孫康娜，丁紅艷，李巖，院珍珍，2*，韓麗娟，葉英

（1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海西寧 810016；2.青海大學(xué)省部共建三江源生態(tài)與高原農(nóng)牧業(yè)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海西寧 810016）

青稞（HordeumvulgareLinn.var.nudumHook.f.）屬禾本科大麥屬，因其籽粒裸露、內(nèi)外穎殼分離，所以又被稱(chēng)為裸大麥[1]。它作為青藏高原最具民族特色的農(nóng)作物，具有“三高兩低”即高蛋白、高纖維、高維生素、低脂肪、低糖的特性，是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的農(nóng)作物[2]。

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外在青稞的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、活性成分等方面開(kāi)展了研究，進(jìn)一步推動(dòng)了青稞產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）是一種非蛋白質(zhì)、功能性氨基酸，是主要存在于微生物和動(dòng)植物體內(nèi)的天然活性成分[3]。它是動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)之一[4]。GABA 在健康和糖尿病動(dòng)物個(gè)體水平口服都具有促進(jìn)胰島素分泌和降低空腹血糖的功能[5]。GABA 生理功能較多，不僅能抗應(yīng)激、解毒、抗癌[6]、治療帕金森、促進(jìn)乙醇代謝、調(diào)節(jié)生殖功能[7]，還是大腦中最重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，在癲癇的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用[8]，兼具鎮(zhèn)靜、抗焦慮或抗驚厥作用[9]，可以改善色素沉著過(guò)度障礙[10]，在治療重度抑郁癥方面也具有積極作用[11]。此外，GABA 能通過(guò)離子型GABA（A）受體和代謝性GABA（B）受體影響多種胰島細(xì)胞類(lèi)型的活性[12]，在干酪乳桿菌對(duì)葡聚糖硫酸鈉（dextran sulphate sodium，DSS）誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎的有益作用中起關(guān)鍵作用[13]。在植物中GABA 也具有積極作用，葉面施用GABA 或GABA 的代謝工程產(chǎn)物可以降低作物生產(chǎn)中農(nóng)藥污染風(fēng)險(xiǎn)[14]；外源GABA 通過(guò)增強(qiáng)GABA 分流和次生細(xì)胞壁生物合成，提高蘋(píng)果幼苗對(duì)長(zhǎng)期干旱脅迫的抵抗力[15]；GABA 能有效緩解蘋(píng)果幼苗中的鎘（Cd）毒性[16]；外源GABA 對(duì)紫花苜蓿幼苗耐堿脅迫有正向作用[17]。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者在富含GABA 原料的選擇、高產(chǎn)GABA 微生物的分離鑒定等方面取得顯著的進(jìn)展，目前已有學(xué)者研究不同因素對(duì)青稞中GABA 含量的影響，通過(guò)分析提取時(shí)間、提取溫度、料液比、pH 值、青稞種類(lèi)等因素對(duì)GABA 含量的影響，得到最優(yōu)提取工藝，使GABA 含量達(dá)到更高[18]。從米糠中提取GABA 所需的條件是用水作為提取介質(zhì)，在50 ℃的溫度下攪拌米糠4 h，該方法可為提取GABA 提供良好的條件[19]。

α-淀粉酶抑制劑可以抑制餐后血糖升高和胰島素的分泌[20]。α-葡萄糖苷酶抑制劑具有抑制腸道細(xì)菌、保持血糖平衡等作用[21]，α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制劑可抑制糖原、淀粉等物質(zhì)水解成葡萄糖，延緩糖原、淀粉等物質(zhì)在小腸中被吸收，能有效降低餐后血糖水平[22]。故可以通過(guò)α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制率測(cè)定降血糖活性。

本試驗(yàn)研究提取溫度、提取時(shí)間、液料比對(duì)黑青稞中GABA 含量的影響，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)探究最優(yōu)提取工藝參數(shù)，并進(jìn)行體外降血糖活性研究，以期為推進(jìn)高原健康食品發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黑青稞粉：青海漢和生物科技股份有限公司；γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品：上海源葉生物科技有限公司；四硼酸鈉（分析純）：上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；苯酚、次氯酸鈉、可溶性淀粉溶液（均為分析純）：天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；3，5-二硝基水楊酸（分析純）：上海展云化工有限公司；4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（分析純）：索萊寶生物科技有限公司；α-淀粉酶（酶活力50 U/mg）：合肥博美生物有限公司；α-葡萄糖苷酶（酶活力70 萬(wàn)U/mL）：上海吉至生化科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

電熱恒溫水浴鍋（HH-6 型）：上海比朗儀器有限公司；恒溫振蕩器（THZ-82 型）：常州國(guó)華電器有限公司；臺(tái)式高速離心機(jī)（H/T16MN 型）：湖南赫西儀器裝備有限公司；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（UN-2600 型）：日本島津公司；渦旋振蕩器（Xw-80A 型）：海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司；全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（MULTISKAN Sky 型）：北京平利洋經(jīng)貿(mào)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 GABA 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

參考劉元等[3]的方法，并稍作修改，稱(chēng)取一定量的GABA 標(biāo)準(zhǔn)品用去離子水配制成1 mol/L 的GABA 標(biāo)準(zhǔn)溶液，準(zhǔn)確吸取0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mL 于10 mL 帶蓋離心管中，分別加蒸餾水0.95、0.90、0.85、0.80、0.75 mL 使每個(gè)離心管中的溶液達(dá)到1 mL，得到不同濃度的GABA 標(biāo)準(zhǔn)液，從配好的標(biāo)準(zhǔn)液中取1.0 mL 到另一個(gè)帶蓋離心管中，在離心管中先加入硼酸鹽緩沖液（pH9.18）0.4 mL，然后加入6% 苯酚溶液1 mL，再加入5.25% 次氯酸鈉溶液1.5 mL，將其充分混勻后馬上放入水浴鍋中沸水浴10 min，然后取出冰浴5 min，之后加入60% 乙醇溶液2 mL，在645 nm 處測(cè)定溶液的吸光值。

1.3.2 單因素試驗(yàn)

考察不同提取溫度、提取時(shí)間、液料比對(duì)GABA含量的影響，并確定各因素的最佳水平。

1.3.2.1 提取溫度對(duì)黑青稞中GABA 含量的影響

參考趙大偉等[23]的方法，并稍作修改，稱(chēng)?。?00±5）mg 黑青稞粉放置于10 mL 帶蓋離心管中，在每管中加5 mL 蒸餾水，固定液料比為10∶1（mL/g），將試管放入振蕩器，設(shè)置轉(zhuǎn)速為2 000 r/min，時(shí)間為90 min，分別在40、50、60、70、80℃條件下進(jìn)行振蕩處理。振蕩結(jié)束后，離心10 min（6 000 r/min），取1 mL 上清液于另一離心管中，待測(cè)。

1.3.2.2 提取時(shí)間對(duì)黑青稞中GABA 含量的影響

參考趙大偉等[23]的方法，并稍作修改，稱(chēng)?。?00±5）mg 黑青稞粉放置于10 mL 帶蓋離心管中，每個(gè)離心管加5 mL 蒸餾水，固定液料比為10∶1（mL/g），將試管放入振蕩器，設(shè)置轉(zhuǎn)速為2 000 r/min，固定溫度為60 ℃，在30、60、90、120、150 min 條件下進(jìn)行振蕩處理。振蕩結(jié)束后，離心10 min（6 000 r/min），取1 mL 上清液于另一離心管中，待測(cè)。

1.3.2.3 液料比對(duì)黑青稞中GABA 含量的影響

參考趙大偉等[23]的方法，并稍作修改，稱(chēng)?。?00±5）mg 黑青稞粉放置于10 mL 帶蓋離心管中，固定時(shí)間為90 min、溫度為60 ℃，設(shè)置液料比分別為2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1（mL/g），將試管放入振蕩器，設(shè)置轉(zhuǎn)速為2 000 r/min，振蕩結(jié)束后，離心10 min（6 000 r/min），取1 mL 上清液于另一離心管中，待測(cè)。

1.3.3 響應(yīng)面試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，以提取溫度（A）、提取時(shí)間（B）、液料比（C）為自變量，以GABA 含量（Y）為響應(yīng)值，利用Box-Behnken 中心設(shè)計(jì)法則[24]，確定黑青稞中GABA 提取的最佳工藝條件，并進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)以檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

通過(guò)單因素試驗(yàn)結(jié)果確定響應(yīng)面因素水平設(shè)計(jì)如表1所示。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)Table 1 Factors and levels of response surface methodology

1.3.4 體外降血糖活性測(cè)定

1.3.4.1 黑青稞中GABA 對(duì)α-淀粉酶的抑制活性試驗(yàn)參考張燕麗[21]的方法，并稍作修改，根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)的最佳條件提取GABA，取150 μL 未處理青稞粉溶液和富集GABA 溶液并添加0.5 mg/mL 的α-淀粉酶液150 μL，充分混勻后，放入水浴鍋在37 ℃條件下孵育10 min，然后將250 μL 的1% 可溶性淀粉溶液加入到混合液中，并在37 ℃條件下繼續(xù)孵育10 min，加入500 μL 的3，5-二硝基水楊酸（dinitrosalicylic acid，DNS）停止反應(yīng)，在沸水浴中反應(yīng)5 min。冷卻后取200 μL 于96 孔板中，使用酶標(biāo)儀在540 nm 處測(cè)吸光值，每組重復(fù)測(cè)定3 次，取平均值。α-淀粉酶抑制率（X，%）按公式（1）計(jì)算。

式中：a為含葡萄糖苷酶溶液與待測(cè)樣本時(shí)所檢出的吸光值；b為含有待測(cè)樣本但不包括葡萄糖苷酶的溶液所測(cè)得的吸光值；c為含葡萄糖苷酶溶液但不含待測(cè)樣本所測(cè)得的吸光值。

1.3.4.2 黑青稞中GABA 對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性試驗(yàn)

參考張燕麗[21]的方法，并稍作修改，根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)的最佳條件提取GABA，取0.05 mol/L（pH6.8）磷酸鹽緩沖液600 μL，加入20 mol/L 的4-硝基苯基-α-D-吡咯葡萄糖苷溶液300 μL 與40 μL 未處理青稞粉溶液和富集GABA 溶液，將其放置于37 ℃水浴條件下孵育10 min，然后加入0.2 U/mL 的α-葡萄糖苷酶溶液52 μL，室溫條件下放置10 min 后再加入0.1 mol/L 的Na2CO31.65 mL 終止反應(yīng)，在405 nm 的條件下測(cè)定終止液吸光值。反應(yīng)體系中采用0.05 mol/L（pH6.8）磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer solution，PBS）作為溶液及待測(cè)樣品的空白對(duì)照。每個(gè)樣品做3 個(gè)平行，并設(shè)置空白對(duì)照，取平均值。α-葡萄糖苷酶抑制率（Y，%）按公式（2）計(jì)算。

式中：a為含葡萄糖苷酶溶液與待測(cè)樣本時(shí)所檢出的吸光值；b為含有待測(cè)樣本但不包括葡萄糖苷酶的溶液所測(cè)得的吸光值；c為含葡萄糖苷酶溶液但不含該樣本時(shí)所測(cè)得的吸光值；d為不包括葡萄糖苷酶的溶液與待測(cè)樣本時(shí)所檢出的吸光值。

1.4 數(shù)據(jù)處理

同一處理的樣品組做3 組平行，使用Excel 2016、Origin 2021 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、分析及作圖，響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果利用Design-Expert 8.0.6 軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 GABA 含量分析標(biāo)準(zhǔn)曲線

在室溫條件下，測(cè)定處理過(guò)的GABA 標(biāo)準(zhǔn)溶液在645 nm 處的吸光值，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 GABA 標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of GABA

由圖1 可知，在645 nm 的條件下GABA 含量和吸光值的線性關(guān)系為Y=1.954 2X-0.042 8，R2=0.996 8。為了讓重復(fù)性符合要求，本次試驗(yàn)重復(fù)測(cè)定3 次，使得其結(jié)果穩(wěn)定，準(zhǔn)確性高。因此，采用該方法對(duì)黑青稞提取液的GABA 含量進(jìn)行測(cè)定可行。

2.2 黑青稞GABA 提取單因素試驗(yàn)

2.2.1 提取溫度對(duì)GABA 含量的影響

提取溫度對(duì)GABA 含量的影響見(jiàn)圖2。

圖2 提取溫度對(duì)GABA 含量的影響Fig.2 Effect of extraction temperature on GABA content

由圖2 可知，當(dāng)提取溫度從40 ℃升高到60 ℃時(shí)，黑青稞中GABA 含量隨著提取溫度的升高而升高，在60 ℃時(shí)GABA 含量達(dá)到峰值（0.273±0.017）mg/mL；提取溫度進(jìn)一步升高，黑青稞中GABA 含量呈下降趨勢(shì)。提取溫度為40 ℃時(shí)，黑青稞中GABA 含量最低，僅為（0.103±0.013）mg/mL。這可能是因?yàn)樘崛囟任催_(dá)到60 ℃時(shí)，水溶液對(duì)GABA 的溶解度較低，從而導(dǎo)致GABA 含量比峰值低，提取溫度高于60 ℃使得GABA 發(fā)生降解，在一定程度上破壞了黑青稞提取液中的GABA，使得GABA 分解、氨基脫離，也可能是因?yàn)榉肿娱g發(fā)生劇烈碰撞會(huì)產(chǎn)生能量，這部分能量使GABA 的氨基解離，所以提取液中的GABA 含量下降[24]。因此選擇提取黑青稞GABA 提取溫度50、60、70 ℃進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。

2.2.2 提取時(shí)間對(duì)GABA 含量的影響

提取時(shí)間對(duì)GABA 含量的影響見(jiàn)圖3。

圖3 提取時(shí)間對(duì)GABA 含量的影響Fig.3 Effect of extraction time on GABA content

由圖3 可知，控制其它3 個(gè)變量，逐漸延長(zhǎng)提取時(shí)間，黑青稞中GABA 含量隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，在90 min 時(shí)黑青稞中GABA 含量達(dá)到峰值（0.289±0.007）mg/mL；提取時(shí)間進(jìn)一步延長(zhǎng)，黑青稞中GABA 含量呈下降趨勢(shì)；當(dāng)提取時(shí)間為150 min 時(shí)，黑青稞中GABA 含量最低，僅為（0.218±0.006）mg/mL。這可能是因?yàn)樘崛r(shí)間太短，黑青稞中GABA 未完全溶出，導(dǎo)致GABA 含量較少，長(zhǎng)時(shí)間的浸提使得GABA被破壞，從而導(dǎo)致GABA 含量比峰值低。因此選擇黑青稞GABA 提取時(shí)間60、90、120 min 進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。

2.2.3 液料比對(duì)GABA 含量的影響

液料比對(duì)GABA 含量的影響見(jiàn)圖4。

圖4 液料比對(duì)GABA 含量的影響Fig.4 Effect of liquid-material ratio on GABA content

由圖4 可知，隨著溶劑體積增加，黑青稞粉沒(méi)有完全浸濕，黑青稞中的GABA 沒(méi)有增加，黑青稞中GABA含量先增加后減小，在液料比為3∶1（mL/g）時(shí)，黑青稞中GABA 含量達(dá)到峰值（0.316±0.015）mg/mL；液料比為6∶1（mL/g）時(shí)，黑青稞中GABA 含量最低，僅為（0.144±0.012）mg/mL。這可能是因?yàn)槿軇w積過(guò)小，黑青稞粉沒(méi)有完全浸濕，黑青稞中的GABA 沒(méi)有完全被溶出；溶出的GABA 在液料比為3∶1（mL/g）時(shí)達(dá)到最大，繼續(xù)增加溶劑用量，會(huì)溶解出其他物質(zhì)，所以GABA 含量降低。最終選擇液料比2∶1、3∶1、4∶1（mL/g）進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。

2.3 黑青稞GABA 提取工藝響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

以提取溫度（A）、提取時(shí)間（B）、液料比（C）為影響因子，以黑青稞中GABA 含量（Y）為響應(yīng)值，采用Box-Behnken 模型設(shè)計(jì)出包括17 次試驗(yàn)的提取方案[25]，測(cè)定每組試驗(yàn)條件下黑青稞GABA 含量，試驗(yàn)方案及結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table 2 Design and results of response surface methodology

2.3.2 回歸模型的建立與顯著性分析

將表2 得到的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，得到Y(jié)關(guān)于A、B、C的二次多項(xiàng)回歸擬合模型為Y=0.34+9.250×10-3A-5.375×10-3B+0.017C-0.012AB+2.250×10-3AC+5.500×10-3BC-0.11A2-0.096B2-0.075C2。

方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 回歸方程試驗(yàn)方差分析Table 3 Analysis of variance（ANOVA）for regression equations

由表3 可知，回歸擬合模型的p＜0.01，說(shuō)明該模型極顯著。失擬項(xiàng)=0.861 表現(xiàn)出不顯著，說(shuō)明擬合效果比較好。且R2=0.968 6＞0.9，R2Adj=0.928 3；C.V.=11.77%，可得結(jié)論：模型的擬合結(jié)果符合實(shí)際試驗(yàn)結(jié)果。因此該試驗(yàn)?zāi)Ｐ偷脑O(shè)計(jì)比較合理，可以擬合試驗(yàn)數(shù)據(jù)，能用于黑青稞中GABA 提取工藝的分析。

2.3.3 交互作用分析

通過(guò)影響因素之間的響應(yīng)面圖和等高線圖來(lái)進(jìn)行分析，響應(yīng)面圖可以形象直觀地反映出兩因素之間的交互作用。通過(guò)Design-Expert 8.0.6 軟件，各試驗(yàn)因素交互作用對(duì)結(jié)果影響的響應(yīng)面及等高線見(jiàn)圖5～圖7。

圖5 提取溫度和提取時(shí)間對(duì)GABA 含量影響的響應(yīng)面和等高線Fig.5 Response surface and contour plots of the effects of temperature and time on GABA content

由圖5 可知，A與B的交互作用的三維圖最陡峭，曲面變化最為明顯，等高線圖呈橢圓，說(shuō)明A、B的交互作用對(duì)黑青稞中GABA 含量在三者中影響最大。

由圖5、圖6、圖7 的等高線圖可知，提取溫度和提取時(shí)間對(duì)黑青稞中GABA 的提取量的影響顯著大于提取溫度和液料比與提取時(shí)間和液料比對(duì)黑青稞中GABA 的提取量的影響。其中，圖6 的等高線比圖5、圖7 的等高線更接近于圓形。因此，兩因素相互作用對(duì)黑青稞中GABA 的含量影響最小的是提取溫度和液料比。根據(jù)表3 的數(shù)據(jù)可以看出，AB相互作用的p值最小，數(shù)值為0.368；AC相互作用的p值最大，數(shù)值為0.859；BC相互作用的p值介于兩者之間，數(shù)值為0.666。所以?xún)梢蛩叵嗷プ饔脤?duì)黑青稞中GABA 含量影響大小依次排序?yàn)锳B＞BC＞AC[26]。

圖6 提取溫度和液料比對(duì)GABA 含量影響的響應(yīng)面和等高線Fig.6 Response surface and contour plots of the effects of temperature and liquid-material ratio on GABA content

圖7 提取時(shí)間和液料比對(duì)GABA 含量影響的響應(yīng)面和等高線Fig.7 Response surface and contour plots of the effects of time and liquid-material ratio on GABA content

2.3.4 響應(yīng)面驗(yàn)證試驗(yàn)

響應(yīng)面分析得到，在提取溫度為60 ℃、提取時(shí)間為90 min、液料比3∶1（mL/g）條件下，預(yù)測(cè)的最優(yōu)黑青稞GABA 含量為0.341 mg/mL。為了檢驗(yàn)響應(yīng)面法得到的優(yōu)化數(shù)據(jù)的可靠性，進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，做3 次平行試驗(yàn)，取平均值，最后計(jì)算GABA 含量為（0.338±0.012）mg/mL，與理論上預(yù)測(cè)的最優(yōu)值0.341 mg/mL 基本相符，驗(yàn)證了黑青稞中GABA 含量回歸模型的有效性，所以黑青稞γ-氨基丁酸含量可以采用該模型進(jìn)行分析。

2.4 黑青稞GABA 體外降血糖活性研究結(jié)果

體外降血糖活性分析見(jiàn)表4。

表4 體外降血糖活性分析Table 4 Hypoglycemic activity in vitro

由表4 可知，根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)的最佳條件提取GABA，取未處理青稞粉溶液和富集GABA 溶液進(jìn)行α-淀粉酶的抑制活性試驗(yàn)，富集GABA 溶液對(duì)α-淀粉酶的抑制效果更佳，其抑制率為（72.41±0.43）%，未處理青稞粉溶液的抑制率為（22.82±0.33）%。

由表4 可知，根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)的最佳條件提取GABA，取未處理青稞粉溶液和富集GABA 溶液進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制活性試驗(yàn)，富集GABA 溶液對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制效果更佳，其抑制率為（82.29±0.38）%，未處理青稞粉溶液的抑制率為（41.46±0.43）%。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，黑青稞中GABA 對(duì)α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶能夠產(chǎn)生抑制效果，具有良好的體外降血糖作用，為研發(fā)功能性食品和研究以青稞為原料的產(chǎn)品提供了理論基礎(chǔ)。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)以黑青稞為原料，以黑青稞中GABA 含量為響應(yīng)指標(biāo)，探究提取溫度、提取時(shí)間、液料比對(duì)GABA 含量的影響，并進(jìn)行體外降血糖活性研究。以單因素試驗(yàn)為基礎(chǔ)，進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)，結(jié)果表明黑青稞提取GABA 最佳工藝參數(shù)：提取溫度為60 ℃、提取時(shí)間為90 min、液料比3∶1（mL/g），在此條件下，黑青稞中GABA 含量為（0.338±0.012）mg/mL，與模型預(yù)測(cè)值0.341 mg/mL 基本相符。根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)的最佳條件提取黑青稞中GABA，結(jié)果發(fā)現(xiàn)富集GABA 溶液的體外降血糖效果更佳，黑青稞中GABA 對(duì)α-淀粉酶的抑制率為（72.41±0.43）%，對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制率為（82.29±0.38）%，具有良好的降血糖效果。