′；核因子-κB（NF-κB）正向：5′-ACTGCCGGGATGGCTTCTAT-3′，反向：5′-CTGGATGCGCTGGCTAATGG-3′；誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）正向：5′-TCCACCTCCTTCCCTGAACTGG-3′，反向：5′-TGATGACGGTGATGAAGAATAT-3′；β-actin正向：5′-CTTAGTTGCGTTACACCCTTTCTTG-3′，反向：5′-CTGTCACCTTCACCGTTCCAGTTT-3′。每個(gè)樣本重復(fù)檢測(cè)3 次，2-ΔΔCt法計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料以表示，兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步多組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 七氟烷吸入對(duì)大鼠生命體征的影響動(dòng)脈監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，維持吸入2.5%七氟烷在NS+七氟烷組和Aβ+七氟烷組大鼠4 個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)（1、2、3、4 h）的MAP、心率、pH、PaCO2、PaO2和HCO3-的測(cè)量值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）。見表1。

表1 七氟烷吸入對(duì)大鼠生命體征的影響/

表1 七氟烷吸入對(duì)大鼠生命體征的影響/

注：MAP為平均動(dòng)脈壓，PaCO2為動(dòng)脈血二氧化碳分壓，PaO2為動(dòng)脈血氧分壓，HCO3-為碳酸氫根，NS為生理鹽水，Aβ為β淀粉樣蛋白。

?

2.2 七氟烷對(duì)大鼠認(rèn)知能力以及海馬區(qū)Aβ1-40水平的影響MWM 結(jié)果顯示，與NS+氧氣組比較，Aβ+氧氣組大鼠原始平臺(tái)探索時(shí)間減少，逃逸潛伏期延長(zhǎng)，Aβ1-40蛋白表達(dá)增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與Aβ+氧氣組相比，Aβ+七氟烷組大鼠原始平臺(tái)探索時(shí)間減少，逃逸潛伏期和Aβ1-40蛋白表達(dá)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。NS+氧氣組和NS+七氟烷組大鼠之間原始平臺(tái)探索時(shí)間、逃逸潛伏期和Aβ1-40蛋白表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 各組大鼠認(rèn)知功能、海馬區(qū)Aβ1-40表達(dá)比較/

表2 各組大鼠認(rèn)知功能、海馬區(qū)Aβ1-40表達(dá)比較/

注：Aβ為β淀粉樣蛋白，NS為生理鹽水。①與NS+氧氣組相比，P＜0.05。②與Aβ+氧氣組相比，P＜0.05。

?

2.3 七氟烷對(duì)大鼠海馬區(qū)GFAP 和IBA1 表達(dá)的影響各組大鼠海馬組織表達(dá)GFAP 和IBA1 蛋白的星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞分布在CA1 區(qū)各層。與NS+氧氣組比較，Aβ+氧氣組大鼠海馬區(qū)GFAP和IBA1 蛋白表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與Aβ+氧氣組相比，Aβ+七氟烷組大鼠海馬區(qū)GFAP和IBA1 蛋白表達(dá)進(jìn)一步增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。NS+氧氣組和NS+七氟烷組大鼠之間GFAP 和IBA1 蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 各組大鼠GFAP和IBA1表達(dá)比較/（個(gè)/高倍視野，）

表3 各組大鼠GFAP和IBA1表達(dá)比較/（個(gè)/高倍視野，）

注：GFAP 為膠質(zhì)纖維酸性蛋白，IBA1 為離子鈣接頭蛋白分子1，NS為生理鹽水，Aβ為β淀粉樣蛋白。①與NS+氧氣組相比，P＜0.05。②與Aβ+氧氣組相比，P＜0.05。

?

2.4 七氟烷吸入對(duì)大鼠海馬組織Bcl-xL、caspase-9、RAGE 和BDNF 蛋白表達(dá)的影響與NS+氧氣組比較，Aβ+氧氣組大鼠海馬區(qū)caspase-9 和RAGE 蛋白的表達(dá)增高，Bcl-xL 和BDNF 蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）。與Aβ+氧氣組相比，Aβ+七氟烷組大鼠海馬組織caspase-9 和RAGE 蛋白的表達(dá)量明顯增高，Bcl-xL 和BDNF 蛋白表達(dá)量顯著降低（P＜0.05）。而NS+O2組和NS+sevo 組之間的Bcl-xL、caspase-9、RAGE 和BDNF 的蛋白表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表4，圖1。

圖1 各組大鼠海馬中Bcl-xL、caspase-9、BDNF、RAGE蛋白表達(dá)水平

表4 各組大鼠海馬區(qū)Bcl-xL、caspase-9、BDNF、RAGE蛋白表達(dá)水平比較/

表4 各組大鼠海馬區(qū)Bcl-xL、caspase-9、BDNF、RAGE蛋白表達(dá)水平比較/

注：Bcl-xL為B淋巴細(xì)胞瘤-xL，caspase-9為胱天蛋白酶-9，BDNF為腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，RAGE為晚期糖基化終末產(chǎn)物受體，NS為生理鹽水，Aβ為β淀粉樣蛋白。①與NS+氧氣組相比，P＜0.05。②與Aβ+氧氣組相比，P＜0.05。

?

2.5 七氟烷吸入對(duì)大鼠海馬組織IL-1β、NF-κB 和iNOS mRNA 表達(dá)的影響與NS+氧氣組比較，Aβ+氧氣組大鼠海馬區(qū)IL-1β、NF-κB 和iNOS mRNA 表達(dá)升高（P＜0.05）。與Aβ+氧氣組相比，Aβ+七氟烷組大鼠海馬區(qū)IL-1β、NF-κB 和iNOS mRNA 表達(dá)明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而NS+O2組和NS+sevo 組之間的IL-1β、NF-κB 和iNOS mRNA 表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表5。

表5 各組大鼠海馬區(qū)IL-1β、NF-κB和iNOS的mRNA相對(duì)表達(dá)量比較/

表5 各組大鼠海馬區(qū)IL-1β、NF-κB和iNOS的mRNA相對(duì)表達(dá)量比較/

注：IL-1β 為白細(xì)胞介素-1β，NF-κB 為核因子-κB，iNOS 為誘導(dǎo)型一氧化氮合酶，NS為生理鹽水，Aβ為β淀粉樣蛋白。①與NS+氧氣組相比，P＜0.05。②與Aβ+氧氣組相比，P＜0.05。

?

3 討論

傳統(tǒng)觀念將七氟烷引起的延遲性神經(jīng)認(rèn)知功能障礙歸因于直接的神經(jīng)毒性作用［6］。為了探討對(duì)于術(shù)前患有AD 或具有AD 傾向的病人應(yīng)用七氟烷是否會(huì)加重其認(rèn)知功能障礙，本研究在大鼠雙側(cè)海馬注射NS 或Aβ1-40后持續(xù)吸入30%氧氣或2.5%七氟烷4 h。結(jié)果發(fā)現(xiàn)2.5%七氟烷僅對(duì)海馬注射Aβ的大鼠產(chǎn)生神經(jīng)毒性作用，對(duì)注射NS 的大鼠無損傷，這表明七氟烷對(duì)正常大鼠無影響。NS+七氟烷組或Aβ+七氟烷組大鼠的MAP、心率、pH、PaCO2，PaO2、HCO3-等生命體征無明顯變化，表明在本研究中使用的七氟烷吸入時(shí)間和濃度是可行的。

與吸入氧氣相比，Aβ組大鼠吸入七氟烷麻醉后逃逸潛伏期明顯延長(zhǎng)，提示七氟烷吸入可誘發(fā)大鼠神經(jīng)認(rèn)知功能障礙，這一結(jié)果與其他關(guān)于逃逸潛伏期的研究［7］一致。麻醉藥物可能導(dǎo)致發(fā)育中大腦的廣泛神經(jīng)變性和持續(xù)學(xué)習(xí)障礙，但其行為異常的確切機(jī)制仍不清楚。多項(xiàng)研究表明，大鼠七氟烷暴露可顯著增加多個(gè)腦區(qū)神經(jīng)元凋亡［8］。Aβ 沉積是AD發(fā)病的重要神經(jīng)病理學(xué)標(biāo)志［9］。Du 等［10］的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與AD 相關(guān)的Aβ 肽沉積會(huì)誘發(fā)神經(jīng)元凋亡。本研究數(shù)據(jù)顯示，Aβ+七氟烷組大鼠吸入七氟烷后第7 天海馬Aβ1-40水平明顯增加。這些數(shù)據(jù)表明，七氟烷吸入導(dǎo)致AD 病人認(rèn)知功能進(jìn)一步損傷的部分原因是加劇細(xì)胞內(nèi)Aβ1-40積累。盡管Aβ1-40和Aβ1-42肽在生物體液中普遍存在［11］，但Aβ1-40被認(rèn)為在AD病人中更具致病性［12］。

GFAP和IBA1常被用作星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞激活的標(biāo)志［13］。GFAP 是一種中間絲蛋白，其免疫染色主要用于星形膠質(zhì)細(xì)胞與Aβ 斑塊共定位［14］。IBA1作為一種鈣結(jié)合蛋白，在顯示小膠質(zhì)細(xì)胞激活方面起重要作用，這種激活幾乎與AD 老年斑中發(fā)現(xiàn)的Aβ 蛋白的致密沉積密切相關(guān)［15］。本研究結(jié)果顯示，吸入七氟烷后第7 天，Aβ+sevo 組大鼠海馬GFAP 和IBA1 表達(dá)明顯增加，而吸入氧氣后無明顯變化，提示七氟烷主要作用于這些膠質(zhì)細(xì)胞，加劇海馬區(qū)神經(jīng)膠質(zhì)活化。

AD 的病理特征是錯(cuò)誤折疊蛋白的積累和炎癥變化，導(dǎo)致區(qū)域特定性突觸喪失和神經(jīng)元死亡［16］。目前認(rèn)為，細(xì)胞凋亡的控制缺陷似乎在神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮核心作用［17］。Bcl-xL能夠保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)免受caspase-9 依賴性凋亡的影響，靶向破壞Bcl-xL 可導(dǎo)致未成熟神經(jīng)元大量死亡，而抑制caspase-9 會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元凋亡減少和神經(jīng)發(fā)育異常。本研究結(jié)果顯示，與Aβ+氧氣組相比，Aβ+七氟烷組大鼠海馬組織caspase-9 表達(dá)量明顯增高，而Bcl-xL表達(dá)下降。這些發(fā)現(xiàn)提示，七氟烷暴露可能通過潛在地破壞凋亡細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)中Bcl-xL 和caspase-9表達(dá)平衡而加劇認(rèn)知功能障礙。RAGE 被認(rèn)為是神經(jīng)變性和神經(jīng)炎癥的潛在促發(fā)因素之一，在AD 影響的腦區(qū)表達(dá)增加［18］。BDNF 是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，在調(diào)節(jié)突觸傳遞、神經(jīng)元存活、軸突導(dǎo)向以及記憶形成和認(rèn)知方面發(fā)揮關(guān)鍵作用［19］，可保護(hù)神經(jīng)元免受Aβ 誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性損傷并促進(jìn)Aβ 降解［20］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在Aβ 處理的海馬中，七氟烷吸入增加了RAGE 的表達(dá)，并降低BDNF 水平，提示七氟烷吸入可能通過引發(fā)海馬組織的神經(jīng)毒性而導(dǎo)致認(rèn)知能力下降。

已有研究證實(shí)NF-κB 信號(hào)通路對(duì)于調(diào)控炎癥介質(zhì)的表達(dá)有重要作用，可調(diào)控主要促炎因子IL-1β的轉(zhuǎn)錄，與細(xì)胞的增殖和凋亡等病理生理過程密切相關(guān)在AD 神經(jīng)元損傷過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，并依賴于氧化應(yīng)激的激活［21］。iNOS 具有顯著的促炎作用，激活后可產(chǎn)生大量氧化因子ROS，增強(qiáng)機(jī)體氧化應(yīng)激的程度，促進(jìn)炎癥因子表達(dá)［22］。qRT-PCR 結(jié)果顯示，七氟烷吸入麻醉導(dǎo)致Aβ1-40誘導(dǎo)的AD 大鼠海馬中Il-1β、NF-κB 和iNOS mRNA 表達(dá)增加，提示七氟烷吸入會(huì)驅(qū)動(dòng)AD 病人強(qiáng)大的神經(jīng)炎癥變化，導(dǎo)致大腦神經(jīng)元死亡。

綜上所述，給予AD 模型大鼠七氟烷吸入麻醉可能會(huì)導(dǎo)致認(rèn)知障礙和衰退，其基本機(jī)制是在Aβ注射的大鼠海馬中形成神經(jīng)毒性、神經(jīng)炎癥和神經(jīng)元凋亡。