毛 斐，劉克克，賈桂華，張 堯

（1.許昌市疾病預(yù)防控制中心，河南 許昌 461000；2.天津國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心，天津 300450）

手足口病是由人腸道病毒引起的丙類傳染病，臨床上以發(fā)熱和手、足、口腔、臀部等部位出現(xiàn)皰疹為主要臨床特征的一種急性傳染病，常見于5 歲以下的兒童［1］。個(gè)別患者可引起心肌炎、肺水腫、無(wú)菌性腦膜炎等并發(fā)癥，致死原因主要為腦干腦炎及神經(jīng)源性肺水腫［2］。根據(jù)《手足口病預(yù)防控制指南（2009 版）》［3］要求：許昌市各縣區(qū)每個(gè)月采集5 份標(biāo)本，對(duì)所有重癥病例和聚集病例標(biāo)本開展腸道病毒通用引物、CA16、EV71 引物的核酸檢測(cè)，重癥病例標(biāo)本同時(shí)開展CA6、CA10 引物的核酸檢測(cè)，了解許昌市2019—2020 年手足口病的病原體型別及分布，并對(duì)手足口病病原監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

許昌市2019 年1 月1 日—2020 年12 月31 日臨床診斷的540 例手足口病患者的540 份標(biāo)本。其中：重癥病例標(biāo)本136 份，輕癥病例標(biāo)本404 份；標(biāo)本種類包括糞便、咽拭子、肛拭子和皰疹液。

1.2 方法

1.2.1 核酸提取

采用蘇州天隆生物科技公司生產(chǎn)的RNA/DNA病毒核酸提取試劑盒（磁珠法）、西安天隆全自動(dòng)核酸提取儀提取病毒RNA。

1.2.2 Real-Time RT-PCR 法核酸檢測(cè)

江蘇碩世生物科技有限公司生產(chǎn)的柯薩奇病毒A16 型和腸道病毒71 型+腸道病毒通用型核酸檢測(cè)試劑盒（2+1）（熒光PCR 法）和CA6、CA10 雙通道試劑盒，美國(guó)伯樂(lè)公司生產(chǎn)的CFX-96 Real-Time PCR 擴(kuò)增儀對(duì)所有樣品進(jìn)行病毒核酸檢測(cè)。

1.3 結(jié)果判定

腸道病毒通用引物及腸道病毒71 型（EV71）特異性引物陽(yáng)性，判定為EV71 陽(yáng)性；腸道病毒通用引物陽(yáng)性及腸道病毒A 組16 型（CA16）特異性引物陽(yáng)性，判定為CA16 陽(yáng)性；腸道病毒通用引物陽(yáng)性及腸道病毒A 組6 型（CA6）特異性引物陽(yáng)性，判定為CA6 陽(yáng)性；腸道病毒通用引物陽(yáng)性及腸道病毒A 組10 型（CA10）特異性引物陽(yáng)性，判定為CA10 陽(yáng)性；僅腸道病毒通用引物陽(yáng)性，判定為其他腸道病毒陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用Excel 2010 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，SPSS 25.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 總體病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

540 份標(biāo)本中，陽(yáng)性409 份，總陽(yáng)性率75.74%；其中：其他腸道病毒陽(yáng)性280 份（占68.46%），CA16陽(yáng)性81 份（占19.80%），EV71 陽(yáng) 性11 份（占2.69%）。540 份標(biāo)本中，普通病例標(biāo)本404 份，陽(yáng)性303 份，陽(yáng)性率75.00%；重癥病例標(biāo)本136 份，陽(yáng)性106 份，陽(yáng)性率77.94%，輕、重癥病例腸道病毒陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.37，P＞0.05）。

2.2 流行病學(xué)特征

2.2.1 普通病例分布情況

2.2.1.1 性別分布

腸道病毒陽(yáng)性病例中男性179 例，女性124例，男女性別比為1.44∶1，男女構(gòu)成比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.66，P＞0.05）；男女病例病原譜構(gòu)成差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.08，P＞0.05）。（見表1）。

表1 2019—2020 年許昌市手足口病輕癥病例性別分布

2.2.1.2 年齡分布

腸道病毒陽(yáng)性病例主要集中在1～5 歲年齡組，構(gòu)成比為95.38%，不同年齡組構(gòu)成比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.70，P＞0.05）。不同年齡組EV71（χ2=2.91）、CA16（χ2=8.91）和未分型EV（χ2=9.41）構(gòu)成差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表2）。

表2 2019—2020 年許昌市手足口病輕癥病例年齡分布

2.2.1.3 時(shí)間分布

2019 年1—12 月均有病例檢出，病例分布具有明顯的季節(jié)性，4—7 月是高峰，檢出核酸陽(yáng)性樣本111 份，占57.81%（111/192）。2020 年1—5 月沒(méi)有病例，8—9 月形成高峰，檢出陽(yáng)性標(biāo)本65 份，占60.19%（65/108）。（見圖1）。

圖1 2019—2020 年各月份普通陽(yáng)性病例分布圖

2.2.2 重癥病例分布情況

2.2.2.1 性別分布

136 例重癥病例中腸道病毒陽(yáng)性106 例，男性75 例，女性31 例，男女性別比為2.42∶1，男女構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.50，P＜0.05）；男女病例病原譜構(gòu)成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=15.71，P＜0.05）。（見表3）。

表3 2019—2020 年許昌市手足口病重癥病例性別分布

2.2.2.2 年齡分布

腸道病毒陽(yáng)性病例主要集中在1～5 歲年齡組，構(gòu)成比為98.11%，不同年齡組構(gòu)成比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意 義（χ2=1.42，P＞0.05）。不 同 年 齡 組CA16（χ2=4.07），CA6（χ2=3.92），CA10（χ2=4.76）和未分型EV（χ2=7.73）構(gòu)成比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而EV71（χ2=28.62）構(gòu)成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（見表4）。

表4 2019—2020 年許昌市手足口病重癥病例年齡分布

2.2.2.3 時(shí)間分布

2019 年重癥病例具有明顯的季節(jié)性特征，5—7月是高峰，檢出核酸陽(yáng)性標(biāo)本48 份，占64.86%（48/74）。2020 年1—6 月手足口病例較少，未采集到病例標(biāo)本，9—11 月出現(xiàn)高峰，檢出陽(yáng)性標(biāo)本27 份，占84.38%（27/32）。（見圖2）。

圖2 2019—2020 年各月份重癥陽(yáng)性病例分布圖

3 討論

手足口病多發(fā)于學(xué)齡前兒童，5 歲以下年齡組發(fā)病率最高。2008 年我國(guó)各地均有由CA16 型和EV71 型腸道病毒引起的手足口病的散發(fā)。2015 年后，我國(guó)報(bào)告手足口病病例數(shù)量位居丙類法定傳染病之首。近年來(lái)研究顯示：手足口病的臨床、流行病學(xué)和病原學(xué)特征可能與原先的認(rèn)識(shí)不同［4］。特別是2013 年以后其他腸道病毒感染在手足口病中所占的比例逐漸增多，并且可引起重癥和死亡病例［5-7］。

監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示：許昌市2019—2020 年手足口病的主要發(fā)病人群是3 歲以下年齡組幼兒，2019 年發(fā)病高峰期出現(xiàn)在5—6 月，2020 年的發(fā)病高峰期在9 月；腸道病毒總陽(yáng)性檢出率為75.00%；優(yōu)勢(shì)毒株是其他腸道病毒占68.46%，其次是CA16 型腸道病毒占19.80%，EV71 型腸道病毒引起的病例少量散在分布，該病原呈明顯低發(fā)狀態(tài)，分析可能與EV71 疫苗接種有關(guān)。相關(guān)研究表明腸道病毒71型滅活疫苗對(duì)EV71 引起的手足口病保護(hù)率達(dá)97.3%，而且安全性和免疫原性良好［8］。。

近年來(lái)，手足口病持續(xù)高發(fā)，對(duì)兒童健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅，已成為重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題［9］。針對(duì)許昌市手足口病的預(yù)防提出以下四方面建議：一是加強(qiáng)宣傳教育，普及防病知識(shí)：飯前便后要洗手，勤通風(fēng)，常曬被褥，少去人群密集場(chǎng)所；二是對(duì)患兒進(jìn)行隔離治療；三是托幼機(jī)構(gòu)在本病流行季節(jié)應(yīng)建立每日晨檢制度，每日對(duì)玩具、餐具等物品進(jìn)行消毒；四是加大其他腸道病毒的病原學(xué)分型工作，為明確其他腸道病毒的分型提供技術(shù)支撐，以加強(qiáng)疫苗的針對(duì)性研究。