童嘉琳 樓姝坪 徐云敏， 朱祝軍， 何 勇， ，

（1浙江農(nóng)林大學(xué)園藝科學(xué)學(xué)院，浙江 杭州 311300；2農(nóng)業(yè)農(nóng)村部亞熱帶果品蔬菜質(zhì)量安全控制重點實驗室，浙江 杭州 311300）

miR396是一類內(nèi)源性的非編碼小分子RNA（大部分為21～22 nt）。與其他miRNA 相同，miR396 由細胞核中的MIR（miRNA 基因）在RNA 聚合酶Ⅱ（RNA polymerase Ⅱ，RNA Pol Ⅱ）的作用下轉(zhuǎn)錄成具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的pri-miRNA；接著由類RNase Ⅲ酶（Dicer-like 1，DCL1）切割形成miRNA/miRNA*雙鏈；最后在甲基轉(zhuǎn)移酶（HUA ENHANCER1，HEN1）和染色體區(qū)域維護因子1（Chromosomal Maintenance 1，CRM1）蛋白的作用下形成miRNA 成熟體，對靶基因進行切割或翻譯抑制［1-4］。近年來研究表明，miR396 可以參與植物生長發(fā)育、生物及非生物脅迫響應(yīng)等過程［5-8］。

miR396 的靶基因包括生長調(diào)節(jié)因子（growthregulating factor，GRF）、基本螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子（basic Helix-Loop-Helix 74，bHLH74）、短營養(yǎng)期相關(guān)基因（short vegetative phase，SVP）、GRAS（含有GRAS 結(jié)構(gòu)域）家族基因成員（scarecrow-like 14，SCL14）、四肽重復(fù)樣超家族蛋白基因（tetratricopeptide repeat-like superfamily protein，TPR）和氨基環(huán)丙烷羧酸氧化酶基因（1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase，ACO）等［9-13］。近年來，miR396 響應(yīng)環(huán)境信號及其分子機制受到廣泛關(guān)注并取得重要進展［6-8，14］。本研究將從miR396 的保守性與多樣性、靶基因、信號響應(yīng)及其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用四個方面進行綜述，旨在闡明miR396 的調(diào)控機制，為豐富轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控植物生長發(fā)育、培育高產(chǎn)、高抗和高養(yǎng)分利用率的新品種等提供參考。

1 miR396的保守性與多樣性

miR396存在于所有維管植物中［15］，最早在水稻和擬南芥中被克?。?6］。miRBase（https：//www.mirbase.org）中一共收錄了46 種植物，在其中超過30 個物種中鑒定到miR396，不同物種中miR396 成熟序列與數(shù)目有所區(qū)別。

利用11 個物種中的miR396 成熟體構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進化樹（圖1），發(fā)現(xiàn)miR396家族可分為6個亞族，第Ⅰ～第Ⅵ亞族分別包含1、7、1、21、15和17個成員。第Ⅵ亞族的miR396 成員最多，分別來自苔蘚類植物、裸子植物、單子葉植物和雙子葉植物［17］?；ㄈ~溪苔（Apopellia endiviifolia）中pen-miR396b 種子區(qū)（seed region）1～6 的堿基與維管植物中miR396 完全一樣［18］，說明penmiR396b在進化的過程中具有較高的保守性。miR396的多樣性體現(xiàn)在以下3個方面：（1）序列長度的多樣性，如花葉溪苔中miR396 序列長短不一，pen-miR396d 為18 個堿基，pen-miR396g 為26 個堿基；（2）堿基的多樣性，pen-miR396a/c/d 成熟體的第1 到第5 個堿基序列與維管植物中保守的堿基均不同，維管植物中miR396種子區(qū)第7 位堿基為A 或G，第21 位堿基為U 或G（圖2）；（3）物種特異性，雙子葉植物中miR396 一般為21 個堿基，在單子葉植物中特異存在22 個堿基的miR396，第7 和第8 位點與GRF完全互補配對［17］。綜上所述，miR396 在進化的過程中具有保守性與多樣性。

圖1 利用鄰近法構(gòu)建植物miR396成熟體系統(tǒng)發(fā)育進化樹Fig.1 The phylogenetic evolutionary tree of mature miR396 constructed by the Neighbor-Joining method

圖2 花葉溪苔及部分植物miR396序列Fig.2 The mature miR396 sequences of Apopellia endiviifolia and several other plant species

反向復(fù)制假說認為miRNA 來源于靶基因或靶基因片段的反向復(fù)制，因此miRNA 的出現(xiàn)時間應(yīng)晚于其靶基因［3，19-20］。通過時間進化分析發(fā)現(xiàn)（圖3），大約在992 萬年前綠藻（Chlamydomonasreinhardtii）中出現(xiàn)了GRF，約480萬年前苔蘚類植物中出現(xiàn)了miR396［18-19，21］，進一步對比擬南芥中保守MIR396 前體與GRF2反向互補序列（圖4），發(fā)現(xiàn)二者具有較高的相似性，因此推測miR396 可能是由GRF反向復(fù)制產(chǎn)生。miRNA 也可能通過串聯(lián)復(fù)制、片段復(fù)制、全基因組復(fù)制或多倍化進行擴張，在復(fù)制過程中發(fā)生的堿基突變可能是miR396多樣性形成的重要原因［22-24］。

圖3 miR396及其靶基因在綠色植物系統(tǒng)發(fā)育中的出現(xiàn)時間Fig.3 Emergence of miR396 and it’s target genes in green plant phylogenesis

圖4 AtMIR396與AtGRF2序列配對Fig.4 Alignments of AtMIR396 and AtGRF2

2 miR396 靶基因——物種間保守的靶基因

2.1 GRF結(jié)構(gòu)特點與分類

GRF是miR396 保守的靶基因，在N 端具有保守的QLQ（谷氨酰胺、亮氨酸、谷氨酰胺）和WRC（色氨酸、精氨酸、半胱氨酸）結(jié)構(gòu)域［1］。QLQ 結(jié)構(gòu)域中包含了編碼谷氨酰胺-亮氨酸-谷氨酰胺（QX3LX2Q）的序列，主要負責GRF 和生長調(diào)節(jié)因子相互作用因子（GRFinteracting factor，GIF）之間的相互作用；WRC 結(jié)構(gòu)域中包含了編碼三個半胱氨酸殘基、一個組氨酸殘基（CX9CX10CX2H）和核定位信號（nuclear localization signal，NLS）的序列，在DNA 結(jié)合方面發(fā)揮作用，并且具有miR396 成熟體的結(jié)合位點［17，25-26］。GRF 蛋白C末端長短不盡相同，較長的C 末端充當反式激活結(jié)構(gòu)域，截短的C末端沒有反式激活活性［25］。

Meng等［26］構(gòu)建了GRF系統(tǒng)發(fā)育進化樹，將其分為6個亞族。第Ⅰ、第Ⅱ、第Ⅳ、第Ⅵ家族均包含單子葉和雙子葉植物，絕大部分苔蘚和蕨類植物分布在第Ⅳ亞族中，第Ⅲ亞族只包含雙子葉植物，第Ⅴ家族包含蕨類植物和雙子葉植物。與高等植物所在的亞族（Ⅰ、Ⅱ）相比，第Ⅳ亞族中GRF 具有較多的外顯子和基序數(shù)量。根據(jù)蛋白結(jié)構(gòu)被子植物中GRF 可分為6 個亞族，第Ⅱ至Ⅵ亞族的GRF 在植物中是保守的，其中Ⅲ亞族中的GRF 則具有較長的C 末端；第Ⅰ亞族的GRF 結(jié)構(gòu)具有多樣性，一部分GRF（OsGRF10、ZmGRF4 和SlGRF13）在WRC結(jié)構(gòu)域后有截短的C末端，另一部分GRF（CsGRF5、AtGRF9 和SlGRF10）具兩個WRC 結(jié)構(gòu)域，在第二個結(jié)構(gòu)域之后有截短的C末端［17］。

根據(jù)是否具有miR396 調(diào)控位點，GRF分為受miR396調(diào)控和不受miR396調(diào)控兩種類型，其中大部分GRF受到miR396的調(diào)控，僅有少數(shù)GRF不受miR396調(diào)控。擬南芥9個GRF中，GRF1-4和GRF7-9均受miR396調(diào)控［27］；番茄中有13個GRF，其中8個GRF是miR396的靶基因［28］；香蕉（MusananaLour）中存在20個GRF，其中15個被預(yù)測為miR396的靶基因［29］；黃瓜中8個GRF均能與miR396 成熟體序列互補配對［17］；蓖麻（Ricinus communis）中11個GRF均包含miR396作用位點［30］。

2.2 miR396-GRF的功能

miR396-GRF模塊參與調(diào)控根系長短、葉片與花器官大小、以及葉片衰老等。通常過表達miR396后細胞數(shù)目減少，器官減?。贿^表達GRF后細胞數(shù)目增多，器官增大。如擬南芥中過表達miR396 及苜蓿（Medicago truncatula）中沉默GRF都降低了根系的長度［11，31］。擬南芥中過表達miR396b降低葉片細胞數(shù)目，減小了葉片面積；擬南芥、水稻、楊樹和春蘭（Cymbidiumgoeringii）中過表達GRF均增大了葉片面積［32-36］。采用短串聯(lián)模擬靶標（short tandem target mimic，STTM）降低番茄中miR396表達水平，部分GRF上調(diào)，花長度增加了22%～25%，萼片長度增加了65%～66%［28，37］。葡萄（Vitisvinifera）中異源表達miR396抗性的突變體rGRF4花序、花梗變長，匍匐本草（Agrostisstolonifera）中過表達miR396 出現(xiàn)雄蕊缺陷的表型［38-39］。此外，過表達miR396擬南芥葉片衰老明顯快于野生型，采用幼葉期特異表達的啟動子（AS1 和ANT）驅(qū)動rGRF3表達后，黑暗條件下葉片衰老加速，表明GRF3表達時期的長短對植株衰老起重要作用［34］。花椒（Zanthoxylumarmatum）中miR396-GRF6模塊也參與葉片衰老過程［40］。

miR396-GRF模塊還參與種子/果實發(fā)育過程。水稻中一共有8個miR396成員，其中miR396e/f突變體植株增加了籽粒大小，其余的miR396 突變體與野生型（WT）相比籽粒大小沒有顯著差異，說明miR396e/f 是決定水稻籽粒大小的主效功能位點［41］。Zhang 等［32］進一步構(gòu)建了miR396 抗性突變體rGRF4/6/8，粒徑均顯著增加。水稻中過表達GRF6，其一級分枝、二級分枝和小穗的數(shù)量均顯著增加［42］。擬南芥中異源表達大豆miR396b后角果變?。?3］。STTM396a/396a-88轉(zhuǎn)基因番茄中，GRF1-5的表達量顯著上調(diào)，生長階段的果實重量增加了66%～72%，表皮細胞大小增加了60%～65%［28］。

3 miR396 靶基因——物種間不保守的靶基因

miR396 的靶基因還包括擬南芥中的bHLH74（AtbHLH74）和SVP（AtSVP）、南林985 楊樹（Populus euramericana）中的SCL14-1/2/3（PeSCL14-1/2/3）、黃瓜中的TPR（CsTPR）以及枳（Poncirustrifoliate）中的ACO（PtrACO）等（圖5）。AtbHLH74與miR396 的結(jié)合位點是由pre-mRNA剪接后形成的，抗性突變體rbHLH74根系伸長區(qū)細胞長度增加，根系變長［10］。葉片AtbHLH74主要定位于葉脈中，起到調(diào)控葉脈脈型和葉片邊緣形狀的作用［44］。此外，bHLH74也稱為隱花色素互作bHLH4（cryptochrome-interacting basic-helix-loop-helix 4，CIB4），可以與隱花色素2（cryptochrome 2，CRY2）相互作用并激活成花素基因（FLOWERING LOCUS T，F(xiàn)T）來控制開花時間，過表達miR396擬南芥植株和cib4-1突變體均出現(xiàn)晚花表型［45-46］。目前僅在十字花科（Brassicaceae）和白花菜科（Cleomaceae）作物中發(fā)現(xiàn)AtbHLH74同源基因，其功能還有待進一步明確。AtSVP是一種MADS-box轉(zhuǎn)錄因子，參與調(diào)控植物開花時間，過表達AtSVP擬南芥開花時間晚于野生型，atmir396a-1突變體中AtSVP表達量上升，但沒有表現(xiàn)出開花時間異常，可能是由于miR396b 存在冗余功能，導(dǎo)致AtSVP積累量較少，不足以延遲擬南芥開花時間［12］。

圖5 miR396與其靶基因序列配對Fig.5 Alignments of miR396 and its target genes

miR396a/c通過切割負調(diào)控PeSCL14-1/2/3的表達，參與楊樹不定根的形成過程［47］；miR396b-5p 負調(diào)控CsTPR的表達，過表達CsTPR的擬南芥植株抗寒性降低［48］；miR396b 可以靶向頁調(diào)控PtrACO，過表達ptr-MIR396b轉(zhuǎn)基因植株中PtrACO表達量降低，使抗寒性增強［13］。

丹參（SalviamiltiorrhizaBunge）中，miR396b可以靶向HDT1（Histonedeacetylases1）和MYB37/4（MYB-related transcriptionfactor37/4）參與丹參酮和丹參酚的合成過程，miR396b 過表達抑制了轉(zhuǎn)基因丹參毛狀根生長，提高了丹參酮含量，降低了丹酚酸含量［49］；黃花石蒜（Lycorisaurea）中miR396負調(diào)控酪氨酸脫羧酶（tyrosine decarboxylase1，TYDC1）參與加蘭他敏的生物合成［50］；芍藥（PaeonialactifloraPall）中miR396b/c 分別靶向1-脫氧-d-5-磷酸木糖還原異構(gòu)酶（1-deoxy-D-xylulose 5-phosphatereductoisomerase，DXR）和細胞色素P450（cytochromeP450，CYP71A1）參與了單萜類生物合成［51］；絲瓜（Luffacylindrica）中的miR396a 負調(diào)控bHLH143參與了類黃酮合成相關(guān)途徑，miR396b 靶向4-香豆酸輔酶a 連接酶（4-coumarate-CoAligase2，4CL2）參與了花青素合成途徑［52］。綜上所述，miR396具有許多其他非保守的靶基因，并且這些靶基因的功能只在個別植物中報道過，表明miR396 靶向具有多樣性與物種特異性。

4 miR396對不同信號的響應(yīng)

4.1 對發(fā)育信號的響應(yīng)

miR396 可以響應(yīng)發(fā)育信號參與葉片從幼葉到成熟葉的轉(zhuǎn)變、木本植物從初生生長到次生生長的轉(zhuǎn)變以及種子成熟過程。在擬南芥和黃瓜葉片發(fā)育過程中，隨著幼嫩葉片的生長miR396成熟體的表達量逐漸上調(diào)至一定水平后保持穩(wěn)定，黃瓜中MIR396A/B/D的表達與成熟體表達趨勢一致［17，27］。楊樹中miR396 在初生生長向次生生長的過渡階段IN3（internode）和次生生長基本成熟的階段IN9 中成熟體表達量較高，過表達miR396a/d 植株在生長前期次生木質(zhì)部明顯加厚并且更早成熟，而過表達GRF15延遲了次生生長［53-54］。此外，miR396在玉米、水稻、小麥籽粒灌漿期間高度表達，并隨著籽粒灌漿的推進而逐漸下降，與GRF表達呈顯著負相關(guān)［55-57］。

4.2 對生物脅迫的響應(yīng)

miR396 可以響應(yīng)真菌、細菌等病原體并參與抗病過程。在致病疫霉（Phytophthorainfestans）侵染下，番茄葉片中miR396 的表達顯著下降，其靶基因GRF1、GRF4、GRF5和胞嘧啶-5 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（Cytosine-5 DNA methyltransferase 5，DRM5）的表達量顯著上調(diào)，過表達miR396 后提高了番茄對致病疫霉的抗性［58］。稻瘟病菌（Magnaportheoryzae）感染水稻（易感品種）后miR396 的積累量顯著增加，過表達miR396 后降低了稻瘟病抗性；過表達GRF8/9增強了稻瘟病抗性［59］。茄子（Solanummelongena）中miR396b 在大麗輪枝菌（Verticilliumdahlia）侵染后下調(diào)表達，過表達miR396b植株對病菌更加敏感，GRF2與miR396b表達量變化呈現(xiàn)相反的趨勢［60］。miR396 在生物脅迫下響應(yīng)方式不同，可能與植物和病原體種類有關(guān)。

4.3 對非生物脅迫的響應(yīng)

研究發(fā)現(xiàn)miR396可以響應(yīng)弱光、高溫、干旱等非生物脅迫。龍眼（DimocarpuslonganLour）miR396a-3p_2的表達受到光質(zhì)和光強的影響，藍光誘導(dǎo)miR396a-3p_2表達。在0～32 μmol·m-2·s-1區(qū)間，隨著光強增加，miR396a-3p_2 表達量逐漸降低，與其靶基因DNA 定向RNA 聚合酶α 亞基（DNA-directed RNA polymerase subunit alpha，rpoA）的表達量的趨勢呈現(xiàn)負相關(guān)；但在32～128 μmol·m-2·s-1區(qū)間，miR396a-3p_2 與rpoA的表達量隨光強的增加而增加［61］；48 ℃高溫脅迫下水稻中miR396a/e/f 表達呈上升趨勢，其靶基因GRF2的表達呈下降趨勢［62］；干旱脅迫（8% PEG8000）下大豆葉片中的miR396 前體表達上調(diào)，GRF16-19的表達下調(diào)［63］；UV-B 會促進絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MPK3）的表達，擬南芥中UV-B（2 Wm-2UV-B 和0.65 Wm-2UV-A）處理MPK3敲除突變體后miR396上調(diào)，GRF1/2/3/6表達下調(diào)，葉片細胞數(shù)目減少，葉片面積減?。?4］。miR396 響應(yīng)非生物脅迫可能與其啟動子序列存在相應(yīng)的相應(yīng)元件有關(guān)，如水稻、大豆和玉米miR396啟動子區(qū)域存在光、溫度和干旱等響應(yīng)元件，但其分子機制還有待進一步明確［14］。

4.4 對激素的響應(yīng)

miR396 可以響應(yīng)激素的變化參與植物生長發(fā)育與抗性調(diào)控。黃瓜miR396b-5p 啟動子區(qū)域有W-box元件，WRKY41/46可以結(jié)合W-box 元件，并且WRKY會受到ABA 的誘導(dǎo)，表明ABA 可以激活WRKY41/46-miR396b 這一模塊［48］。水稻BR 信號的核心轉(zhuǎn)錄激活因子（BRASSINAZOLE-RESISTANT1，BZR1）可以和miR396d 啟動子中CGTGT/CG 元件結(jié)合正向調(diào)節(jié)miR396d，過表達MIR396d和沉默GRF4均增加了水稻葉片夾角，表明miR396d 可以響應(yīng)BR 信號并調(diào)節(jié)GRF4的表達來控制水稻的葉片夾角［65］。水稻miR396a還可以響應(yīng)GA 信號，GA 通過泛素化降解DELLA（SLENDER RICE1，SLR1）蛋白，解除了SLR1對miR396的促進作用，從而抑制水稻葉片中細胞的增殖［66-67］。

5 miR396及其靶基因在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用

miR396 與其靶基因參與調(diào)控作物的重要農(nóng)藝性狀，改變miR396或GRF的表達水平，可提高水稻、番茄等作物的產(chǎn)量、抗性和氮素/水分利用效率等（圖6）。水稻miR396ef突變植株種子重量增加，在正常施氮情況下（270 kg·hm-2）產(chǎn)量增加了4%［32］。降低miR396b（MIM396-9 植株）、提高GRF6（OEGRF6 植株）表達均能提高水稻產(chǎn)量［42］。武漢地區(qū)田間試驗發(fā)現(xiàn)，MIM396-9 和OEGRF6 水稻產(chǎn)量分別較野生型增加了16.8% 和18.1%，海南地區(qū)水稻產(chǎn)量分別增加了15.4%和17.3%，進一步分析發(fā)現(xiàn)MIM396 和OEGRF6轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)量增加可能與小穗數(shù)增多有關(guān)［42］。鄭州和北京的田間試驗發(fā)現(xiàn)，小麥（Triticumaestivum）中MIM396（沉默miR396）植株的粒徑和穗長顯著增加，三個株系的千粒重較對照組增加了10%～19%［68］。柳枝稷（Panicumvirgatum）中過表達miR396 降低了植株株高、生物量和木質(zhì)素，其中木質(zhì)素含量較野生型降低了15%，過表達GRF9后增加了株高和生物量［69］。過表達OsGRF6/8/9增強了稻瘟病抗性，過表達OsGRF6不僅正調(diào)節(jié)稻瘟抗性，也增加了產(chǎn)量［55］。MIM396 降低了小麥對白粉病菌（Blumeriagraminis）的抗性，MIM396三個株系的相對菌落面積增加了21%～30%［68］。miR396 還可用于提高植物的氮素/水分利用效率。低氮條件下miR396ef突變植株的產(chǎn)量與正常氮肥條件下野生型的產(chǎn)量相當，缺氮條件下干物質(zhì)量較野生型提高了25.0%［32］。番茄MIM396 轉(zhuǎn)基因植株葉片氣孔減小，密度增加，蒸騰作用降低，GRF的上調(diào)促進葉綠體的發(fā)育，葉片光合作用較高，提高了水分利用效率［70］。

圖6 miR396-GRF模塊在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的應(yīng)用Fig.6 Application of miR396-GRF module in agricultural production

miR396與GRF不僅可以提高作物的農(nóng)藝性狀，其靶基因蛋白GRF還能夠和GIF互作以提高植物的再生效率。甜菜（Betavulgarisssp.vulgaris）、油菜（Brassica napus）、大豆（Glycinemax）和向日葵（Helianthusannuus）中，擬南芥GRF5（AtGRF5）在愈傷組織細胞中的異位表達加速了芽的形成，并顯著提高了轉(zhuǎn)化效率［71］。此外GRF與GIF可以形成GRF-GIF復(fù)合體以提高植株再生效率。西瓜和小麥中，GRF4-GIF1 復(fù)合體可以提高植株轉(zhuǎn)化效率，突變GRF4內(nèi)miR396 靶向位點可以進一步提高再生效率［72-73］。

通過正向遺傳學(xué)發(fā)現(xiàn)GRF高表達種質(zhì)，可以用于雜交以獲得更優(yōu)良的品種。如GRF4ngr2（GRF4高表達）存在于秈稻品種NM73 中，與GRF4NGR2（GRF4低表達）相比，GRF4ngr2通過阻止miR396介導(dǎo)的GRF4ngr2mRNA18-20的切割，增加GRF4表達量并促進氮吸收和氮同化［74］。與緊湊型黑皮諾（Pinot noir）葡萄群體相比，松散型群體的GRF4的miR396 結(jié)合位點突變解除了miR396 對GRF4的抑制作用，從而正向調(diào)控細胞增殖過程，促進漿果的數(shù)量與大小增加［38］。

6 總結(jié)與展望

miR396 的產(chǎn)生可以追溯到苔蘚類植物中，可能是由編碼蛋白質(zhì)的基因復(fù)制而來。保守的miR396-GRF模塊和物種特異性的模塊參與響應(yīng)多種信號，共同決定植物表型。隨著理論與技術(shù)的不斷創(chuàng)新，越來越多的方法（酵母單雜、CRISPR/Cas9、正向遺傳學(xué)）可以用于研究miR396 功能并應(yīng)用到實際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中［48，75-76］。水稻、番茄及葡萄相關(guān)試驗表明，miR396-GRF在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)利用上具有較高的價值，可以提高作物產(chǎn)量、抗病性和氮素/水分利用效率。雖然miR396 的功能得到了一定的解析，但在調(diào)控機制方面仍有許多問題亟待解決，如miR396響應(yīng)生物與非生物脅迫信號的分子機制等。未來，一方面可以利用生物信息學(xué)分析和實驗（酵母單雜、雙熒光素酶）相結(jié)合，挖掘更多miR396上游調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子。另一方面可以通過CRISPR/Cas9 技術(shù)實現(xiàn)作物中miR396 表達水平的精準調(diào)控以優(yōu)化植物表型或者通過正向遺傳學(xué)發(fā)掘GRF高表達的種質(zhì)，并與其他優(yōu)良材料雜交獲得高產(chǎn)及抗逆性強的新品種。