段紅偉,孫麗麗,王曉滇,李麗娟,范紅云

不孕不育癥致病機(jī)制復(fù)雜,且與生活習(xí)慣、居住環(huán)境等因素息息相關(guān),近年研究顯示[1],生殖道感染在女性不孕不育癥中較為常見,繼發(fā)性不孕不育婦女生殖道支原體及衣原體感染情況較為嚴(yán)重。近年來,免疫學(xué)與不孕不育癥的關(guān)系受到學(xué)術(shù)界廣泛關(guān)注,研究發(fā)現(xiàn),生殖免疫因素能通過排斥精子、精卵結(jié)合、胚胎著床、胚胎發(fā)育等多種途徑,影響生殖道內(nèi)環(huán)境,誘導(dǎo)生殖道感染,從而影響生殖過程[2]。其中抗精子抗體(ASAb)是最常見的抗生殖免疫抗體,ASAb在正常情況下不會(huì)在女性免疫系統(tǒng)生成,女性生殖道存在傷口等情況將影響生理屏障功能,精子抗原不能被黏附屏障阻礙時(shí),被大量釋放入血,影響精子運(yùn)動(dòng),造成不孕不育癥,且有研究指出[3],ASAb表達(dá)水平與生殖道解脲支原體(Uu)、沙眼衣原體(Ct)的感染密切相關(guān)?？棺訉m內(nèi)膜抗體(EMAb)是一種自身抗體,在子宮內(nèi)膜異位或內(nèi)環(huán)境失調(diào)等因素刺激下,EMAb可大量產(chǎn)生,激活補(bǔ)體系統(tǒng),并破壞子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu),影響子宮內(nèi)膜腺體功能,誘導(dǎo)不孕不育及生殖道感染[4]?？孤殉部贵w(AOAb)、抗心磷脂抗體(ACAb)也為臨床常見的抗生殖免疫抗體,AOAb由機(jī)體受到感染、手術(shù)等刺激致抗原增多或過度免疫應(yīng)答產(chǎn)生,可引起卵巢結(jié)構(gòu)及功能損傷,造成不孕不育;而ACAb多由組織炎癥、損害及粘連引起,可促進(jìn)血栓形成,使蛻膜及胎盤血流不暢、血供不足,導(dǎo)致流產(chǎn),同時(shí)二者均能通過影響生殖道微環(huán)境介導(dǎo)生殖道感染[5]。本研究回顧性分析151例不孕不育癥育齡期女性臨床資料,以評(píng)估血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb在女性不孕不育癥合并生殖道感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值,為不孕不育癥的臨床診療提供新思路,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年3月至2022年12月在鄭州隴海醫(yī)院就診的151例不孕不育癥育齡期女性臨床資料。151例不孕不育癥者中合并生殖道感染74例(感染組),無生殖道感染62例(未感染組)。感染組年齡21～34歲,平均年齡為(27.41±5.06)歲;身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為18～25 kg/m2,平均BMI為(21.06±2.17)kg/m2;學(xué)歷為初中或小學(xué)7例,高中或中專35例,大?；蛞陨?2例。未感染組年齡21～32歲,平均年齡為(26.52±4.63)歲;BMI為18～24 kg/m2,平均BMI為(20.74±2.03)kg/m2;學(xué)歷為初中或小學(xué)4例,高中或中專28例,大?；蛞陨?0例。2組年齡、BMI、受教育程度比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)[6]結(jié)婚時(shí)間≥2年的育齡期女性;婚后性生活正常且未采取避孕措施者;卵泡發(fā)育和排卵周期正常者;生殖道結(jié)構(gòu)正常者;男方泌尿生殖系統(tǒng)正常且精液分析正常者;臨床資料完整者。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 伴內(nèi)分泌功能紊亂或外周血染色體異常等情況而不適合受孕者;男方或女方合并遺傳性疾病家族史者。

1.2 方法

1.2.1 生殖道感染診斷 使用無菌窺陰器充分暴露受檢者宮頸,使用無菌棉簽去除陰道及宮頸口分泌物,棄去,使用宮頸液采集專用無菌棉拭子,置于宮頸口內(nèi)1.5～2.0 cm,旋轉(zhuǎn)5圈,稍作停留(10～15 s即可),采集宮頸液標(biāo)本;使用分離培養(yǎng)法檢測支原體,培養(yǎng)基由淺黃色變?yōu)闇\紫色提示Uu、人型支原體(Mh)陽性,Uu在低倍鏡呈棕色小型菌落,Mh菌落較大且呈油煎蛋樣;使用實(shí)時(shí)熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增(試劑盒購自上海仁度生物科技有限公司)檢測Ct、淋病奈瑟菌(Ng)感染情況,試劑盒設(shè)有陽性對(duì)照與陰性對(duì)照,直觀判斷是否存在Ct及Ng感染。

1.2.2 生殖免疫抗體檢測 受檢者均抽取空腹外周靜脈血,使用酶聯(lián)免疫分析法(美國ABI公司)檢測血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平;采用金標(biāo)法試紙(美國R&D公司)檢測ASAb、EMAb、AOAb、ACAb陽性率。

2 結(jié)果

2.1 2組患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb陽性率比較 感染組血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb陽性率明顯高于未感染組(P<0.05),見表1。

表1 2組患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb陽性率比較[n(%)]

2.2 2組患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平比較 感染組血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平均高于未感染組(P<0.05),見表2。

表2 2組患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平比較

2.3 血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb對(duì)不孕不育癥合并生殖道感染的診斷效能分析 經(jīng)ROC曲線分析,發(fā)現(xiàn)ASAb、EMAb、AOAb、ACAb診斷不孕不育癥合并生殖道感染的AUC值分別為0.972、0.945、0.968、0.891(P<0.05),見表3、圖1(目次后)。

表3 血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb對(duì)不孕不育癥合并生殖道感染的診斷效能分析

2.4 不同病原感染的不孕不育癥患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb檢測情況 Uu、Mh、Ct、Ng單一感染及混合感染者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb陽性率比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表4。

表4 不同病原感染的不孕不育癥患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb檢測情況[n(%)]

3 討論

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[7],我國已婚夫婦中不孕不育率可達(dá)10%～15%,不孕不育不僅增加夫婦身心壓力,也影響婚姻和諧,并在一定程度上威脅家庭生活穩(wěn)定性。因此,分析不孕不育癥相關(guān)影響因素,及時(shí)予以針對(duì)性治療,有其必要性。近年來,免疫因素參與不孕不育過程已得到證實(shí),部分學(xué)者認(rèn)為[8-9],免疫失調(diào)不僅是導(dǎo)致女性不孕不育的重要因素,也能使生殖道感染風(fēng)險(xiǎn)增加,促進(jìn)不孕不育的進(jìn)程。故檢測生殖免疫抗體在女性不孕不育癥診療中具有重要作用。對(duì)此,本研究就血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb在不孕不育癥合并生殖道感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值展開分析,取得較好效果。

女性在生理期、人工流產(chǎn)吸宮術(shù)等陰道創(chuàng)傷手術(shù),或在生殖道炎性水平較高狀態(tài)下進(jìn)行性行為,可刺激機(jī)體產(chǎn)生ASAb,不僅影響生殖道自我防御系統(tǒng),還促進(jìn)生殖道巨噬細(xì)胞吞噬精子、損傷精子膜、溶解精細(xì)胞,導(dǎo)致女性的不孕不育[10-11]。郁兆存等[12]還發(fā)現(xiàn),ASAb與Uu感染發(fā)生、發(fā)展有關(guān),這可能是誘發(fā)男性不育的原因。提示ASAb可能與生殖道感染及不孕不育機(jī)制密切相關(guān)。本研究結(jié)果也顯示,感染組血清ASAb陽性率及血清含量明顯高于未感染組,且血清ASAb對(duì)不孕不育癥合并生殖道感染具有較高診斷效能。提示生殖道感染可影響女性自身免疫,刺激ASAb表達(dá)升高,可共同介導(dǎo)育齡期女性不孕不育的發(fā)生。另外,EMAb主要作用于子宮內(nèi)膜,影響早期受精卵的輸送及著床,易造成流產(chǎn)性不育,且生殖道感染可刺激EMAb的分泌及產(chǎn)生,EMAb又可通過刺激子宮內(nèi)膜免疫反應(yīng),形成局部病理變化,加速感染進(jìn)程,二者形成惡性循環(huán)破壞生殖道健康[13-14]。而本研究中,感染組血清EMAb陽性率及血清含量明顯高于未感染組,且血清EMAb在不孕不育癥合并生殖道感染中診斷效能較高,表明EMAb在生殖道感染及不孕不育中發(fā)揮重要作用。既往研究發(fā)現(xiàn)[15],AOAb含量在卵巢早衰及早閉經(jīng)、感染、炎癥中含量顯著升高,通過阻礙胚胎細(xì)胞分裂、影響雌孕激素的分泌、代謝等多種途徑,使女性不孕不育。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn),感染組血清AOAb陽性率及其在血清含量明顯高于未感染組,其血清含量在不孕不育癥合并生殖道感染中診斷效能較高。說明AOAb可通過影響卵巢生殖內(nèi)分泌功能導(dǎo)致女性不孕不育,借助其評(píng)估患者生殖道感染情況,對(duì)指導(dǎo)臨床診療有利。病毒、支原體感染及自身免疫性疾病等因素均能導(dǎo)致ACAb表達(dá)升高,可影響前列環(huán)素的表達(dá)而促進(jìn)血栓形成,并調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞功能,使子宮的供血及供氧減少,導(dǎo)致不孕不育[16-17]。本研究中,感染組血清ACAb陽性率及血清含量明顯高于未感染組,ROC曲線提示血清ACAb對(duì)判斷不孕不育癥合并生殖道感染有重要作用。這也表明,ACAb不僅能通過影響子宮供血及供氧,引起不孕不育,還能輔助評(píng)估生殖道感染的發(fā)生,指導(dǎo)臨床治療。因此,ASAb、EMAb、AOAb、ACAb與不孕不育合并生殖道感染的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),臨床可將其納入診療指標(biāo)。

女性生殖道感染以支原體、衣原體(如Uu、Mh、Ct、Ng)感染常見,且易出現(xiàn)混合感染,不同病原感染可能對(duì)機(jī)體免疫功能影響不同[18-19]。朱麗娟等[20]發(fā)現(xiàn),女性不孕不育合并Uu、Mh、Ct感染時(shí)ASAb、EMAb抗體陽性率明顯升高。本研究對(duì)不同病原感染者生殖免疫抗體陽性率比較,發(fā)現(xiàn)不同病原感染者間ASAb、EMAb、AOAb、ACAb陽性率比較并無顯著差異,與上述學(xué)者的報(bào)道有所不同?？紤]該結(jié)果一方面與不同病原感染均能造成生殖免疫抗體的過度表達(dá),其影響程度可能極其相近;另一方面,本研究樣本量不多且為單中心研究,缺乏代表性,可能造成研究結(jié)果偏倚。因此,不同病原感染者與生殖免疫抗體表達(dá)的關(guān)聯(lián)性,還需后續(xù)聯(lián)合其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行大樣本量多中心前瞻性研究。