何平 徐婧怡 張雪雪 陳曉龍

原發(fā)性肝癌（Primary liver cancer，PHC）臨床表現極不典型，早期癥狀不明顯，隨時間推移，患者可出現肝區(qū)疼痛、乏力、食欲缺乏、消瘦等癥狀，癥狀一旦出現往往患者腫瘤已經較大，且病情發(fā)展迅速，如未及時有效治療，患者在幾個月至1 年內即可死亡［1］。有研究證實，在PHC 患者發(fā)病早期及時行手術治療可使患者5 年生存率達到50%～70%［2］。因此，早診斷、早治療PHC，對患者病情進展、轉歸及預后具有重要意義。當前，臨床認為血清甲胎蛋白（alpha?fetoprotein，AFP）對于鑒別PHC、肝硬化具有重要意義，在PHC 中，AFP 水平呈升高，可作為PHC 陽性檢測指標，但其診斷敏感性不高，在部分PHC 患者中檢測呈陰性，因此僅依靠AFP 對PHC 早期診斷與篩查具有一定局限性［3］。相關文獻報道，PHC患者中可見血清高爾基體糖蛋白73（Golgi glyco?protein 73，GP73）與磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Phos?phatidyl inositol proteoglycan 3，GPC3）升高［4］。近年來相關研究證實，GP73 與GPC3 在AFP 檢測陰性患者的血清中有較高的陽性檢出率，可用于PHC 的早期診斷［5］。本文旨在分析血清AFP、GP73 及GPC3 檢測在PHC 診斷及預后評估中的價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021 年5 月至2022 年5 月鄭州大學第一附屬醫(yī)院收治的原發(fā)性肝癌患者52 例為研究對象，設為PHC 組，其中男41 例，女11 例，平均年齡（49.62±2.95）歲，平均體重指數（Body mass index，BMI）（17.59±1.24）kg/m2。根 據TNM 病理分期［6］：Ⅰ期18 例，Ⅱ期16 例，Ⅲ期8 例，Ⅳ期10例。納入標準：①符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2019 年版）》相關標準［6］；②臨床資料完整；③既往未行無水乙醇注射、射頻消融等治療；④依從性良好者；⑤意識清晰，可正常溝通者。排除標準：①無法正常交流；②伴其他系統(tǒng)疾病或器質性病變者；③合并慢性感染性疾病。另外再選取同期本院收治的肝硬化患者46 例與健康體檢者48 名，分別設為肝硬化組與健康組，其中肝硬化組男39 例，女7 例，平均年齡（45.36±3.95）歲，平均BMI（17.63±1.23）kg/m2。納入標準：①符合《肝硬化診治指南》相關標準［7］；②臨床資料完整；③患者存在明確基礎肝病史及相關體征。排除標準同PHC 組。健康組男40 名，女8 名，平均年齡（46.90±4.95）歲，平均BMI（18.15±2.10）kg/m2。三組一般臨床資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），有可比性。本研究經醫(yī)院倫理委員會批準，且受試者及家屬知曉并同意。

1.2 方法

1.2.1 血清AFP、GP73 及GPC3 檢測

PHC 組、肝硬化組入院當日，健康組于體檢當日均采集靜脈血5 mL，放置抗凝管內，離心（3 000 r/min、15 min、離心半徑10 cm），采集血清，在6 h 內完成檢測，采用全自動化學發(fā)光儀（羅氏E601 型）、電化學發(fā)光法檢測AFP 水平；應用酶聯免疫吸附法測GP73、GPC3 水平，試劑盒來于美國Phoenix 公司，嚴格按照說明書進行操作。

1.2.2 隨訪

PHC 患者出院后進行3 個月隨訪，了解患者預后情況，并根據患者預后情況分為預后良好組及預后不良組。預后良好：未發(fā)生多器官功能障礙癥及死亡；預后不良：發(fā)生多器官功能障礙癥或死亡［6］。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0 軟件進行分析，計量資料采用（）描述，多組比較采用方差分析（F），兩組比較使用t檢驗；計數資料采用n（%）表示，用χ2檢驗。采用二元Logistic回歸分析影響PHC 組預后不良的危險因素；繪制ROC 曲線分析AFP、GP73、GPC3 單獨及聯合診斷PHC 的效果。均以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同人群AFP、GP73、GPC3 水平比較

AFP、GP73、GPC3 水平：PHC 組＞肝硬化組＞健康組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同人群AFP、GP73、GPC3 水平比較（）Table 1 Comparison of AFP，GP73 and GPC3 levels among different populations（）

注：與健康組比較，aP＜0.05；與肝硬化組比較，bP＜0.05。

2.2 不同病理分期PHC 患者血清AFP、GP73、GPC3 水平比較

AFP、GP73、GPC3 水平：Ⅳ期＞Ⅲ期＞Ⅱ期＞Ⅰ期，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同病理分期AFP、GP73、GPC3 水平比較（）Table 2 Comparison of AFP，GP73 and GPC3 levels in different pathological stages（）

表2 不同病理分期AFP、GP73、GPC3 水平比較（）Table 2 Comparison of AFP，GP73 and GPC3 levels in different pathological stages（）

注：與Ⅰ期比較，aP＜0.05；與Ⅱ期比較，bP＜0.05；與Ⅲ期比較，cP＜0.05。

2.3 不同預后PHC 患者的一般資料及AFP、GP73、GPC3 水平比較

隨訪結果顯示，預后良好組45 例，預后不良組7 例。兩組性別、年齡、BMI 指數比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。兩組凝血酶原、紅細胞計數、載脂蛋白A1、GGT、AFP、GP73、GPC3 水平比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 PHC 組不同預后一般資料及AFP、GP73、GPC3 水平比較（）Table 3 Comparison of general data of different prognosis and AFP，GP73 and GPC3 levels in PHC group（）

2.4 PHC 患者預后不良的危險因素分析

以是否預后不良為因變量，將單因素分析中具有統(tǒng)計學意義的變量納入二元Logistic 回歸模型進一步分析，結果顯示凝血酶原、紅細胞計數、載脂蛋白A1、GGT、AFP、GP73、GPC3 水平均上升是影響PHC 患者預后不良的危險因素（P＜0.05）。見表4。

表4 二元Logistic 回歸分析PHC 患者預后不良的危險因素Table 4 Risk factors for poor prognosis in PHC patients using binary logistic regression analysis

2.5 AFP、GP73、GPC3 單一及聯合檢測對PHC 患者的診斷效能

依據ROC 曲線可知，AFP+GP73+GPC3 聯合檢測診斷PHC 的敏感度、特異度分別為0.956、0.857；AUC=0.950（95%CI：0.909～0.991），明顯高于AFP、GP73、GPC3 單獨檢測（P＜0.05）。見表5、圖1。

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

表5 AFP、GP73、GPC3 對PPHC 患者的診斷效能Table 5 Diagnostic efficacy of AFP，GP73 and GPC3 in patients with PPHC

3 討論

據研究顯示，PHC 目前是我國第2 位腫瘤致死病因［8］。由于PHC 起病較隱匿，早期臨床癥狀不典型，診斷具有一定困難，確診時多數患者已為中晚期，失去最佳治療時機。因此，早期診斷PHC 并及時開展相應治療，對扼制其病情發(fā)展及預后具有一定積極作用。本次研究顯示，PHC 組AFP、GP73、GPC3 水平均顯著高于肝硬化組與健康組，且不同病理分期PHC 患者的AFP、GP73、GPC3 水平存在差異，說明AFP、GP73、GPC3 的表達水平與PHC 患者的發(fā)生、病情發(fā)展具有一定關系。AFP是胚胎時期存在于血液中的一種糖蛋白，由胎兒肝臟和卵黃囊所合成，胎兒出生后AFP 水平逐漸下降，被白蛋白所代替。若肝細胞（或生殖腺胚胎組織）病變，與AFP 有關基因再次激活，重新合成AFP，血清中AFP 則會明顯升高。有文獻報道，90%以上PHC 患者中會出現AFP 水平顯著上升，認為AFP 可作為PHC 的血清標志物［9］。既往有研究報道，GP73 及GPC3 在PHC 患者血清中呈現高表達現象，并在AFP 檢測陰性患者的血清中也可呈高水平，對PHC 具有一定診斷價值［10］。GP73 屬于跨膜蛋白，存在細胞高爾基體中，正常情況中，GP73 表達于膽管上皮細胞，肝細胞中幾乎難見到GP73 表達。近年有研究報道，70%～80%肝細胞癌可見GPC3 呈特異性表達，認為其與肝細胞癌發(fā)生、預后具有緊密聯系［11］。

有研究指出，AFP、GP73、GPC3 在肝癌中的濃度明顯上升，且伴隨著疾病嚴重程度的加重，其水平也呈逐漸升高趨勢，三指標可作為預測預后的危險因素［12］。本次研究經多元Logistic 回歸分析顯示：AFP、GP73、GPC3 是影響PHC 預后的危險因素，與既往研究結果類似［12］，提示三者與PHC 預后關系密切。研究報道，PHC 患者行手術治療后，多數術后2 個月內AFP 可降至正常范圍，手術治療后，AFP 水平出現上升，則表示治療失敗，且預后不佳［11］。GP73 在肝病表達中隨病情發(fā)展表現為逐漸上升的趨勢，健康人群的肝細胞中極少有GP73 的表達；肝癌組織表達GP73，與血管內皮生長因子有關，檢測血清中GP73 可判斷肝細胞癌患者肝切除術后的預后［10］。GPC3 與細胞粘附分子、生長因子、酶和酶抑制物等相互作用，可能參與多種信號通路，在腫瘤細胞生長過程中起到一定作用。國內研究顯示，GPC3 低表達的患者一般預后良好，而GPC3 高表達被視為癌癥復發(fā)的危險信號［13］。近年有研究認為，GP73、GPC 與AFP 聯合檢測有利于提高PHC 診斷及預后效能［14］。本研究ROC 曲線結果顯示，AFP、GP73、GPC3 聯合檢測診斷PHC 的敏感度、特異度分別為0.956、0.857，AUC=0.950（95% CI：0.909～0.991），表明三指標聯合檢測助于PHC 早期診斷及篩查，且對于PHC 預后判定具有重要意義，與既往研究結果相似［15］。

綜上所述，血清AFP、GP73、GPC3 三者聯合檢測在PHC 鑒別診斷中具有較高的診斷價值，可用于對PHC 的早期診斷，臨床可通過檢測上述血清水平來評估PHC 患者的預后情況。