王茜 新鄉(xiāng)學院3d打印學院生物醫(yī)學工程（河南 新鄉(xiāng) 453003）

內(nèi)容提要 目的探討全自動血培養(yǎng)儀與全自動微生物鑒定儀在血液感染細菌中鑒別診斷的差異。方法將本院2021年1月～2021年12月檢驗科的101份血液為研究對象并將其分為兩份，一份采用全自動微生物鑒定儀進行檢測并納入對照組，另一份采用全自動血培養(yǎng)儀進行檢測并納入觀察組，比較兩組血標本的細菌檢出率、檢出時間以及藥敏實驗結(jié)果。結(jié)果觀察組與對照組兩種檢驗方法下血液標本細菌的陽性菌與陰性菌檢出率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。觀察組細菌檢出時間短于對照組（P＜0.05）。觀察組與對照組的藥敏實驗結(jié)果差異比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論于血液感染細菌的鑒別診斷方法上，全自動血培養(yǎng)儀與全自動微生物鑒定儀均能有效準確地檢出病原菌并提高確診率，但全自動血培養(yǎng)儀在檢查效率上更具有優(yōu)勢。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展和更新，近年來各類新型抗菌藥物也得以現(xiàn)世并應用于臨床治療，使得各類細菌的耐藥性不斷提高進而誘發(fā)全身感染[1]，尤其是菌血癥，其感染發(fā)生率隨著多重耐藥菌的大量出現(xiàn)而不斷上升[2]。因此，為了有效降低這一現(xiàn)象的出現(xiàn)，選擇科學合適的檢驗方法準確掌握細菌的耐藥情況，提高用藥的精確性至關(guān)重要。全自動血培養(yǎng)儀同時具有培養(yǎng)和檢測兩種效用，不僅能夠有效降低血液標本的污染，還能夠排除人為的干預[3]。全自動微生物鑒定儀是一種結(jié)合計算機技術(shù)和微生物檢測技術(shù)，并利用傳統(tǒng)生化反應實施自動微生物檢測的技術(shù)[4,5]，近年來也在細菌檢測上被廣泛應用。本文運用全自動血培養(yǎng)儀和全自動微生物鑒定儀檢測血液標本并分析兩者的細菌鑒別診斷價值的差異，具體如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

將本院2021年1月～2021年12月檢驗科的101份血液為研究對象并將其分為兩份，一份采用全自動微生物鑒定儀進行檢測并納入對照組，另一份采用全自動血培養(yǎng)儀進行檢測并納入觀察組。其中血液標本患者資料，男61例，女40例；年齡18～54歲，平均（35.24±4.28）歲。本研究在醫(yī)學倫理會的批準下進行。

納入標準①年齡18～55歲；②血液標本采集前48h內(nèi)未使用抗生素治療；③患者及家屬均簽署知情同意書；④血液標本均來自發(fā)熱或感染的患者。

排除標準①患者合并其他凝血功能異?；蜓合到y(tǒng)疾?。虎诤喜乐氐男?、肺功能疾病。

1.2 方法

標本采集在患者晨起空腹時科室護士嚴格按照無菌操作步驟采集兩份20mL的外周靜脈血標本并于0.5h內(nèi)送至檢驗科，檢驗科對其進行檢測。

標本檢測①觀察組采用全自動血培養(yǎng)儀器檢測。將需要檢測的血液標本置入血培養(yǎng)瓶，接著將血培養(yǎng)瓶嚴格按照儀器操作步驟放入全自動血培養(yǎng)儀（生產(chǎn)廠家珠海美華醫(yī)療科技有限公司；產(chǎn)品型號BC32），血培養(yǎng)儀以自傳的形式對血培養(yǎng)瓶進行培養(yǎng)，其中設置儀器培養(yǎng)溫度為（35±1.5）?C，轉(zhuǎn)盤以26轉(zhuǎn)/min的速度勻速旋轉(zhuǎn)，以10min為周期對培養(yǎng)瓶進行動態(tài)檢測。利用血培養(yǎng)瓶激發(fā)產(chǎn)生的熒光通過光電檢測器和A/D轉(zhuǎn)換系統(tǒng)傳送給系統(tǒng)計算機分析程序。系統(tǒng)對檢測信號進行分析，發(fā)現(xiàn)陽性瓶儀器發(fā)出陽性警報，并在主程序界面上的培養(yǎng)瓶位置號上顯示為紅色，可以取出培養(yǎng)瓶，轉(zhuǎn)接種培養(yǎng)皿后做細菌鑒定和直接藥敏實驗。持續(xù)培養(yǎng)5d后未發(fā)現(xiàn)微生物生長的血培養(yǎng)瓶，報告為陰性瓶，且主程序界面上的培養(yǎng)瓶位置號上顯示為草綠色，取出培養(yǎng)瓶。當檢驗結(jié)果為陽性時抽取樣品并注入無菌試管中，在離心處理后收取沉淀，再用生理鹽水洗滌兩次得到細菌懸液，接著進行涂片并開始鏡檢，當鏡檢結(jié)果顯示陽性，使用羊血板進行藥敏試驗。除此之外，根據(jù)鏡檢結(jié)果選用合適的氧化酶并調(diào)整菌液濃度，將其接種到PC11綜合板上，最后用微生物分析儀實施鑒定；②對照組采用全自動微生物鑒定儀檢測。將得到的血液標本接種到提前準備好的血瓊脂平板和瓊脂平板上進行培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境保持溫度32?C，時間13～23h，CO2濃度保持5%。培養(yǎng)結(jié)束后，分離菌株，并按要求配置出一定細菌濃度的菌懸液，接著實施鏡檢和常規(guī)藥敏試驗。同時將其置全自動微生物鑒定儀的鑒定卡架上，連接菌液管和鑒定卡，采用比色比濁法，并于全自動微生物鑒定系統(tǒng)內(nèi)輸入相關(guān)信息，全自動微生物鑒定儀（生產(chǎn)廠家上海梅里埃生物制品有限公司；產(chǎn)品型號VitekCompact型）實施自動培養(yǎng)和檢測，15～18h后得到結(jié)果。

1.3 觀察指標

比較實施兩組檢驗方法的血液檢驗結(jié)果，藥敏實驗結(jié)果以及檢驗時間。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS19.0進行分析，計數(shù)資料用%表示，行χ2檢驗；計量資料用±s表示，行t檢驗，等級資料用秩和檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組實驗結(jié)果比較

觀察組與對照組兩種檢驗方法下血液標本陰性菌、陽性菌檢出率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1.兩組試驗結(jié)果比較[n(%)]

2.2 兩組藥敏試驗結(jié)果比較

觀察組與對照組的藥敏結(jié)果符合率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2.兩組藥敏實驗結(jié)果

2.3 兩組檢驗時長比較

觀察組對血液感染中細菌的所需鑒別診斷時間為（14.66±3.24）h，對照組所需時間為（26.16±4.71）h，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（t=20.248，P＜0.001）。

3.討論

血液感染常常指敗血癥，是指細菌已經(jīng)進入到血液循環(huán)，并且在血液當中進行繁殖[6]。細菌隨著血液循環(huán)可以累及身體的各個器官，嚴重的患者可以引起多臟器的功能衰竭，感染中毒性休克，且該病具有較高的死亡率[7]。所以對于血液感染的患者，應該盡早到醫(yī)院就診，通過抗感染治療，幫助患者有效地控制病情，降低患者的病死率。但是由于臨床上治療該病時常會在病原菌不明確的情況下經(jīng)驗性的使用一些抗生素，使得病原菌的耐藥性不斷加強[8]，嚴重影響其治愈。因此，為了了解病原菌的種類以及耐藥特點，對血液感染中的細菌進行檢驗成為有效治療血液感染的關(guān)鍵步驟。傳統(tǒng)的方式進行血液檢驗難度大且耗時長，極易延誤病情，錯失治療最佳時機。全自動血培養(yǎng)儀與全自動微生物鑒定儀作為兩種先進的醫(yī)療設備，在血液感染的檢測上具有操作簡單檢測速度快等優(yōu)勢。

全自動血培養(yǎng)儀由轉(zhuǎn)盤、驅(qū)動電機、控制電路、光電檢測系統(tǒng)以及溫控系統(tǒng)等組成，并設有自動矯正和質(zhì)控檢測功能，具有自動化培養(yǎng)和快速檢測的特點。其工作原理是采用均質(zhì)熒光增強檢測技術(shù)。通過培養(yǎng)瓶底部的熒光傳感器受細菌產(chǎn)生的代謝物質(zhì)激發(fā)產(chǎn)生熒光，熒光強度隨著細菌數(shù)量的增加而不斷增強，最后系統(tǒng)根據(jù)熒光變化趨勢判斷有無微生物生長[9]。優(yōu)勢之處在于①能提供不同細菌繁殖所必需的增菌液體培養(yǎng)基，還包含適宜的氣體成分，以最大限度檢出所有陽性標本，防止假陰性；②連續(xù)恒溫震蕩方式培養(yǎng)和自動連續(xù)監(jiān)測，可使微生物生長更快，易于檢出，并保證陽性標本能在第一時間檢出；③采用封閉式非侵入性監(jiān)測方式，可避免標本交叉污染和實驗室人員的院內(nèi)感染，符合生物安全要求；④設有內(nèi)部質(zhì)控程序，定時進行溫度、感應器等監(jiān)控，以保證儀器正常運轉(zhuǎn)；⑤強大的數(shù)據(jù)處理能力，培養(yǎng)瓶采用雙條形碼技術(shù)，所有環(huán)節(jié)均自動完成，并可與醫(yī)院LIS系統(tǒng)聯(lián)網(wǎng)，實現(xiàn)即時查詢、報告功能。

全自動微生物鑒定儀其工作原理為利用微生物對不同碳源代謝率的差異，針對每一類微生物篩選多種不同的碳源，配合顯色物質(zhì)，固定于孔板上，結(jié)合陰性對照，接種菌懸液后培養(yǎng)一定時間，通過檢測微生物細胞利用不同碳源進行新陳代謝過程中產(chǎn)生的氧化還原酶與顯色物質(zhì)發(fā)生反應而導致的顏色變化（吸光度）以及由于微生物生長造成的濁度差異（濁度），與標準菌株數(shù)據(jù)庫進行比對，最終得出鑒定結(jié)果。其中提到的碳源是為微生物提供碳素來源的物質(zhì)，用于合成菌體，碳源物質(zhì)在細胞內(nèi)經(jīng)過一系列復雜的化學變化后成為微生物自身的物質(zhì)（如糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)等）。對比傳統(tǒng)檢驗方法，其優(yōu)勢之處在于較高的可操作性，靈敏度更高，錯誤率更低[10,11]，因此已經(jīng)被眾多檢驗機構(gòu)所認可[12]。

根據(jù)本次的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在對血液感染的細菌陽性率檢測結(jié)果上，使用全自動血培養(yǎng)儀和全自動微生物鑒定儀兩種檢驗方法差異無統(tǒng)計學意義，都具有較高的檢測率。大概是由于兩種檢驗儀器都具有完善的檢測系統(tǒng)，全自動血培養(yǎng)儀通過自動搖勻動作促進微生物的成長，并利用其產(chǎn)生的二氧化碳與培養(yǎng)瓶底的染料發(fā)生作用出現(xiàn)熒光，接著通過熒光強度作出及時陽性判斷；全自動微生物鑒定儀則通過檢測不同微生物利用碳源新陳代謝過程中產(chǎn)生的氧化還原酶與顯色物質(zhì)發(fā)生反應，產(chǎn)生顏色變化，將其與標準菌株數(shù)據(jù)庫進行比對，得出相應的鑒定結(jié)果。兩種檢驗方法均應用了生理學和生物學的鑒定方法且都具有自動完備的檢測系統(tǒng)，所以兩組都具有完善的較高的陽性檢出率。本研究中發(fā)現(xiàn)觀察組與對照組的革蘭性陽性菌與革蘭氏陰性菌的藥物敏感性差異無統(tǒng)計學意義?？赡苁怯捎谌詣友囵B(yǎng)儀能夠顯示出陽性菌與陰性菌，有利于檢測人員了解各類菌群的耐藥特點與藥敏情況。全自動微生物鑒定儀通過對細菌培養(yǎng)后得到標準濃度的菌懸液，再進行藥敏試驗，促進操作的標準化和藥敏結(jié)果的精確性。所以兩種檢驗方法在藥敏試驗的檢測性能上都具有較高性能。本研究結(jié)果顯示觀察組檢驗時間低于對照組?？赡苁怯捎谌詣友鄡x相比全自動微生物鑒定儀減少了分離培養(yǎng)這一步驟，有效地降低了整體檢驗時間。

綜上所述，全自動血培養(yǎng)儀與全自動微生物鑒定儀均能有效檢出血液細菌的陽性率，并分析其對藥物的敏感性，但全自動血培養(yǎng)儀有其更高的檢測效率。